Name: engineering a bilayered hydrogel to control asc differentiation
Uploaded: 2012-05-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation at JoVE.com

एस.एन. पिट्सबर्ग ऊतक इंजीनियरिंग पहल से एक Postdoctoral फैलोशिप अनुदान द्वारा समर्थित किया गया था. DOZ जिनेवा फाउंडेशन से सम्मानित किया गया अनुदान द्वारा समर्थित है.

1. वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल (ASCs) 1, 5 अलग नोट: कमरे के तापमान पर सभी प्रक्रियाओं प्रदर्शन किया गया जब तक अन्यथा नोट. <ol><li> Perirenal चूहा और अधिवृषणी वसा को अलग और बाँझ हांक नमक बफर समाधान (HbSS) 5</sup...

<ol>
	<li>Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+bilayer+construct+controls+adipose-derived+stem+cell+differentiation+into+endothelial+cells+and+pericytes+without+growth+factor+stimulation.">A bilayer construct controls adipose-derived stem cell differentiation into endothelial cells and pericytes without growth factor stimulation.</a> Tissue Eng. Part A. 17, 941-953 (2011).</li><li>Nuttelman, C. R., Tripodi, M. C., Anseth, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+hydrogel+niches+that+promote+hMSC+viability.">Synthetic hydrogel niches that promote hMSC viability.</a> Matrix Biol. 24, 208-218 (2005).</li><li>Benoit, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-linked+kinase+production+prevents+anoikis+in+human+mesenchymal+stem+cells.">Integrin-linked kinase production prevents anoikis in human mesenchymal stem cells.</a> J Biomed Mater Res A. 81, 259-268 (2007).</li><li>Willerth, S. M., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+stem+cells+and+biomaterial+scaffolds+for+constructing+tissues+and+cell+delivery.">Combining stem cells and biomaterial scaffolds for constructing tissues and cell delivery.</a> , (2008).</li><li>Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cell+delivery+into+collagen+gels+using+chitosan+microspheres.">Adipose-derived stem cell delivery into collagen gels using chitosan microspheres.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 1369-1384 (2010).</li><li>Bubnis, W. A., Ofner, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+epsilon-amino+groups+in+soluble+and+poorly+soluble+proteinaceous+materials+by+a+spectrophotometric+method+using+trinitrobenzenesulfonic+acid.">The determination of epsilon-amino groups in soluble and poorly soluble proteinaceous materials by a spectrophotometric method using trinitrobenzenesulfonic acid.</a> Anal. Biochem. 207, 129-133 (1992).</li><li>Zhang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+PEGylated+fibrin+patch+for+mesenchymal+stem+cell+delivery.">A PEGylated fibrin patch for mesenchymal stem cell delivery.</a> Tissue Eng. 12, 9-19 (2006).</li><li>Bornstein, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstituted+rattail+collagen+used+as+substrate+for+tissue+cultures+on+coverslips+in+Maximow+slides+and+roller+tubes.">Reconstituted rattail collagen used as substrate for tissue cultures on coverslips in Maximow slides and roller tubes.</a> Lab Invest. 7, 134-137 (1958).</li><li>Zhang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+differentiation+of+bone+marrow+stem+cells+is+directed+by+a+tunable+three-dimensional+matrix.">Vascular differentiation of bone marrow stem cells is directed by a tunable three-dimensional matrix.</a> Acta Biomater. 6, 3395-3403 (2010).</li><li>Rochon, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+human+epithelial+cells+regulate+the+size+and+morphology+of+tissue-engineered+capillaries.">Normal human epithelial cells regulate the size and morphology of tissue-engineered capillaries.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 1457-1468 (2010).</li><li>Liu, H., Collins, S. F., Suggs, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+culture+for+expansion+and+differentiation+of+mouse+embryonic+stem+cells.">Three-dimensional culture for expansion and differentiation of mouse embryonic stem cells.</a> Biomaterials. 27, 6004-6014 (2006).</li></ol>

ASCs अलगाव और विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं की ओर अंतर करने की क्षमता के अपने आसानी के लिए अच्छी तरह से जाना जाता है. इस पांडुलिपि में वर्णित तकनीकों के साथ, हम कई biomatrices के लिए इन कोशिकाओं को एक साथ उजागर द्वारा ...

