Name: a tirf microscopy technique for real-time, simultaneous imaging of the tcr and its associated signaling proteins
Uploaded: 2012-03-22T13:00:00
Duration: 16 min 10 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A TIRF Microscopy Technique for Real-time, Simultaneous Imaging of the TCR and its Associated Signaling Proteins at JoVE.com

وأيد هذا البحث من قبل شعبة البحوث ضمن الجدران من المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية والمعاهد الوطنية للصحة. ونحن ممتنون لHuppa يوهانس ومارك ديفيس لتزويدنا scFv من H57 المستخدمة في هذه الدراسات. وأود أن أشكر RV كير نيومان للمناقشة مفيدة خلال تطوير هذه التقنية.

<ol>
	<li>Call, M. E., Wucherpfennig, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+T+cell+receptor:+critical+role+of+the+membrane+environment+in+receptor+assembly+and+function.">The T cell receptor: critical role of the membrane environment in receptor assembly and function.</a> Annu. Rev. Immunol. 23, 101-125 (2005).</li><li>Smith-Garvin, J. E., Koretzky, G. A., Jordan, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=S.T+cell+activation.">S.T cell activation.</a> Annu. Rev. Immunol. 27, 591-619 (2009).</li><li>Bezbradica, J. S., Medzhitov, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integration+of+cytokine+and+heterologous+receptor+signaling+pathways.">Integration of cytokine and heterologous receptor signaling pathways.</a> Nat. Immunol. 10, 333-339 (2009).</li><li>Fraser, I. D., Germain, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Navigating+the+network:+signaling+cross-talk+in+hematopoietic+cells.">Navigating the network: signaling cross-talk in hematopoietic cells.</a> Nat. Immunol. 10, 327-331 (2009).</li><li>Dustin, M. L., Starr, T., Varma, R., Thomas, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supported+planar+bilayers+for+study+of+the+immunological+synapse.">Supported planar bilayers for study of the immunological synapse.</a> Curr. Protoc. Immunol. Chapter 18, 13-13 (2007).</li><li>Vardhana, S., Dustin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Supported+Planar+Bilayers+for+the+Formation+of+Study+of+Immunological+Synapses+and+Kinapse.">Supported Planar Bilayers for the Formation of Study of Immunological Synapses and Kinapse.</a> J. Vis. Exp. (19), e947-e947 (2008).</li><li>Varma, R., Campi, G., Yokosuka, T., Saito, T., Dustin, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T+cell+receptor-proximal+signals+are+sustained+in+peripheral+microclusters+and+terminated+in+the+central+supramolecular+activation+cluster.">T cell receptor-proximal signals are sustained in peripheral microclusters and terminated in the central supramolecular activation cluster.</a> Immunity. 25, 117-127 (2006).</li><li>Yokosuka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Newly+generated+T+cell+receptor+microclusters+initiate+and+sustain+T+cell+activation+by+recruitment+of+Zap70+and+SLP-76.">Newly generated T cell receptor microclusters initiate and sustain T cell activation by recruitment of Zap70 and SLP-76.</a> Nat. Immunol. 6, 1253-1262 (2005).</li><li>Huppa, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TCR-peptide-MHC+interactions+in+situ+show+accelerated+kinetics+and+increased+affinity.">TCR-peptide-MHC interactions in situ show accelerated kinetics and increased affinity.</a> Nature. 463, 963-967 (2010).</li><li>Tolar, P., Pierce, S. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+conformation-induced+oligomerization+model+for+B+cell+receptor+microclustering+and+signaling.">A conformation-induced oligomerization model for B cell receptor microclustering and signaling.</a> Curr. Top. Microbiol. Immunol. 340, 155-169 (2010).</li><li>Treanor, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+membrane+skeleton+controls+diffusion+dynamics+and+signaling+through+the+B+cell+receptor.">The membrane skeleton controls diffusion dynamics and signaling through the B cell receptor.</a> Immunity. 32, 187-199 (2010).</li><li>Treanor, B., Batista, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanistic+insight+into+lymphocyte+activation+through+quantitative+imaging+and+theoretical+modelling.">Mechanistic insight into lymphocyte activation through quantitative imaging and theoretical modelling.</a> Curr. Opin. Immunol. 19, 476-483 (2007).</li><li>Sylvain, N. R., Nguyen, K., Bunnell, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vav1-mediated+scaffolding+interactions+stabilize+SLP-76+microclusters+and+contribute+to+antigen-dependent+T+cell+responses.">Vav1-mediated scaffolding interactions stabilize SLP-76 microclusters and contribute to antigen-dependent T cell responses.</a> Sci. Signal. 4, ra14-ra14 (2011).</li><li>Purbhoo, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+subsynaptic+vesicles+and+surface+microclusters+at+the+immunological+synapse.">Dynamics of subsynaptic vesicles and surface microclusters at the immunological synapse.</a> Sci. Signal. 3, ra36-ra36 (2010).</li><li>Lasserre, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ezrin+tunes+T-cell+activation+by+controlling+Dlg1+and+microtubule+positioning+at+the+immunological+synapse.">Ezrin tunes T-cell activation by controlling Dlg1 and microtubule positioning at the immunological synapse.</a> EMBO. J. 29, 2301-2314 (2010).</li><li>Balagopalan, L., Sherman, E., Barr, V. A., Samelson, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+techniques+for+assaying+lymphocyte+activation+in+action.">Imaging techniques for assaying lymphocyte activation in action.</a> Nat. Rev. Immunol. 11, 21-33 (2011).</li><li>Axelrod, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7:+Total+internal+reflection+fluorescence+microscopy.">Chapter 7: Total internal reflection fluorescence microscopy.</a> Methods Cell. Biol. 89, 169-221 (2008).</li><li>Williamson, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-existing+clusters+of+the+adaptor+Lat+do+not+participate+in+early+T+cell+signaling+events.">Pre-existing clusters of the adaptor Lat do not participate in early T cell signaling events.</a> Nat. Immunol. 12, 655-662 (2011).</li></ol>

