Name: a system for ex vivo culturing of embryonic pancreas
Uploaded: 2012-08-27T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas at JoVE.com

البحث في المختبر Spagnoli. بتمويل من مؤسسة هيلمهولتس، ومنحة FP7-IRG-2008-ENDOPANC وERC-2009-ابتداء المنح الكبدية.

وقد تم تكييف البروتوكول الموصوفة هنا من تقنية صفها أصلا في بيرسيفال وسلاك 9 و الأمثل للفحص المجهري متحد البؤر. 1. طلاء الزجاج من الأطباق الاستزراع القاعي وينبغي إجراء الخطوات الآتية تحت ظ...

<ol>
	<li>Slack, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+biology+of+the+pancreas.">Developmental biology of the pancreas.</a> Development. 121, 1569-1580 (1995).</li><li>Pan, F., Wright, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreas+organogenesis:+from+bud+to+plexus+to+gland.">Pancreas organogenesis: from bud to plexus to gland.</a> Dev. Dyn. 240, 530-565 (2011).</li><li>Puri, S., Hebrok, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+Plasticity+within+the+Pancreas-+Lessons+Learned+from+Development.">Cellular Plasticity within the Pancreas- Lessons Learned from Development.</a> Developmental Cell. 18, 342-356 (2010).</li><li>Spagnoli, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=From+endoderm+to+pancreas:+a+multistep+journey.">From endoderm to pancreas: a multistep journey.</a> Cell. Mol. Life Sci. 64, 2378-2390 (2007).</li><li>Hick, A. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+primitive+duct+formation+in+the+pancreas+and+submandibular+glands:+a+role+for+SDF-1.">Mechanism of primitive duct formation in the pancreas and submandibular glands: a role for SDF-1.</a> BMC Dev. Biol. 9, 1-17 (2009).</li><li>Villasenor, A., Chong, D., Henkemeyer, M., Cleaver, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epithelial+dynamics+of+pancreatic+branching+morphogenesis.">Epithelial dynamics of pancreatic branching morphogenesis.</a> Development. 137, 4295-4305 (2010).</li><li>Kesavan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cdc42-Mediated+Tubulogenesis+Controls+Cell+Specification.">Cdc42-Mediated Tubulogenesis Controls Cell Specification.</a> Cell. 139, 791-801 (2009).</li><li>Zhou, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Multipotent+Progenitor+Domain+Guides+Pancreatic+Organogenesis.">A Multipotent Progenitor Domain Guides Pancreatic Organogenesis.</a> Developmental Cell. 13, 103-114 (2007).</li><li>Percival, A., Slack, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+pancreatic+development+using+a+cell+lineage+label.">Analysis of pancreatic development using a cell lineage label.</a> Exp. Cell Res. 247, 123-132 (1999).</li><li>Miralles, F., Czernichow, P., Ozaki, K., Itoh, N., Scharfmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+through+fibroblast+growth+factor+receptor+2b+plays+a+key+role+in+the+development+of+the+exocrine+pancreas.">Signaling through fibroblast growth factor receptor 2b plays a key role in the development of the exocrine pancreas.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 96, 6267-6272 (1999).</li><li>Puri, S., Hebrok, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+embryonic+pancreas+development+using+real-time+imaging.">Dynamics of embryonic pancreas development using real-time imaging.</a> Dev. Biol. 306, 82-93 (2007).</li><li>Magenheim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+vessels+restrain+pancreas+branching,+differentiation+and+growth.">Blood vessels restrain pancreas branching, differentiation and growth.</a> Development. 138, 4743-4752 (2011).</li><li>Nagy, A., Gertsenstein, M., Vintersten, K., Behringer, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manipulating the Mouse Embryo: A Laboratory Manual. , (2003).</li><li>Horb, L. D., Slack, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+cell+division+in+branching+morphogenesis+and+differentiation+of+the+embryonic+pancreas.">Role of cell division in branching morphogenesis and differentiation of the embryonic pancreas.</a> Int. J. Dev. Biol. 44, 791-796 (2000).</li><li>Muzumdar, M., Tasic, B., Miyamichi, K., Li, L., Luo, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+global+double-fluorescent+Cre+reporter+mouse.">A global double-fluorescent Cre reporter mouse.</a> Genesis. 45, 593-605 (2007).</li></ol>

