Name: bioluminescence imaging of nadph oxidase activity in different animal models
Uploaded: 2012-10-22T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescence Imaging of NADPH Oxidase Activity in Different Animal Models at JoVE.com

Bu çalışma NIH RO1 AI079253 ve Gazi İşleri Bakanlığı tarafından finanse edildi.

1. Hayvan Modelleri <ol><li> Fare: S47 phox-Kullanım / - farelerde, yaş ve cinsiyete göre eşleştirilmiş C57BL6/DBA fareler. Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi deneyler için onay alın. </li><li> Anestezi: Anestezi ikna etmek için sürekli bir izofluran yönetim sistemi kullanın. Buharlaştırıcı sistemi (VetEquip) (% 2-3) izofluran ile doldurulur. Fareler dış uyaranlara yanıt olarak solunum, hareket ve korneal refleks gözlemleyerek tamamen uyuşturulduktan olduğunu onaylay...

<ol>
	<li>Segal, B., Han, W., Bushey, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=NADPH+oxidase+limits+innate+immune+response+in+the+lungs+in+mice.">NADPH oxidase limits innate immune response in the lungs in mice.</a> PLoS ONE. 5, e9631 (2010).</li><li>Jackson, S., Gallin, J., Holland, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+p47phox+mouse+knock-out+model+of+chronic+granulomatous+disease.">The p47phox mouse knock-out model of chronic granulomatous disease.</a> J. Exp. Med. 182, 751-758 (1995).</li><li>Gantner, B. N., Simmons, R. M., Underhill, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collaborative+induction+of+inflammatory+responses+by+dectin-1+and+Toll-like+receptor+2.">Collaborative induction of inflammatory responses by dectin-1 and Toll-like receptor 2.</a> J. Exp. Med. 197, 1107-1117 (2003).</li><li>Dejager, L., Pinheiro, I., Libert, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cecal+ligation+and+puncture:+the+gold+standard+model+for+polymicrobial+sepsis.">Cecal ligation and puncture: the gold standard model for polymicrobial sepsis.</a> Trends Microbiol. 19, 198-208 (2011).</li><li>Tsiotou, A. G., Sakorafas, G. H., Bramis, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Septic+shock;+current+pathogenetic+concepts+from+a+clinical+perspective.">Septic shock; current pathogenetic concepts from a clinical perspective.</a> Med. Sci. Monit. 11, 76-85 (2005).</li><li>Fujii, T., Fuchs, B. C., Tanabe, K. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+carbon+tetrachloride+induced+liver+fibrosis:+Histopathological+changes+and+expression+of+CD133+and+epidermal+growth+factor.">Mouse model of carbon tetrachloride induced liver fibrosis: Histopathological changes and expression of CD133 and epidermal growth factor.</a> BMC Gastroenterology. 10, 79-90 (2010).</li><li>Kubo, H., Morgensterm, D., Doerschuk, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+complement-induced+lung+injury+in+mice+with+deficiency+of+NADPH+oxidase.">Preservation of complement-induced lung injury in mice with deficiency of NADPH oxidase.</a> J. Clin. Invest. 97, 2680-2684 (1996).</li><li>Segal, B., Sakamoto, N., Bulkley, G. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Xanthine+oxidase+contributes+to+host+defense+against+Burkholderia+cepacia+in+the+p47(phox-/-)+mouse+model+of+chronic+granulomatous+disease.">Xanthine oxidase contributes to host defense against Burkholderia cepacia in the p47(phox-/-) mouse model of chronic granulomatous disease.</a> Infect Immun. 68, 2374-2378 (2000).</li><li>Droge, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Free+radicals+in+the+physiological+control+of+cell+function.">Free radicals in the physiological control of cell function.</a> Physiological reviews. 82, 47-95 (2002).</li><li>Jones, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radical-free+biology+of+oxidative+stress.+American+journal+of+physiology.">Radical-free biology of oxidative stress. American journal of physiology.</a> Cell physiology. 295, C849-C868 (2008).</li><li>Hubbard, W. J., Choudhry, M., Chaudry, I. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cecal+ligation+and+puncture.">Cecal ligation and puncture.</a> Shock. 24, 52-57 .</li><li>Wardman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+and+luminescent+probes+for+measurement+of+oxidative+and+nitrosative+species+in+cells+and+tissues:+progress,+pitfalls,+and+prospects.">Fluorescent and luminescent probes for measurement of oxidative and nitrosative species in cells and tissues: progress, pitfalls, and prospects.</a> Free Radic. Biol. Med. 43, 995-1022 (2007).</li><li>Pollock, J. D., Williams, D. A., Gifford, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+X-linked+chronic+granulomatous+disease,+an+inherited+defect+in+phagocyte+superoxide+production.">Mouse model of X-linked chronic granulomatous disease, an inherited defect in phagocyte superoxide production.</a> Nat. Genet. 9, 202-209 (1995).</li><li>Aramaki, Y., Y, ., Yoshida, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+sensitive+chemiluminescence+probe,+L-012,+for+measuring+the+production+of+superoxide+anion+by+cells.">A new sensitive chemiluminescence probe, L-012, for measuring the production of superoxide anion by cells.</a> Biochem. Biophys. Res. Commun. 193, 554-559 (1993).</li><li>Daiber, A., Oelze, M., August, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+superoxide+and+peroxynitrite+in+model+systems+and+mitochondria+by+the+luminol+analogue+L-012.">Detection of superoxide and peroxynitrite in model systems and mitochondria by the luminol analogue L-012.</a> Free Radic. Res. 38, 259-269 (2004).</li><li>Kielland, A., Blom, T., Nandakumar, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+reactive+oxygen+and+nitrogen+species+in+inflammation+using+the+luminescent+probe+L-012.">In vivo imaging of reactive oxygen and nitrogen species in inflammation using the luminescent probe L-012.</a> Free Radic. Biol. Med. 47, 760-766 (2009).</li></ol>

