Name: isolation and primary culture of rat hepatic cells
Uploaded: 2012-06-29T12:10:00
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लेखकों के लिए तकनीकी सहायता के लिए श्री जोश Basford और डॉ. जिओ मिनट ली को धन्यवाद देना चाहूंगा. इस काम के हिस्से में को एनआईएच अनुदान (DK70992 और DK92779 एमएल) द्वारा समर्थित किया गया था.

1. तैयारी सभी buffers के हौसले बाँझ तकनीक का उपयोग कर तैयार कर रहे हैं और फिल्टर एक Corning है .22 माइक्रोन फिल्टर का उपयोग निष्फल. <ol><li> परफ्यूज़न तैयार मैं हांक संतुलित नमक समाधान के लिए निम्नलिखि?...

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	<li>Berry, M. N., Friend, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High-yield+preparation+of+isolated+rat+liver+parenchymal+cells:+a+biochemical+and+fine+structural+study.">High-yield preparation of isolated rat liver parenchymal cells: a biochemical and fine structural study.</a> J. Cell Biol. 43, 506-520 (1969).</li><li>Seglen, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+isolated+rat+liver+cells.">Preparation of isolated rat liver cells.</a> Methods Cell Biol. 13, 29-83 (1976).</li><li>Saito, K., Kobayashi, K., Mizuno, Y., Fukuchi, Y., Furihata, T., Chiba, K., Schmidt, M., Schmitz, H. J., Baumgart, A., Guedon, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peroxisome+proliferator-activated+receptor+alpha+(PPARalpha)+agonists+induce+constitutive+androstane+receptor+(CAR)+and+cytochrome+P450+2B+in+rat+primary+hepatocytes.">Peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARalpha) agonists induce constitutive androstane receptor (CAR) and cytochrome P450 2B in rat primary hepatocytes.</a> Drug Metab. Pharmacokinet. 25, 108-111 (2010).</li><li>Gomez-Lechon, M. J., Donato, M. T., Castell, J. V., Jover, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hepatocytes+in+primary+culture:+the+choice+to+investigate+drug+metabolism+in+man.">Human hepatocytes in primary culture: the choice to investigate drug metabolism in man.</a> Curr. Drug Metab. 5, 443-462 (2004).</li><li>Goncalves, L. A., Vigario, A. M., Penha-Goncalves, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+isolation+of+murine+hepatocytes+for+in+vitro+malaria+liver+stage+studies.">Improved isolation of murine hepatocytes for in vitro malaria liver stage studies.</a> Malar. J. 6, 169 (2007).</li><li>Bu, S. Y., Mashek, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+long-chain+acyl-CoA+synthetase+5+mediates+fatty+acid+channeling+between+anabolic+and+catabolic+pathways.">Hepatic long-chain acyl-CoA synthetase 5 mediates fatty acid channeling between anabolic and catabolic pathways.</a> J. Lipid Res. 51, 3270-3280 (2010).</li><li>Aiken, J., Cima, L., Schloo, B., Mooney, D., Johnson, L., Langer, R., Vacanti, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+in+rat+liver+perfusion+for+optimal+harvest+of+hepatocytes.">Studies in rat liver perfusion for optimal harvest of hepatocytes.</a> J. Pediatr. Surg. 25, 140-144 (1990).</li><li>Jauregui, H. O., McMillan, P. N., Hevey, K., Naik, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+quantitative+analysis+of+lectin+binding+to+adult+rat+hepatocyte+cell+surfaces.">A quantitative analysis of lectin binding to adult rat hepatocyte cell surfaces.</a> In Vitro Cell. 24, 401-412 (1988).</li><li>Klaunig, J. E., Goldblatt, P. J., Hinton, D. E., Lipsky, M. M., Trump, B. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+liver+cell+culture.+II.+Primary+culture.">Mouse liver cell culture. II. Primary culture.</a> In Vitro. 17, 926-934 (1981).</li><li>Hay, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Operator-induced+contamination+in+cell+culture+systems.">Operator-induced contamination in cell culture systems.</a> Dev. Biol. Stand. 75, 193-204 (1991).</li></ol>

Hepatocytes की प्राथमिक संस्कृति इन विट्रो मॉडल में एक व्यापक रूप से जिगर शरीर विज्ञान और विकृति विज्ञान के विभिन्न पहलुओं का अध्ययन किया है. उदाहरण के लिए, प्राथमिक संस्कृति अभिव्यक्ति और दवा metabolizing एं?...

