Name: do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks
Uploaded: 2012-05-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

DIY criogénico dispositivo de recuperación ha sido probado en el curso de los proyectos &quot;prenilación modelado de proteínas bacterianas en las células eucariotas uso de la bioinformática y los enfoques moleculares&quot;, patrocinado por Mary Louise Andrews Premio para el programa de Investigación del Cáncer, la Academia de Ciencias de Virginia, &quot;significado fisiológico de la edición del ARN en el plasma Las células dendríticas &quot;patrocinado por la Jeffress Thomas F. Miller y Kate Jeffress Memorial Trust y el Contrato 16.740.11.0364 Estado (Ministerio de Educación y Ciencia, Rusia). Nos gustaría dar las gracias a Bet Eom para obtener ayuda con el experimento de la integridad del RNA.

1. Asamblea de dispositivos Cryotolerant para la recuperación de Cajas criogénicas <ol><li> Usando los alicates, enderezar un lado de 3 caras fuerte de corbata (Figura 1A) para hacer una forma de L-fuerte lazo Nota se muestra en la Figura 1B. Las dimensiones de fuerte lazo se puede seleccionar en función del diámetro del cuello de Dewar . </li><li> Asegure dos tan fuertes los lazos con una correa de Strong-Tie T (Figura 2) con la Corona tuerca del...

<ol>
	<li>Kittel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in Cryogenic Engineering. , 41 (1996).</li><li>Edeskuty, F. J., Walter, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).</li><li>Council, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Management of Chemical Hazards. , (2011).</li><li>Muyal, J., Muyal, V., Kaistha, B., Seifart, C., Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+comparison+of+RNA+extraction+techniques+from+frozen+and+fresh+lung+tissues:+checkpoint+towards+gene+expression+studies.">Systematic comparison of RNA extraction techniques from frozen and fresh lung tissues: checkpoint towards gene expression studies.</a> Diagnostic Pathology. 4, 9 (2009).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular cloning: a laboratory manual. , (2001).</li><li>Holland, N. T., Smith, M. T., Eskenazi, B., Bastaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+sample+collection+and+processing+for+molecular+epidemiological+studies.">Biological sample collection and processing for molecular epidemiological studies.</a> Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 543, 217-234 (2003).</li><li>Lynch, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CELL,+TISSUE+AND+ORGAN+CULTURE+|+Storage+and+Cryopreservation.">CELL, TISSUE AND ORGAN CULTURE | Storage and Cryopreservation.</a> Encyclopedia of Rose Science. , 106-111 (2003).</li><li>Crawford, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Plastics Engineering. , (1998).</li><li>Gorenc, B., Tinyou, R., Syam, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Steel designers' handbook. , (1996).</li><li>Harper, C. A., Petrie, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastics+materials+and+processes:+a+concise+encyclopedia.">Plastics materials and processes: a concise encyclopedia.</a> Wiley-Interscience. , (2003).</li></ol>

Uno de los métodos más comunes de recuperar criocajas y crioviales desde el fondo del tanque Dewar es decantar nitrógeno líquido en un recipiente de repuesto y extraer las muestras restantes en el matraz o flotando en el nitrógeno líquido se decantó. Esta es, sin embargo, una práctica insegura que puede causar quemaduras criogénicas o asfixia debido a la exposición prolongada a vapores de nitrógeno líquido 2. Otra forma común de recuperación de los crioviales caídos implica el uso de pinzas cri...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nombre del reactivo </td><td> Empresa </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentarios </td></tr><tr><td> Hillman Group bañados con ranuras planas 1-3/8 x 4 pies, calibre 14 </td><td> Tienda de hardware local </td><td> N / A </td><td> 1 unidad requiere </td></tr><tr><td> Corona del perno de acero inoxidable # 6 - 32 x 3/8 pulgadas de cabeza ovalada tornillo de la máquina Phillips Drive </td><td> Tienda de hardware local </td><td> Modelo # 42281 </td><td> 4 unidades requeridas </td></tr><tr><td> Corona del perno 3/8 pulgadas x 1-1/2 pulgadas zincado Arandelas de acero Fender </td><td> Tienda de hardware local </td><td> Modelo # 20122 </td><td> 4 unidades requeridas </td></tr><tr><td> Corona Tornillo galvanizada # 8-32 Tuerca Tornillo para metales </td><td> Tienda de hardware local </td><td> Modelo # 18512 </td><td> 4 unidades requeridas </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie BC40Z 4 In.x4 in Media Base </td><td> Hardware Localir de compras </td><td> Modelo # BC40Z </td><td> 2 unidades requeridas </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie 6 x 6 pulgadas Correa T </td><td> Tienda de hardware local </td><td> Modelo # 66T </td><td> 1 unidad requiere </td></tr><tr><td> Oneida 6 &quot;colador </td><td> Supermercados local </td><td> Modelo # 7859W </td><td> 1 unidad requiere </td></tr><tr><td> El Grupo de Hillman galvanizado tuercas hexagonales de 3/8-16 </td><td> Tienda de hardware local </td><td> Modelo #: 810509 </td><td> 6 unidades requeridas </td></tr><tr><td> El Grupo de Hillman galvanizado tornillos de cabeza hexagonal 3/8- 16 </td><td> Tienda de hardware local </td><td></td><td> 4 unidades requeridas </td></tr><tr><td> Espuma para el aislamiento </td><td> Tienda de hardware local </td><td></td><td> 1 unidad requiere </td></tr><tr><td> Destornillador </td><td> Tienda de hardware local </td><td></td><td> 1 unidad requiere </td></tr><tr><td> Alicates </td><td> Tienda de hardware local </td><td></td><td> 1 unidad requiere </td></tr></tbody></table>

