Name: engineering a bilayered hydrogel to control asc differentiation
Uploaded: 2012-05-25T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation at JoVE.com

SN Pittsburgh Doku Mühendisliği Girişimi bir Doktora Sonrası Araştırma Bursu Grant tarafından desteklenmiştir. DOZ Cenevre Vakfı tarafından verilen bir hibe ile desteklenmektedir.

1. Yağ-Türetilmiş Kök Hücre (TSK) 1, 5 Ayırma Not: aksi belirtilmediği sürece tüm işlemler oda sıcaklığında yapıldı. <ol><li> Sıçan perirenal ve epididimal adipoz yalıtmak ve daha önce açıklanan 5 olarak% 1 fetal sığır serumu (FBS) içeren steril Hank tamponlu tuz solüsyonu (HBSS) ile yıkayın. Bu çalışma, Hayvan Refahı Yasası, uygulanması Hayvan Refahı Yönetmeliği ve Laboratuvar Hayvanları Bakım ve Kullanım Kıl...

<ol>
	<li>Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+bilayer+construct+controls+adipose-derived+stem+cell+differentiation+into+endothelial+cells+and+pericytes+without+growth+factor+stimulation.">A bilayer construct controls adipose-derived stem cell differentiation into endothelial cells and pericytes without growth factor stimulation.</a> Tissue Eng. Part A. 17, 941-953 (2011).</li><li>Nuttelman, C. R., Tripodi, M. C., Anseth, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthetic+hydrogel+niches+that+promote+hMSC+viability.">Synthetic hydrogel niches that promote hMSC viability.</a> Matrix Biol. 24, 208-218 (2005).</li><li>Benoit, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Integrin-linked+kinase+production+prevents+anoikis+in+human+mesenchymal+stem+cells.">Integrin-linked kinase production prevents anoikis in human mesenchymal stem cells.</a> J Biomed Mater Res A. 81, 259-268 (2007).</li><li>Willerth, S. M., Sakiyama-Elbert, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combining+stem+cells+and+biomaterial+scaffolds+for+constructing+tissues+and+cell+delivery.">Combining stem cells and biomaterial scaffolds for constructing tissues and cell delivery.</a> , (2008).</li><li>Natesan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose-derived+stem+cell+delivery+into+collagen+gels+using+chitosan+microspheres.">Adipose-derived stem cell delivery into collagen gels using chitosan microspheres.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 1369-1384 (2010).</li><li>Bubnis, W. A., Ofner, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+determination+of+epsilon-amino+groups+in+soluble+and+poorly+soluble+proteinaceous+materials+by+a+spectrophotometric+method+using+trinitrobenzenesulfonic+acid.">The determination of epsilon-amino groups in soluble and poorly soluble proteinaceous materials by a spectrophotometric method using trinitrobenzenesulfonic acid.</a> Anal. Biochem. 207, 129-133 (1992).</li><li>Zhang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+PEGylated+fibrin+patch+for+mesenchymal+stem+cell+delivery.">A PEGylated fibrin patch for mesenchymal stem cell delivery.</a> Tissue Eng. 12, 9-19 (2006).</li><li>Bornstein, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reconstituted+rattail+collagen+used+as+substrate+for+tissue+cultures+on+coverslips+in+Maximow+slides+and+roller+tubes.">Reconstituted rattail collagen used as substrate for tissue cultures on coverslips in Maximow slides and roller tubes.</a> Lab Invest. 7, 134-137 (1958).</li><li>Zhang, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+differentiation+of+bone+marrow+stem+cells+is+directed+by+a+tunable+three-dimensional+matrix.">Vascular differentiation of bone marrow stem cells is directed by a tunable three-dimensional matrix.</a> Acta Biomater. 6, 3395-3403 (2010).</li><li>Rochon, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+human+epithelial+cells+regulate+the+size+and+morphology+of+tissue-engineered+capillaries.">Normal human epithelial cells regulate the size and morphology of tissue-engineered capillaries.</a> Tissue Eng. Part A. 16, 1457-1468 (2010).</li><li>Liu, H., Collins, S. F., Suggs, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+culture+for+expansion+and+differentiation+of+mouse+embryonic+stem+cells.">Three-dimensional culture for expansion and differentiation of mouse embryonic stem cells.</a> Biomaterials. 27, 6004-6014 (2006).</li></ol>