مرة واحدة يتم تحديد مصير البنكرياس، الخلايا الاصلية البنكرياس الخضوع انتشار واسعة، والتمايز والتشكل في نهاية المطاف لتشكيل هيئة ناضجة وظيفية 2،4. في الوقت الحاضر، وكيف المتفرعة يحدث في البنكرياس وكيف يتم توصيله انتشار السلف والتمايز غير معروف إلى حد كبير. يزد?...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> الأجسام المضادة: كربوكسي ببتيداز E-كادهيرين F-أكتين الجلوكاجون الأنسولين β1-إنتغرين Pdx1 Pdx1 الفوسفات-H3 هيستون </td><td> عبد Serotec إينفيتروجن الجزيئية مجسات ImmunoStar ميليبور ميليبور Abcam ورم هجين الضفة خلية تشوير </td><td> 1810-0006 13-1900 A-12373 20076 4011-01 MAB1997 ab47267 F109-D12 9706 </td><td></td></tr><tr><td> النسر متوسطة القاعدية (BME) </td><td> سيجما </td><td> B1522-500ML </td><td> يوضع في ظروف معقمة </td></tr><tr><td> المياه خلية ثقافة الصف </td><td> PAA </td><td> S15-012 </tد&gt; <td> يوضع في ظروف معقمة </td></tr><tr><td> أطباق الثقافة (الزجاجي)، 35 ملم </td><td> شركة ماتيك </td><td> P35G-0-20-C </td><td></td></tr><tr><td> حمار المصل </td><td> Chemicon </td><td> S30-100 مل </td><td></td></tr><tr><td> الجنين مصل العجل الذهب </td><td> PAA </td><td> A15-151 </td><td> يوضع في ظروف معقمة </td></tr><tr><td> فبرونيكتين </td><td> إينفيتروجن </td><td> 330100-8 </td><td> الأسهم سول. 1 ملغ / مل في خلية ثقافة المياه الصف </td></tr><tr><td> جنتاميسين </td><td> إينفيتروجن </td><td> 15750-037 </td><td> يوضع في ظروف معقمة </td></tr><tr><td> الجلوتامين </td><td> إينفيتروجن </td><td> 25030-024 </td><td> يوضع في ظروف معقمة </td></tr><tr><td> 4-جيدا Multidishes </td><td> نونك </td><td> 176740 </td><td></td></tr><tr><td> المجاهر: متحد البؤر المجهر المقلوب (LSM 700) Stereomicroscope (ديسكفري V12) </td><td> زايس زايس </td><td></td><td> الأهداف: C-10X لامزيغ / W 0.45 M27 (ص 1،8 مم work.؛ عمق التصوير ~ 100 مم)؛ C-40X لامزيغ / 1.2 W M27 كور (ص work. 0،28 مم؛. ~ التصوير عمق 50 ميكرومتر) تضوء من أسفل والإضاءة الألياف الضوئية من فوق </td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد </td><td> روث </td><td> 0335.3 </td><td> الأسهم حل 20٪ </td></tr><tr><td> باستور الماصة (زجاج)، 150 مم </td><td> VWR </td><td> HECH567 / 1 </td><td></td></tr><tr><td> البنسلين / الستربتوميسين </td><td> PAA </td><td> P11-010 </td><td> ج يوضع في معقمةonditions </td></tr><tr><td> أطباق بتري، 60 مم </td><td> غرينر بيو واحد </td><td> 628102 </td><td></td></tr><tr><td> أطباق بتري، 35 مم </td><td> غرينر بيو واحد </td><td> 627161 </td><td></td></tr><tr><td> 1X PBS، pH7.4 </td><td> PAA </td><td> H15-002 </td><td> يوضع في ظروف معقمة </td></tr><tr><td> ربيع مقص منحني نصل مم 8 </td><td> أدوات العلوم الجميلة </td><td> 15023-10 </td><td></td></tr><tr><td> تريتون-X100 </td><td> روث </td><td> 3051،3 </td><td></td></tr><tr><td> صناعة الساعات foreceps دومون # 5 </td><td> روث </td><td> K342.1 </td><td></td></tr></table>

