Name: rat mesentery exteriorization: a model for investigating the cellular dynamics involved in angiogenesis
Uploaded: 2012-05-20T14:00:00
Duration: 12 min 29 s
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Ce travail a été soutenu par le Board of Regents de l&#39;État de la Louisiane LEQSF (2009-12)-RD-A-19 (PI: WL Murfee) et l&#39;hypertension Tulane et du Centre rénale d&#39;excellence financé par le NIH subvention P20RR017659-08 (PI : L. Gabriel Navar).

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	<li>Carmeliet, P., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+in+cancer+and+other+diseases.">Angiogenesis in cancer and other diseases.</a> Nature. 407, 249-257 (2000).</li><li>le Noble, F. A., Stassen, F. R., Hacking, W. J., Struijker Boudier, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+and+hypertension.">Angiogenesis and hypertension.</a> J. Hypertens. 16, 1563-1572 (1998).</li><li>Peirce, S. M., Skalak, T. 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J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+sprout+endothelial+cells+exhibit+a+CD36+low+phenotype:+regulation+by+shear+stress+and+vascular+endothelial+growth+factor-induced+mechanism+for+attenuating+anti-proliferative+thrombospondin-1+signaling.">Capillary sprout endothelial cells exhibit a CD36 low phenotype: regulation by shear stress and vascular endothelial growth factor-induced mechanism for attenuating anti-proliferative thrombospondin-1 signaling.</a> Am. J. Pathol. 173, 1220-1228 (2008).</li><li>Norrby, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+models+of+angiogenesis.">In vivo models of angiogenesis.</a> J. Cell. Mol. Med. 10, 588-612 (2006).</li><li>Norrby, K. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic/Blood+endothelial+cell+connections+at+the+capillary+level+in+adult+rat+mesentery.">Lymphatic/Blood endothelial cell connections at the capillary level in adult rat mesentery.</a> Anat. Rec. (Hoboken). 293, 1629-1638 (2010).</li><li>Amos, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IFATS+collection:+The+role+of+human+adipose-derived+stromal+cells+in+inflammatory+microvascular+remodeling+and+evidence+of+a+perivascular+phenotype.">IFATS collection: The role of human adipose-derived stromal cells in inflammatory microvascular remodeling and evidence of a perivascular phenotype.</a> Stem Cells. 26, 2682-2690 (2008).</li></ol>

Nous n&#39;avons rien à communiquer.

