Name: a human fallopian tube model for investigation of c. trachomatis infections
Uploaded: 2012-08-11T14:00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af DFG-Cluster of Excellence &quot;Inflammation på grænseflader&quot; (RA-Hvis RA-D). Vi er taknemmelige for den fremragende teknisk bistand fra Kristin Wischnat.

1. Fremstillinq af Chlamydia trachomatis-serovar D Stock <ol><li> Inficere konfluente 175 cm2 cellekultur kolbe indeholdende HeLa-229-celler med 4 ml C. trachomatis D i SPG buffer. </li><li> Inkuberes i en time ved 37 ° C under konstant omrystning. </li><li> Tilsættes 20 ml DMEM med 10% FCS og 240 pi cycloheximid. </li><li> Inkuber i en befugtet inkubator i 48 timer ved 37 ° C og 5% CO2. </li><li> Tilsæt 5 ml sterile glasperler, stærke ryste aftages og ødelægge C. trachomatis huser HeLa-229-celler. </li><li> Samle bundfald, og der tilsættes yderligere 5 ml steril glasperler. </li><li> Rock tre gange i 1 minut for at destruere alle HeLa-229-celler og frigivelse C. trachomatis. </li><li> Centrifuge i 5 minutter ved 1000 RPMI og 4 ° C for at slippe af cellerester. </li><li> Opsamle supernatanten til infektion fra 8 til 10 175 cm2 celledyrkningskolber sammenflydende grown med HeLa 229-celler. </li><li> Inkuber hver kolbe med 4 ml SPG-puffer og 4 ml supernatant fra tidligere infektion i en time ved 37 ° C med konstant omrystning. </li><li> Efter en time tilsættes 15 ml DMEM med 10% FCS og 230 pi cycloheximid efterfulgt af 48 timers inkubation ved 37 ° C og 5% CO2. </li><li> Tilsæt 5 ml sterile glasperler, ryst at frigøre og ødelægge C. trachomatis huser HeLa-229-celler. </li><li> Opsamle supernatanten, og der tilsættes yderligere 5 ml steril glasperler. </li><li> Rock tre gange i 1 minut for at destruere alle HeLa-229-celler og frigivelse C. trachomatis. </li><li> Centrifuge i 5 minutter ved 1000 RPMI ved 4 ° C for at slippe af cellerester. </li><li> Opsamle supernatanten. </li><li> Fylde 40 ml af supernatanten i 50 ml Falcon-rør og centrifugeres i 99 minutter med 11 tusind RPMI. </li><li> Efter centrifugering supernatanten og vask centrifugebundfaldet med 1 ml SPG buffer. </li><li> HomogeniserePelleten i 1 ml SPG og aliquot 20 gl i en 1, 5 ml eppendorfrør, opbevares ved -70 ° C indtil anvendelse. Biologisk aktivitet af det fremstillede bestanden blev bekræftet i en fast HeLa-229 celle-infektion model. </li></ol> 2. Fremstillinq af human æggelederen <ol><li> Detaljerede humane æggelederne (HFT) fra kvinder, som gennemgår hysterektomi umiddelbart efter kirurgi i RPMI indeholdende 5% FCS uden antibiotika i 4 ° C indtil præparatet. Protokollen blev godkendt af etisk komité ved University of Lübeck (09-153). Kvinder, der indgår i undersøgelsen (34 år indtil 53) havde ikke tidligere er C. trachomatis infektion. Væv i æggelederne blev opsamlet ved peripartum sterilisering af maternel anmodning under kejsersnit eller under hysterektomier grund symptomatiske uterusfibromer i den luteale fase. Alle HFT blev testet negativ for C. trachomatis ved hjælp af PCR. </li><li> Dissekere HFT i en petriskål indeholdende RPMI med5% FCS uden antibiotika. Under hele behandlingen af ​​vævet skal nedsænkes i mediet for at forhindre udtørring. </li><li> Afskåret og kassér bindevæv og væv ødelægges under kirurgi. </li><li> Efter dissektion åbne HFT forsigtigt med en lille skalpel. </li><li> For yderligere eksperimenter fremstille stykker af væv i størrelse på 0,5 cm x 0,5 cm til 1 cm x 1 cm. </li><li> Til infektion lager HFT prøve i 1 ml RPMI indeholdende 5% FCS uden antibiotika. HFT prøver blev inficeret med 5.5x10 5 IFU (integration dannende enheder) af C. trachomatis. </li><li> Inkuber HFT prøve i 37 ° C, 5% CO2 og 21% O2 og i 37 ° C, 5% CO2 og 2% O2 i 24 timer. </li><li> Efter inkubationstid indsamle prøven, og opbevar det i Montis fiksativ i mindst tre dage ved 4 ° C indtil SEM / TEM præparatet. </li></ol> 3. Udarbejdelse af HFT Specimen for TEM <ol><li> ForTEM fjerne prøven fra Montis fiksativ og skæres 2 x 2 mm til 4 x 5 mm stykker. Det resterende væv kan anvendes til SEM. </li><li> Vaskes stykker med natrium cacodylat puffer, pH 7,35 i 1 time. </li><li> Inkuber i 1% (w / v) osmiumtetroxid i destilleret vand. natten. </li><li> Fjernes overskydende osmiumtetroxid ved vask 