Name: basic caenorhabditis elegans methods: synchronization and observation
Uploaded: 2012-06-10T14:00:00
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Autoren möchten MICINN (PTA Programm unterstützt Montserrat Porta de la Riva), AGAUR (Promotionsstipendium an Laura Fontrodona), Instituto de Salud Carlos III (Miguel Servet Programm zur Unterstützung Julián Cerón) und Marie-Curie-IRG, ISCIII und IDIBELL für die Finanzierung anerkennen das Labor.

1. Ein Protokoll: Kultivieren Worms zum Bleichen 11 Große Populationen von C. elegans durch Kultivierung von ihnen gewonnen werden, entweder in flüssigen Medien oder auf festen Medien in Platten. Sie sind meist auf festem NGM (Nematode Growth Media) und gefüttert mit E. gewachsen coli-Bakterien, die zu den Platten entweder lebend oder tot (getötet von UV 12, 13 oder durch Hitze durch Kälte 14) hinzugefügt wird. Das häufigste Ve...

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	<li>Brenner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+genetics+of+Caenorhabditis+elegans.">The genetics of Caenorhabditis elegans.</a> Genetics. 77, 71-94 (1974).</li><li>Wood, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The nematode Caenorhabditis elegans. , (1988).</li><li>Potts, M. B., Cameron, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+lineage+and+cell+death:+Caenorhabditis+elegans+and+cancer+research.">Cell lineage and cell death: Caenorhabditis elegans and cancer research.</a> Nat. Rev. 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Nematoden-Synchronisation Mehrere Bleichlösungen beschrieben worden. Wir haben versucht, fünf verschiedene Rezepte (Tabelle I) und, in unseren Händen, sie zeigten keine signifikanten Unterschiede in der Synchronisation der Wurm Populationen (Abb. 1). Allerdings haben unsere Experimente zeigen, dass Parameter wie Temperatur (Abb. 2), das Verhältnis Bleichlösung: Volumen von Würmern (Abb. 3) und dem Volumen der M9, mit dene...

basic caenorhabditis elegans methods: synchronization and observation

Die Erforschung der Molekular-und Entwicklungsbiologie der Fadenwurm Caenorhabditis elegans wurde in den frühen Siebzigern von Sydney Brenner begonnen und es wurde seither als Modellorganismus 1 verwendet. C. elegans besitzt wichtige Eigenschaften wie Einfachheit, Transparenz und kurze Lebensdauer, die es ein geeignetes experimentelles System für die biologische Grundlagenforschung seit vielen Jahren 2 haben. Entdeckungen in diesem Nematoden weitreichende Auswirkungen haben, da viele zelluläre und molekulare Prozesse, die Kontrolle tierischer Entwicklung evolutionär konservierte 3 sind. C. elegans Lebenszyklus durchläuft einem embryonalen Stadium und vier Larvenstadien, bevor die Tiere das Erwachsenenalter erreichen. Die Entwicklung kann dauern 2 bis 4 Tage je nach Temperatur. In jeder der Stufen mehrere charakteristische Züge beobachtet werden kann. Das Wissen um seine komplette Zelllinie 4,5 zusammen mit dem tiefen annotatIon seines Genoms machen diese Nematoden in ein großes Modell in so unterschiedlichen Bereichen wie der Neurobiologie 6, Alterung 7,8, Stammzellbiologie 9 und 10 Biologie Keimbahn. Ein zusätzliches Feature, das macht C. elegans ein attraktives Modell, mit zu arbeiten ist die Möglichkeit der Erlangung Populationen von Würmern in einem bestimmten Stadium durch einen relativ einfachen Protokoll synchronisiert. Die einfache Wartung und Verbreitung dieser Nematoden zugegeben, um die Möglichkeit der Synchronisation ein mächtiges Werkzeug, um große Mengen von Würmern, die für eine Vielzahl von kleinen oder High-Throughput-Experimente wie RNAi-Screens, Mikroarrays, massiven Sequenzierung verwendet werden können, zu erhalten, Immunoblot oder in situ Hybridisierung, unter anderem. Wegen seiner Transparenz, C. elegans Strukturen können unter dem Mikroskop nach Differential Interference Contrast Mikroskopie unterschieden werden, die auch als Nomarski micros bekanntzu kopieren. Verwendung einer fluoreszierenden DNA-Bindemittel, DAPI (4 &#39;,6-Diamidino-2-phenylindol), zum Beispiel, auf die spezifische Erkennung und Lokalisierung von einzelnen Zellen sowie subzellulären Strukturen / Defekte der sie zu führen.