تمت المحافظة على جميع الحيوانات المستخدمة في هذه التجارب في بيئة خالية من العوامل المسببة للأمراض محددة، وتمت الموافقة على هذه التجارب من قبل المعاهد الوطنية للصحة ورعاية الحيوان لجنة الاستخدام.

نحن هنا وصف نظام لدراسة الإشارات في مستضد محدد أساسي خلايا تي فأر باستخدام TIRFM وطبقات ثنائية زجاج الدهون كما دعمت ناقلات الجنود المدرعة الاصطناعي. هذا الاسلوب يعتمد على التعبير عن البروتينات بنجاح GFP المفتاحية في هذه الخلايا. Transfecting الخلايا التائية هي دائما مهمة صعبة. عادة، يتم استخدام electroporation أو الجينات تسليم باستخدام الفيروسات أو lentiviruses. أسلوب واحد ليست متفوقة على الآخر، وكلاهما يكون لها حدود ومزاياها. نجد أن electroporation والمزايا التالية: 1) لا يشترط أن يتم تقسيم خلايا نشطة كما هو مطلوب من أجل الفيروسات ولكن ليس lentiviruses، و 2) يمكن التحكم في مستوى التعبير من خلال تغيير وقت يتم تحضين الخلايا قبل التصوير. والعائق الاكبر هو أننا نجد صعوبة بالغة في التعبير عن البروتينات التي تكون كبيرة في الحجم في خلايا أولية. لقد قدمنا ​​الأسلوب الذي يعطينا جيد جدا بقاء الخلية بعد electroporation. ونتيجة لذلك فمن applicabجنيه إلى استخدامه لتحقيق إسكات الجينات بوساطة سيرنا. وصفنا أيضا هنا مخصصة 2 قناة TIRF اكتساب المجهر في وقت واحد الذي تم تصحيحه لونيا ولا يتطلب المواءمة منفصلة لأطوال موجية مختلفة. هذه القدرات، ومع ذلك، متوفرة تجاريا. ويستند نظامنا على مبادئ الفحص المجهري TIRF نشرت من قبل خبراء في الميدان، وأرخص من البدائل التجارية. واحد من انتقاد ممكن تصميم لدينا هو اننا نستخدم نفس الزاوية من حدوث موجات لإثارة مختلف. هذا من شأنه أن يؤدي إلى عمق تغلغل مختلف TIRF لإثارة موجات مختلفة. ونحن نعتقد أن هذه الآثار هي صغيرة لأن موجة زائل هو حقل تدهور بشكل كبير وعمق الميدان TIRF هي وظيفة خطية من الطول الموجي. وسوف Fluorophores على مقربة من سطح الزجاج تجربة لا فرق في شدة الليزر بين موجات اثنين. لfluorophores بالقرب من البولي ايثيلينعمق netration، فإن اختلاف كثافة يقدر بحوالي 1.3 أضعاف لموجات 2 488 و 640 نانومتر، وأضعاف 1.15 لموجات 2 488 و 561 نانومتر. ويمكن استخدام نفس النظام جنبا إلى جنب مع تقنيات فائقة أن قرار الاستفادة من الإضاءة TIRF. وقد وصفت نحن أيضا نظام كاميرا 2 التي بنيت العرف. مثل نظام TIRF، أجهزة مماثلة كما تتوفر تجاريا. نظامنا يوفر مرونة لتغيير الفلاتر وdichroics، مما يتيح استخدامه مع مجموعات مختلفة من