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मक / उपकरण का नाम </td><td> कंपनी </td><td> सूचीपत्र संख्या </td><td> टिप्पणियाँ </td></tr><tr><td> हैंक्स संतुलित नमक समाधान (HbSS) </td><td> Gibco </td><td> 14,175 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> भ्रूण गोजातीय सीरम </td><td> Hyclone </td><td> SH30071.03 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Collagenase प्रकार द्वितीय </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> C6685 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> 70 माइक्रोन नायलॉन मेष फ़िल्टर </td><td> बी.डी. बायोसाइंसेज </td><td> ३,५२,३५० </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> 100 माइक्रोन नायलॉन मेष फ़िल्टर </td><td> बी.डी. बायोसाइंसेज </td><td> 352,360 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> MesenPRO विकास मध्यम सिस्टम </td><td> Invitrogen </td><td> 12746-012 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> एल-Glutamine </p&gt; <td> Gibco </td><td> 25,030 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> CaCl 0.2 2 एच 2 हे </td><td> सिग्मा </td><td> C8106 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> T75 ऊतक संस्कृति फ्लास्क </td><td> बी.डी. बायोसाइंसेज </td><td> +१,३७,७८७ </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Chitosan </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> +४४८८६९ </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> एसिटिक एसिड </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> 320,099 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> एन - Octanol </td><td> Acros ऑर्गेनिक्स </td><td> 150630025 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Sorbitan - मोनो - Oleate </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> S6760 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> पोटेशियम हीड्राकसीड </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> P1767 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> एसीटोन </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> एल-4859 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> इथेनॉल </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> 270,741 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Trinitro Benzenesulfonic एसिड </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> P2297 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> हाइड्रोक्लोरिक एसिड </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> 320,331 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> एथिल व्योम </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> 472-484 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> 8 - माइक्रोन टिशू कल्चर प्लेट आवेषण </td><td> बी.डी. बायोसाइंसेज </td><td> 353,097 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> 1.5 मिलीलीटर Microcentrifuge ट्यूबें </td><td> मछुआ </td><td> 05-408-129 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> MTT अभिकर्मक </td><td> Invitrogen </td><td> M6494 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> डाइमिथाइल Sulfoxide </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> D8779 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Qtracker सेल लेबल किट (क्यू655 ट्रैकर) </td><td> आणविक जांच </td><td> Q2502PMP </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> कोलेजन टाइप 1 </td><td> Travigen </td><td> 3447-020-01 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> सोडियम हीड्राकसीड </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> S8045 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> 12 अच्छी तरह टिशू कल्चर प्लेट्स </td><td> बी.डी. बायोसाइंसेज </td><td> +३५३०४३ </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> फाइब्रिनोजन </td><td> सिग्मा </td><td> F3879 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> थ्रोम्बिन </td><td> सिग्मा </td><td> T6884 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Polyethylene के benztriazole व्युत्पन्न </td><td> Sunbio </td><td> De-034GS </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> Tris बफर गोली (7.6 पीएच) </td><td> सिग्मा </td><td> T5030 </td><td> उपभोज्य </td></tr><tr><td> अपकेंद्रित्र </td><td> Eppendorf </td><td> 5417R </td><td> समpment </td></tr><tr><td> कक्षीय शेखर </td><td> न्यू ब्रंसविक Scienctific के </td><td> C24 </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> एयर 5% सीओ 2 के साथ humidified इनक्यूबेटर </td><td> थर्मो वैज्ञानिक </td><td> 370 मॉडल </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> ओवरहेड दोषी </td><td> IKA </td><td> Visc6000 </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> चुंबकीय दोषी </td><td> कोर्निंग </td><td> पीसी-210 </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> निर्वात desiccator </td><td> - </td><td> - </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> कण आकार विश्लेषक </td><td> माल्वेर्न </td><td> STP2000 Spraytec </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> जल स्नान </td><td> फिशर साइंटिफिक </td><td> Isotemp210 </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> स्पेक्ट्रोफोटोमीटर </td><td> के Beckman </td><td> Beckman कल्टर 800UV/Visible स्पेक्ट्रोफोटोमीटर ड्यू </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> भंवर </td><td> Diagger </td><td> 3030a </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> Microplate रीडर </td><td> आणविक डिवाइसेज </td><td> SpectraMax M2 </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> / प्रकाश प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोप </td><td> ओलिंप </td><td> IX71 </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> Confocal सूक्ष्मदर्शी </td><td> ओलिंप </td><td> FV-500 लेजर confocal सूक्ष्मदर्शी स्कैनिंग </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> स्कैनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप </td><td> कार्ल Zeiss MicroImaging </td><td> लियो 435 उपाध्यक्ष </td><td> उपकरण </td></tr><tr><td> ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोप </td><td> JEOL </td><td> 1230 JEOL </td><td> उपकरण </td></tr></tbody></table>

