Name: preparing t cell growth factor from rat splenocytes
Uploaded: 2007-10-31T22:24:33
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<ol><li>ルイスラットの脾臓（160〜200グラムの間でラット最高のものを）取る。セルストレーナーを使用してPBS +抗生物質（PBS - PS）を含むペトリ皿に氷の上で引き裂く。 50 mlチューブに入れ。 PBS - PSで埋める。 </li><li> 4℃で10分間スピン° Cの細胞をペレット化する。 </li><li>細胞を2回洗浄する。 </li><li> NH 4 Clを 0.15 M（脾臓あたり5 ml）溶液でペレットを再懸濁します。赤血球を溶解するために氷上で<strong...

<ol>
	<li>Beeton, C., Barbaria, J., Devaux, J., Benoliel, A. -. M., Gola, M., Sabatier, J. -. M., Bernard, D., Crest, M., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+blocking+of+voltage-gated+K++channels+treats+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+inhibits+T-cell+activation.">Selective blocking of voltage-gated K+ channels treats experimental autoimmune encephalomyelitis and inhibits T-cell activation.</a> J. Immunol. 166, 936-944 (2001).</li><li>Beeton, C., Wulff, H., Barbaria, J., Clot-Faybesse, O., Pennington, M., Bernard, D., Cahalan, M. D., Chandy, K. G., Beraud, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+blockade+of+T+lymphocyte+K++channels+ameliorates+experimental+autoimmune+encephalomyelitis,+a+model+for+multiple+sclerosis.">Selective blockade of T lymphocyte K+ channels ameliorates experimental autoimmune encephalomyelitis, a model for multiple sclerosis.</a> Proc. Natl. Acad. 98, 13942-13947 (2001).</li><li>Mor, F., Cohen, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Propagation+of+Lewis+rat+encephalitogenic+T+cell+lines:+T-cell-growth-factor+is+superior+to+recombinant+IL-2.">Propagation of Lewis rat encephalitogenic T cell lines: T-cell-growth-factor is superior to recombinant IL-2.</a> J. Neuroimmunol. 123, 76-82 (2002).</li></ol>

我々は定期的に血清とthymusの複数形は、in vitroでルイスラットT細胞株を刺激するために収穫するために、この株からナイーブなラットを安楽死させるので、我々は、ルイスラットの脾細胞からTCGFを準備。このTCGFは、他のラット系統からのT細胞系の増殖と生存を促進するために使用することができます。 TCGFは、ラットの他の株から調製することができる。

完全培地を準備するにはRPMI 1640と滅菌フィルターの500mlボトルに以下を追加します：10％FCS、PSGのボトル1本、5ミリリットルRPMIのビタミン、5 mlのピ​​ルビン酸ナトリウム、5ミリリットル非必須アミノ酸、50μMのβ-メルカプトエタノール、2 ug / mlとコンカナバリンAの

preparing t cell growth factor from rat splenocytes

培養中の抗原特異的T細胞株やクローンのメンテナンスは、細胞の膨張の1,2の段階で区切られた抗原誘発活性化のラウンドが必要です。拡張フェーズ中に培地にインターロイキン2の添加は細胞死を防止するために必要と短期的なT細胞株を維持するのに十分ですが、Th1の偏光3を高めることが示されている。サイトカインの組み合わせを含むT細胞増殖因子（TCGF）によるインターロイキン2の交換は、in vitro 3に、長期的なT細胞株を維持するためにインターロイキン2よりも効果的です。また、TCGFは、簡単に実験室で大量に用意し、組換えインターロイキン2よりもはるかに安価であることができる。 ここで、我々はラット脾細胞培養上清からTCGFを準備する方法を示します。この手順では、我々は胸腺と血液採取のために安楽死させナイーブLewisラットから脾臓を採取する。我々は、脾臓からの単細胞懸濁液を準備し、浸透圧ショックにより赤血球をlyze、およびシード培地に脾細胞。細胞は、コンカナバリンA、非選択的にサイトカインの産生を誘導する、すべてのラットのTリンパ球を活性化することをマイトジェンで刺激されています。文化supernantantがandexcessコンカナバリン48時間後に収集されるTCGFが追加されるT細胞株を活性化するからそれを防ぐために、アルファメチルマンノシドにバインドされています。 TCGFは、分注し、滅菌濾過し、-20℃で保存

