Name: do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks
Uploaded: 2012-05-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

DIY kryogenisk gjenfinning enheten hadde blitt testet i løpet av de prosjektene &quot;Modeling bakterieprotein prenylation i eukaryote celler ved hjelp av bioinformatikk og molekylær tilnærminger&quot; sponset av Mary Louise Andrews Award for Cancer Research Program, Virginia Academy of Science, &quot;Physiological Meaning of RNA Redigering i Plasma Dendrittiske celler &quot;sponset av Thomas F. Jeffress og Kate Miller Jeffress Memorial Trust og State Kontrakt 16.740.11.0364 (Departementet for vitenskap og utdanning, Russland). Vi ønsker å takke Beth Eom for hjelp med RNA integritet eksperimentet.

1. Montering av Cryotolerant Enhet for henting av Cryoboxes <ol><li> Ved hjelp av tang, rette ut en side av 3 sided sterk-tie (figur 1A) for å gjøre en L-formet sterke tie vist i figur 1B. Merk: Dimensjonene på sterk-slips kan velges avhengig av diameteren på halsen av Dewar . </li><li> Sikre to slike sterke-bånd med en sterk-tie T stropp (figur 2) med Crown bolt mutter, skive og skrue for å danne Cryoscoop basen som vist i Figur 3 (AB). Merk: T...

<ol>
	<li>Kittel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in Cryogenic Engineering. , 41 (1996).</li><li>Edeskuty, F. J., Walter, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).</li><li>Council, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Management of Chemical Hazards. , (2011).</li><li>Muyal, J., Muyal, V., Kaistha, B., Seifart, C., Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+comparison+of+RNA+extraction+techniques+from+frozen+and+fresh+lung+tissues:+checkpoint+towards+gene+expression+studies.">Systematic comparison of RNA extraction techniques from frozen and fresh lung tissues: checkpoint towards gene expression studies.</a> Diagnostic Pathology. 4, 9 (2009).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular cloning: a laboratory manual. , (2001).</li><li>Holland, N. T., Smith, M. T., Eskenazi, B., Bastaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+sample+collection+and+processing+for+molecular+epidemiological+studies.">Biological sample collection and processing for molecular epidemiological studies.</a> Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 543, 217-234 (2003).</li><li>Lynch, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CELL,+TISSUE+AND+ORGAN+CULTURE+|+Storage+and+Cryopreservation.">CELL, TISSUE AND ORGAN CULTURE | Storage and Cryopreservation.</a> Encyclopedia of Rose Science. , 106-111 (2003).</li><li>Crawford, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Plastics Engineering. , (1998).</li><li>Gorenc, B., Tinyou, R., Syam, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Steel designers' handbook. , (1996).</li><li>Harper, C. A., Petrie, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastics+materials+and+processes:+a+concise+encyclopedia.">Plastics materials and processes: a concise encyclopedia.</a> Wiley-Interscience. , (2003).</li></ol>

En av de vanligste metodene for å hente cryoboxes og cryovials fra bunnen av Dewar tanken er å decant flytende nitrogen i en ekstra container og trekke ut prøvene som er igjen i flasken eller flytende i dekantert flytende nitrogen. Dette er imidlertid en utrygg praksis som kan forårsake kryogeniske forbrenninger eller kvelning på grunn av langvarig eksponering for flytende nitrogen damper to. Annen vanlig måte å hente falne cryovials innebærer bruk av cryovial tang 3. Imidlertid begrenser b...

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagensen </td><td> Firma </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Hillman Gruppe Gullbelagte Slotted Flate 1-3/8 x 4 meter, 14 Gauge </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td> N / A </td><td> En enhet som er nødvendig </td></tr><tr><td> Crown Bolt Stainless Steel # 6 - 32 x 3/8 tommer Oval Leder Phillips Drive Maskinskrue </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td> Model # 42281 </td><td> 4 enheter kreves </td></tr><tr><td> Crown Bolt 3/8 tommer x 1-1/2 tommer sinkbelagt stål Fender Washers </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td> Model # 20122 </td><td> 4 enheter kreves </td></tr><tr><td> Crown Bolt kromatisert # 8-32 Maskinskrue Mutter </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td> Model # 18512 </td><td> 4 enheter kreves </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 i. Half Base </td><td> Lokal Hardwarehandle </td><td> Model # BC40Z </td><td> 2 enheter kreves </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie 6 tommer x 6 tommer T stropp </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td> Model # 66T </td><td> En enhet som er nødvendig </td></tr><tr><td> Oneida 6 &quot;Mesh Sil </td><td> Lokal Butikk </td><td> Model # 7859W </td><td> En enhet som er nødvendig </td></tr><tr><td> Den Hillman Konsernet Galvanisert Sekskantmuttere 3/8-16 </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td> Modell #: 810509 </td><td> 6 enheter kreves </td></tr><tr><td> Den Hillman Konsernet Galvanisert Hex Bolter 3/8- 16 </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td></td><td> 4 enheter kreves </td></tr><tr><td> Skum for isolasjon </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td></td><td> En enhet som er nødvendig </td></tr><tr><td> Skrutrekker </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td></td><td> En enhet som er nødvendig </td></tr><tr><td> Tenger </td><td> Lokal Hardware butikk </td><td></td><td> En enhet som er nødvendig </td></tr></tbody></table>

