Name: nano-fem: protein localization using photo-activated localization microscopy and electron microscopy
Uploaded: 2012-12-03T12:00:00
Duration: 13 min 13 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Nano-fEM: Protein Localization Using Photo-activated Localization Microscopy and Electron Microscopy at JoVE.com

אנו מודים הרלד הס ואריק Betzig עבור גישה למיקרוסקופ PALM לניסויי הוכחה של עיקרון, ריצ&#39;רד פעטער לשיתוף פרוטוקולי קיבעון, ריאגנטים ועידוד. אנו מודים למיכאל דוידסון, ג&#39;רלדין סייד, סטפן Eimer, רודולף Leube, קית&#39; Nehrke, כריסטיאן Frøkjr-ג&#39;נסן, אוד עדת נגואמה ומארק Hammarlund למבני DNA. כמו כן, אנו מודים Carl Zeiss Inc למתן גישה לZeiss PAL-M, גרסת הבטא של מיקרוסקופ Zeiss ELYRA P.1 PALM.

<ol>
	<li>Polishchuk, R. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlative+light-electron+microscopy+reveals+the+tubular-saccular+ultrastructure+of+carriers+operating+between+Golgi+apparatus+and+plasma+membrane.">Correlative light-electron microscopy reveals the tubular-saccular ultrastructure of carriers operating between Golgi apparatus and plasma membrane.</a> J. Cell Biol. 148, 45-58 (2000).</li><li>Oberti, D., Kirschmann, M. A., Hahnloser, R. H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlative+microscopy+of+densely+labeled+projection+neurons+using+neural+tracers.">Correlative microscopy of densely labeled projection neurons using neural tracers.</a> Front. Neuroanat. 4, 24 (2010).</li><li>Bishop, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Near-infrared+branding+efficiently+correlates+light+and+electron+microscopy.">Near-infrared branding efficiently correlates light and electron microscopy.</a> Nat. Meth. 8, 568-570 (2011).</li><li>Sims, P. A., Hardin, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence-integrated+transmission+electron+microscopy+images:+integrating+fluorescence+microscopy+with+transmission+electron+microscopy.">Fluorescence-integrated transmission electron microscopy images: integrating fluorescence microscopy with transmission electron microscopy.</a> Methods Mol. Biol. 369, 291-308 (2007).</li><li>Micheva, K., Smith, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Array+tomography:+a+new+tool+for+imaging+the+molecular+architecture+and+ultrastructure+of+neural+circuits.">Array tomography: a new tool for imaging the molecular architecture and ultrastructure of neural circuits.</a> Neuron. 55, 25-36 (2007).</li><li>Nixon, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+method+for+cryofixation+and+correlative+light,+electron+microscopy+and+tomography+of+zebrafish+embryos.">A single method for cryofixation and correlative light, electron microscopy and tomography of zebrafish embryos.</a> Traffic. 10, 131-136 (2009).</li><li>Kukulski, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlated+fluorescence+and+3D+electron+microscopy+with+high+sensitivity+and+spatial+precision.">Correlated fluorescence and 3D electron microscopy with high sensitivity and spatial precision.</a> J. Cell Biol. 192, 111-119 (2011).</li><li>Betzig, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Intracellular+Fluorescent+Proteins+at+Nanometer+Resolution.">Imaging Intracellular Fluorescent Proteins at Nanometer Resolution.</a> Science. 313, 1642-1645 (2006).</li><li>Rust, M. J., Bates, M., Zhuang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sub-diffraction-limit+imaging+by+stochastic+optical+reconstruction+microscopy+(STORM).">Sub-diffraction-limit imaging by stochastic optical reconstruction microscopy (STORM).</a> Nat. Methods. 3, 793-795 (2006).</li><li>Hess, S. T., Girirajan, T. P. K., Mason, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-high+resolution+imaging+by+fluorescence+photoactivation+localization+microscopy.">Ultra-high resolution imaging by fluorescence photoactivation localization microscopy.</a> Biophys. J. 91, 4258-4272 (2006).</li><li>Weibull, C., Christiansson, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+proteins+and+membrane+lipids+during+low+temperature+embedding+of+biological+material+for+electron+microscopy.">Extraction of proteins and membrane lipids during low temperature embedding of biological material for electron microscopy.</a> J. Microsc. 142, 79-86 (1986).</li><li>Watanabe, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+localization+in+electron+micrographs+using+fluorescence+nanoscopy.">Protein localization in electron micrographs using fluorescence nanoscopy.</a> Nat. Methods. 8, 80-84 (2011).</li><li>F lling, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescence+nanoscopy+by+ground-state+depletion+and+single-molecule+return.">Fluorescence nanoscopy by ground-state depletion and single-molecule return.</a> Nat. Methods. 5, 943-945 (2008).</li><li>Gustafsson, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surpassing+the+lateral+resolution+limit+by+a+factor+of+two+using+structured+illumination+microscopy.">Surpassing the lateral resolution limit by a factor of two using structured illumination microscopy.</a> J. Microsc. 198, 82-87 (2000).</li><li>Wombacher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Live-cell+super-resolution+imaging+with+trimethoprim+conjugates.">Live-cell super-resolution imaging with trimethoprim conjugates.</a> Nature Methods. 7, 717-719 (2010).</li><li>Dertinger, T., Colyer, R., Iyer, G., Weiss, S., Enderlein, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fast,+background-free,+3D+super-resolution+optical+fluctuation+imaging+(SOFI).">Fast, background-free, 3D super-resolution optical fluctuation imaging (SOFI).</a> PNAS. 106, 22287-22292 (2009).</li><li>Burnette, D. T., Sengupta, P., Dai, Y., Lippincott-Schwartz, J., Kachar, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bleaching/blinking+assisted+localization+microscopy+for+superresolution+imaging+using+standard+fluorescent+molecules.">Bleaching/blinking assisted localization microscopy for superresolution imaging using standard fluorescent molecules.</a> PNAS. , (2011).</li><li>Annibale, P., Vanni, S., Scarselli, M., Rothlisberger, U., Radenovic, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+clustering+artifacts+in+photoactivated+localization+microscopy.">Identification of clustering artifacts in photoactivated localization microscopy.</a> Nat. Meth. 8, 527-528 (2011).</li></ol>

