Name: rat mesentery exteriorization: a model for investigating the cellular dynamics involved in angiogenesis
Uploaded: 2012-05-20T14:00:00
Duration: 12 min 29 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rat Mesentery Exteriorization: A Model for Investigating the Cellular Dynamics Involved in Angiogenesis at JoVE.com

Эта работа была поддержана Советом регентов штата Луизиана LEQSF (2009-12)-RD-19 (PI: WL Murfee) и Tulane Гипертония и почечная Центр повышения квалификации финансируемых NIH грант P20RR017659-08 (PI : Л. Гавриил Навар).

<ol>
	<li>Carmeliet, P., Jain, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+in+cancer+and+other+diseases.">Angiogenesis in cancer and other diseases.</a> Nature. 407, 249-257 (2000).</li><li>le Noble, F. A., Stassen, F. R., Hacking, W. J., Struijker Boudier, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+and+hypertension.">Angiogenesis and hypertension.</a> J. Hypertens. 16, 1563-1572 (1998).</li><li>Peirce, S. M., Skalak, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvascular+remodeling:+a+complex+continuum+spanning+angiogenesis+to+arteriogenesis.">Microvascular remodeling: a complex continuum spanning angiogenesis to arteriogenesis.</a> Microcirculation. 10, 99-111 (2003).</li><li>Anderson, C. R., Ponce, A. M., Price, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistochemical+identification+of+an+extracellular+matrix+scaffold+that+microguides+capillary+sprouting+in+vivo.">Immunohistochemical identification of an extracellular matrix scaffold that microguides capillary sprouting in vivo.</a> J. Histochem. Cytochem. 52, 1063-1072 (2004).</li><li>Ponce, A. M., Price, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenic+stimulus+determines+the+positioning+of+pericytes+within+capillary+sprouts+in+vivo.">Angiogenic stimulus determines the positioning of pericytes within capillary sprouts in vivo.</a> Microvasc. Res. 65, 45-48 (2003).</li><li>Franzen, L., Ghassemifar, R., Malcherek, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+mast+cell+activation+improves+connective+tissue+repair+in+the+perforated+rat+mesentery.">Experimental mast cell activation improves connective tissue repair in the perforated rat mesentery.</a> Agents Actions. 33, 371-377 (1991).</li><li>Anderson, C. R., Hastings, N. E., Blackman, B. R., Price, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Capillary+sprout+endothelial+cells+exhibit+a+CD36+low+phenotype:+regulation+by+shear+stress+and+vascular+endothelial+growth+factor-induced+mechanism+for+attenuating+anti-proliferative+thrombospondin-1+signaling.">Capillary sprout endothelial cells exhibit a CD36 low phenotype: regulation by shear stress and vascular endothelial growth factor-induced mechanism for attenuating anti-proliferative thrombospondin-1 signaling.</a> Am. J. Pathol. 173, 1220-1228 (2008).</li><li>Norrby, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+models+of+angiogenesis.">In vivo models of angiogenesis.</a> J. Cell. Mol. Med. 10, 588-612 (2006).</li><li>Norrby, K. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+Mesentery+Angiogenesis+Assay.">Rat Mesentery Angiogenesis Assay.</a> J. Vis. Exp. (52), e3078 (2011).</li><li>Murfee, W. L., Rehorn, M. R., Peirce, S. M., Skalak, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perivascular+cells+along+venules+upregulate+NG2+expression+during+microvascular+remodeling.">Perivascular cells along venules upregulate NG2 expression during microvascular remodeling.</a> Microcirculation. 13, 261-273 (2006).</li><li>Stapor, C. P., Murfee, L. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+class+III+&#946;-tubulin+as+a+marker+of+angiogenic+perivascular+cells.">Identification of class III &#946;-tubulin as a marker of angiogenic perivascular cells.</a> Microvascular Research. , (2011).</li><li>Yang, M., Aragon, M., Murfee, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+in+Mesenteric+Microvascular+Networks+from+Spontaneously+Hypertensive+Versus+Normotensive+Rats.">Angiogenesis in Mesenteric Microvascular Networks from Spontaneously Hypertensive Versus Normotensive Rats.</a> Microcirculation. , (2011).</li><li>Robichaux, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphatic/Blood+endothelial+cell+connections+at+the+capillary+level+in+adult+rat+mesentery.">Lymphatic/Blood endothelial cell connections at the capillary level in adult rat mesentery.</a> Anat. Rec. (Hoboken). 293, 1629-1638 (2010).</li><li>Amos, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=IFATS+collection:+The+role+of+human+adipose-derived+stromal+cells+in+inflammatory+microvascular+remodeling+and+evidence+of+a+perivascular+phenotype.">IFATS collection: The role of human adipose-derived stromal cells in inflammatory microvascular remodeling and evidence of a perivascular phenotype.</a> Stem Cells. 26, 2682-2690 (2008).</li></ol>

Нам нечего раскрывать.

