Name: a murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion
Uploaded: 2012-07-17T12:00:00
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Agradecemos a Daniel Duerr para o seu conselho sobre a fixação de perfusão-técnica.

1. Indução da anestesia <ol><li> Para a indução com isoflurano, coloque o rato em uma caixa de indução que é ligado ao conjunto de vapor a 3,0% vol e fluxo de oxigénio de 0,5 L / min. </li><li> Após inconsciência é obtido com estímulo tátil não de induzir uma resposta e do membro anterior ou hindlimb reflexo de retirada pedal estar ausente, coloque o mouse em uma mesa de operação com temperatura controlada em decúbito dorsal. Manter a anestesia ao longo de um cone nasal que está ligado ao vapor atrav...

<ol>
	<li>Lim, S. Y., Davidson, S. M., Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preconditioning+and+postconditioning:+the+essential+role+of+the+mitochondrial+permeability+transition+pore.">Preconditioning and postconditioning: the essential role of the mitochondrial permeability transition pore.</a> Cardiovasc. Res. 75, 530-535 (2007).</li><li>Eckle, T., Koeppen, M., Eltzschig, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+a+Hanging+Weight+System+for+Coronary+Artery+Occlusion+in+Mice.">Use of a Hanging Weight System for Coronary Artery Occlusion in Mice.</a> J. Vis. Exp. (50), e2526 (2011).</li><li>Michael, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+and+remodeling+in+mice:+effect+of+reperfusion.">Myocardial infarction and remodeling in mice: effect of reperfusion.</a> Am. J. Physiol. 277, H660-H668 (1999).</li><li>Nossuli, T. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+chronic+mouse+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion:+essential+in+cytokine+studies+52.">A chronic mouse model of myocardial ischemia-reperfusion: essential in cytokine studies 52.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 278, H1049-H1055 (2000).</li><li>Irwin, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+expression+and+immunolocalization+of+tumor+necrosis+factor-alpha+in+postinfarction+dysfunctional+myocardium+846.">Tissue expression and immunolocalization of tumor necrosis factor-alpha in postinfarction dysfunctional myocardium 846.</a> Circulation. 99, 1492-1498 (1999).</li><li>Michael, L. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creatine+kinase+and+phosphorylase+in+cardiac+lymph:+coronary+occlusion+and+reperfusion.">Creatine kinase and phosphorylase in cardiac lymph: coronary occlusion and reperfusion.</a> Am. J. Physiol. 248, 350-359 (1985).</li><li>Tonkovic-Capin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Delayed+cardioprotection+by+isoflurane:+role+of+K(ATP)+channels+765.">Delayed cardioprotection by isoflurane: role of K(ATP) channels 765.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 283, H61-H68 (2002).</li><li>Tsutsumi, Y. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+caveolin-3+and+glucose+transporter-4+in+isoflurane-induced+delayed+cardiac+protection.">Role of caveolin-3 and glucose transporter-4 in isoflurane-induced delayed cardiac protection.</a> Anesthesiology. 112, 1136-1145 (2010).</li><li>Benedict, P. E., Benedict, M. B., Su, T. P., Bolling, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opiate+drugs+and+delta-receptor-mediated+myocardial+protection.">Opiate drugs and delta-receptor-mediated myocardial protection.</a> Circulation. 100, II357-II360 (1999).</li><li>Ren, X., Wang, Y., Jones, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TNF-alpha+is+required+for+late+ischemic+preconditioning+but+not+for+remote+preconditioning+of+trauma.">TNF-alpha is required for late ischemic preconditioning but not for remote preconditioning of trauma.</a> J. Surg. Res. 121, 120-129 (2004).</li><li>Andrassy, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-mobility+group+box-1+in+ischemia-reperfusion+injury+of+the+heart.">High-mobility group box-1 in ischemia-reperfusion injury of the heart.</a> Circulation. 117, 3216-3226 (2008).</li><li>Kim, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extracellular+heat+shock+protein+60,+cardiac+myocytes,+and+apoptosis.">Extracellular heat shock protein 60, cardiac myocytes, and apoptosis.</a> Circ. Res. 105, 1186-1195 (2009).</li><li>Lin, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HSP60+in+heart+failure:+abnormal+distribution+and+role+in+cardiac+myocyte+apoptosis.">HSP60 in heart failure: abnormal distribution and role in cardiac myocyte apoptosis.</a> Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 293, 2238-2247 (2007).</li></ol>

Nós modificamos um modelo fechado de tórax murino, acessando o coração através de uma toracotomia lateral intercostal esquerdo e levando as suturas LAD no peito esquerdo na linha hemiclavicular. Saindo da caixa torácica óssea intacta irá minimizar o trauma, a necessidade de medicação para a dor, infecção de sítio cirúrgico e assim, facilitar a recuperação. Ao preservar a esquerda da artéria mamífero interna não há necessidade de electrocauterização. Deixamos o laço de sutura no tecido subcutâneo ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td></tr><tr><td> Vapor </td><td> Drägerwerk AG </td><td> Isoflo </td></tr><tr><td> Microscópio </td><td> Leica </td><td> M80 </td></tr><tr><td> Fonte de luz </td><td> Schott </td><td> KL 1500 LCD </td></tr><tr><td> Unidade de Controle homeotérmicos Blanket </td><td> Harvard Apparatus </td><td></td></tr><tr><td> MiniVent Tipo 845 </td><td> Hugo Sachs Elektronik </td><td></td></tr><tr><td> 8-0 Prolene </td><td> Ethicon </td><td> BV130-5 6,5 milímetros 3/8C </td></tr><tr><td> 6-0 Prolene </td><td> Ethicon </td><td> BV-1 9,3 milímetros 3/8C </td></tr><tr><td> Kalt agulha de sutura 3 </td><td> FST </td><td> 12050-03 </td></tr><tr><td> Trifeniltetrazólio </td><td> Sigma Aldrich </td><td> 93145 </td&gt; </tr><tr><td> Phthalo azul </td><td> Heucotech LTD </td><td></td></tr><tr><td> PowerLab </td><td> ADInstruments </td><td></td></tr></tbody></table>