6x5 minutter i natrium cacodylat puffer, pH 7,35. </li><li> Fjerne vand ved inkubering i stigende koncentrationer af ethanol i vand (v / v) (30% i 2 timer, 40% i 2 timer, 50% i 2 timer, 60% i 2 timer, 70% i løbet af natten, 80% for 2 h, 90% i 1 time, 95% i 1 h, 100% i 1 time. </li><li> Udvaske ethanol i 2 x 15 minutter i propylenoxid og derefter overføres til en blanding af 50% (v / v) frisk fremstillet Araldite (herunder alle komponenter) i propylen og inkuber natten over. </li><li> Overførsel til frisk tilberedt Araldite (inklusive alle komponenter) i mindst 1 time. </li><li> Overførsel til flade forankring forme og fylde med Araldite. </li><li> Lad Araldite hærdemindst 48 timer ved 60 ° C </li><li> Efter trimning af indlejret prøve skæres semi tynde sektioner (700 nm) på en ultramikrotom bruge glas knive eller en histo diamant kniv og plette med Richardsons pletten. </li><li> Skær ultra-tynde sektioner (ca. 70 nm) ved hjælp af en diamant kniv og overførsel til kobber net (fx 150 kvadratiske masker). </li><li> Plette ultratynde sektioner med 0,5% (w / v) uranylacetat i destilleret vand. efterfulgt af 3% (w / v) blycitrat i destilleret vand. i en automatisk sektion Stainer. Alternativt, kan sektioner farves manuelt ved at lade net 15 minutter på en mættet centrifugeret opløsning af uranylacetat i destilleret vand. efterfulgt af 0,3% blycitrat (w / v) i destilleret vand. </li></ol> 4. Fremstillinq af HFT prøveemne SEM <ol><li> For SEM fjerne eksemplar fra Montis fiksativ, Orient med epitel opad på en 1,5 x 1 cm kork plade og fastgør position ved hjælp af insekter nåle. </li><li> Overfør prøven på kork til egnede metalkurve ogvask i 30 minutter i natrium cacodylat puffer, pH 7,35. </li><li> Fjerne vand ved inkubering prøve i stigende koncentrationer af acetone / vand-blandinger (v / v) 30% i 6 timer, 40% i 6 timer, 60% i 8 timer, 70% i løbet af natten, 80% i 2 timer, 90% for 2 timer og 100% i løbet af natten (være yderst forsigtige med at holde modellen kontinuerligt nedsænket). </li><li> Overfør frisk 100% acetone og tør prøve af det kritiske punkt tørring (40 ° C, tryk 80 bar). </li><li> Fjern nåle, kork og lim eksemplar med epitel opad på SEM prøven mount er udstyret med en ledende kulstof fane med ledende kulstof cement. Brug flydende ledende sølv til at øge ledningsevne mellem holderen og den ledende kulstof fanen. </li><li> Fremstilling af en ledende platin, guld eller palladium coating af prøven ved hjælp af en pådampningsbelægningsmaskinen. </li></ol> 5. Farvning af Semi tyndslib med Richardsons Stain <ol><li> Lad semi tynde sektioner tørt på dias. </li><li> Plet sektioner med farvning opløsning ved 60 ° C i 1-2 min. </li><li> Vask i destilleret vand. </li><li> Tørre sektioner og dækglas. </li></ol> 6. Repræsentative resultater I det menneskelige æggelederen infektion model var vi i stand til at visualisere forskelle i epitelmorfologi mellem de ikke-inficerede kontroller (figur 1) og C. trachomatis - inficerede rør (figur 2) under normoxisk tilstand. Karakteristiske morfologiske forskelle underforstået patogen-inducerede kvældning og lysis af æggeleder epitelceller, der ikke kunne påvises i ikke-inficerede kontroller. Brug semi tynde sektioner og transmissions elektron mikroskopi vi var i stand til at bevise intracellulær C. trachomatis optagelse dannelse i ex vivo-inficeret humant æggelederen væv (fig. 3, 5), men ikke i ikke-inficerede kontroller (figur 4). Da ilt koncentrationertioner i de kvindelige kønsorganer allerede er lav under fysiologiske forhold 11, og yderligere fald i løbet af en inflammatorisk proces vi også undersøgt vores model under hypoxiske betingelser. Foreløbige resultater tyder på modellen er nyttigt at analysere chlamydia vækst og afkom under varierende iltkoncentrationer. Chlamydia-induceret epitelcelle skaden skal adskilles fra artifakter, der er medieret gennem uforsigtig forberedelse og håndtering af æggelederne før infektion (figur 6). <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig1.jpg" alt="Figur 1" /> Figur 1. Scanningselektronmikroskopi (SEM) af en ikke-inficeret humant æggelederens efter én dag inkubation i kontrolmediet (grøn pil viser cilierede celler, blå pil viser manglende cilierede