Name: solubilization and bio-conjugation of quantum dots and bacterial toxicity assays by growth curve and plate count
Uploaded: 2012-07-11T13:00:00
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Ce travail a été financé par le programme de découverte individuelle du CRSNG, le CRSNG / IRSC Programme de recherche concertée sur la santé (PRCS), et le CRSNG CREATE Programme canadien de formation astrobiologie (CATP).

1. Solubilisation QD Il s&#39;agit d&#39;une méthode appropriée pour le CdTe. Des méthodes similaires peuvent être utilisés avec d&#39;autres types de boîtes quantiques tels que InP / ZnS 20 et CdSe / ZnS 21. <ol><li> Préparer une solution de BQs CdTe dans le toluène à 15 um (densité optique = 2,5 au sommet exciton en premier). </li><li> Transférer 200 ul de ce stock dans un flacon en verre. Ne pas utiliser de plastique! </li><li> Ajouter 800 ul du toluène...

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	<li>Michalet, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantum+dots+for+live+cells,+in+vivo+imaging,+and+diagnostics.">Quantum dots for live cells, in vivo imaging, and diagnostics.</a> Science. 307, 538-544 (2005).</li><li>Jamieson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+applications+of+quantum+dots.">Biological applications of quantum dots.</a> Biomaterials. 28, 4717-4732 (2007).</li><li>Asokan, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+heat+transfer+fluids+in+the+synthesis+of+high-quality+CdSe+quantum+dots,+core/shell+quantum+dots,+and+quantum+rods.">The use of heat transfer fluids in the synthesis of high-quality CdSe quantum dots, core/shell quantum dots, and quantum rods.</a> Nanotechnology. 16, 2000-2011 (2005).</li><li>Chan, W. 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L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antimicrobial+activity+and+cellular+toxicity+of+nanoparticle-polymyxin+B+conjugates.">Antimicrobial activity and cellular toxicity of nanoparticle-polymyxin B conjugates.</a> Nanotechnology. 22, 185101 (2011).</li><li>Cooper, D. R., Dimitrijevic, N. M., Nadeau, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photosensitization+of+CdSe/ZnS+QDs+and+reliability+of+assays+for+reactive+oxygen+species+production.">Photosensitization of CdSe/ZnS QDs and reliability of assays for reactive oxygen species production.</a> Nanoscale. 2, 114-121 (2010).</li><li>Pong, B. K., Trout, B. L., Lee, J. 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Les nanoparticules représentent une approche prometteuse pour la création de nouveaux agents anti-microbiens. Analyse de la courbe de croissance est un moyen de contrôler la densité des cellules bactériennes qui distingue les cellules activement croissantes de-croissance des cellules inhibées. Lorsque couplée avec un nombre de plaques, il permet une analyse approfondie du potentiel antibiotique d&#39;un conjugué. Le format de 96 puits permet des variations relativement à haut débit de concentration et d&#39;au...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom </td><td> Entreprise </td><td> Le numéro de catalogue </td><td> Commentaires (optionnel) </td></tr><tr><td> Borate composant tampon n ° 1 </td><td> Pêcheur </td><td> L&#39;acide borique A-74-1 </td><td></td></tr><tr><td> Borate composant tampon n ° 2 </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> B9876 tétraborate de sodium </td><td></td></tr><tr><td> MPA </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> M5801 </td><td></td></tr><tr><td> Vivaspin 500 </td><td> GE Healthcare </td><td> 28-9322 </td><td> Divers MWCO disponibles </td></tr><tr><td> Flacons en verre </td><td> Pêcheur </td><td> 03-338C </td><td></td></tr><tr><td> EDC </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> E6383 </td><td></td></tr><tr><td> Polymyxine B </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> P1004 </td><td></td></tr><tr><td> Gr bactérienneoissance milieu (LB) Composante n ° 1 </td><td> Pêcheur </td><td> NaCl S271 </td><td></td></tr><tr><td> Milieu de croissance bactérienne (LB) Composante n ° 2 </td><td> BD </td><td> Tryptone 211705 </td><td></td></tr><tr><td> Milieu de croissance bactérienne (LB) Composante n ° 3 </td><td> BD </td><td> 211929 Extrait de levure </td><td></td></tr><tr><td> Lampe pour exposition à la lumière </td><td> Coutume </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Clear-fond plaques à 96 puits </td><td> Pêcheur </td><td> 07-200-567 ou 07-200-730 </td><td></td></tr><tr><td> Spectromètre à fluorescence </td><td> Molecular Devices </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Lecteur de plaque d&#39;absorbance </td><td> Molecular Devices </td><td></td><td></td></tr><tr><td> BactoAgar pour les milieux solides </td><td> Bioshop </td><td> AGR001.1 </td><td></td></tr><tr><td> Des boîtes de Pétri autour </td><td> Pêcheur </td><td> 08-75-12 </td><td></td></tr><tr><td> Des boîtes de Pétri rectangulaires </td><td> Pêcheur </td><td> 08-757-11A </td><td></td></tr></tbody></table>

solubilization and bio-conjugation of quantum dots and bacterial toxicity assays by growth curve and plate count