Экстериоризации модели было сообщено в 2006 году и взят из предыдущей механических повреждений брыжейки крысы моделей ангиогенеза 4-7 и производит аналогичные результаты хорошо установленных IP-моделей инъекции, которые используют крыс брыжейки 9. 20 минут экстериоризации время экспериментально установлено, производить надежные ангиогенного ответа. Хотя этот период времени может быть изменена, она позволяет местным применением ингибиторов ангиогенеза 4 механистического исследования и непосредственное применение экзогенных клеток для исследования клеточной линии. Возможность включения в клетке реконструкции брыжеечной ткани поддерживается предварительные исследования в нашей лаборатории с использованием предварительно помечены клетки костного мозга и мезенхимальные стволовые клетки (рис. 7), и успех расследования судьбы человеческой жировой ткани, производных стромальных клеток инъекции IP 14 . В нашей лаборатории, мы использовали эту модель для определения перицитов фенotypic изменения с течением времени ход кровеносных сосудов ответ 10 и оценить потенциал ангиогенеза при патологических состояниях, таких как гипертония 12. Ангиогенных ответ и клеточный фенотип изменения, связанные с этой моделью можно наблюдать и в других крыс брыжеечной ангиогенных моделей, включая хронической гипоксии экспозиции 10, 11. Ограничение экстериоризации модели является то, что точный запуск механизмов ангиогенеза неизвестно. Экстериоризации брыжейки была связана с дегрануляцию тучных клеток и увеличение уровня гистамина 6, но необходимы дальнейшие исследования, чтобы получить более глубокое. Ангиогенных стимул, несомненно, является многофакторным, создавая надежный ответ реконструкции всей иерархии микрососудистой сети. В то время как неизвестные механизмы остаются серьезной критики этой модели, ее воспроизводимость и простота делают его привлекательным для выявления клеточной динамики involВЭД в заведомо сложной капиллярной прорастания процесс. Воспроизводимость модели поддерживают сопоставимых ангиогенных метрики с течением времени курс микрососудистых роста сети на нескольких штаммов крыс (мужские и женские линии Вистар Sprague-Dawley) в ранее опубликованных исследований, проведенных в нашей лаборатории 10, 12. Так, большинство из тканей взрослого брыжеечной крысы являются васкуляризированной, модель также позволяет нескольким ткани должны быть рассмотрены на животное. К сожалению, эта модель не является, очевидно, применимы к генетической модели мыши, окна мышью брыжеечной меньше родной васкуляризации и, по нашему опыту, обычно не хватает наблюдается разветвление сети. Будущие приложения включают исследование судно функциональность при использовании ангиогенеза внутри жизненно микроскопии в определенные моменты времени и исследование связанных клеточной динамики, участвующих в лимфангиогенеза и нейрогенез. Хотя степень васкуляризации в родной брыжеечной окно, кажется, ROUghly пропорциональна возрасту, мы наблюдали ветвления микрососудистых сетей у самцов крыс Вистар в возрасте 4-5 недель. Эти наблюдения позволяют предположить, что экстериоризация модель также может быть применен для сравнения ангиогенных различия в возрасте.