الموجات. العيب في نظامنا هو درجة واحدة من دوران اللازمة لتحقيق المواءمة بين الصورتين. يمكن حل هذه المشكلة باستخدام كاميرا المدرجات التي يقودها بيزو وتقدم درجة التناوب المحاذاة. لدينا أيضا بنجاح تنفيذ نظام الكاميرا اثنين على هذا المجهر، الذي الكاميرات مختلفة ولها أحجام مختلفة بكسل. ومن شأن مثل هذا النظام أن يكون مفيدا إذا كان أحد يحتاج الأمر إلى حساسية في قناة واحدة ودى كبيرمجموعة namic في بلد آخر، وكلاهما نادرا ما تتوفر في نفس الكاميرا. استخدمنا HQ-2 Photometrics كاميرا في binning 2X2 تعطينا حجم بكسل فعالة من 12.9 ميكرون مع الكاميرا كوانت-EM Photometrics التي لديها حجم بكسل من 16 ميكرون. تم استخدام أنبوب 180 مم البعد البؤري للعدسة EM-كوانت وتم استخدام أنبوب 145 ملم طول بؤري عدسة للكاميرا HQ-2. تمت السيطرة على HQ-2 باستخدام Metamorph البرمجيات وتمت السيطرة كوانت-EM عبر الصغرى مدير البرنامج على جهاز كمبيوتر مستقل في وضع الزناد الخارجية. وقدمت على الزناد خارجي الى الكاميرا كوانت-EM باستخدام الإخراج الرقمي من لجنة المساعدة الإنمائية مجلس قياس والحوسبة، والذي تم تنفيذه باعتباره مصراع إضافية في إعدادات الإضاءة من تكوين Metamorph. نسبة أطوال البؤرية من العدسات أنبوب يطابق نسبة من أحجام بكسل فعالة. ويرد محاذاة ممثل في الشكل 5.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> Amaxa Nucleofector عدة لخلايا تي ماوس </td><td> Lonza المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> VPA-1006 </td><td></td></tr><tr><td> PureLink HiPure البلازميد Midiprep كيت </td><td> الحياة تكنولوجيز </td><td> K2100-05 </td><td> لمحضرات الذيفان الداخلي الحمض النووي مجانا </td></tr><tr><td> Amaxa Nucleofector الأجهزة </td><td> Lonza المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> AAD-1001 </td><td></td></tr><tr><td> المؤتلف الفئران IL-2 </td><td> Peprotech المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> 212-12 </td><td></td></tr><tr><td> Fluoresbrite Multifluorescent المجهرية 0.20μm </td><td> Polysciences، المؤتمر الوطني العراقي. </td><td> 24050-5 </td><td></td></tr><tr><td> مختبر تيك الثاني 8-جيدا حجرات ساترة </td><td> الحرارية العلمية، نونك </td><td> 155409 </td><td></td></tr></tbody></table>

a tirf microscopy technique for real-time, simultaneous imaging of the tcr and its associated signaling proteins