TSK ve izolasyon ve çeşitli hücre tipleri doğru ayırt etmek için yeteneği edilmeleri kolay olduğundan iyi bilinmektedir. Bu yazıda anlatılan teknikleri ile, aynı anda birden fazla biomatrices bu hücrelerin teşhir ederek TSK plastisite yararlanmak için edebiliyoruz. Hücreler CSM tabanı uzağa göç ve onların çevresindeki ekstrasellüler çevre girerken, hücrelerin iskele gelen ipucu almak ve ya &quot;stemness&quot; (kollajen) koruyabilir veya damar-damar-destekleyici hücre tipleri (fibrin) doğru ay?...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif / ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Hanks Dengeli Tuz Çözeltisi (HBSS) </td><td> Gibco </td><td> 14175 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Sığır fetüs serumu </td><td> Hyclone </td><td> SH30071.03 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Kollajenaz Tip II </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> C6685 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> 70-um Naylon Mesh Filtre </td><td> BD Biosciences </td><td> 352350 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> 100 mikron Naylon Mesh Filtre </td><td> BD Biosciences </td><td> 352360 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> MesenPRO Büyüme Orta Sistemi </td><td> Invitrogen </td><td> 12746-012 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> L-Glutamine </td&gt; <td> Gibco </td><td> 25030 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> CaCI2 0,2 H2O </td><td> Sigma </td><td> C8106 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> T75 Doku Kültürü Flask </td><td> BD Biosciences </td><td> 137787 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Chitosan </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 448869 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Asetik asit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 320099 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> N-oktanol </td><td> Acros Organics </td><td> 150630025 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Sorbitan-Mono-oleat </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S6760 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Potasyum hidroksit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P1767 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Aseton </td><td> Fisher Scientific </td><td> L-4859 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Etanol </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 270741 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Trinitro benzensülfonik asit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P2297 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Hidroklorik asit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 320331 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Etil eter </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 472-484 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> 8-um Doku Kültürü Plaka Uçlar </td><td> BD Biosciences </td><td> 353097 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> 1.5 ml Mikrosantrifüj Tüpler </td><td> Balıkçı </td><td> 05-408-129 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> MTT Reaktif </td><td> Invitrogen </td><td> M6494 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Dimetil Sulfoxide </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> D8779 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Qtracker Hücre Etiketleme Kiti (QTracker 655) </td><td> Molecular Probes </td><td> Q2502PMP </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> 1 Kollajen Tip </td><td> Travigen </td><td> 3447-020-01 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Sodyum Hidroksit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> S8045 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> 12-Peki Doku Kültürü Tabaklar </td><td> BD Biosciences </td><td> 353043 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Fibrinojen </td><td> Sigma </td><td> F3879 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Trombin </td><td> Sigma </td><td> T6884 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Polietilen Benztriazole Türev </td><td> Sunbio </td><td> DE-034GS </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Tampon Tris Tablet (pH 7.6) </td><td> Sigma </td><td> T5030 </td><td> Sarf </td></tr><tr><td> Santrifüj </td><td> Eppendorf </td><td> 5417R </td><td> Equipment </td></tr><tr><td> Orbital Çalkalayıcı </td><td> New Brunswick Bilimsel </td><td> C24 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Hava-% 5 CO2 ile nemlendirilmiş Kuluçka </td><td> Thermo Scientific </td><td> Model 370 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Tepegöz Karıştırıcı </td><td> IKA </td><td> Visc6000 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Manyetik Karıştırıcı </td><td> Corning </td><td> PC-210 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Vakum Desikatör </td><td> - </td><td> - </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Parçacık Boyut Analiz Cihazı </td><td> Malvern </td><td> STP2000 Spraytec </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Su Banyosu </td><td> Fisher Scientific </td><td> Isotemp210 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Spektrofotometre </td><td> Beckman </td><td> Beckman Coulter DU 800UV/Visible Spektrofotometre </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Girdap </td><td> Diagger </td><td> 3030a </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Mikroplaka Okuyucu </td><td> Molecular Devices </td><td> SpectraMax M2 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Floresan / Işık Mikroskobu </td><td> Olympus </td><td> IX71 </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Konfokal Mikroskop </td><td> Olympus </td><td> Konfokal Mikroskop FV-500 Lazer </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Taramalı Elektron Mikroskobu </td><td> Carl Zeiss MicroImaging </td><td> Leo 435 VP </td><td> Ekipman </td></tr><tr><td> Transmisyon Elektron Mikroskobu </td><td> JEOL </td><td> JEOL 1230 </td><td> Ekipman </td></tr></tbody></table>