Canlı hayvanlar reaktif oksijen türlerinin &quot;Gerçek zamanlı&quot; ölçümü (ROS) floresan ve kemilüminesans problar kullanılarak elde edilebilir. Floresan problar zayıf sinyal-gürültü oranı 12 olan muzdarip iken, açıklanan görüntüleme tekniği luminol tabanlı substrat L-012 ile ROS bir kimyasal reaksiyon sonrasında ışık emisyon tespiti için daha duyarlıdır. Tüm bioluminescent görüntüleme teknikleri gibi, bu metodoloji organ ve dokular tarafından dalgaboyu bağımlı ışık ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> L-012 </td><td> Wako Chemicals USA, Inc </td><td> 120-04891 </td><td></td></tr><tr><td> Zymosan </td><td> Sigma, St Louis, MO </td><td> Z4250 </td><td></td></tr><tr><td> karbon tetraklorid </td><td> Sigma, St Louis, MO </td><td> 289116 </td><td></td></tr></tbody></table>

bioluminescence imaging of nadph oxidase activity in different animal models

NADPH oksidaz antibakteriyel ve antifungal konak savunma aracılık kritik bir enzimdir. Antimikrobiyal konak savunma rolüne ek olarak, NADPH oksidaz inflamatuvar yanıt 1 modüle kritik sinyalizasyon fonksiyonları vardır. Böylece, NADPH oksidaz kökenli ROS nesil &quot;gerçek zamanlı&quot; kinetik ölçmek için bir yöntem geliştirilmesi savunma, inflamasyon ve yaralanma barındırması ilgili mekanizmalar anlamak için değerli bir araştırma aracı olması bekleniyor. Kronik granülomatöz hastalık (CGD) ciddi enfeksiyonlar ve aşırı inflamasyon ile karakterize NADPH oksidaz kalıtsal bir hastalıktır. Fagosit NADPH oksidaz aktivasyonu, kendi sitosolik alt birimden (S47 phox, phox P67, P40 ve phox) ve bir membran-sınırlayıcı flavocytochrome (bir gp91 phox ve p22 heterodimeri phox oluşur) Rac translokasyon gerektirir. KayıpCGD bu NADPH oksidaz bileşenlerin sonucu herhangi birinde işlev mutasyonlar. ÇGD olan hastalarda benzer, gp91 phox-eksik farelerde ve S47 phox-eksik farelerde arızalı fagosit NADPH oksidaz aktivitesi ve bozulmuş konak savunması 13, 14 var. Yukarıda tarif edilen NADPH oksidaz bileşenler içeren fagositler, ek olarak, diğer hücre tipleri arasında, çeşitli NADPH oksidaz izoformları değişik ifade eder. Burada yaşayan farelerde ROS üretimini ölçmek ve inflamasyon ve yaralanma modellerinde ROS nesil NADPH oksidaz katkısını belirginleştiren bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, bir şarj bağlı cihaz (CCD) tarafından kaydedilir ışıldama yayma L-012 (luminol bir analog) ile reaksiyona ROS dayanmaktadır. L-012 prob orijinal tanımı olarak, L-012-bağlı kemiluminesans tamamen bu reaksiyon tespit ana ROS süper olduğunu gösteren, süperoksit dismutaz kaldırılmış;oksit anyon 15. Daha sonraki çalışmalar, L-012 reaktif