a system for ex vivo culturing of embryonic pancreas

البنكرياس تسيطر الوظائف الحيوية من الجسم، بما في ذلك إنتاج الإنزيمات الهضمية وتنظيم مستويات السكر في الدم 1. رغم أنه في العقد الماضي العديد من الدراسات قد ساهمت في أساس متين لفهم توالد الأعضاء البنكرياس، ثغرات هامة لا تزال قائمة في معرفتنا تشكيل البنكرياس في وقت مبكر 2. وهناك فهم كامل لهذه الأحداث في وقت مبكر توفير نظرة ثاقبة على تطوير هذا الجهاز، ولكن أيضا في الأمراض المستعصية التي تستهدف البنكرياس، مثل مرض السكري أو سرطان البنكرياس. وأخيرا، فإن هذه المعلومات تولد مخططا لتطوير علاجات استبدال الخلايا في سياق مرض السكري. خلال مرحلة التطور الجنيني، والبنكرياس تنبع من الامتداد الجنينية متميزة من الأديم الباطن المعى الأمامي الظهري البطني في اليوم والجنينية (E) 9.5 في جنين فأر 3،4. كلا الامتداد evaginate في اللحمة المتوسطة المحيطة بها ظهائر الصلبةبراعم لتر، التي تخضع الانتشار، المتفرعة والتمايز لإنشاء هيئة ناضجة تماما 2،5،6. وقد اقترح مؤخرا أن الأدلة نمو وتمايز الخلايا البنكرياسية الأنساب، بما في ذلك الخلايا المنتجة للانسولين β، ويعتمد على إعادة عرض مناسب، والأنسجة الطلائية العمارة وتحديد المواقع داخل الخلية ظهارة البنكرياس المتفرعة 7،8. ولكن، كيف يحدث المتفرعة التشكل والانتشار وبالتنسيق مع التمايز في البنكرياس غير معروفة إلى حد كبير. هذا هو في جزء منه يرجع ذلك إلى حقيقة أن المعرفة الحالية حول هذه العمليات التنموية اعتمدت بشكل حصري تقريبا على تحليل العينات الثابتة، في حين الأحداث تخلقية حيوية للغاية. هنا، ونحن التقرير وسيلة لتشريح وزراعة الماوس الجنينية السابقين فيفو براعم البنكرياس على أطباق أسفل الزجاج، والتي تسمح رؤية مباشرة من البنكرياس النامية (الشكل 1). هذا عبادةوضعت بشكل مثالي لدى عودتهم نظام ليزر متحد البؤر المجهري المسح، ولا سيما التصوير الخلية الحية. يمكن إعداد إإكسبلنتس البنكرياس ليس فقط من أجنة الفئران البرية من نوع، ولكن أيضا من سلالات الفئران المعدلة وراثيا (جينيا أو مثل خروج المغلوب)، مما يسمح في الوقت الحقيقي من الدراسات الظواهر متحولة. وعلاوة على ذلك، هذه الثقافة الحية النظام السابق قيمة لدراسة آثار المركبات الكيميائية على التنمية البنكرياس، مما يتيح الحصول على بيانات كمية عن الانتشار والنمو، واستطالة، المتفرعة، tubulogenesis والتمايز. في الختام، وضع البنكرياس المجراة سابقا أسلوب الثقافة يزدرع جنبا إلى جنب مع التصوير عالية الدقة توفر منصة قوية لمراقبة تخلقية والتمايز الأحداث حال وقوعها داخل جنين فأر النامية.