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Preparing T Cell Growth Factor from Rat Splenocytes

我々は、抗原特異的ラットTリンパ球のラインのin vitroでの拡大のために使用されるT細胞増殖因子の調製を記載。

ラットの脾細胞からT細胞増殖因子の準備

Maintenance of antigen-specific T cell lines or clones in culture requires rounds of antigen-induced activation separated by phases of cell expansion 1,2. ...

Research

JoVE Journal

Biology

Growth Factor-Coated Bead Placement on Dorsal Forebrain Explants

背側前脳の外植片上に成長因子-コーティングビーズの配置

Preparing E18 Cortical Rat Neurons for Compartmentalization in a Microfluidic Device

マイクロ流体デバイスでコンパートメントのためのE18脳ラットのニューロンの準備

In this video, we demonstrate the preparation of E18 cortical rat neurons. E18 cortical rat neurons are obtained from E18 fetal rat cortex previously ...

Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos

アーリーステージのニワトリ胚に成長因子コートビーズの配置

The neural tube expresses many proteins in specific spatiotemporal patterns during development.   These proteins have been shown to be critical for cell ...

Neuronal Cell Cultures from Aplysia for High-Resolution Imaging of Growth Cones

成長円錐の高分解能イメージングのためのアメフラシから神経細胞の培養

Neuronal growth cones are the highly motile structures at the tip of axons that can detect guidance cues in the environment and transduce this information ...

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia (SCG)

Protocol for Culturing Sympathetic Neurons from Rat Superior Cervical Ganglia SCG

ラット上頚神経節（SCG）から培養交感神経のためのプロトコル

The superior cervical ganglia (SCG) in rats are small, glossy, almond-shaped structures that contain sympathetic neurons.  These neurons provide ...

Live Imaging of Cell Extrusion from the Epidermis of Developing Zebrafish

開発ゼブラフィッシュの表皮から細胞の押出のライブイメージング

Homeostatic maintenance of epithelial tissues requires the continual removal of damaged cells without disrupting barrier function.  Our studies have found ...

Modified Yeast-Two-Hybrid System to Identify Proteins Interacting with the Growth Factor Progranulin

成長因子Progranulinと相互作用するタンパク質を識別するように変更酵母ツーハイブリッドシステム

Progranulin (PGRN), also known as granulin epithelin precursor (GEP), is a 593-amino-acid autocrine growth factor. PGRN is known to play a critical role ...

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

Preparing Individual Drosophila Egg Chambers for Live Imaging

個々の準備ショウジョウバエ</emライブイメージングのための>エッグチェンバース

Live cell imaging is an important technique applied to a number of Drosophila tissues used as models to investigate topics such as axis specification, ...

Kinematic Analysis of Cell Division and Expansion: Quantifying the Cellular Basis of Growth and Sampling Developmental Zones in Zea mays Leaves

Kinematic Analysis of Cell Division and Expansion: Quantifying the Cellular Basis of Growth and Sampling Developmental Zones in Zea mays Leaves

細胞分裂と拡張の動解析：成長とサンプリング発達ゾーンの細胞基礎での定量化<em&gt;トウモロコシ</em&gt;葉

Growth analyses are often used in plant science to investigate contrasting genotypes and the effect of environmental conditions. The cellular aspect of ...

Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-&#946; Signaling

Molecular Analysis of Endothelial-mesenchymal Transition Induced by Transforming Growth Factor-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â² Signaling

成長因子 β シグナルを変換することによって誘導される血管内皮間葉移行の分子解析

Phenotypic plasticity of endothelial cells underlies cardiovascular system development, cardiovascular diseases, and various conditions associated with ...