Name: a system for ex vivo culturing of embryonic pancreas
Uploaded: 2012-08-27T12:00:00
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の研究 スパニョーリラボ。ヘルムホルツ協会、FP7-IRG-2008-ENDOPANC助成とERC-2009-開始HEPATOPANCREATIC助成金によって賄われています。

ここで説明されたプロトコルは、もともとパーシバルとスラック9に記載されており、共焦点顕微鏡検査用に最適化手法から適応されています。 1。グラスボトム培養皿のコーティング次の手順は、層流フード内の無菌条件下で行われるべきである。 <ol><li>膵臓外植片を直径20mmガラス底マイクロウェル（ 例えばマテック株式会社）と3...

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	<li>Slack, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Developmental+biology+of+the+pancreas.">Developmental biology of the pancreas.</a> Development. 121, 1569-1580 (1995).</li><li>Pan, F., Wright, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pancreas+organogenesis:+from+bud+to+plexus+to+gland.">Pancreas organogenesis: from bud to plexus to gland.</a> Dev. Dyn. 240, 530-565 (2011).</li><li>Puri, S., Hebrok, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+Plasticity+within+the+Pancreas-+Lessons+Learned+from+Development.">Cellular Plasticity within the Pancreas- Lessons Learned from Development.</a> Developmental Cell. 18, 342-356 (2010).</li><li>Spagnoli, F. 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膵臓運命が指定されると、膵臓前駆細胞は、最終的に成熟しており、機能的な臓器2,4を形成するために大規模な増殖、分化、形態形成を受ける。現時点では、分岐方法は、膵臓で行われ、それがどのように前駆細胞の増殖と分化に接続されているほとんど知られていない。膵臓外植培養は 、ex vivo 5,9,11、これらのプロセスを解明するための理想的なシステムを表します...

<table border="1"><tr><td> 試薬の名称 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> 注釈 </td></tr><tr><td>抗体： カルボキシペプチダーゼ E-カドヘリン F-アクチン グルカゴン インスリン β1-インテグリン PDX1 PDX1 ホスホヒストンH3 </td><td> ABD Serotec社 インビトロジェン 分子プローブ ImmunoStar ミリポア ミリポア アブカム ハイブリドーマ銀行 細胞シグナリング</td><td> 1810-0006 13から1900 - 12373 20076 4011から01 MAB1997 ab47267 F109-D12 9706 </td><td></td></tr><tr><td>基礎培地イーグル（BME） </td><td>シグマ</td><td> B1522-500ML </td><td>無菌状態に保た</td></tr><tr><td>細胞培養グレードの水</td><td> PAA </td><td> S15-012 </tD&gt; <td>無菌状態に保た</td></tr><tr><td>培養皿（ガラス底）、35 mmの</td><td>マテック株式会社</td><td> P35G-0-20-C </td><td></td></tr><tr><td>ロバ血清</td><td>ケミコン</td><td> S30-100ミリリットル</td><td></td></tr><tr><td>ウシ胎児血清ゴールド</td><td> PAA </td><td> A15-151 </td><td>無菌状態に保た</td></tr><tr><td>フィブロネクチン</td><td>インビトロジェン</td><td> 330100から8 </td><td>株式ゾル。細胞培養グレードの水に1 mg / mlの</td></tr><tr><td>ゲンタマイシン</td><td>インビトロジェン</td><td> 15750-037 </td><td>無菌状態に保た</td></tr><tr><td>グルタミン</td><td>インビトロジェン</td><td> 25030-024 </td><td>無菌状態に保た</td></tr><tr><td> 4ウェルMultidishes </td><td>ヌンク</td><td> 176740 </td><td></td></tr><tr><td>顕微鏡： 倒立共焦点顕微鏡（LSM 700） 実体顕微鏡（ディスカバリーV12） </td><td>ツァイス ツァイス</td><td></td><td>目的： C-アポクロマート0.45 / 10X W M27（work. DIST 1.8ミリメートル;撮像深度〜100ミリメートル）、C-アポクロマート1.2 WコアーM27（work. distの0.28ミリメートル。〜撮像深さ50μm）/ 40X 上から下および光ファイバ照明から透視</td></tr><tr><td>パラホルムアルデヒド</td><td>ロート</td><td> 0335.3 </td><td>原液20パーセント</td></tr><tr><td>パスツールピペット（ガラス）、150ミリメートル</td><td> VWR </td><td> HECH567 / 1 </td><td></td></tr><tr><td>ペニシリン/ストレプトマイシン</td><td> PAA </td><td> P11-010 </td><td>無菌Cに保たonditions </td></tr><tr><td>ペトリ皿、60ミリメートル</td><td>グライナーバイオワン</td><td> 628102 </td><td></td></tr><tr><td>ペトリ皿、35ミリメートル</td><td>グライナーバイオワン</td><td> 627161 </td><td></td></tr><tr><td> 1×PBS、pH7.4の</td><td> PAA </td><td> H15-002 </td><td>無菌状態に保た</td></tr><tr><td>春はさみ8ミリメートルブレードが湾曲</td><td>ファイン科学ツール</td><td> 15023から10 </td><td></td></tr><tr><td>トリトン-X100 </td><td>ロート</td><td> 3051.3 </td><td></td></tr><tr><td>時計職人のforecepsデュモン5位</td><td>ロート</td><td> K342.1 </td><td></td></tr></table>