engineering a bilayered hydrogel to control asc differentiation

पिछले कुछ वर्षों में प्राकृतिक पॉलिमर उनके मेजबान और biocompatibility के लिए इन विट्रो में और vivo में कोशिकाओं के साथ बातचीत करने की क्षमता की वजह से अधिक महत्व प्राप्त है, अनुसंधान का एक क्षेत्र है कि पुनर्योजी चिकित्सा में वादा धारण उपन्यास biomaterials और स्टेम सेल के मिश्रित उपयोग है. ऊतक इंजीनियरिंग के क्षेत्र में एक मौलिक रणनीति सेल समारोह के निर्देशन के लिए तीन आयामी पाड़ (उदाहरण के लिए, बाह्य मैट्रिक्स, hydrogels, माइक्रो / नैनो कणों decellularized) का उपयोग है. इस तकनीक की खोज से विकसित किया गया है कि कोशिकाओं को एक सब्सट्रेट पर जो वे का पालन कर सकते हैं की जरूरत है, पैदा करना, और उनके विभेदित सेलुलर phenotype और 2-3 समारोह व्यक्त. हाल ही में, यह भी निर्धारित किया गया है कि कोशिकाओं को न केवल इन substrates के पालन के लिए उपयोग करने के लिए, लेकिन यह भी बातचीत और मैट्रिक्स (उदाहरण के लिए, बाह्य मैट्रिक्स, ईसीएम) सब्सट्रेट 4 से cues ले. इसलिए, कोशिकाओं और scaffolds कि पारस्परिक संबंध हैऊतक विकास, संगठन, और अंतिम समारोह को नियंत्रित करता है. वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल (ASCs) mesenchymal, गैर hematopoetic के स्टेम कोशिकाओं कि बहु - वंश भेदभाव एक्ज़िबिट और कोशिकाओं के एक तत्काल उपलब्ध स्रोत (यानी पूर्व के संवहनी endothelia और pericytes) के रूप में सेवा कर सकते हैं वसा ऊतकों में मौजूद हैं. हमारी परिकल्पना है कि वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल phenotypes एक साथ bilayered 1 matrices में बस सह संवर्धन उन्हें अलग - अलग करने की ओर निर्देशित किया जा सकता है. हमारी प्रयोगशाला त्वचीय घाव भरने पर ध्यान केंद्रित है. यह अंत करने के लिए, हम प्राकृतिक, biomaterials से एक समग्र मैट्रिक्स, आतंच, मज्जा, और chitosan कि घाव त्वचीय विशिष्ट चिकित्सा ईसीएम पर्यावरण की विशेषताओं और कार्यों की नकल कर सकते हैं बनाया है.