הייצור והגישה חופשיה למאמר זה הוא בחסות Carl Zeiss, Inc

כאן אנו מתארים כיצד לשמר חלבוני ניאון בפלסטיק, למקם את חלבוני ניאון בחלקים, ותמונת ultrastructure באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים. חלבונים היו נקודות מתחת לגבול ההשתברות באמצעות מיקרוסקופ PALM לרזולוצית ננומטר. כדי להתאים פרוטוקול זה לדגימות מסוימות, את הפרמטרים הבאים צריכים להיחשב: fluorophore, כימות, ויישור. הבחירה של חלבון פלואורסצנטי או fluorophore האורגני תלויה ביישום ומערכת המודל. בדקנו מגוון רחב של חלבוני ניאון, כולל EGFP, YFP, סיטרין, mEosFP, mEos2, tdEos, mOrange, רשות mCherry, ו12 Dendra. שימור פלואורסצנטי מכל fluorophore היה דומה, מה שמרמז שכל חלבוני הניאון יכולים להישמר בשיטה שתוארה. גם אנחנו בחרנו tdEos כי זה בא לידי ביטוי בג elegans, חלבונים נשארו פונקציונליים כאשר התמזגו לtdEos, ובגללהמאפייני תמונה, הפעלה היו אופטימליים למיקרוסקופיה PALM. עם זאת, ביטוי צבירה או כושל של tdEos נצפה מדי פעם 12. בהתאם ליישום, fluorophore שונה עשוי להיות מתאים יותר. במקרים רבים, אין זה הכרחי להשתמש בחלבון פלואורסצנטי צילום פעיל. מיקרוסקופ אלקטרוני פלואורסצנטי פשוט מתאם אינו דורש חלבון פלואורסצנטי צילום פעיל. ניתן להשתמש GFP או צבעים אורגניים לפלואורסצנטי תמונה מחלבונים מתויגים בסעיפים לעיל לגבול ההשתברות. לדוגמה, אחד יכול תמונת האקסון בneuropil באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי ולתאם את אות פלואורסצנטי עם האקסון בפרט במיקרוסקופ אלקטרונים על ידי הדמיה את הקרינה במיקרוסקופ פלואורסצנטי. טכניקות ברזולוצית סופר אחרים, כגון מיקרוסקופיה מגורה פליטת דלדול (STED) 12, מיקרוסקופיה דלדול מדינת הקרקע אחרי חזרת מולקולה בודדה (GSDIM) 13, ומיקרוסקופיה המובנהית תאורה (SIM) 14, אינה דורשת חלבוני ניאון צילום הופעל. יתר על כן, שיטות הדמיה ברזולוצית הסופר שמשתמשות בצבעים אורגניים 9,15,16 או רכוש המהותי של בדיקות ניאון 17 הן ברצון ישימות. בכף היד, את מספר המולקולות ניתן לכמת משום שקרינה של כל מולקולה היא מופרד מרחב ובזמן. עם זאת, כימות עשוי להיות מטעה מארבע סיבות: חמצון, undercounting, overcounting, וביטוי יתר. ראשית, חלק קטן מן חלבוני הניאון ניתן מפוגל או מתחמצן במהלך עיבוד מדגם 5,12. למרות ~ 90% של אות פלואורסצנציה נשמרו באמצעות קיבוע והטבעה בפרוטוקול שלנו, חמצון של החלבון פלואורסצנטי עלול להתרחש לאחר הדגימה כבר מחולקת והמשטח נחשף לחמצן. שנית, ההפעלה של חלבוני צילום activatable היא אקראית, ובכך מולקולות מרובות יכולות להיותהופעל במקום מוגבל עקיף ניתן 8. קרינה מן המולקולות המרובות תופיע כנקודה אחת, ולכן המספר הכולל של חלבונים יהיה undercounted. שלישית, בעיה דומה יכולה להוביל לovercounting. בכף יד, כל חלבון פלואורסצנטי הוא מקומי ולאחר מכן &quot;נמחק&quot; על ידי לבן. עם זאת, חלבוני ניאון יכולים לחזור מהמדינה החשוכה מבלי להיות לצמיתות מולבנות 18. מולקולות כאלה ואז תיספרנה מספר פעמים. רביעי, חלבונים מתויגים מבוטאים כמושתלים ולעתים קרובות להציג בעותקים רבים, אשר יכול להוביל לביטוי