وبدأت إشارات من خلال مستقبلات الخلايا التائية (TCR) عندما تشارك بها شظايا الببتيد مستضدي ملزمة بمركب التوافق النسجي الأكبر (الشركة الفلسطينية للرهن) البروتينات وأعرب على سطح الخلايا مستضد تقديم (ناقلات الجنود المدرعة). ويتألف المجمع من TCR TCRαβ مثنوي مغاير يجند ملزم أن الزميلة غير تساهمي مع CD3 dimers (وεδ وεγ heterodimers وhomodimer ζζ) 1. على إشراك مستقبلات، وفسفرته سلاسل ζ CD3 من قبل عائلة كيناز SRC، LCK. هذا يؤدي إلى تجنيد من عائلة كيناز SYK، Zap70 الذي فسفرته ثم وتفعيلها من خلال LCK. بعد ذلك، Zap70 phosphorylates محول البروتينات اللات وSLP76، والشروع في تشكيل مجمع الإشارات القريبة التي تحتوي على عدد كبير من مختلف الجزيئات يشير الى 2. تشكيل هذه النتائج في نهاية المطاف في مجمع الكالسيوم وهيئة تنظيم الاتصالات التي تعتمد على رأسnscription تفعيل عامل والشروع يترتب على ذلك من سلسلة معقدة من البرامج التعبير الجيني التي تؤدي إلى تمايز الخلايا T 2. إشارات TCR (والدولة الناتجة من تمايز) هي عن طريق التضمين العديد من العوامل الأخرى، بما في ذلك قوة مستضد والحديث المتبادل مع co-stimulatory/co-inhibitory، chemokine، ومستقبلات خلوى 3-4. دراسة التنظيم المكاني والزماني للمجمع إشارات الداني في ظل ظروف تنشيط مختلف ولذلك فإن المفتاح لفهم المسار إشارات TCR، فضلا عن تنظيمها من قبل مما يشير الى مسارات أخرى. نظام واحد نموذجا مفيدا جدا لدراسة الإشارات التي بدأها TCR في غشاء البلازما في الخلايا التائية هي طبقات ثنائية الزجاج المدعومة من الدهون، كما هو موضح سابقا 5-6. ويمكن استخدام ما لتقديم مجمعات الشركة الفلسطينية للرهن المستضدية، التصاق، والجزيئات شارك في تنشيطية لخلايا T-بمثابة ناقلات الجنود المدرعة الاصطناعي. بواسطة التصوير خلايا تي التفاعل معطبقة ثنائية الدهن باستخدام مجموع مضان انعكاس داخلي المجهري (TIRFM)، يمكننا الحد من الإثارة على بعد 100 نيوتن متر من المسافة بين الزجاج وسطح الخلية 7-8. هذا يسمح لنا صورة الأحداث التي وقعت في المقام الأول يشير تحدث في غشاء البلازما. كما نحن مهتمون في مجال التصوير تجنيد البروتينات مما يشير إلى مجمع TCR، ونحن تصف اثنين من الكاميرا نظام التصوير TIRF فيه على TCR، وصفت مع فاب فلوري (مستضد جزء ملزم) أجزاء من الجسم المضاد H57 (تنقيته من ورم هجين H57-597 ، آي تي ​​سي سي، عدد ATCC: لا يجوز تصوير HB-218) التي هي محددة لTCRβ، والبروتينات مما يشير، الموسومة ب GFP، في وقت واحد في الوقت الحقيقي. هذه الاستراتيجية هو ضروري نظرا لطبيعة ديناميكية للغاية من خلايا تي وكلا من الأحداث يشير إلى أن تحدث في TCR. وقد سمحت هذه طريقة من طرق التصوير الباحثين ليغاندس صورة واحدة 9-11، فضلا عن تجنيد من الجزيئات مما يشير إلى تنشيط مستقبلات وهو نظام ممتاز لدراسة الكيمياء الحيوية في الموقع 12-16.

Watch this Scientific Journal Video about A TIRF Microscopy Technique for Real-time, Simultaneous Imaging of the TCR and its Associated Signaling Proteins at JoVE.com

A TIRF Microscopy Technique for Real-time, Simultaneous Imaging of the TCR and its Associated Signaling Proteins

والتقسيم من البروتينات، سواء داخل غشاء البلازما أو في مواقع داخل الخلايا هي واحدة الآلية التنظيمية التي يمكن أن تؤثر بشكل كبير نتائج إشارة، وبالتالي فهم إشارات من المهم دراسة السلوك المكاني والزماني للبروتينات المعنية. نحن هنا وصف نظام الفحص المجهري TIRF يستند إلى دراسة نقل الإشارات في الخلايا التائية، ولكن قابلة للتطبيق على نطاق واسع.