nitrojen türleri 16, 17 gibi diğer serbest radikaller, tespit edebildiğini göstermiştir. Kielland ve ark. 17 forbol miristat asetat, NADPH oksidaz güçlü bir aktivatörü, bu topikal uygulama ışıldayan sonda L-012 fare kullanılarak tespit edilebilir oksidaz bağımlı ROS NADPH üretim yol göstermiştir. Bu modelde, L-012-bağımlı lüminesans S47 phox-eksik farelerde kaldırılmış olduğunu gösterdi. Biz yabani-tip farelerden ve NADPH oksidaz eksikliği S47 phox-/ ROS üretimi karşılaştınl - aşağıdaki üç model fareler 2: zymosan, NADPH oksidaz aktive edebilirsiniz duvara türetilmiş ürün pro-inflamatuar fungal hücre 1) zerk; 2) çekal ligasyon ve delme (CLP), sekonder akut akciğer inflamasyonu ve hasarı ile intra-abdominal sepsis modeli ve 3) sözlü karbon tetraklorür(CCl4), ROS-bağımlı karaciğer hasarının bir model. Bu modeller özellikle sırasıyla, non-enfeksiyöz inflamasyon, polimikrobiyal sepsis ve toksin kaynaklı organ hasarının bağlamında NADPH oksidaz bağımlı ROS üretimi değerlendirmek için seçilmiştir. S47 için yabani-tip farelerde biyolüminesans karşılaştırma phox-/ - farelerde bize bu modellerde bioluminescent sinyal S47 phox içeren NADPH oksidaz tarafından üretilen ROS özgül katkıda tasvir sağlar. S47 ile karşılaştırıldığında yabani-tip farelerden artmış ROS seviyeleri gösterdi Biyoparlaklık görüntüleme sonuçları phox-/ - farelerde NADPH oksidaz enflamatuvar uyaranlara yanıt olarak ROS üretiminin ana kaynağı olduğunu belirtti. Bu yöntem, in vivo enflamasyon sırasında ROS nesil &quot;gerçek zamanlı&quot; izlenmesi için minimal invaziv bir yaklaşım sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about Bioluminescence Imaging of NADPH Oxidase Activity in Different Animal Models at JoVE.com

Bioluminescence Imaging of NADPH Oxidase Activity in Different Animal Models

NADPH oksidaz fagositler reaktif oksijen türlerinin ana kaynağı (ROS) &#39;dir. Çünkü ROS geçici doğası nedeniyle, canlı hayvanlarda ROS seviyelerini ölçmek ve izlemek zordur. Yaşayan farelerde ROS seri ölçümü için bir minimal invaziv bir yöntem tarif edilmiştir.

Farklı Hayvan Modelleri NADPH Oksidaz Aktivitesinin Biyoparlaklık Görüntüleme

NADPH oxidase is a critical enzyme that mediates antibacterial and antifungal host defense. In addition to its role in antimicrobial host defense, NADPH ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Diagnosis of Ecto- and Endoparasites in Laboratory Rats and Mice

Tanı Laboratuvarı Sıçanlar ve Fareler Ecto-Endoparasites

Internal and external parasites remain a significant concern in laboratory rodent facilities, and many research facilities harbor some parasitized ...