יתר. לכן, כימות מPALM ניתן להשתמש כדי להעריך אבל לא בדיוק לקבוע את מספר המולקולות במקום מסוים. היישור של תמונת PALM עם מיקרוסקופ אלקטרונים גם יכול להיות מאתגר בגלל השוני ברזולוציה מיקרוסקופית ועיוות אור ואלקטרונים הנגרמים על ידי קרן האלקטרונים. חלקיקי זהב משמשים כחוזקה localized סמני fiducial בmicrographs אלקטרונים. עם זאת, fluoresecence מחלקיקי זהב הוא לא צילום שהופעל, ומופיע ככתם גדול העקיף מוגבל. לכן, המיקום של תמונת פלואורסצנטי על מיקרוסקופ אלקטרונים הוא הערכה בלבד. עיוותים יכולות גם לנבוע מאינטראקציות של אלקטרונים עם סעיף הפלסטיק. רפים אקריליים כגון GMA הם פחות יציבים תחת אלומת האלקטרונים, ואת הממדים של הפלסטיק ניתן לשנות. בנסיבות אלה, יישור פלואורסצנטי עם ultrastructure עשויה לדרוש שינוי הבלתי ליניארי של סמני fiducial.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שמו של המגיב או ציוד </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגים </td><td> תגובות </td></tr><tr><td> מקפיא בלחץ גבוה </td><td> אברה </td><td> HPM 010 </td><td> EMPact וHPM 100 מיקה או hpf-01 מWohlwend יכולים לשמש גם. </td></tr><tr><td> יחידת הקפאת החלפה אוטומטית </td><td> ליקה </td><td> AFS 2 </td><td> 1 AFS יכול לשמש גם. </td></tr><tr><td> Zeiss PALM </td><td> Zeiss </td><td> ELYRA P.1 </td><td> ניקון וVutara גם למכור מיקרוסקופי PALM מסחריים. </td></tr><tr><td> סריקת מיקרוסקופ אלקטרונים </td><td> פיי </td><td> נובה ננו </td><td> מיקרוסקופי SEM אחרים ברזולוציה גבוהה ניתן להשתמש. </td></tr><tr><td> אצטון </td><td> EMS </td><td> RT10016 </td><td></td></tr><tr><td> אתנול </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> 459844-1L </td><td></td></tr><tr><td> אוסמיום tetroxide </td><td> EMS </td><td> RT19134 </td><td></td></tr><tr><td> פרמנגנט האשלגן </td><td> EMS </td><td> RT20200 </td><td></td></tr><tr><td> אלבומין מסרום שור </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> A3059-50 </td><td></td></tr><tr><td> תצטט Uranyl </td><td> Polysciences </td><td> 21447-25 </td><td> ה-pH של יצטט uranyl מחברה זו היא מעט גבוהה יותר. </td></tr><tr><td> methacrylate גליקול (GMA) </td><td> SPI </td><td> 02630-AA </td><td> חומצה נמוכה, כיתת TEM. </td></tr><tr><td> N, N-דימתיל-p-toluidine </td><td> סיגמה אולדריץ </td><td> D9912 </td><td></td></tr><tr><td> בקבוקוני cryo </td><td> Nalgene </td><td> 5000-0020 </td><td></td></tr><tr><td> בקבוקוני זכוכית </td><td> EMS </td><td> 72632 </td><td></td></tr><tr><td> סרט Aclar </td><td> EMS </td><td> 50425-10 </td><td></td></tr><tr><td> BEEM כמוסה </td><td> EBSciences </td><td> TC </td><td> פוליפרופילן </td></tr><tr><td> 3/8 &quot;אגרופי DISC </td><td> טד פלה </td><td> 54741 </td><td></td></tr><tr><td> חלקיקי זהב </td><td> microspheres-nanospheres.com </td><td> 790122-010 </td><td> לבקש פתרון מרוכז 2x </td></tr></tbody></table>

