Name: do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks
Uploaded: 2012-05-11T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

DIY kryogen Borttagningsmedlet hade testats i samband med projekten &quot;Modeling bakteriellt protein prenylering i eukaryota celler med hjälp av bioinformatik och molekylär metoder&quot; sponsrad av Mary Louise Andrews Award for Cancer Research program, Virginia Academy of Science &quot;, fysiologisk betydelse av RNA Redigera i plasma dendritiska celler &quot;som sponsras av Thomas F. Jeffress och Kate Miller Jeffress Memorial samverkan och statligt avtal 16.740.11.0364 (Ministeriet för vetenskap och utbildning, Ryssland). Vi vill tacka Beth Eom för hjälp med RNA integriteten experimentet.

1. Montering av Cryotolerant Anordning för hämtning av Cryoboxes <ol><li> Med en tång, räta ut en sida av 3 sidig stark-tie (figur 1 A) för att göra en L-formad stark-tien visas i figur 1B Anm. Dimensioner stark-tien kan väljas beroende på diametern av halsen på Dewar- . </li><li> Säkra två sådana starka band med en stark slips T bandet (figur 2) med Crown bult mutter, bricka och skruv för att bilda Cryoscoop basen som visas i figur 3 (AB) Anm.:</...

<ol>
	<li>Kittel, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Advances in Cryogenic Engineering. , 41 (1996).</li><li>Edeskuty, F. J., Walter, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Stewart Safety in the handling of cryogenic fluids. , (1996).</li><li>Council, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Prudent Practices in the Laboratory: Handling and Management of Chemical Hazards. , (2011).</li><li>Muyal, J., Muyal, V., Kaistha, B., Seifart, C., Fehrenbach, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systematic+comparison+of+RNA+extraction+techniques+from+frozen+and+fresh+lung+tissues:+checkpoint+towards+gene+expression+studies.">Systematic comparison of RNA extraction techniques from frozen and fresh lung tissues: checkpoint towards gene expression studies.</a> Diagnostic Pathology. 4, 9 (2009).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular cloning: a laboratory manual. , (2001).</li><li>Holland, N. T., Smith, M. T., Eskenazi, B., Bastaki, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+sample+collection+and+processing+for+molecular+epidemiological+studies.">Biological sample collection and processing for molecular epidemiological studies.</a> Mutation Research/Reviews in Mutation Research. 543, 217-234 (2003).</li><li>Lynch, P. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CELL,+TISSUE+AND+ORGAN+CULTURE+|+Storage+and+Cryopreservation.">CELL, TISSUE AND ORGAN CULTURE | Storage and Cryopreservation.</a> Encyclopedia of Rose Science. , 106-111 (2003).</li><li>Crawford, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Plastics Engineering. , (1998).</li><li>Gorenc, B., Tinyou, R., Syam, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Steel designers' handbook. , (1996).</li><li>Harper, C. A., Petrie, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plastics+materials+and+processes:+a+concise+encyclopedia.">Plastics materials and processes: a concise encyclopedia.</a> Wiley-Interscience. , (2003).</li></ol>

En av de vanligaste metoderna för att hämta cryoboxes och kryobehållare från botten av Dewar-behållaren är för dekantering flytande kväve till en extra behållare och dra ut proverna kvar i kolven eller flyter i dekanterades flytande kväve. Detta är dock en riskabel tillämpning, som kan orsaka kryogena brännskador eller kvävning på grund av långvarig exponering för flytande kväve ångor 2. Andra vanliga sätt att hämtning av fallna kryokärl innebär användning av köldkärlet tänger ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Namnet på reagens </td><td> Företaget </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> Hillman Group Plated Slitsade Flat 1-3/8 x 4 meter, 14 Gauge </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td> N / A </td><td> 1 enhet krävs </td></tr><tr><td> Crown Bolt rostfritt stål # 6 - 32 x 3/8 tum ovalt huvud Phillips Drive maskinskruven </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td> Modell # 42.281 </td><td> 4 krävs enheter </td></tr><tr><td> Crown Bult 3/8 tum x 1-1/2 tum elförzinkad brickor Steel Fender </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td> Model # 20.122 </td><td> 4 krävs enheter </td></tr><tr><td> Crown Bolt Zink Pläterad # 8-32 Machine muttern </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td> Modell # 18.512 </td><td> 4 krävs enheter </td></tr><tr><td> Simpson Stark-tien BC40Z 4 In.x4 i. Hälften Base </td><td> Lokal Hårdvarahandla </td><td> Modell # BC40Z </td><td> 2 som krävs enheter </td></tr><tr><td> Simpson Strong-Tie 6 tum x 6 tum T Strap </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td> Modell # 66T </td><td> 1 enhet krävs </td></tr><tr><td> Oneida 6 &quot;Mesh sil </td><td> Lokal butik </td><td> Modell # 7859W </td><td> 1 enhet krävs </td></tr><tr><td> Den Hillman Koncernen Galvaniserad sexkantmuttrarna 3/8-16 </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td> Model #: 810.509 </td><td> 6 erfordras enheter </td></tr><tr><td> Den Hillman Koncernen Galvaniserad Hex Bolts 3/8- 16 </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td></td><td> 4 krävs enheter </td></tr><tr><td> Skum för isolering </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td></td><td> 1 enhet krävs </td></tr><tr><td> Skruva Driver </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td></td><td> 1 enhet krävs </td></tr><tr><td> Tång </td><td> Lokal Järnverktyg </td><td></td><td> 1 enhet krävs </td></tr></tbody></table>

do-it-yourself device for recovery of cryopreserved samples accidentally dropped into cryogenic storage tanks