a murine closed-chest model of myocardial ischemia and reperfusion

O trauma cirúrgico, por toracotomia de tórax aberto em modelos de ligadura coronária induz uma resposta imune que modifica diferentes mecanismos envolvidos na isquemia e reperfusão. A resposta imune inclui a expressão de citocinas e de libertação ou secreção de ligandos endógenos de inatos receptores imunes. Ativação da imunidade inata pode potencialmente modular tamanho do infarto. Nós modificamos uma já existente modelo fechado de tórax murino usando pesos pendurados que podem ser úteis para o estudo do miocárdio pré-e pós eo papel da imunidade inata na isquemia miocárdica e reperfusão. Este modelo permite animais para se recuperar de trauma cirúrgico antes do início da isquemia do miocárdio. Os anestésicos voláteis foram intensamente estudados e seu efeito de pré-condicionamento para o coração isquémico é bem conhecida. No entanto, este efeito protector impede a sua utilização em modelos de tórax aberto de ligação da artéria coronária. Assim, uma outra vantagem pode ser a utilização de thde e bem controláveis ​​anestésicos voláteis para a instrumentação em um modelo fechado de tórax crônica, uma vez que seu efeito de pré-condicionamento dura até 72 horas. Doenças cardíacas crônicas com isquemia intermitente e modelos de vida são múltiplas outras possíveis aplicações deste modelo. Para o modelo fechado de tórax crônica, ratos intubados e ventilados submetidos a uma toracotomia lateral brusco através do 4 º espaço intercostal. Na sequência de identificação do descendente anterior esquerda uma ligadura é passado por baixo do vaso e ambas as extremidades de sutura são enfiados através de um oclusor. Em seguida, as duas extremidades de sutura são passados ​​através da parede torácica, em espiral para formar um laço e deixado no tecido subcutâneo. Após o encerramento peito e recuperação por 5 dias, os ratos são anestesiados novamente, a pele do peito é reaberto e pesos pendurados são conectados ao circuito sob controle de ECG. No final do protocolo de isquemia / reperfusão, corações podem ser marcadas com TTC para enfarteavaliação do tamanho ou sofrer fixação de perfusão para permitir estudos morfométricos além de histologia e imuno-histoquímica.

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A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

O trauma cirúrgico induz uma resposta inflamatória. As citocinas e ligandos endógenos são conhecidos para modular o tamanho do enfarte do miocárdio após isquemia e reperfusão. Apresentamos um modelo modificado fechado de tórax murino de isquemia e reperfusão utilizando pesos pendurados para minimizar os efeitos de toracotomia.

Um modelo fechado de tórax murino de isquemia do miocárdio e reperfusão

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

Cardiac Arrest normotérmica e Ressuscitação Cardiopulmonar: um modelo do rato de isquemia-reperfusão

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

Medicina

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproducable Paraplegia por Thoracic Aorta Oclusão em um modelo murino de Medula Espinhal A isquemia-reperfusão

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Um modelo murino de isquemia-reperfusão, através da ligadura da artéria Descendente Anterior Esquerda

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

A Rat Model of Ventricular Fibrillation and Resuscitation by Conventional Closed-chest Technique

Um modelo de rato de Fibrilação Ventricular e Reanimação por Técnica de tórax fechado convencional

A rat model of electrically-induced ventricular fibrillation followed by cardiac resuscitation using a closed chest technique that incorporates the basic ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Modelo murino de isquemia-reperfusão

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Confirmation of Myocardial Ischemia and Reperfusion Injury in Mice Using Surface Pad Electrocardiography

A confirmação da Isquemia Miocárdica e reperfusão em ratos usando Pad Superfície Eletrocardiografia

Many animal models have been established for the study of myocardial remodeling and heart failure due to its status as the number one cause of mortality ...

Improvement of a Closed Chest Porcine Myocardial Infarction Model by Standardization of Tissue and Blood Sampling Procedures

Aprimoramento do modelo de suínos do miocárdio peito fechado pela padronização do tecido e os procedimentos de recolha de amostras de sangue

Myocardial ischemia reperfusion (I/R) injury contributes to almost half of the necrotic area after myocardial infarction. To date there is no approved ...

A Closed-chest Model to Induce Transverse Aortic Constriction in Mice

Um modelo de peito fechado para induzir a constrição da aorta transversa em ratos

Research on cardiac hypertrophy and heart failure is frequently based on pressure overload mouse models induced by TAC. The standard procedure is to ...

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

Avaliação da reserva de fluxo coronariano após reperfusão de isquemia miocárdica em ratos

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

Delayed Intramyocardial Delivery of Stem Cells after Ischemia Reperfusion Injury in a Murine Model

Entrega intramiocárdica atrasada de células-tronco após lesão de reperfusão de Isquemia em um modelo murino

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, ...