a system for ex vivo culturing of embryonic pancreas

膵臓は消化酵素の生産と血糖値1の規制を含め、私たちの体の重要な機能を制御します。過去10年間に多くの研究では、膵臓の器官形成を理解するための強固な基盤に貢献してきたが、重要なギャップが早期膵臓形成の2の我々の知識に固執する。これらの初期のイベントの完全な理解は、この臓器の開発への洞察を提供するだけでなく、糖尿病や膵臓癌などの膵臓をターゲット難病、になります。最後に、この情報は、糖尿病との関連で、細胞補充療法を開発するための青写真を生成します。 胚発生時、膵臓はマウス胚における3,4日胚（E）は9.5で、背側と腹側前腸内胚葉の異なる胚の増生に由来する。両方の派生物は、固体として周囲の上皮間葉に裏返しにする完全に成熟した器官2,5,6を生成するために、分岐や分化、増殖を受けるリットルの芽、。最近の証拠は、インスリン産生β細胞を含む膵臓細胞系譜、の成長や分化、分岐膵臓上皮7,8内の適切な組織アーキテクチャ、上皮リモデリングと細胞の位置に依存していることを示唆している。しかし、分枝形態形成方法と発生し、膵臓の増殖と分化との間で調整されているほとんど知られていない。これは、形態形成のイベントは非常に動的でありながら、これらの発達過程に関する現在の知識は、固定された試料の分析にほぼ独占的に依存してきたという事実のために一部になっています。 ここでは、開発膵臓（ 図1）の直接可視化を可能にするガラスボトムディッシュ上でex vivoで解剖し、培養マウス胚膵芽する方法について検討する。このカルトUREシステムは、理想的には、特に、ライブセルイメージング共焦点レーザー走査顕微鏡と、ために考案されています。膵臓外植片だけでなく、野生型マウスの胚から調製しただけでなく、遺伝子組み換えマウス系統（ 例えば、トランスジェニックやノックアウト）から、変異体の表現型のリアルタイムの研究を可能にすることができます。また、このex vivoで培養系は 、増殖、成長、伸長、分岐、細管形成と分化に関する定量的なデータを取得できるように、膵臓の開発に化学化合物の効果を研究するために貴重なものです。結論として、高分解能イメージングを組み合わせるex vivoでの膵臓移植片培養法の開発は、彼らが開発したマウス胚の中で発生した形態形成と分化のイベントを観察するための強力なプラットフォームを提供します。

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A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

ここでは、マウス胚性膵臓の分離、培養および操作のための方法を説明します。これは、優れたを表し<em&gt; ex vivoで</em形態形成、分化、成長を含む膵臓開発のさまざまな側面を研究するための&gt;システム。膵原外植片は、数日間培養し、ホールマウント蛍光免疫とライブイメージングなど、さまざまなアプリケーションの範囲で使用することができます。

のためのシステム<em&gt; ex vivoで</em胚膵臓&gt;培養

The pancreas controls vital functions of our body,  including the production of digestive enzymes and regulation of blood sugar  levels1. Although in the ...

Research

JoVE Journal

Biology

A System for ex vivo Culturing of Embryonic Pancreas

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo (New Culture)

Method for Culture of Early Chick Embryos ex vivo New Culture

初期のニワトリ胚をex vivo（新文化）の文化のための方法

The chick embryo is a valuable tool in the study of early embryonic development. Its transparency, accessibility and ease of manipulation, make it an ...

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

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アン EX - OVO</emイメージングとマイクロサーアプリケーションに適して>ニワトリ胚培養システム

Understanding the relationships between genetic and microenvironmental factors that drive normal and malformed embryonic development is fundamental for ...

A System for Culturing Iris Pigment Epithelial Cells to Study Lens Regeneration in Newt

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Salamanders like newt and axolotl possess the ability to regenerate many of its lost body parts such as limbs, the tail with spinal cord, eye, brain, ...

A 3D System for Culturing Human Articular Chondrocytes in Synovial Fluid

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Cartilage destruction is a central pathological feature of osteoarthritis, a leading cause of disability in the US. Cartilage in the adult does not ...

Preparation of Mouse Embryonic Fibroblast Cells Suitable for Culturing Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells

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In general, human embryonic stem cells (hESCs) and human induced pluripotent stem cells (hiPSCs)1 can be cultured under variable conditions. However, it ...

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

A Novel Ex vivo Culture Method for the Embryonic Mouse Heart

小説<em&gt;エクスビボ</emマウス胎児ハート&gt;文化法

Developmental studies in the mouse are hampered  by the inaccessibility of the embryo during gestation. Thus, protocols to  isolate and culture individual ...

A Method for Culturing Embryonic C. elegans Cells

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培養胚のための方法<em&gt; C.虫</em&gt;細胞

C. elegans is a powerful model system, in which genetic and molecular techniques are easily applicable. Until recently though, techniques that require ...

Ex vivo Culture of Mouse Embryonic Skin and Live-imaging of Melanoblast Migration

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ex vivoで培養マウス胚の皮膚およびメラノブラストの移行のライブイメージング

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An Ex vivo Culture System to Study Thyroid Development

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アン<em&gt;生体外</em甲状腺の開発を研究する&gt;文化システム

The thyroid is a bilobated endocrine gland localized at the base of the neck, producing the thyroid hormones T3, T4, and calcitonin. T3 and T4 are ...

In Vitro Pancreas Organogenesis from Dispersed Mouse Embryonic Progenitors

In Vitro Pancreas Organogenesis from Dispersed Mouse Embryonic Progenitors

分散マウス胚性前駆細胞からin vitro膵臓器官形成

The pancreas is an essential organ that regulates glucose homeostasis and secretes digestive enzymes. Research on pancreas embryogenesis has led to the ...