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Saliva, Salivary Gland, and Hemolymph Collection from Ixodes scapularis Ticks

Ixodes scapularis Keneler gelen tükürük, Tükürük Bezi ve hemolimf Koleksiyonu

Ticks are found worldwide and afflict humans with many tick-borne illnesses. Ticks are vectors for pathogens that cause Lyme disease and tick-borne ...

Long Term Intravital Multiphoton Microscopy Imaging of Immune Cells in Healthy and Diseased Liver Using CXCR6.Gfp Reporter Mice

CXCR6.Gfp Muhabir Fare kullanma Sağlıklı ve hastalıklı Karaciğer Bağışıklık Hücreleri Uzun Vadeli intravital multiphoton Mikroskopi Görüntüleme

Liver inflammation as a response to injury is a highly dynamic process involving the infiltration of distinct subtypes of leukocytes including monocytes, ...

Isolation and Transplantation of Different Aged Murine Thymic Grafts.

İzolasyon ve Farklı Yaşlı Fare Timik Greft Nakli.

The mechanisms that regulate the efficacy of thymic selection remain ill-defined. The method presented here allows in vivo analyses of the development and ...

Bioluminescence Imaging to Detect Late Stage Infection of African Trypanosomiasis

Biyoparlaklık Görüntüleme Afrika Trypanosomiasis Geç Evre Enfeksiyon Algılama için

Human African trypanosomiasis (HAT) is a multi-stage disease that manifests in two stages; an early blood stage and a late stage when the parasite invades ...

Flow Cytometric Analysis of Natural Killer Cell Lytic Activity in Human Whole Blood

İnsan Tüm Kan Natural Killer Hücre Parçalayıcı Faaliyet Akışı Sitometrik Analizi

NK cell cytotoxicity is a widely used measure to determine the effect of outside intervention on NK cell function. However, the accuracy and ...

In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

In Vivo Investigation of Antimicrobial Blue Light Therapy for Multidrug-resistant Acinetobacter baumannii Burn Infections Using Bioluminescence Imaging

Çok ilaca dirençli için Antimikrobiyal Mavi Işık Tedavisinin Vivo İncelenmesinin Acinetobacter baumannii Biyoparlaklık ımaging&#39;i kullanarak Enfeksiyonlar Yanık

Burn infections continue to be an important cause of morbidity and mortality. The increasing emergence of multidrug-resistant (MDR) bacteria has led to ...

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invasive In Vivo Fluorescence Optical Imaging of Inflammatory MMP Activity Using an Activatable Fluorescent Imaging Agent

Non-invaziv<emIn vivo</em&gt; Aktive Edilebilir Floresan Görüntüleme Ajanını Kullanan İnflamatuvar MMP Aktivitesinin Flüoresan Optik Görüntülemesi

This paper describes a non-invasive method for imaging matrix metalloproteinases (MMP)-activity by an activatable fluorescent probe, via in vivo ...

Live Imaging of Antifungal Activity by Human Primary Neutrophils and Monocytes in Response to A. fumigatus

Live Imaging of Antifungal Activity by Human Primary Neutrophils and Monocytes in Response to A. fumigatus

Cevabı İnsan İlköğretim nötrofiller ve monositler tarafından Antifungal Faaliyet Canlı Görüntüleme<em&gt; A. fumigatus</em

Aspergillus fumigatus is an opportunistic fungal pathogen causing invasive infections in immunocompromised hosts with a high case-fatality rate. Research ...

Implantation and Monitoring by PET/CT of an Orthotopic Model of Human Pleural Mesothelioma in Athymic Mice

Athymic Farelerde İnsan Plevral Mezotelyoma'nın Ortotopik Modelinin PET/BT ile İmplantasyonu ve İzlenmesi

Malignant pleural mesothelioma (MPM) is a rare and aggressive tumor arising in the mesothelium that covers the lungs, the heart, and the thoracic cavity. ...