Name: preparing t cell growth factor from rat splenocytes
Uploaded: 2007-10-31T22:24:33
Description: Watch this Scientific Journal Video about Preparing T Cell Growth Factor from Rat Splenocytes at JoVE.com

<ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تأخذ الطحال الفئران لويس (الجرذان بين 200G - 160 هي الأفضل). Dilacerate على الجليد في طبق بتري تحتوي على المضادات الحيوية PBS + (PBS - PS) باستخدام مصفاة الخلية. وضعت في أنبوب 50 مل. تمتلئ PBS - PS. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تدور لمدة 10 دقيقة على 4 إلى خلايا بيليه درجة مئوية. </li...

<ol>
	<li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -. M., Gola, M., Sabatier, J. -. M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+blocking+of+voltage-gated+K++channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation.">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. 166, 936-944 (2001).</li><li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K++channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis,+a+model+for+multiple+sclerosis.">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. 98, 13942-13947 (2001).</li><li>Mor, F., Cohen, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propagation+of+Lewis+rat+encephalitogenic+T+cell+lines:+T-cell-growth-factor+is+superior+to+recombinant+IL-2.">Propagation of Lewis rat encephalitogenic T cell lines: T-cell-growth-factor is superior to recombinant IL-2.</a> J. Neuroimmunol. 123, 76-82 (2002).</li></ol>

نحن نستعد TCGF من splenocytes الفئران لويس لأننا الموت ببطء بانتظام الفئران ساذج من هذه السلالة لحصاد المصل والتوتة لتحفيز خلايا الفئران خطوط لويس تي في المختبر. ويمكن استخدام هذا TCGF لتعزيز النمو والبقاء على قيد الحياة من خطوط الخلايا التائية من سلالات الفئران الأخرى. ويمكن أيضا أن تك?...

لإعداد كاملة مستنبت إضافة التالي لزجاجة 500 مل من RPMI 1640 ومعقمة فلتر : 10 ٪ FCS (1) ؛ زجاجة من باريس سان جيرمان ، 5 مل الفيتامينات RPMI ؛ البيروفات الصوديوم 5 مل و 5 مل غير الأحماض الأمينية الأساسية ، و 50 أوقية بيتا المركابتويثانول ؛ 2 ميكروغرام / مل كونكانافالين A.

preparing t cell growth factor from rat splenocytes

صيانة خطوط محددة مستضد الخلايا التائية أو استنساخ في الثقافة يتطلب جولات من مستضد التي يسببها تفعيل مفصولة مراحل التوسع 1،2 الخلية. إضافة انترلوكين 2 إلى وسائل الإعلام الثقافة خلال مرحلة التوسع ضروري لمنع موت الخلايا وكافية للحفاظ على المدى القصير خطوط الخلايا T ولكن ثبت لزيادة الاستقطاب TH1 3. استبدال انترلوكين 2 بواسطة الخلايا التائية عامل النمو (TCGF) الذي يحتوي على مزيج من السيتوكينات هو أكثر فعالية من انترلوكين 2 في الحفاظ على المدى الطويل خطوط الخلايا التائية في المختبر 3. وعلاوة على ذلك ، يمكن بسهولة TCGF تكون مستعدة بكميات كبيرة في المختبر ، وأرخص بكثير من المؤتلف انترلوكين 2. هنا ، وتبين لنا كيفية تحضير TCGF من الفئران supernatants ثقافة خلية طحالية. لهذا الإجراء ، ونحن الحصاد الطحال من الفئران لويس السذاجة الموت الرحيم لجمع الدم والغدة الصعترية. نحن نستعد وحيدة الخلية الحذف من الطحال ، lyze خلايا الدم الحمراء من صدمة ناضح ، والبذور splenocytes في المتوسط ​​الثقافة. يتم تحفيز الخلايا مع كونكانافالين A ، وهو أن mitogen غير انتقائي تنشيط الخلايا اللمفية تي جميع الفئران ، الأمر الذي أدى إلى إنتاج السيتوكينات. يتم جمع supernantant الثقافة بعد 48 ساعة كونكانافالين andexcess منضما إلى mannoside الميثيل ألفا لمنعها من تفعيل خطوط الخلايا التائية التي ستضاف TCGF. وTCGF غير معقمة ، ثم تمت تصفيتها ، aliquoted ، وتخزينها في -20 درجة مئوية.