Boîtes quantiques (QDS) sont des nanoparticules semi-conductrices fluorescentes dont la taille dépend de spectres d&#39;émission pouvant être excités par un choix large de longueurs d&#39;onde. QDs ont attiré beaucoup d&#39;intérêt pour l&#39;imagerie, le diagnostic et la thérapie en raison de leur brillante, la fluorescence stable 1,2 3,4,5. BQs peut être conjugué à une variété de molécules bio-actives pour se lier à des bactéries et des cellules mammaliennes 6. Les points quantiques sont également largement étudiée comme agents cytotoxiques pour assassinat ciblé des bactéries. L&#39;émergence de multiplier les souches bactériennes résistantes aux devient rapidement une crise de santé publique, en particulier dans le cas de germes à Gram négatif 7. En raison de l&#39;effet bien connu antimicrobienne de certains nanomatériaux, en particulier Ag, il ya des centaines d&#39;études portant sur ​​la toxicité des nanoparticules à des bactéries 8. Des études bactériennes ont été effectuées avec d&#39;autres types de nanoparticules semi-conductrices ainsi, spécially TiO 2 9,10-11, mais aussi de ZnO 12 et autres, y compris CuO 13. Quelques comparaisons de souches bactériennes ont été effectuées dans ces études, généralement comparant une souche à Gram négatif avec un Gram positif. Avec toutes ces particules, les mécanismes de toxicité sont attribués à l&#39;oxydation: soit l&#39;photogénération d&#39;espèces réactives de l&#39;oxygène (ROS) par les particules ou le rejet direct d&#39;ions métalliques qui peuvent causer la toxicité oxydative. Même avec ces matériaux, les résultats des différentes études varient considérablement. Dans certaines études, la souche d&#39;essai à Gram positif est censément plus sensible que les 10 à Gram négatif, dans d&#39;autres c&#39;est le 14 en regard. Ces études ont été étudiées en 15. Dans toutes les études de nanoparticules, la composition des particules, la taille, la chimie de surface, l&#39;échantillon vieillissement / ventilation, et de longueur d&#39;onde, la puissance et la durée d&#39;exposition de lumière peuvent tous affecter les résultats de façon spectaculaire. En outre, SYNTHESIsous-produits s et les solvants doivent être considérées 16 17. Techniques de criblage à haut débit sont nécessaires pour être en mesure de développer des agents efficaces de la nanomédecine nouvelles. QDs CdTe ont effets anti-microbiens seuls 18 ou en combinaison avec des antibiotiques. Dans une étude précédente, nous avons montré que le couplage d&#39;antibiotiques pour CdTe peut augmenter la toxicité pour les bactéries, mais de diminuer la toxicité pour les cellules de mammifères, en raison de la production a diminué d&#39;espèces réactives de l&#39;oxygène à partir des conjugués 19. Bien qu&#39;il soit peu probable que le cadmium composés contenant sera approuvé pour utilisation chez les humains, ces préparations peuvent être utilisées pour la désinfection des surfaces ou la stérilisation de l&#39;eau. Dans ce protocole, nous donnons une approche simple pour solubiliser les points quantiques de CdTe avec de l&#39;acide mercaptopropionique (MPA). Les points quantiques sont prêts à utiliser moins d&#39;une heure. Nous démontrons ensuite le couplage à un agent antimicrobien. La deuxième partie du protocoledémontre un test d&#39;inhibition de 96 puits en utilisant des bactéries les boîtes quantiques conjugués et non conjugués. La densité optique est lue pendant plusieurs heures, permettant aux effets de l&#39;ajout QD et exposition à la lumière d&#39;être évalués immédiatement ainsi que, après une période de récupération. Nous présentons aussi un comptage des colonies pour quantifier la survie des bactéries.

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Solubilization and Bio-conjugation of Quantum Dots and Bacterial Toxicity Assays by Growth Curve and Plate Count

Les nanoparticules telles que les points quantiques à semi-conducteurs (QDS) peut être utilisé pour créer des agents photo-activables pour les applications anti-microbiens ou anti-cancer. Cette technique montre comment l&#39;eau solubiliser en tellurure de cadmium (CdTe) QDs, les conjuguer à un antibiotique, et d&#39;effectuer un test d&#39;inhibition bactérienne basée sur les courbes de croissance et numération sur plaque.

Solubilisation et Bio-conjugaison de Quantum Dots et des tests de toxicité bactériennes par la courbe de croissance et le comte Plate

Quantum dots (QDs) are fluorescent semiconductor nanoparticles with size-dependent emission spectra that can be excited by a broad choice of wavelengths. ...

Research

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