Flytande kväve är färglös, luktlös, extremt kallt (-196 ° C) vätska hålls under tryck. Den används ofta som en kryogen vätska för långtidsförvaring av biologiska material såsom blod, celler och vävnader 1,2. Den kryogena natur flytande kväve, medan idealisk för förvaring av prover, kan orsaka en snabb frysning av levande vävnader vid kontakt - känd som &quot;kryogen Bränn&quot; 2, vilket kan leda till allvarlig köldskador hos personer engagerade i lagring och hämtning av prover från termosbehållare med låg vikt. Dessutom, såsom flytande kväve avdunstar det minskar syrekoncentrationen i luften och kan orsaka kvävning, speciellt i begränsade utrymmen 2. I laboratorier, är biologiska prover ofta lagras i kryokärl eller cryoboxes staplade i rostfritt stål rack inom Dewar tankarna 1. Dessa lagerhyllor är försedda med en lång axel för att förhindra lådor från att glida ut ur racken och in i botten avTermosbehållare med låg vikt vid rutinmässig hantering. Alltför ofta, men lådor eller injektionsflaskor med dyrbara prover glider ut och sjunker till botten av vätskefyllda kväve tanken. I sådana fall kan prover tediously hämtas efter överföring av flytande kväve till en extra behållare eller kasta den. Lådorna och flaskor kan sedan vara relativt säkert återhämtat sig från tömmas Dewar. Men gör kryogen typ av flytande kväve och expansionstakt sjunkna farligt prov hämtning. Det är allmänt rekommenderas av Safety kontor som provet återtag aldrig utföras av en enda person. Ett annat alternativ är att använda kommersiellt tillgängliga häftiga grabbers eller tång att dra ut flaskorna 3. Men innebär begränsad sikt inom de mörka vätskefyllda termosbehållare med låg vikt en stor begränsning i användningen av dem. I den här artikeln beskriver vi byggandet av en Cryotolerant DIY hämtning enhet, vilket gör prov hämtning från Dewar innehåller frysmedier både säkra ennd lätt.

Watch this Scientific Journal Video about Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks at JoVE.com

Do-It-Yourself Device for Recovery of Cryopreserved Samples Accidentally Dropped into Cryogenic Storage Tanks

Här presenterar vi en låg kostnad, hållbar cryotolerant enhet för prov hämtning från Dewar tankar fyllda med flytande kväve. Den enkla konstruktionen och den modulära utformningen av anordningen gör processen av prov hämtning från kryogena tankar säkert och enkelt.

Gör-det-själv Device för återhämtning av kryokonserverade prover Tappade misstag i Kryogena Lagringstankar

Liquid nitrogen is colorless, odorless, extremely cold (-196 &deg;C) liquid kept under pressure. It is commonly used as a cryogenic fluid for long term ...

Research

JoVE Journal

Biology

Fabrication of a Microfluidic Device for the Compartmentalization of Neuron Soma and Axons

Tillverkning av en mikroflödessystem enhet för uppdelning av Neuron Soma och Axoner

In this video, we demonstrate the technique of soft lithography with polydimethyl siloxane (PDMS) which we use to fabricate a microfluidic device for ...

A Gradient-generating Microfluidic Device for Cell Biology

En gradient som genererar mikroflödessystem enhet för cellbiologi

 The fabrication and operation of a gradient-generating microfluidic device for studying cellular behavior is described.  A microfluidic platform is an ...

A Microfluidic Device for Quantifying Bacterial Chemotaxis in Stable Concentration Gradients

Ett mikroflödessystem enhet för att kvantifiera Bakteriella chemotaxis i stabila koncentrationsgradienter

Chemotaxis allows bacteria to approach sources of attractant chemicals or to avoid sources of repellent chemicals. Bacteria constantly monitor the ...

Direct Tracheal Instillation of Solutes into Mouse Lung

Direkt Trakealtuber instillation av lösta ämnen i Mouse Lung

Intratracheal instillations deliver solutes directly into the lungs.  This procedure targets the delivery of the instillate into the distal regions of the ...

Transplantation of Cells Directly into the Kidney of Adult Zebrafish

Transplantation av celler direkt in i njuren för vuxna Zebrafish

Regenerative medicine based on the transplantation of stem or progenitor cells into damaged tissues has the potential to treat a wide range of chronic ...

Test Samples for Optimizing STORM Super-Resolution Microscopy

Test Prover för Optimera STORM Super-resolution Mikroskopi

STORM is a recently developed super-resolution microscopy technique with up to 10 times better resolution than standard fluorescence microscopy ...

Recovery of Adult Zebrafish Hearts for High-throughput Applications

Återvinning av vuxna zebrafisk Hjärtan för hög genomströmning Applications

Use of the zebrafish model system for studying development, regeneration, and disease is expanding toward use of adult hearts for cell dissociation and ...

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Quasi-metagenomic Analysis of Salmonella from Food and Environmental Samples

Quasi-gjorts analys av Salmonella från mat och miljöprover

Quasi-metagenomics sequencing refers to the sequencing-based analysis of modified microbiomes of food and environmental samples. In this protocol, ...

Reproductive Techniques for Ovarian Monitoring and Control in Amphibians

Reproduktionsteknik för ovariell övervakning och kontroll i amfibier

Ovarian control and monitoring in amphibians require a multi-faceted approach. There are several applications that can successfully induce reproductive ...

Cryogenic Sample Loading into a Magic Angle Spinning Nuclear Magnetic Resonance Spectrometer that Preserves Cellular Viability

Kryogent prov laddar in i en magisk vinkel snurrande kärnmagnetisk resonansspektrometer som bevarar cellulär livskraft

Dynamic nuclear polarization (DNP) can dramatically increase the sensitivity of magic angle spinning (MAS) nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy. ...