engineering a bilayered hydrogel to control asc differentiation

Yılda Doğal polimerler nedeniyle ana biyouyumluluk ve in vitro ve in vivo olarak hücreleri ile etkileşim yeteneği daha fazla önem kazanmıştır. Rejeneratif tıpta umut vaat araştırma bir alan roman biyomalzemeler ve kök hücre kombinatoryal kullanılmasıdır. Doku mühendisliği alanında temel bir strateji hücre fonksiyonu yönlendirilmesi için üç boyutlu İskele (örneğin, hücre dışı matriks, hidrojeller, mikro / nano parçacıklar decellularized) kullanılmasıdır. Bu teknoloji, hücrelerin, onlar yapışabilir bunun üzerine bir substrata ihtiyaç çoğalırlar ve onların farklılaşmış hücre fenotipi ve fonksiyonu 2-3 olduğunu ifade keşif dönüşmüştür. Daha yakın zamanlarda, aynı zamanda hücre yapışması için, bu yüzeyler kullanımı, aynı zamanda etkileşime girer ve matris substrat (örn., hücre dışı matris, ECM) 4 kuyruklar alır sadece olduğu tespit edilmiştir. Bu nedenle, hücre ve iskelesi bir karşılıklı bağlantısı vardırdoku gelişimi, organizasyon ve nihai fonksiyonunu kontrol etmek için hizmet vermektedir. Yağ kökenli kök hücreleri (TSK) mezenkimal olan, non-hematopoetik kök hücreler çok soy diferansiyasyon sergileyen ve hücrelerin hazır kaynağıdır (yani pre-vasküler endotelin ve perisitler) olarak hizmet verebilir adipoz dokuda sunuyoruz. Bizim hipotezi yağ kaynaklı kök hücreleri iki katmanlı matrisler 1 tek ortak kültür onlar tarafından eş zamanlı olarak farklı fenotipleri doğru yönlendirilecek olmasıdır. Laboratuvarımız dermal yara iyileşmesi üzerine odaklanmıştır. Bu amaçla, bir dermal özgü yara iyileşmesi ECM çevrenin özelliklerini ve işlevlerini taklit tek bir kompozit doğal biyomalzemeler gelen matrisi, fibrin, kollajen ve kitosan yarattı.

Watch this Scientific Journal Video about Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation at JoVE.com

Engineering a Bilayered Hydrogel to Control ASC Differentiation

Bu protokol çevreleyen hücre dışı matriks gelen ipucu almak ve birden fenotipleri farklılaşması için indüklenebilir kök hücrelerin doğal yeteneği kullanılmasına odaklanmıştır. Bu yöntemler yazının aynı anda yağ kaynaklı kök hücreleri birlikte ayırt etmek için, PEG-fibrin ve kollajen oluşan iki katmanlı hidrojel kullanan bir model, bizim ve nitelendirilmesi uzanır<sup&gt; 1</sup&gt;.