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Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Die Einfachheit in der Pflege und Verbreitung des Nematoden<em&gt; C elegans</em&gt; Machen es zu einem schönen Modell-Organismus zu arbeiten. Die Möglichkeit zum Synchronisieren von Würmern ermöglicht die Arbeit mit einer signifikanten Menge an Themen gleichzeitig Entwicklungsstadium, was erleichtert die Untersuchung eines bestimmten Prozesses in vielen Tieren.

Grundlegende<em&gt; Caenorhabditis elegans</em&gt; Methoden: Synchronisation und Observation

Research into the molecular and developmental biology of the nematode Caenorhabditis elegans was begun in the early seventies by Sydney Brenner and it has ...

Research

JoVE Journal

Biology

Basic Caenorhabditis elegans Methods: Synchronization and Observation

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span on Solid Media

Measuring Caenorhabditis elegans Life Span on Solid Media

Messung Caenorhabditis elegans Life Span auf festen Medien

Aging is a degenerative process characterized by a progressive deterioration of cellular components and organelles resulting in mortality. The nematode ...

Forschung

Biologie

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation and In vitro Activation of Caenorhabditis elegans Sperm

Isolation und In-vitro- Aktivierung von Caenorhabditis elegans Sperma

Males and hermaphrodites are the two naturally found sexual forms in the nematode C. elegans. The amoeboid sperm are produced by both males and ...

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solid Plate-based Dietary Restriction in Caenorhabditis elegans

Solide Plate-basierte diätetische Einschränkung in Caenorhabditis elegans</em

Reduction of food intake without malnutrition or starvation is known to increase lifespan and delay the onset of various age-related diseases in a wide ...

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraction and Analysis in Caenorhabditis elegans

Prostaglandin Extraktion und Analyse in<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Caenorhabditis elegans is emerging as a powerful animal model to study the biology of lipids1-9. Prostaglandins are an important class of eicosanoids, ...

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

Observation and Quantification of Telomere and Repetitive Sequences Using Fluorescence In Situ Hybridization FISH with PNA Probes in Caenorhabditis elegans

Beobachtung und Quantifizierung der Telomere und repetitiver Sequenzen mittels Fluoreszenz<em&gt; In Situ</em&gt; Die Hybridisierung (FISH) mit PNA-Sonden in<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Telomere is a ribonucleoprotein structure that protects chromosomal ends from aberrant fusion and degradation. Telomere length is maintained by telomerase ...

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methods to Study Changes in Inherent Protein Aggregation with Age in Caenorhabditis elegans

Methoden zur Untersuchung Veränderungen inhärenten Proteinaggregation mit dem Alter in Caenorhabditis elegans

In the last decades, the prevalence of neurodegenerative disorders, such as Alzheimer's disease (AD) and Parkinson's disease (PD), has grown. These ...

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Combined Nucleotide and Protein Extractions in Caenorhabditis elegans

Kombinierte Nukleotid- und Protein Extraktionen in Caenorhabditis elegans

A single biological sample holds a plethora of information, and it is now common practice to simultaneously investigate several macromolecules to capture ...

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Measurement of Oxygen Consumption Rates in Intact Caenorhabditis elegans

Messung von Sauerstoff Verbrauchsmengen in intakten Caenorhabditis elegans

Optimal mitochondrial function is critical for healthy cellular activity, particularly in cells that have high energy demands like those in the nervous ...

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Purification and Analysis of Caenorhabditis elegans Extracellular Vesicles

Reinigung und Analyse von Caenorhabditis elegans Extrazelluläre Vesikel

The secretion of small membrane-bound vesicles into the external environment is a fundamental physiological process of all cells. These extracellular ...

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Modeling Age-Associated Neurodegenerative Diseases in Caenorhabditis elegans

Modellierung altersassoziierter neurodegenerativer Erkrankungen bei Caenorhabditis elegans

Battling human neurodegenerative pathologies and managing their pervasive socioeconomic impact is becoming a global priority. Notwithstanding their ...