do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks

El nitrógeno líquido es incoloro, inodoro, muy frío (-196 ° C) de líquido mantiene bajo presión. Se utiliza comúnmente como un fluido criogénico para el almacenamiento a largo plazo de los materiales biológicos tales como sangre, células y tejidos 1,2. La naturaleza criogénica de nitrógeno líquido, mientras ideal para la preservación de la muestra, puede causar una rápida congelación de los tejidos vivos en contacto - conocido como &quot;quemadura criogénica &#39;2, que puede conducir a la congelación severa en personas estrechamente implicados en el almacenamiento y recuperación de muestras de Dewars. Además, como el nitrógeno líquido se evapora, se reduce la concentración de oxígeno en el aire y pueden causar asfixia, especialmente en espacios confinados 2. En los laboratorios, las muestras biológicas a menudo se almacenan en crioviales o criocajas apilados en bastidores de acero inoxidable dentro de los tanques de Dewar 1. Estos bastidores de almacenamiento se proporcionan con un eje largo para evitar que las cajas se deslice fuera de los bastidores y en la parte inferior deDewars durante el manejo de rutina. Con demasiada frecuencia, sin embargo, las cajas o frascos con muestras preciosas salirse y se hunden hasta el fondo del tanque de nitrógeno líquido llena. En tales casos, las muestras pueden ser tediosamente recuperado después de transferir el nitrógeno líquido en un recipiente de repuesto o desecharlo. Las cajas y los viales a continuación, puede ser relativamente segura recuperado de vaciado Dewar. Sin embargo, la naturaleza criogénica de nitrógeno líquido y su tasa de expansión hace peligrosos hundida recuperación de la muestra. Se recomienda con frecuencia por las oficinas de seguridad que la recuperación de la muestra no se llevará a cabo por una sola persona. Otra alternativa es el uso de tarjetas de adquisición de frescos disponibles en el mercado o tenazas para sacar los 3 viales. Sin embargo, la visibilidad limitada en la oscuridad Dewars llenos de líquido representa una importante limitación en su uso. En este artículo se describe la construcción de un dispositivo de recuperación de Cryotolerant bricolaje, lo que hace que la recuperación de la muestra de Dewar que contiene líquidos criogénicos, tanto de caja fuerteª fáciles.

Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Aquí se presenta un bajo coste, duradero dispositivo de cryotolerant para la recuperación de la muestra de los tanques de Dewar lleno de nitrógeno líquido. La facilidad de construcción y el diseño modular del dispositivo hace que el proceso de recuperación de muestras de los tanques criogénicos seguro y fácil.

Do-It-Yourself de dispositivos para la recuperación de las muestras criopreservadas de caída accidental en los tanques de almacenamiento criogénicos

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

Fabricación de un dispositivo de microfluidos para la compartimentación de las neuronas y los axones Soma

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

Investigación

Biología

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

Un dispositivo de microfluidos gradiente de generación de Biología Celular

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

Un dispositivo de microfluidos para la cuantificación de la quimiotaxis bacteriana en gradientes de concentración estable

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Direct Tracheal Instillation of Solutes into Mouse Lung

La instilación directa traqueal de solutos en pulmón de ratón

Intratracheal instillations deliver solutes directly into the lungs.  This procedure targets the delivery of the instillate into the distal regions of the ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

El trasplante de células directamente en el riñón de adultos de pez cebra

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Test Samples for Optimizing STORM Super-Resolution Microscopy

Las muestras de prueba para optimizar STORM Super-Resolución de Microscopía

STORM is a recently developed super-resolution microscopy technique with up to 10 times better resolution than standard fluorescence microscopy ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

Recuperación de adultos de pez cebra Corazones para aplicaciones de alto rendimiento

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Análisis de metagenómica cuasi de Salmonella de muestras alimentarias y ambientales

Quasi-metagenomics sequencing refers to the sequencing-based analysis of modified microbiomes of food and environmental samples. In this protocol, ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Técnicas Reproductivas para el Monitoreo y Control de La Ovacada en Anfibios

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...

Cryogenic Sample Loading into a Magic Angle Spinning Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer that Preserves Cellular Viability

Carga criogénica de muestras en un espectrómetro de resonancia magnética nuclear de ángulo mágico que preserva la viabilidad celular

Dynamic nuclear polarization (DNP) can dramatically increase the sensitivity of magic angle spinning (MAS) nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. ...