<table border="1"><tbody><tr><td> Имя </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td><td> Дополнительные комментарии </td></tr><tr><td> Драпировать </td><td> Cardinal Health </td><td> 4012 </td><td> 12 &quot;x12&quot; Bio-Shield Регулярные стерилизации Обертывания </td></tr><tr><td> Нойес Micro Scissor </td><td> Roboz хирургический инструмент </td><td> RS-5677 </td><td> Нойес Micro Анатомический Весна ножницы; Прямо, Sharp-Blunt центров; режущей кромки 13 мм; 0,25 мм Ширина Совет, 4 1/2 &quot;Общая длина </td></tr><tr><td> Грефе Forcep </td><td> Roboz хирургический инструмент </td><td> RS-5135 </td><td> Micro диссекции, Зубчатые, небольшим изгибом; 0,8 Ширина Совет, 4 &quot;Длина </td></tr><tr><td> Грефе Forcep </td><td> Roboz хирургический инструмент </td><td> RS-5130 </td><td> Micro диссекции, зубчатые, прямые, 0,8 мм Ширина Совет, 4 &quot;Длина </td></TR&gt; <tr><td> 4-0 шва </td><td> Ethicon </td><td> 699G </td><td> (1,5 метрической) ETHILON Нейлон черный мононить Шовный </td></tr><tr><td> 5-0 шва </td><td> Ethicon </td><td> 8556 </td><td> (1,0 метрической) PROLENE Polyprolene Шовный Синий мононить </td></tr><tr><td> 7-0 шва </td><td> Ethicon </td><td> 1647G </td><td> (0,5 метрической) ETHILON Нейлон черный мононить Шовный </td></tr><tr><td> Кастровьехо Micro Иглодержатель </td><td> Изобразительных средств наук </td><td> 12060-02 </td><td> Совет Ширина: 0,6 мм Зажимные Длительность: 5 мм Длина: 9 см Св `едения из достоверных источников </td></tr><tr><td> Кастровьехо Иглодержатель </td><td> Изобразительных средств наук </td><td> 12565-14 </td><td> Tip Shape: Прямые Совет Ширина: 1,5 мм Зажимные Длина: 10 мм Ножницы: Нет Блокировка: Да Длина: 14 см Зубчатые: Да </td></tr><tr><td> Ручка скальпеля </td><td> Roboг хирургические инструменты </td><td> RS-9843 </td><td> Скальпель ручки, # 3, твердые, 4 &quot;Длина </td></tr><tr><td> Стерильные хирургические лезвия </td><td> Цинциннати хирургической </td><td> 0110 </td><td> Нержавеющая сталь, размер 10 </td></tr><tr><td> Чашку Петри </td><td> Fisher Scientific </td><td> 08-757-13 </td><td> Скошенные Ридж, Slippable </td></tr></tbody></table> Таблица конкретных хирургических материалов и инструментов. <table border="1"><tbody><tr><td> Имя </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td><td> Дополнительные комментарии </td></tr><tr><td> Beuthanasia </td><td> Schering-Plough Animal Health корпорации союза (упорядоченные от MWI ветеринарной питания) </td><td> MWI #: 011168 </td><td> Активный ингредиент: на 100 мл, 390 мг фенобарбитала натрия, 50 мг натрия фенитоином </td></tr><tr><td> Кетамин </td><td> Fort Dodge Animal Health (упорядоченные от MWI ветеринарной питания) </td><td> MWI #: 000680 </td><td> Kateset 100 мг / мл </td></tr><tr><td> Ксилазин </td><td> LLOYD. Инк (Упорядоченные от MWI ветеринарной питания) </td><td> MWI #: 009307 </td><td> Anased 100 мг / мл </td></tr><tr><td> Солевой </td><td> Hospira Инк </td><td> 94-217-JT </td><td></td></tr><tr><td> PBS </td><td> SIGMA </td><td> 011M8207 </td><td></td></tr><tr><td> Saponin </td><td> Сигма </td><td> BCBB4080 </td><td></td></tr><tr><td> PECAM (CD31) </td><td> BD Pharmingen </td><td> 553371 </td><td></td></tr><tr><td> Стрептавидин-Cy3 </td><td> Джексон ImmunoResearch </td><td> 016-160-084 </td><td></td></tr><tr><td> BSA </td><td> Джексон ImmunoResearch </td><td> 096555 </td><td></td></tr><tr><td> Vectastain Elite ABC </td><td> Vector Laboratories </td><td> PK-6100 </td><td></td></tr><tr><td> Векторные Нова Красный </td><td> Vector Laboratories </td><td> SK-4800 </td><td></td></tr><tr><td> VectaMount </td><td> Vector Laboratories </td><td> H-500 </td><td></td></tr></tbody></table> Таблица специфических реагентов

rat mesentery exteriorization: a model for investigating the cellular dynamics involved in angiogenesis

Microvacular роста сети и реконструкция представляют собой критические аспекты заживления ран, воспалений, диабетическая ретинопатия, рост опухолей и других патологических состояний 1, 2. Сеть роста обычно связывают с ангиогенез, определяется как рост новых сосудов из уже существующих судов. Ангиогенных процесс также напрямую связаны с arteriogenesis, определяемый как капиллярная приобретение периваскулярных покрытие клеток и сосудов расширения. Излишне говорить, ангиогенез является комплексным и включает в себя несколько игроков на клеточном и молекулярном уровне 3. Понимание того, как капиллярная сеть растет требует определения пространственной и временной динамике по иерархии сети за время хода ангиогенеза. Эта информация имеет решающее значение для развития методов лечения, направленных на манипулирование судно роста. Экстериоризации модели, описанной в этой статье, представляет собой простой, воспроизводимой моделью стимулируетlating ангиогенеза у крыс брыжейки. Она была заимствована из ранозаживляющим модели у крыс брыжейки 4-7, и является альтернативой для стимуляции ангиогенеза в брыжейке с помощью IP-инъекции проангиогенных агентов 8, 9. Экстериоризации модель привлекательна тем, что требует минимального хирургического вмешательства и производит драматические, воспроизводимые увеличения капиллярного капуста, сосудистые области и сосудистой плотности в течение относительно короткого времени курс в ткани, что позволяет двумерной визуализации всей сети микрососудов до одного клеточном уровне. Стимулировал рост отражает естественный ангиогенных ответы в физиологическом среде без вмешательства иностранных ангиогенных молекул. Использование иммуногистохимических методов маркировки, эта модель была оказались чрезвычайно полезными для выявления новых клеточных событий, участвующих в ангиогенеза. Следователи легко соотнести ангиогенных метрики во время хода реконструкции со временем зрecific динамики, таких как сотовые фенотипические изменения или межклеточных взаимодействий 4, 5, 7, 10, 11.