nano-fem: protein localization using photo-activated localization microscopy and electron microscopy

מיפוי החלוקה של חלבונים חיוני להבנת תפקודם של חלבונים בתא. מיקרוסקופ פלואורסצנטי נעשה שימוש נרחב ללוקליזציה חלבון, אך הקשר subcellular הוא לעתים קרובות חסר בתמונות פלואורסצנציה. מיקרוסקופיה חיסונית אלקטרון, לעומת זאת, יכולה למקם חלבונים, אבל הטכניקה היא מוגבלת על ידי חוסר נוגדנים תואמים, שימור לקוי של מורפולוגיה וכי רוב אנטיגנים אינם חשופים על פני שטח הדגימה. גישות המצטרפות יכולות לרכוש את תמונת פלואורסצנטי מכל תא הראשון, או מחיסוני פלואורסצנטי או חלבונים מתויגים גנטי. אז המדגם קבוע ומשובץ למיקרוסקופ אלקטרונים, ואת התמונות מתואמות 1-3. עם זאת, תמונת פלואורסצנטי הרזולוציה נמוכה והמחסור בסמני fiducial ימנעו לוקליזציה המדויקת של חלבונים. לחלופין, דימות פלואורסצנטי יכולה להיעשות לאחר שימור הדגימה בפלסטיק. בתוךגישה זו, היא הבלוק נותח, ותמונות פלואורסצנציה וmicrographs אלקטרונים של אותו הסעיף, מתואמות 4-7. עם זאת, גבול השתברות אור בתמונת קורלציה מטשטש את המיקומים של מולקולות בודדות, ואת הקרינה לעתים קרובות משתרעת מעבר לגבול של התא. מיקרוסקופ אלקטרוני פלואורסצנטי ננו רזולוציה (ננו פאם) נועד למקם חלבונים בקנה מידת ננו ידי הדמיה את אותם קטעים באמצעות מיקרוסקופ תמונה הופעל לוקליזציה (PALM) ומיקרוסקופ אלקטרונים. PALM מתגבר על גבול ההשתברות ידי חלבוני ניאון בודדים הדמיה ולאחר מכן מיפוי centroid של כל 8-10 ספוט ניאון. אנחנו נתווה את טכניקת ננו Fem בחמש שלבים. ראשית, המדגם קבוע ומוטבע באמצעות תנאים המשמרים את הקרינה של חלבונים מתויגים. שנית, את אובניים השרף הוא מחולק למקטעי Ultrathin (70-80 ננומטר) שהם רכוביםעל מכסה זכוכית. שלישית, פלואורסצנטי הוא צלם בקטעים אלה באמצעות מיקרוסקופ PALM Zeiss. רביעית, מבנים צפופים אלקטרונים הם צלמו באותם סעיפים אלה באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורקים. החמישי, micrographs הקרינה ואלקטרונים מיושרים באמצעות חלקיקי זהב כסמני fiducial. לסיכום, לוקליזציה subcellular של חלבונים מתויגים fluorescently ניתן לקבוע ברזולוצית ננומטר כבשבוע.

Watch this Scientific Journal Video about Nano-fEM: Protein Localization Using Photo-activated Localization Microscopy and Electron Microscopy at JoVE.com

Nano-fEM: Protein Localization Using Photo-activated Localization Microscopy and Electron Microscopy

אנו מתארים שיטה לאיתור חלבונים מתויגים fluorescently בmicrographs אלקטרונים. פלואורסצנטי הוא מקומי הראשון באמצעות מיקרוסקופ לוקליזציה תמונה המופעל על חלקי Ultrathin. תמונות אלה אז מיושר לmicrographs אלקטרונים של אותו הסעיף.

