Name: retrograde loading of nerves, tracts, and spinal roots with fluorescent dyes
Uploaded: 2012-04-19T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Retrograde Loading of Nerves, Tracts, and Spinal Roots with Fluorescent Dyes at JoVE.com

<p class="jove_content"&gt; Эта работа была поддержана очной программы Национальных институтов неврологических расстройств и инсульта Национального института здоровья. Мы также хотели бы поблагодарить д-ра Джорджа Mentis за его вклад в ранее метод и данные на рисунке 3.</p

Флуоресцентные декстраны были использованы в качестве анатомических инструментов для работы с изображениями и активности нейронов 1-4. Поля и соавт. (2009) 4 опубликовал протокол для применения ионно-и напряжения чувствительных красителей аксонального путей с акцентом н...

<ol>
	<li>Nance, D. M., Burns, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+dextrans+as+sensitive+anterograde+neuroanatomical+tracers:+applications+and+pitfalls.">Fluorescent dextrans as sensitive anterograde neuroanatomical tracers: applications and pitfalls.</a> Brain Res. Bull. 25, 139-145 (1990).</li><li>Glover, J. C., Petursdottir, G., Jansen, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluorescent+dextran-amines+used+as+axonal+tracers+in+the+nervous+system+of+the+chicken+embryo.">Fluorescent dextran-amines used as axonal tracers in the nervous system of the chicken embryo.</a> J. Neurosci. Methods. 18, 243-254 (1986).</li><li>McPherson, D. R., McClellan, A. D., O'Donovan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optical+imaging+of+neuronal+activity+in+tissue+labeled+by+retrograde+transport+of+Calcium+Green+Dextran.">Optical imaging of neuronal activity in tissue labeled by retrograde transport of Calcium Green Dextran.</a> Brain Research Protocols. 1, 157-164 (1997).</li><li>Fields, D. R., Shneider, N., Mentis, G. Z., O'Donovan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+nervous+system+activity.">Imaging nervous system activity.</a> Curr. Protoc. Neurosci. Chapter 2, Unit 2.3 (2009).</li><li>O'Donovan, M. J., Ho, S., Sholomenko, G., Yee, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Real-time+imaging+of+neurons+retrogradely+and+anterogradely+labelled+with+calcium-sensitive+dyes.">Real-time imaging of neurons retrogradely and anterogradely labelled with calcium-sensitive dyes.</a> J. Neurosci. Methods. 46, 91-106 (1993).</li><li>Wenner, P., Tsau, Y., Cohen, L. B., O'Donovan, M. J., Dan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Voltage-sensitive+dye+recording+using+retrogradely+transported+dye+in+the+chicken+spinal+cord:+staining+and+signal+characteristics.">Voltage-sensitive dye recording using retrogradely transported dye in the chicken spinal cord: staining and signal characteristics.</a> J. Neurosci. Methods. 70, 111-120 (1996).</li><li>Garudadri, S., Gallarda, B., Pfaff, S., Alaynick, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+Cord+Electrophysiology+II:+Extracellular+Suction+Electrode+Fabrication.">Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication.</a> J. Vis. Exp. (48), e2580 (2011).</li><li>Smith, J. C., Feldman, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+brainstem-spinal+cord+preparations+for+study+of+motor+systems+for+mammalian+respiration+and+locomotion.">In vitro brainstem-spinal cord preparations for study of motor systems for mammalian respiration and locomotion.</a> J. Neurosci. Methods. 21, 321-333 (1987).</li><li>Meyer, A., Gallarda, B., Pfaff, S., Alaynick, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spinal+Cord+Electrophysiology.">Spinal Cord Electrophysiology.</a> J. Vis. Exp. (35), e1660 (2010).</li><li>Shneider, N. A., Mentis, G. Z., Schustak, J., O'Donovan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functionally+reduced+sensorimotor+connections+form+with+normal+specificity+despite+abnormal+muscle+spindle+development:+the+role+of+spindle-derived+neurotrophin+3.">Functionally reduced sensorimotor connections form with normal specificity despite abnormal muscle spindle development: the role of spindle-derived neurotrophin 3.</a> J. Neurosci. 29, 4719-4735 (2009).</li><li>Mentis, G. Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+functional+impairment+of+sensory-motor+connectivity+in+a+mouse+model+of+spinal+muscular+atrophy.">Early functional impairment of sensory-motor connectivity in a mouse model of spinal muscular atrophy.</a> Neuron. 69, 453-467 (2011).</li><li>Blivis, D., Mentis, Z., O'Donovan, J. M. G., Lev-Tov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studies+of+sacral+neurons+involved+in+activation+of+the+lumbar+central+pattern+generator+for+locomotion+in+the+neonatal+rodent+spinal+cord.">Studies of sacral neurons involved in activation of the lumbar central pattern generator for locomotion in the neonatal rodent spinal cord.</a> Soc. Neurosci. Abstr. 564.8, (2009).</li><li>O'Donovan, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+the+spatiotemporal+organization+of+neural+activity+in+the+developing+spinal+cord.">Imaging the spatiotemporal organization of neural activity in the developing spinal cord.</a> Dev. Neurobiol. 68, 788-803 (2008).</li><li>Kasumacic, N., Glover, J. C., Perreault, M. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Segmental+patterns+of+vestibular-mediated+synaptic+inputs+to+axial+and+limb+motoneurons+in+the+neonatal+mouse+assessed+by+optical+recording.">Segmental patterns of vestibular-mediated synaptic inputs to axial and limb motoneurons in the neonatal mouse assessed by optical recording.</a> J. Physiol. (Lond). 588, 4905-4925 (2010).</li><li>Szokol, K., Glover, J. C., Perreault, M. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organization+of+functional+synaptic+connections+between+medullary+reticulospinal+neurons+and+lumbar+descending+commissural+interneurons+in+the+neonatal+mouse.">Organization of functional synaptic connections between medullary reticulospinal neurons and lumbar descending commissural interneurons in the neonatal mouse.</a> J. Neurosci. 31, 4731-4742 (2011).</li></ol>