do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks

Flytende nitrogen er fargeløs, luktfri, ekstremt kaldt (-196 ° C) væsken holdes under press. Den brukes ofte som en kryogen væske for langsiktig lagring av biologisk materiale som blod, celler og vev 1,2. Den kryogenisk natur flytende nitrogen, mens ideell for prøve bevaring, kan føre til rask frysing av levende vev ved kontakt - kjent som &quot;kryogen burn &#39;2, som kan føre til alvorlig forfrysning i personer involvert i lagring og gjenfinning av prøver fra Dewars. I tillegg, som flytende nitrogen fordamper det reduserer oksygenkonsentrasjonen i luften og kan forårsake kvelning, spesielt i trange rom 2. I laboratorier, er biologiske prøver ofte lagret i cryovials eller cryoboxes stablet i rustfritt stål reoler innenfor Dewar tanks 1. Disse lagring stativer er utstyrt med en lang sjakt for å hindre bokser sklir ut fra stativet og inn i bunnen avDewars under rutinemessig håndtering. Alt for ofte, men bokser eller flasker med edle prøver gli ut og synker til bunnen av flytende nitrogen fylt tanken. I slike tilfeller kan prøvene tediously hentes Etter overføring av flytende nitrogen til et ekstra container eller forkaster det. Boksene og hetteglass kan da være relativt trygt utvinnes fra tømt Dewar. Men gjør kryogenisk natur flytende nitrogen og dens ekspansjon sats nedsunket prøven henting farlig. Det er ofte anbefalt av Safety Kontorer at prøven gjenfinning aldri utføres av en enkelt person. Et annet alternativ er å bruke kommersielt tilgjengelige kule grabbers eller tang for å trekke ut de hetteglassene 3. Samtidig er begrenset sikt i de mørke væskefylte Dewars en stor begrensning i bruken. I denne artikkelen beskriver vi byggingen av et Cryotolerant DIY henting enhet, som gjør prøven henting fra Dewar inneholder kryogene væsker både sikkert ennd enkle.

Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Her presenterer vi en lav kostnad, slitesterk cryotolerant enhet for sample henting fra Dewar tanker fylt med flytende nitrogen. Den enkle konstruksjonen og modulære utformingen av enheten gjør prosessen med prøven henting fra kryogene tanker trygt og enkelt.

Gjør-det-selv Enhet for gjenoppretting av Cryopreserved Prøver uhell falt inn Kryogeniske lagertanker

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Direct Tracheal Instillation of Solutes into Mouse Lung

Intratracheal instillations deliver solutes directly into the lungs.  This procedure targets the delivery of the instillate into the distal regions of the ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Test Samples for Optimizing STORM Super-Resolution Microscopy

Test Prøver for Optimalisere STORM Super-oppløsning Mikros

STORM is a recently developed super-resolution microscopy technique with up to 10 times better resolution than standard fluorescence microscopy ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

Utvinning av Voksen sebrafisk Hearts for høy gjennomstrømming Applications

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Kvasi-metagenomic analyse av Salmonella fra mat og miljøprøver

Quasi-metagenomics sequencing refers to the sequencing-based analysis of modified microbiomes of food and environmental samples. In this protocol, ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Reproduktive teknikker for eggstokkene overvåking og kontroll i amfibier

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...

Cryogenic Sample Loading into a Magic Angle Spinning Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer that Preserves Cellular Viability

Kryogene prøver som lastes inn i en magisk vinkel som spinner kjernefysisk magnetisk resonansspektrometer som bevarer cellulær levedyktighet

Dynamic nuclear polarization (DNP) can dramatically increase the sensitivity of magic angle spinning (MAS) nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. ...