ננו פאם: לוקליזציה חלבון באמצעות מיקרוסקופ לוקליזציה תמונה מופעלת ומיקרוסקופי אלקטרונים

Mapping the distribution of proteins is essential for understanding the function of proteins in a cell. Fluorescence microscopy is extensively used for ...

Research

JoVE Journal

Biology

Simultaneous Multicolor Imaging of Biological Structures with Fluorescence Photoactivation Localization Microscopy

Localization-based super resolution microscopy can be applied to obtain a spatial map (image) of the distribution of individual fluorescently labeled ...

Tandem High-pressure Freezing and Quick Freeze Substitution of Plant Tissues for Transmission Electron Microscopy

הקפאה בלחץ גבוהה טנדם ומהיר הקפאת חילוף של צמח רקמות למיקרוסקופים אלקטרונים חודרים

Since the 1940s transmission electron microscopy (TEM) has been providing biologists with ultra-high resolution images of biological materials. Yet, ...

Quantitation of Protein Expression and Co-localization Using Multiplexed Immuno-histochemical Staining and Multispectral Imaging

כימות של ביטוי חלבון ו Co-לוקליזציה שימוש חיסונית-histochemical Multiplexed מכתים והדמיה Multispectral

Immunohistochemistry is a commonly used clinical and research lab detection technique for investigating protein expression and localization within ...

Three-dimensional Super Resolution Microscopy of F-actin Filaments by Interferometric PhotoActivated Localization Microscopy (iPALM)

Three-dimensional Super Resolution Microscopy of F-actin Filaments by Interferometric PhotoActivated Localization Microscopy iPALM

תלת מימדי סופר רזולוציה מיקרוסקופית של סיבים F- אקטין ידי interferometric PhotoActivated לוקליזציה מיקרוסקופית (iPALM)

Fluorescence microscopy enables direct visualization of specific biomolecules within cells. However, for conventional fluorescence microscopy, the spatial ...

Multi-color Localization Microscopy of Single Membrane Proteins in Organelles of Live Mammalian Cells

צבע רב לוקליזציה מיקרוסקופיה של חלבוני ממברנה בודדת ב- Organelles של תאים בתרבית של חיים

Knowledge about the localization of proteins in cellular subcompartments is crucial to understand their specific function. Here, we present a ...

Biological Sample Preparation by High-pressure Freezing, Microwave-assisted Contrast Enhancement, and Minimal Resin Embedding for Volume Imaging

הכנת הדוגמא ביולוגית על ידי הקפאת בלחץ גבוה, שיפור ניגודיות בסיוע מיקרוגל, ושרף מינימלי הטמעה של אמצעי הדמיה

The described sample preparation technique is designed to combine the best quality of ultrastructural preservation with the most suitable contrast for the ...

Visualizing Lymph Node Structure and Cellular Localization using Ex-Vivo Confocal Microscopy

חזותי מבנה צומת לימפה ולוקליזציה לסלולר באמצעות Ex-Vivo Confocal מיקרוסקופ

Lymph nodes (LNs) are organs spread within the body, where the innate immune responses can connect with the adaptive immunity. In fact, LNs are ...

The CryoAPEX Method for Electron Microscopy Analysis of Membrane Protein Localization Within Ultrastructurally-Preserved Cells

שיטת ה-קריואיפקס לניתוח מיקרוסקופ אלקטרוני של לוקליזציה של חלבון ממברנה בתוך תאים שהשתמרו באופן מבנית

Key cellular events like signal transduction and membrane trafficking rely on proper protein location within cellular compartments. Understanding precise ...

Analyzing the &alpha;-Actinin Network in Human iPSC-Derived Cardiomyocytes Using Single Molecule Localization Microscopy

Analyzing the ÃƒÅ½Ã‚Â±-Actinin Network in Human iPSC-Derived Cardiomyocytes Using Single Molecule Localization Microscopy

ניתוח רשת α-Actinin בקרדיומיוציטים אנושיים הנגזרים מ-iPSC באמצעות מיקרוסקופיה לתיאום מולקולה אחת

The maturation of iPSC-derived cardiomyocytes is a critical issue for their application in regenerative therapy, drug testing and disease modeling. ...

Cryo-Electron Microscopic Grid Preparation for Time-Resolved Studies using a Novel Robotic System, Spotiton

הכנת רשת מיקרוסקופית קריו-אלקטרון למחקרים שנפתרו בזמן באמצעות מערכת רובוטית חדשנית, Spotiton

The capture of short-lived molecular states triggered by the early encounter of two or more interacting particles continues to be an experimental ...