Watch this Scientific Journal Video about Preparing T Cell Growth Factor from Rat Splenocytes at JoVE.com

Preparing T Cell Growth Factor from Rat Splenocytes

وصفنا إعداد الخلايا التائية عامل النمو المستخدمة في المختبر في التوسع من الفئران محددة مستضد خطوط تي اللمفاوية.

إعداد عامل نمو الخلايا T من Splenocytes الجرذ

Maintenance of antigen-specific T cell lines or clones in culture requires rounds of antigen-induced activation separated by phases of cell expansion 1,2. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Growth Factor-Coated Bead Placement on Dorsal Forebrain Explants

عامل النمو المغلفه الموضع الخرزة على Explants الدماغ المقدم الظهرية

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

إعداد E18 العصبونات القشرية للتجزئة الجرذ في جهاز ميكروفلويديك

In this video, we demonstrate the preparation of E18 cortical rat neurons. E18 cortical rat neurons are obtained from E18 fetal rat cortex previously ...

Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos

وضع عامل النمو المغلفه الخرز على أجنة الدجاج المرحلة المبكرة

The neural tube expresses many proteins in specific spatiotemporal patterns during development.   These proteins have been shown to be critical for cell ...

Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones

الخلية العصبية من الثقافات Aplysia عن التصوير عالية الدقة من المخاريط النمو

Neuronal growth cones are the highly motile structures at the tip of axons that can detect guidance cues in the environment and transduce this information ...

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia (SCG)

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia SCG

بروتوكول للالخلايا العصبية التثقيف تعاطفية من العقد الجرذ عنق الرحم فخمة (SCG)

The superior cervical ganglia (SCG) in rats are small, glossy, almond-shaped structures that contain sympathetic neurons.  These neurons provide ...

Live Imaging of Cell Extrusion from the Epidermis of Developing Zebrafish

يعيش التصوير من النتوء خلية من البشرة من اسماك الزرد النامية

Homeostatic maintenance of epithelial tissues requires the continual removal of damaged cells without disrupting barrier function.  Our studies have found ...

Modified Yeast-Two-Hybrid System to Identify Proteins Interacting with the Growth Factor Progranulin

تعديل الخميرة اثنين والهجين نظام لتحديد البروتينات التفاعل مع عامل النمو Progranulin

Progranulin (PGRN), also known as granulin epithelin precursor (GEP), is a 593-amino-acid autocrine growth factor. PGRN is known to play a critical role ...

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

إعداد فردية ذبابة الفاكهة البيض غرف للتصوير لايف

Live cell imaging is an important technique applied to a number of Drosophila tissues used as models to investigate topics such as axis specification, ...

Kinematic Analysis of Cell Division and Expansion: Quantifying the Cellular Basis of Growth and Sampling Developmental Zones in Zea mays Leaves

Kinematic Analysis of Cell Division and Expansion: Quantifying the Cellular Basis of Growth and Sampling Developmental Zones in Zea mays Leaves

تحليل الحركية من انقسام الخلايا والتوسع: تحديد مقدار الأساس الخلوي للمناطق التنموية النمو وأخذ العينات في<em&gt; ذرة شامية</em&gt; أوراق

Growth analyses are often used in plant science to investigate contrasting genotypes and the effect of environmental conditions. The cellular aspect of ...

Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-&#946; Signaling

Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² Signaling

التحليل الجزيئي غشائي الوسيطة الانتقالية الناجمة عن تحويل الإشارات عامل النمو-β

Phenotypic plasticity of endothelial cells underlies cardiovascular system development, cardiovascular diseases, and various conditions associated with ...