تقنية الفحص المجهري للTIRF التصوير، في الوقت الحقيقي في وقت واحد من TCR وما يرتبط بها من البروتينات اشارة

Signaling is initiated through the T Cell Receptor (TCR) when it is engaged by antigenic peptide fragments bound by Major Histocompatibility Complex ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Real-time Imaging of Leukotriene B4 Mediated Cell Migration and BLT1 Interactions with &beta;-arrestin

Real-time Imaging of Leukotriene B4 Mediated Cell Migration and BLT1 Interactions with ÃƒÅ½Ã‚Â²-arrestin

في الوقت الحقيقي التصوير باء Leukotriene 4 الهجرة خلية وساطة BLT1 التفاعلات مع arrestin - β

G-protein coupled receptors (GPCRs) belong to the seven transmembrane protein family and mediate the transduction of extracellular signals to ...

Real-time Live Imaging of T-cell Signaling Complex Formation

في الوقت الحقيقي تصوير لايف تي خلية اشارة تشكيل مجمع

Protection against infectious diseases is mediated by the immune system 1,2. T lymphocytes are the master coordinators of the immune system, regulating ...

Real-time Imaging of Endothelial Cell-cell Junctions During Neutrophil Transmigration Under Physiological Flow

التصوير في الوقت الحقيقي من غشائي المفارق خلايا العدلات خلية أثناء التهجير تحت الفسيولوجية تدفق

During inflammation, leukocytes leave the circulation and cross the endothelium to fight invading pathogens in underlying tissues. This process is known ...

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

Real-time Imaging of Myeloid Cells Dynamics in ApcMin/+ Intestinal Tumors by Spinning Disk Confocal Microscopy

التصوير في الوقت الحقيقي من خلايا الدم النخاعي في ديناميات<em&gt; APC<sup&gt; مين / +</sup</em&gt; الأورام المعوية التي كتبها غزل القرص متحد البؤر المجهر

Myeloid cells are the most abundant immune cells within tumors and have been shown to promote tumor progression. Modern intravital imaging techniques ...

Simultaneous Quantification of T-Cell Receptor Excision Circles (TRECs) and K-Deleting Recombination Excision Circles (KRECs) by Real-time PCR

Simultaneous Quantification of T-Cell Receptor Excision Circles TRECs and K-Deleting Recombination Excision Circles KRECs by Real-time PCR

الكمي في وقت واحد T-خلية الدوائر مستقبلات الختان (TRECs) والدوائر K-حذف إعادة التركيب الختان (KRECs) من قبل في الوقت الحقيقي PCR

T-cell receptor excision circles (TRECs) and K-deleting recombination excision circles (KRECs) are circularized DNA elements formed during recombination ...

Analysis of Yersinia enterocolitica Effector Translocation into Host Cells Using Beta-lactamase Effector Fusions

Analysis of Yersinia enterocolitica Effector Translocation into Host Cells Using Beta-lactamase Effector Fusions

تحليل<em&gt; يرسينيا القولون</em&gt; المستجيب إزفاء في الخلايا المضيفة عن طريق بيتا لاكتاماز المستجيب الإنشطار

Many gram-negative bacteria including pathogenic Yersinia spp. employ type III secretion systems to translocate effector proteins into eukaryotic target ...

Imaging Neutrophils and Monocytes in Mesenteric Veins by Intravital Microscopy on Anaesthetized Mice in Real Time

التصوير العدلات وحيدات في مساريقي الأوردة التي كتبها حيوي داخلي المجهري على الفئران مخدرة في الوقت الحقيقي

Efficient immune response is dependent on rapid mobilization of blood leukocytes to the site of infection or injury. Investigating leukocyte migration in ...

Purification of Viral DNA for the Identification of Associated Viral and Cellular Proteins

تنقية الحمض النووي الفيروسي للتعرف على البروتينات الفيروسية والخلوية المرتبطة بها

The goal of this protocol is to isolate herpes simplex virus type 1 (HSV-1) DNA from infected cells for the identification of associated viral and ...

Real-time Imaging and Quantification of Fungal Biofilm Development Using a Two-Phase Recirculating Flow System

التصوير في الوقت الحقيقي والتحديد الكمي للتنمية بيوفيلم الفطرية باستخدام نظام تدفق دائرية ذات مرحلتين

In oropharyngeal candidiasis, members of the genus Candida must adhere to and grow on the oral mucosal surface while under the effects of salivary flow. ...

Pan-lyssavirus Real Time RT-PCR for Rabies Diagnosis

Pan-lyssavirus في الوقت الحقيقي RT-PCR لتشخيص داء الكلب

Molecular assays are rapid, sensitive and specific, and have become central to diagnosing rabies. PCR based assays have been utilized for decades to ...