Le modèle extériorisation a été signalé en 2006 et est adapté des modèles précédents de blessures mécaniques du mésentère de rat de l&#39;angiogenèse 4-7 et produit des résultats similaires à des modèles bien établis injection IP qui tirent parti du rat mésentère 9. Le temps de l&#39;extériorisation 20 minutes a été déterminée expérimentalement pour produire une réponse robuste angiogénique. Bien que cette période pourrait être modifiée, elle permet à une application locale d&#39;inhibiteurs de l&#39;angiogenèse 4 pour des études mécanistiques et l&#39;application directe des cellules exogènes pour les études de lignées cellulaires. De faisabilité de la constitution de cellules dans le remodelage des tissus mésentériques est appuyée par des études préliminaires dans notre laboratoire à l&#39;aide pré-étiquetés cellules de moelle osseuse et les cellules souches mésenchymateuses (Figure 7), et par le succès d&#39;enquêter sur le sort de l&#39;homme tissu adipeux ip injection cellules stromales 14 . Dans notre laboratoire, nous avons utilisé ce modèle pour identifier les phen péricyteschangements otypic au cours du temps de la réponse angiogénique 10 et d&#39;évaluer le potentiel angiogénique dans des conditions pathologiques, telles que l&#39;hypertension 12. La réponse angiogénique et les changements phénotypiques cellulaires associés à ce modèle peut également être observé dans d&#39;autres modèles mésentériques de rat angiogéniques y compris l&#39;exposition hypoxie chronique 10, 11. Une limitation du modèle extériorisation, c&#39;est que les mécanismes exacts de déclenchement de l&#39;angiogenèse ne sont pas connus. Extériorisation du mésentère a été liée à la dégranulation des mastocytes et une augmentation des taux d&#39;histamine 6, mais une enquête plus approfondie est nécessaire pour gagner plus de perspicacité. Le stimulus angiogénique est sans doute multifactorielle, produisant une réponse robuste remodelage dans la hiérarchie d&#39;un réseau microvasculaire. Bien que les mécanismes inconnus restent une critique majeure de ce modèle, sa reproductibilité et la simplicité le rendre attrayant pour identifier la dynamique cellulaire impliqués dans le processus intrinsèquement complexe germination capillaire. La reproductibilité du modèle est soutenu par comparables métriques angiogéniques au cours du temps de la croissance du réseau microvasculaire dans plusieurs souches de rats (mâles Wistar et Sprague-Dawley femelles) dans des études publiées antérieurement dans notre laboratoire 10, 12. Depuis, la majorité des adultes tissus mésentériques de rat sont vascularisés, le modèle permet aussi de multiples tissus à examiner par animal. Malheureusement, ce modèle n&#39;est manifestement pas applicable à des modèles génétiques de souris que les fenêtres mésentériques de souris ont une vascularisation moins natale et, dans notre expérience, manquent souvent observables réseaux de branchement. Les applications futures comprennent l&#39;étude de la fonctionnalité navire au cours de l&#39;angiogenèse en utilisant la microscopie intra-vitale à des moments précis et l&#39;enquête de la dynamique connexes cellulaires impliqués dans la lymphangiogenèse et la neurogenèse. Bien que la mesure de la vascularisation native par la fenêtre mésentérique semble être roughly proportionnelle avec l&#39;âge, nous avons observé de branchement des réseaux microvasculaires chez les rats mâles Wistar aussi jeunes que 4-5 semaines. Ces observations suggèrent que le modèle extériorisation pourrait également être appliqué pour comparer les différences angiogéniques à travers les âges.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires additionnels </td></tr><tr><td> Draper </td><td> Cardinal Health </td><td> 4012 </td><td> 12 &quot;x12&quot; Bio-Shield stérilisation régulière Wraps </td></tr><tr><td> Noyes Micro ciseaux </td><td> Roboz instruments chirurgicaux </td><td> RS-5677 </td><td> Noyes Micro Ciseaux de dissection de printemps; Droites, Sharp-Blunt points; Cutting Edge 13mm; Largeur Astuce 0.25mm, 4 1/2 &quot;Longueur hors tout </td></tr><tr><td> Graefe Pince </td><td> Roboz instruments chirurgicaux </td><td> RS-5135 </td><td> Micro Pinces à disséquer; dentelé; légère courbe; Largeur Astuce 0.8mm; 4 &quot;Longueur </td></tr><tr><td> Graefe Pince </td><td> Roboz instruments chirurgicaux </td><td> RS-5130 </td><td> Micro Pince à dissection; en dents de scie, les droites; Largeur Astuce 0.8mm; 4 &quot;Longueur </td></tr&gt; <tr><td> Suture 4-0 </td><td> ETHICON </td><td> 699g </td><td> (1,5 métrique) monofilament en nylon noir Ethilon Suture </td></tr><tr><td> 5-0 </td><td> ETHICON </td><td> 8556 </td><td> (1,0 métrique) PROLENE Polyprolene suture monofilament Bleu </td></tr><tr><td> 7-0 suture </td><td> ETHICON </td><td> 1647G </td><td> (0,5 métrique) monofilament en nylon noir Ethilon Suture </td></tr><tr><td> Titulaire Castroviejo aiguille Micro </td><td> Outils belle science </td><td> 12060-02 </td><td> Largeur Astuce: 0.6mm De serrage Longueur: 5mm Longueur: 9cm Pointe droite </td></tr><tr><td> Porte-aiguille Castroviejo </td><td> Outils belle science </td><td> 12565-14 </td><td> Forme de la pointe: Droit Largeur Astuce: 1.5mm Longueur de serrage: 10mm Ciseaux: Aucun Lock: Oui Longueur: 14cm Dentelé: Oui </td></tr><tr><td> Manche de bistouri </td><td> Roboz d&#39;instruments chirurgicaux </td><td> RS-9843 </td><td> Scalpel Handle, n ° 3; solide; 4 &quot;Longueur </td></tr><tr><td> Stérile Lame chirurgicale </td><td> Cincinnati chirurgicale </td><td> 0110 </td><td> En acier inoxydable; Taille 10 </td></tr><tr><td> Boîte de Pétri </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-757-13 </td><td> Ridge biseauté, Slippable </td></tr></tbody></table> Table des matières spécifiques chirurgicales et outils. <table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires additionnels </td></tr><tr><td> Beuthanasia </td><td> Schering-Plough Animal Health Corp Union (Commandé par MWI alimentation vétérinaire) </td><td> MWI #: 011168 </td><td> Matière active: par 100 ml, 390 mg de sodium pentobarbital de sodium, 50 mg de phénytoïne </td></tr><tr><td> La kétamine </td><td> Fort Dodge Santé Animale (Commandé par MWI alimentation vétérinaire) </td><td> MWI #: 000680 </td><td> Kateset 100 mg / ml </td></tr><tr><td> La xylazine </td><td> LLOYD. Inc (Commandé par MWI alimentation vétérinaire) </td><td> MWI #: 009307 </td><td> Anased 100 mg / ml </td></tr><tr><td> Saline </td><td> Hospira Inc </td><td> 94-217-JT </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> SIGMA </td><td> 011M8207 </td><td></td></tr><tr><td> La saponine </td><td> Sigma </td><td> BCBB4080 </td><td></td></tr><tr><td> PECAM (CD31) </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553371 </td><td></td></tr><tr><td> Streptavidine-Cy3 </td><td> Jackson ImmunoResearch </td><td> 016-160-084 </td><td></td></tr><tr><td> BSA </td><td> Jackson ImmunoResearch </td><td> 096555 </td><td></td></tr><tr><td> Vectastain Elite ABC </td><td> Vector Laboratories </td><td> PK-6100 </td><td></td></tr><tr><td> Vecteur Nouvelle-Rouge </td><td> Vector Laboratories </td><td> SK-4800 </td><td></td></tr><tr><td> VectaMount </td><td> Vector Laboratories </td><td> H-500 </td><td></td></tr></tbody></table> Table des réactifs spécifiques