<p class="jove_content"&gt; Мы описываем здесь простой и экономически эффективный протокол для введения красителей в нейроны, нервы и спинной путей. Этот метод включает в себя разоблачение определены анатомические пути к высококонцентрированным раствором красителя на время процесса загрузки. Это приводит к р...

<table border="1"&gt;<tbody&gt;<tr&gt;<td colspan="2"<strong&gt; Материал Имя</strong</td&gt;<td<strong&gt; О компании</strong</td&gt;<td<strong&gt; Номер по каталогу</strong</td&gt;<td<strong&gt; Комментарии</strong</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td rowspan="2"&gt; Трубы</td&gt;<td&gt; PE90 (IDxOD: 0,034 &quot;x0.050&quot;; стены Толщина: 0.008 &quot;)</td&gt;<td&gt; Клей Адамса Марка Intermedic</td&gt;<td&gt; 427421</td&gt;<td&gt; Для Type I и Type II пипетки</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; NSF-51 (IDxOD: 1/16x1/8; стены Толщина: 1/32)</td&gt;<td&gt; Pharmed BPT, Коул-Parmer</td&gt;<td&gt; AY242002</td&gt;<td&gt; Для гибкого соединения</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Шприцы</td&gt;<td&gt; 1 мл шприц инсулина U-100</td&gt;<td&gt; Becton Dickenson</td&gt;<td&gt; 329650</td&gt;<td&gt;</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Иглы</td&gt;<td&gt; 19G x1-1/2 &quot;Металл концентратор иглы</td&gt;<td&gt; MONOJECT</td&gt;<td&gt; 200136</td&gt;<td&gt; Подключение типа II пипеткой шприца</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt;</td&gt;<td&gt; Алкоголь лампы</td&gt;<td&gt;</td&gt;<td&gt;</td&gt;<td&gt;</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Кран</td&gt;<td&gt; Трехходовой кран с наружной Luer адаптер скольжения</td&gt;<td&gt; Baxter Healthcare корпорации</td&gt;<td&gt; 2C6241</td&gt;<td&gt; С помощью шприца</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td rowspan="3"&gt; Держатель</td&gt;<td&gt; H-1 держатель электрода</td&gt;<td&gt; Narishige</td&gt;<td&gt; H-1/12</td&gt;<td&gt;</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Магнит стенд</td&gt;<td&gt; Narishige</td&gt;<td&gt; GJ-8</td&gt;<td&gt;</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Микроманипулятор</td&gt;<td&gt; Narishige</td&gt;<td&gt; М-3333</td&gt;<td&gt;</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Пинцеты</td&gt;<td&gt; S &amp; T DUMONT швейцарский 00632-11</td&gt;<td&gt; DUMONT</td&gt;<td&gt; JF-5 ТК</td&gt;<td&gt;</td&gt;</tr&gt;</tbody&gt;</table&gt;<p class="jove_content"&gt; * Те предложили материалов. Может быть заменен на любой совместимой продукции</p

retrograde loading of nerves, tracts, and spinal roots with fluorescent dyes

Ретроградная маркировки нейронов является стандартным методом анатомического 1,2, что также используется для загрузки кальцием и напряжение чувствительных красителей в нейронах 3-6. Как правило, красители применяются в качестве твердых кристаллов или местных давление впрыска с использованием стеклянных пипеток. Тем не менее, это может привести к разбавления краски и снижения интенсивности маркировки, особенно, когда несколько часов, необходимых для красителей диффузии. Здесь мы показываем, простой и недорогой метод введения флуоресцентной и ионно-чувствительных красителей в нейроны с помощью пипетки полиэтилена всасывания заполнены раствором красителя. Этот метод предлагает надежный способ для поддержания высокой концентрации красителя в контакт с аксонами всей процедуры нагрузки.