Watch this Scientific Journal Video about Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation at JoVE.com

Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation

इस प्रोटोकॉल स्टेम सेल की निहित क्षमता का उपयोग करने के लिए अपने आसपास के बाह्य मैट्रिक्स से क्यू लेने और कई phenotypes में अंतर प्रेरित करने पर केंद्रित है. इस तरीके पांडुलिपि हमारे और एक मॉडल एक bilayered hydrogel उपयोग, खूंटी आतंच और कोलेजन की रचना का वर्णन लक्षण वर्णन प्रदान करता है, के लिए एक साथ वसा व्युत्पन्न स्टेम सेल सह अंतर<sup&gt; 1</sup&gt;.

एक Bilayered Hydrogel इंजीनियरिंग ए एस सी भेदभाव नियंत्रण

Natural polymers over the years have gained more importance because of their host biocompatibility and ability to interact with cells in vitro and in ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Procedure for Lung Engineering

फेफड़े इंजीनियरिंग के लिए प्रक्रिया

Lung tissue, including lung cancer and chronic lung diseases such as chronic obstructive pulmonary disease, cumulatively account for some 280,000 deaths ...

Encapsulation of Cardiomyocytes in a Fibrin Hydrogel for Cardiac Tissue Engineering

Cardiomyocytes की कार्डिएक ऊतक इंजीनियरिंग के लिए एक आतंच Hydrogel में इनकैप्सुलेशन

Culturing cells in a three dimensional hydrogel environment is an important technique for developing constructs for tissue engineering as well as studying ...

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

डिजाइन के लिए एक चक्रीय दबाव bioreactor पूर्व vivo</emमहाधमनी हार्ट वाल्व का> अध्ययन

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

A Toolkit to Enable Hydrocarbon Conversion in Aqueous Environments

वातावरण में जलीय हाइड्रोकार्बन रूपांतरण सक्षम टूलकिट

This work puts forward a toolkit that enables the conversion of alkanes by Escherichia coli and presents a proof of principle of its applicability. The ...

Synthesis of an Intein-mediated Artificial Protein Hydrogel

एक Intein की मध्यस्थता कृत्रिम प्रोटीन hydrogel के संश्लेषण

We present the synthesis of a highly stable protein hydrogel mediated by a split-intein-catalyzed protein trans-splicing reaction. The building blocks of ...

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

कैंसर सेल आक्रमण करने के लिए आवेदन के साथ ट्यूमर Stromal microenvironment के ऊतक इंजीनियरिंग

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

An Injectable and Drug-loaded Supramolecular Hydrogel for Local Catheter Injection into the Pig Heart

सुअर दिल में स्थानीय कैथेटर इंजेक्शन के लिए एक इंजेक्शन और दवा भरी हुई Supramolecular Hydrogel

Regeneration of lost myocardium is an important goal for future therapies because of the increasing occurrence of chronic ischemic heart failure and the ...

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

एक में आंतरिक vascularization से ऊतक इंजीनियरिंग<em&gt; Vivo</em&gt; टिशू इंजीनियरिंग चैंबर

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and ...

Dendrimer-based Uneven Nanopatterns to Locally Control Surface Adhesiveness: A Method to Direct Chondrogenic Differentiation

Dendrimer-आधारित असमान Nanopatterns को स्थानीय रूप से नियंत्रित करने के लिए सतह चिपकने वाला: एक विधि Chondrogenic भेदभाव प्रत्यक्ष करने के लिए

Cellular adhesion and differentiation is conditioned by the nanoscale disposition of the extracellular matrix (ECM) components, with local concentrations ...

Gel-seq: A Method for Simultaneous Sequencing Library Preparation of DNA and RNA Using Hydrogel Matrices

Gel-seq: एक साथ अनुक्रमण पुस्तकालय के लिए एक विधि डीएनए और आरएनए का उपयोग Hydrogel मैट्रिक्स की तैयारी

The ability to amplify and sequence either DNA or RNA from small starting samples has only been achieved in the last five years. Unfortunately, the ...