rat mesentery exteriorization: a model for investigating the cellular dynamics involved in angiogenesis

La croissance du réseau Microvacular et le remodelage sont des aspects cruciaux de la cicatrisation des plaies, l&#39;inflammation, la rétinopathie diabétique, la croissance tumorale et les conditions d&#39;autres maladies 1, 2. Croissance du réseau est communément attribué à l&#39;angiogenèse, définie comme la croissance de nouveaux vaisseaux à partir de vaisseaux pré-existants. Le procédé angiogénique est également directement relié à artériogenèse, défini comme l&#39;acquisition d&#39;un capillaire de revêtement cellule périvasculaire et l&#39;élargissement navire. Inutile de dire que, l&#39;angiogenèse est complexe et implique de multiples acteurs au niveau cellulaire et moléculaire 3. Comprendre comment un réseau microvasculaire augmente, il faut identifier les dynamiques spatiales et temporelles ainsi que la hiérarchie d&#39;un réseau au cours du temps de l&#39;angiogenèse. Cette information est essentielle pour le développement de thérapies visant à manipuler la croissance des vaisseaux. Le modèle extériorisation décrit dans cet article représente un modèle simple et reproductible pour stimulerLating l&#39;angiogenèse dans le mésentère de rat. Il a été adapté à partir de cicatrisation des modèles chez le rat mésentère 4-7, et est une alternative à stimuler l&#39;angiogenèse dans le mésentère via des injections ip de pro-angiogéniques 8, 9. Le modèle extériorisation est attrayante parce qu&#39;elle nécessite un minimum d&#39;intervention chirurgicale et produit des augmentations dramatiques, reproductibles dans les germes de la zone capillaire, vasculaire et de la densité vasculaire au cours d&#39;une évolution dans le temps relativement court dans un tissu qui permet de visualiser en deux dimensions des réseaux microvasculaires entières vers le bas pour unique niveau de la cellule. La croissance stimulée reflète naturelles réponses angiogéniques dans un environnement physiologique, sans ingérence des étrangers molécules angiogéniques. En utilisant des méthodes immunohistochimiques étiquetage, ce modèle a été révélée extrêmement utile pour identifier de nouveaux événements cellulaires impliqués dans l&#39;angiogenèse. Les enquêteurs peuvent facilement corréler les mesures angiogéniques au cours du temps de remodelage avec le temps spdynamique, tels que S PROPRES cellulaires changements phénotypiques ou interactions cellulaires 4, 5, 7, 10, 11.

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Rat Mesentery Exteriorization: A Model for Investigating the Cellular Dynamics Involved in Angiogenesis

Cet article décrit un modèle simple pour stimuler l&#39;angiogenèse dans le mésentère de rat. Le modèle produit des augmentations spectaculaires de la germination capillaire, la zone vasculaire et la densité vasculaire au cours d&#39;une évolution dans le temps relativement court dans un tissu qui permet la visualisation en face de l&#39;ensemble des réseaux microvasculaires vers le niveau de la cellule unique.

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