ASC farklılaşma kontrol için bir iki tabakalı Hidrojel mühendislik

Natural polymers over the years have gained more importance because of their host biocompatibility and ability to interact with cells in vitro and in ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Procedure for Lung Engineering

Akciğer Mühendisliği Prosedürü

Lung tissue, including lung cancer and chronic lung diseases such as chronic obstructive pulmonary disease, cumulatively account for some 280,000 deaths ...

Encapsulation of Cardiomyocytes in a Fibrin Hydrogel for Cardiac Tissue Engineering

Kalp Doku Mühendisliği Fibrin Hidrojel kardiyomiyositlerinin Kapsülleme

Culturing cells in a three dimensional hydrogel environment is an important technique for developing constructs for tissue engineering as well as studying ...

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Design of a Cyclic Pressure Bioreactor for the Ex Vivo Study of Aortic Heart Valves

Devirli Basınç Biyoreaktör Tasarım Ex vivo</emAort Kalp Vanalar> Eğitim

The aortic valve, located between the left ventricle and the aorta, allows for unidirectional blood flow, preventing backflow into the ventricle. Aortic ...

A Toolkit to Enable Hydrocarbon Conversion in Aqueous Environments

Sulu Ortamlarda Hidrokarbon Dönüşüm Enable A Toolkit

This work puts forward a toolkit that enables the conversion of alkanes by Escherichia coli and presents a proof of principle of its applicability. The ...

Synthesis of an Intein-mediated Artificial Protein Hydrogel

Bir Intein aracılı yapay protein Hidrojel sentezi

We present the synthesis of a highly stable protein hydrogel mediated by a split-intein-catalyzed protein trans-splicing reaction. The building blocks of ...

Tissue Engineering of Tumor Stromal Microenvironment with Application to Cancer Cell Invasion

Kanser Hücre Invasion Uygulama ile Tümör Stromal mikroçevresinin Doku Mühendisliği

3D organotypic cultures of epithelial cells on a matrix embedded with mesenchymal cells are widely used to study epithelial cell differentiation and ...

An Injectable and Drug-loaded Supramolecular Hydrogel for Local Catheter Injection into the Pig Heart

Domuz Kalbe Yerel Kateter Enjeksiyon için bir Enjekte ve İlaç yüklü Supramoleküler Hidrojel

Regeneration of lost myocardium is an important goal for future therapies because of the increasing occurrence of chronic ischemic heart failure and the ...

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

Tissue Engineering by Intrinsic Vascularization in an In Vivo Tissue Engineering Chamber

Bir ıntrinsic Vaskülarizasyon tarafından Doku Mühendisliği<em&gt; İn Vivo</em&gt; Doku Mühendisliği Odası

In reconstructive surgery, there is a clinical need for an alternative to the current methods of autologous reconstruction which are complex, costly and ...

Dendrimer-based Uneven Nanopatterns to Locally Control Surface Adhesiveness: A Method to Direct Chondrogenic Differentiation

Düzensiz Nanopatterns Dendrimer tabanlı yerel olarak kumanda yüzeyi Adhesiveness için: Chondrogenic farklılaşma yönlendirmek için bir yöntem

Cellular adhesion and differentiation is conditioned by the nanoscale disposition of the extracellular matrix (ECM) components, with local concentrations ...

Gel-seq: A Method for Simultaneous Sequencing Library Preparation of DNA and RNA Using Hydrogel Matrices

Jel-seq: DNA ve RNA hidrojel matrisleri kullanarak eşzamanlı sıralama kitaplığı hazırlanması için bir yöntem

The ability to amplify and sequence either DNA or RNA from small starting samples has only been achieved in the last five years. Unfortunately, the ...