Watch this Scientific Journal Video about Rat Mesentery Exteriorization: A Model for Investigating the Cellular Dynamics Involved in Angiogenesis at JoVE.com

Rat Mesentery Exteriorization: A Model for Investigating the Cellular Dynamics Involved in Angiogenesis

В этой статье описывается простой моделью для стимуляции ангиогенеза у крыс брыжейки. Модель дает резкое увеличение капиллярной прорастания, сосудистые области и сосудистой плотности в течение относительно короткого времени курс в ткани, что позволяет в фас визуализацию всей микрососудистых сетей до одного уровня ячейки.

Крысы Брыжейка экстериоризации: модель для исследования Клеточная динамика, вовлеченных в ангиогенез

Microvacular network growth and remodeling are critical aspects of wound healing, inflammation, diabetic retinopathy, tumor growth and other disease ...

Research

JoVE Journal

Biology

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis (Interview)

Christopher Hughes:  An in vitro model for the Study of Angiogenesis Interview

Кристофер Хьюз: в пробирке модель для изучения ангиогенеза (Интервью)

Christopher C.W. Hughes describes the utility of his culture system for studying angiogenesis in vitro.  He explains the importance of fibroblasts that ...

Use of Rotorod as a Method for the Qualitative Analysis of Walking in Rat

Использование Rotorod как метод Качественный анализ Прогулка по Крыса

High speed videoanalysis of the details of movement can provide a source of information about qualitative aspects of walking movements. When walking on a ...

Rat Mesentery Angiogenesis Assay

Крыса Брыжейка Ангиогенез Пробирной

The adult rat mesentery window angiogenesis assay is biologically appropriate and is exceptionally well suited to the 
study of sprouting angiogenesis in ...

An Explant Assay for Assessing Cellular Behavior of the Cranial Mesenchyme

Эксплантов анализа для оценки сотовой поведение черепно Мезенхима

The central nervous system is derived from the neural plate that undergoes a series of complex morphogenetic movements resulting in formation of the ...

Using RNA-mediated Interference Feeding Strategy to Screen for Genes Involved in Body Size Regulation in the Nematode C. elegans

Using RNA-mediated Interference Feeding Strategy to Screen for Genes Involved in Body Size Regulation in the Nematode C. elegans

Использование РНК-опосредованного вмешательства стратегии кормления для выявления генов, участвующих в размерах тела регулированию в Нематода<em&gt; C. Элеганс</em

Double-strand RNA-mediated interference (RNAi) is an effective strategy to knock down target gene expression1-3. It has been applied to many model systems ...

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

Using Caenorhabditis elegans as a Model System to Study Protein Homeostasis in a Multicellular Organism

The folding and assembly of proteins is essential for protein function, the long-term health of the cell, and longevity of the organism. Historically, the ...

One-channel Cell-attached Patch-clamp Recording

Один канал сотового прилагается патч-зажим записи

Ion channel proteins are universal devices for fast communication across biological membranes. The temporal signature of the ionic flux they generate ...

Microperfusion Technique to Investigate Regulation of Microvessel Permeability in Rat Mesentery

Microperfusion Техника по расследованию Правила микрососудов проницаемость у крыс брыжейки

Experiments to measure the permeability properties of individually perfused microvessels provide a bridge between investigation of molecular and cellular ...

A Simple Bioassay for the Evaluation of Vascular Endothelial Growth Factors

Простой биопроб для оценки факторов роста эндотелия сосудов

The analysis of receptor tyrosine kinases and their interacting ligands involved in vascular biology is often challenging due to the constitutive ...

High-resolution Time-lapse Imaging and Automated Analysis of Microtubule Dynamics in Living Human Umbilical Vein Endothelial Cells

Высокое разрешение Покадровый изображений и автоматизированный анализ динамики микротрубочек в живых человеческих эндотелиальных клеток пупочной вены

The physiological process by which new vasculature forms from existing vasculature requires specific signaling events that trigger morphological changes ...