Watch this Scientific Journal Video about A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas at JoVE.com

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

هنا، نحن تصف طريقة للثقافة والعزلة والتلاعب في البنكرياس الماوس الجنينية. هذا يمثل ممتاز<em&gt; خارج الجسم</em&gt; نظام لدراسة مختلف جوانب التنمية البنكرياس، بما في ذلك التمايز، التشكل والنمو. يمكن تربيتها إإكسبلنتس برعم البنكرياس لعدة أيام واستخدامها في مجموعة واسعة من التطبيقات المختلفة، بما في ذلك كله جبل المناعي والتصوير الحي.

نظام ل<em&gt; خارج الجسم</em&gt; التثقيف البنكرياس الجنينية

The pancreas controls vital functions of our body,  including the production of digestive enzymes and regulation of blood sugar  levels1. Although in the ...

Research

JoVE Journal

Biology

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

طريقة لثقافة الفرخ المبكر فيفو السابقين الأجنة (الثقافة الجديدة)

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

و السابقين البيضة الثقافة الأجنة النظام الدجاج مناسبة للتطبيقات التصوير والجراحة المجهرية

Understanding the relationships between genetic and microenvironmental factors that drive normal and malformed embryonic development is fundamental for ...

A System for Culturing Iris Pigment Epithelial Cells to Study Lens Regeneration in Newt

نظام لخلايا الظهارية التثقيف صبغات قزحية عدسة لدراسة التجديد في نيوت

Salamanders like newt and axolotl possess the ability to regenerate many of its lost body parts such as limbs, the tail with spinal cord, eye, brain, ...

A 3D System for Culturing Human Articular Chondrocytes in Synovial Fluid

ونظام 3D لغضروفية التثقيف مفصلي الإنسان في السائل الزليلي

Cartilage destruction is a central pathological feature of osteoarthritis, a leading cause of disability in the US. Cartilage in the adult does not ...

Preparation of Mouse Embryonic Fibroblast Cells Suitable for Culturing Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells

إعداد خلايا الفأر الجنينية الخلايا الليفية مناسبة للالإنسان التثقيف الجنينية والتي يسببها الخلايا الجذعية المحفزة

In general, human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)1 can be cultured under variable conditions. However, it ...

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

رواية<em&gt; خارج الحي</em&gt; الطريقة الثقافة لالجنينية القلب

Developmental studies in the mouse are hampered  by the inaccessibility of the embryo during gestation. Thus, protocols to  isolate and culture individual ...

A Method for Culturing Embryonic C. elegans Cells

A Method for Culturing Embryonic C. elegans Cells

منهج في التثقيف الجنينية<em&gt; C. ايليجانس</em&gt; خلايا

C. elegans is a powerful model system, in which genetic and molecular techniques are easily applicable. Until recently though, techniques that require ...

Ex vivo Culture of Mouse Embryonic Skin and Live-imaging of Melanoblast Migration

Ex vivo Culture of Mouse Embryonic Skin and Live-imaging of Melanoblast Migration

فيفو السابقين الثقافة من الفأر الجنينية بالبشرة والتصوير لايف للهجرة أرومة ميلانينية

Melanoblasts are the neural crest derived precursors of melanocytes; the cells responsible for producing the pigment in skin and hair. Melanoblasts ...

An Ex vivo Culture System to Study Thyroid Development

An Ex vivo Culture System to Study Thyroid Development

و<em&gt; خارج الحي</em&gt; نظام الثقافة لدراسة التنمية الغدة الدرقية

The thyroid is a bilobated endocrine gland localized at the base of the neck, producing the thyroid hormones T3, T4, and calcitonin. T3 and T4 are ...

In Vitro Pancreas Organogenesis from Dispersed Mouse Embryonic Progenitors

In Vitro Pancreas Organogenesis from Dispersed Mouse Embryonic Progenitors

في المختبر البنكرياس توالد من تفرقوا الجنينية الماوس أسلاف

The pancreas is an essential organ that regulates glucose homeostasis and secretes digestive enzymes. Research on pancreas embryogenesis has led to the ...