Watch this Scientific Journal Video about Retrograde Loading of Nerves, Tracts, and Spinal Roots with Fluorescent Dyes at JoVE.com

Retrograde Loading of Nerves, Tracts, and Spinal Roots with Fluorescent Dyes

Мы опишем простой и недорогой метод для внедрения высоких концентрациях люминесцентных и кальций-чувствительных красителей в нейронах или нейронных путей с помощью пипетки полиэтилена всасывания.

Ретроградная Загрузка нервов, урочища, и корешков спинного мозга с флуоресцентными красителями

Retrograde labeling of neurons is a standard anatomical method1,2 that has also been used to load calcium and voltage-sensitive dyes into neurons3-6. ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Studying Synaptic Vesicle Pools using Photoconversion of Styryl Dyes

Изучение Synaptic Бассейны пузырьков использованием фотопревращения стириловых красителей

The fusion of synaptic vesicles with the plasma membrane (exocytosis) is a required step in neurotransmitter release and neuronal communication. The ...

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

Visualization of Larval Segmental Nerves in 3rd Instar Drosophila Larval Preparations

Визуализация личинок Сегментные Нервы у 3 Й Инстар Drosophila Подготовка личинок

Drosophila melanogaster is emerging as a powerful model system for studying the development and function of the nervous system, particularly because of ...

Optical Imaging of Neurons in the Crab Stomatogastric Ganglion with Voltage-sensitive Dyes

Оптических изображений нейронов в Крабовидной стоматогастральных ганглия с напряжением чувствительных красителей

Voltage-sensitive dye imaging of neurons is a key methodology for the understanding of how neuronal networks are organised and how the simultaneous ...

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Retrograde Fluorescent Labeling Allows for Targeted Extracellular Single-unit Recording from Identified Neurons In vivo

Ретроградная Флуоресцентная маркировка Позволяет Целевые Внеклеточные единичные Запись с Выявленные Нейроны<em&gt; В естественных условиях</em

The overall goal of this method is to record single-unit responses from an identified population of neurons. In vivo electrophysiological recordings from ...

Promotion of Survival and Differentiation of Neural Stem Cells with Fibrin and Growth Factor Cocktails after Severe Spinal Cord Injury

Продвижение выживания и дифференцировка нервных стволовых клеток с фибрином и фактор роста Коктейли после Тяжелая травмы спинного мозга

Neural stem cells (NSCs) can self-renew and differentiate into neurons and glia. Transplanted NSCs can replace lost neurons and glia after spinal cord ...

Retrograde Labeling of Retinal Ganglion Cells in Adult Zebrafish with Fluorescent Dyes

Ретроградная Маркировка ганглиозных клеток сетчатки в взрослых данио рерио флуоресцентными красителями

As retrograde labeling retinal ganglion cells (RGCs) can isolate RGCs somata from dying sites, it has become the gold standard for counting RGCs in RGCs ...

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

In Vivo Electrophysiological Measurements on Mouse Sciatic Nerves

В Vivo Электрофизиологические измерения на мышь седалищного нервов

Electrophysiological studies allow a rational classification of various neuromuscular diseases and are of help, together with neuropathological ...

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

A Procedure for Implanting a Spinal Chamber for Longitudinal In Vivo Imaging of the Mouse Spinal Cord

Процедура имплантации спинного палату для продольных<em&gt; В Vivo</em&gt; Визуализация мозга мыши спинного

Studies in the mammalian neocortex have enabled unprecedented resolution of cortical structure, activity, and response to neurodegenerative insults by ...

Imaging Membrane Potential with Two Types of Genetically Encoded Fluorescent Voltage Sensors

Визуализации мембранного потенциала с двумя типами генетически кодируемых флуоресцентных датчиков напряжения

Genetically encoded voltage indicators (GEVIs) have improved to the point where they are beginning to be useful for in vivo recordings. While the ultimate ...

Retrograde Neuroanatomical Tracing of Phrenic Motor Neurons in Mice

Ретроградная нейроанатомический трассировки диафрагмальный двигательных нейронов у мышей

Phrenic motor neurons are cervical motor neurons originating from C3 to C6 levels in most mammalian species. Axonal projections converge into phrenic ...