isolation and primary culture of rat hepatic cells

प्राथमिक hepatocyte संस्कृति एक महत्वपूर्ण उपकरण है कि बड़े पैमाने पर किया गया है जिगर समारोह, रोग, औषध विज्ञान, pathophysiology और अन्य संबंधित विषयों के बुनियादी अनुसंधान में प्रयोग किया जाता है. Collagenase छिड़काव के लिए दो कदम बरकरार hepatocytes के अलगाव पर आधारित विधि पहले 1969 1 में बेरी और मित्र के द्वारा शुरू किया गया था और तब से, कई संशोधनों आया है. सबसे अधिक इस्तेमाल किया तकनीक 1976 Seglenin 2 द्वारा वर्णित किया गया था. मूलतः, hepatocytes के पोर्टल शिरा के माध्यम से एक गैर - रीसर्क्युलेटिंग Collagenase छिड़काव द्वारा संवेदनाहृत वयस्क चूहों से अलग कर रहे हैं. अलग कोशिकाओं तो एक 100 माइक्रोन रोमकूप आकार जाल नायलॉन फिल्टर के माध्यम से फ़िल्टर्ड रहे हैं, और प्लेटों पर सभ्य है. 4 घंटे की संस्कृति के बाद, सीरम युक्त या सीरम मुक्त मध्यम, संस्कृति के लिए अतिरिक्त समय के लिए जैसे HepatoZYME SFM, मध्यम के साथ बदल दिया है. इन प्रक्रियाओं शल्य चिकित्सा और बाँझ संस्कृति कदम है कि बेहतर पाठ द्वारा की तुलना में वीडियो द्वारा प्रदर्शन किया जा सकता है की आवश्यकता होती है. एचअरे, हम दोनों वीडियो और लिखा है, प्रोटोकॉल, जो बड़ी संख्या में व्यवहार्य hepatocytes की पीढ़ी में लगातार अनुमति देते हैं द्वारा इन प्रक्रियाओं के लिए विस्तृत कदम दस्तावेज़.

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Isolation and Primary Culture of Rat Hepatic Cells

प्राथमिक hepatocytes के physiologically प्रासंगिक प्रयोगात्मक प्रणाली में जैव रासायनिक, आणविक, और चयापचय कार्यों का मूल्यांकन करने के लिए एक मूल्यवान उपकरण प्रदान करते हैं. हम सीटू जिगर छिड़काव, जो लगातार to1.0 × 10 के ऊपर व्यवहार्य hepatocytes उत्पन्न में चूहे के लिए एक विश्वसनीय प्रोटोकॉल का वर्णन<sup8&gt;</sup88 ~ 96% के बीच सेल व्यवहार्यता के साथ तैयारी प्रति कोशिकाओं.

अलगाव और चूहा यकृत कोशिकाओं की प्राथमिक संस्कृति

Primary hepatocyte culture is a valuable tool that has been extensively used in basic research of liver function, disease, pathophysiology, pharmacology ...

Research

JoVE Journal

Biology

Primary Culture of Adult Rat Heart Myocytes

वयस्क चूहा हार्ट Myocytes के प्राथमिक संस्कृति

Cultured primary adult rodent heart cells are an important model system for cardiovascular research.  Nevertheless, establishment of robust, viable ...

Isolation of Immune Cells from Primary Tumors

प्राथमिक ट्यूमर से प्रतिरक्षा कोशिकाओं का अलगाव

Tumors create a unique immunosuppressive microenvironment (tumor microenvironment, TME) whereby leukocytes are recruited into the tumor by various ...

Isolation and Culture of Mouse Primary Pancreatic Acinar Cells

माउस प्राथमिक अग्नाशय कोष्ठकी कोशिकाओं के अलगाव और संस्कृति

This protocol permits rapid isolation (in less than 1 hr) of murine pancreatic acini, making it possible to maintain them in culture for more than one ...

Isolation and Primary Culture of Mouse Aortic Endothelial Cells

अलगाव और माउस महाधमनी endothelial कोशिकाओं के प्राथमिक संस्कृति

The vascular endothelium is essential to normal vascular homeostasis. Its dysfunction participates in various cardiovascular disorders. The mouse is an ...

Isolation and Culture of Primary Mouse Keratinocytes from Neonatal and Adult Mouse Skin

नवजात और वयस्क माउस त्वचा से प्राथमिक माउस केराटिनोसाइट्स के अलगाव और संस्कृति

The keratinocyte (KC) is the predominant cell type in the epidermis, the outermost layer of the skin. Epidermal KCs play a critical role in providing skin ...

Primary Culture of Rat Adrenocortical Cells and Assays of Steroidogenic Functions

चूहा adrenocortical कोशिकाओं और steroidogenic कार्यों के assays की प्राथमिक संस्कृति

The hormone which the adrenal cortex secretes is vital for animals against stress and diseases. The method described here is the procedure of primary ...

Isolation and Culture of Primary Aortic Endothelial Cells from Miniature Pigs

अलगाव और लघु सूअर से प्राथमिक महाधमनी Endothelial कोशिकाओं की संस्कृति

Xenotransplantation is a promising way to resolve the shortage of human organs for patients with end-stage organ failure, and the pig is considered as a ...

Isolation, Transfection, and Long-Term Culture of Adult Mouse and Rat Cardiomyocytes

अलगाव, ट्रांसफैक्शन, और वयस्क माउस और चूहा कार्डियोमायोसाइट्स की दीर्घकालिक संस्कृति

Ex vivo culture of the adult mammalian cardiomyocytes (CMs) presents the most relevant experimental system for the in vitro study of cardiac biology. ...

Isolation, Culture, and Genetic Engineering of Mammalian Primary Pigment Epithelial Cells for Non-Viral Gene Therapy

गैर वायरल जीन थेरेपी के लिए स्तनधारी प्राथमिक वर्णक एपिथेलियल कोशिकाओं के अलगाव, संस्कृति, और जेनेटिक इंजीनियरिंग

Age-related macular degeneration (AMD) is the most frequent cause of blindness in patients &#62;60 years, affecting ~30 million people worldwide. AMD is a ...

Isolation of Primary Rat Hepatocytes with Multiparameter Perfusion Control

Multiparameter परफ्यूजन नियंत्रण के साथ प्राथमिक चूहा हेपेटोसाइट्स का अलगाव

Primary hepatocytes are widely used in basic research on liver diseases and for toxicity testing in vitro. The two-step collagenase perfusion procedure ...