celler). <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig2.jpg" alt="Figur 2" /> Figur 2. Scanning elektron MICROS<html> kopi (SEM) af en ex vivo C. trachomatis inficeret human æggelederen én dag efter infektion (hvid pil mærket lækkende integration). <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig3.jpg" alt="Figur 3" /> Figur 3. Semi tynde sektioner viser typiske intracellulære inklusioner (hvide pile) 1d efter infektion af den humane æggeleder med C. trachomatis ex vivo. <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig4.jpg" alt="Figur 4" /> Figur 4. Transmissionselektronmikroskopi (TEM) af et ikke-inficeret humant æggelederen efter én dag inkubation i kontrolmediet. <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig5.jpg" alt="Figur 5" /> Figur 5. Transmissionselektronmikroskopi (TEM) af en ex vivo C. trachomatis inficeret human æggelederen én dag efter infektion (hvide pile markerer chlamydia indeslutninger). ve_content &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig6.jpg" alt="Figur 6" /> Figur 6. Scanningselektronmikroskopi (SEM) af æggeleder epitel beskadiget gennem uforsigtig forberedelse og håndtering af prøven (hvid pil mærket nedbrudt epitelvæv).

<ol>
	<li>Dean, D., Suchland, R. J., Stamm, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+long-term+cervical+persistence+of+Chlamydia+trachomatis+by+omp1+genotyping.">Evidence for long-term cervical persistence of Chlamydia trachomatis by omp1 genotyping.</a> J. Infect. Dis. 182, 909-916 (2000).</li><li>Campbell, L. A., Patton, D. L., Moore, D. E., Cappuccio, A. L., Mueller, B. A., Wang, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Chlamydia+trachomatis+deoxyribonucleic+acid+in+women+with+tubal+infertility.">Detection of Chlamydia trachomatis deoxyribonucleic acid in women with tubal infertility.</a> Fertil. Steril. 59, 45-50 (1993).</li><li>Peipert, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice.+Genital+chlamydial+infections.">Clinical practice. Genital chlamydial infections.</a> N. Engl. J. Med. 349, 2424-2430 (2003).</li><li>Mardh, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tubal+factor+infertility,+with+special+regard+to+chlamydial+salpingitis.">Tubal factor infertility, with special regard to chlamydial salpingitis.</a> Curr. Opin. Infect. Dis. 17, 49-52 (2004).</li><li>Ertel, A., Verghese, A., Byers, S. W., Ochs, M., Tozeren, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathway-specific+differences+between+tumor+cell+lines+and+normal+and+tumor+tissue+cells.">Pathway-specific differences between tumor cell lines and normal and tumor tissue cells.</a> Mol. Cancer. 5, 55 (2006).</li><li>Roshick, C., Wood, H., Caldwell, H. D., McClarty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+gamma+interferon-mediated+antichlamydial+defense+mechanisms+in+human+and+mouse+cells.">Comparison of gamma interferon-mediated antichlamydial defense mechanisms in human and mouse cells.</a> Infect. Immun. 74, 225-238 (2006).</li><li>Mestas, J., Hughes, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice+and+not+men:+differences+between+mouse+and+human+immunology.">Of mice and not men: differences between mouse and human immunology.</a> J. Immunol. 172, 2731-2738 (2004).</li><li>Hvid, M., Baczynska, A., Deleuran, B., Fedder, J., Knudsen, H. J., Christiansen, G., Birkelund, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-1+is+the+initiator+of+Fallopian+tube+destruction+during+Chlamydia+trachomatis+infection.">Interleukin-1 is the initiator of Fallopian tube destruction during Chlamydia trachomatis infection.</a> Cell Microbiol. 9, 2795-2803 (2007).</li><li>Roth, A., Konig, P., van, Z. G., Klinger, M., Hellwig-Burgel, T., Daubener, W., Bohlmann, M. K., Rupp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+abrogates+antichlamydial+properties+of+IFN-gamma+in+human+fallopian+tube+cells+in+vitro+and+ex+vivo.">Hypoxia abrogates antichlamydial properties of IFN-gamma in human fallopian tube cells in vitro and ex vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19502-19507 (2010).</li><li>Wyrick, P. B., Knight, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-exposure+of+infected+human+endometrial+epithelial+cells+to+penicillin+in+vitro+renders+Chlamydia+trachomatis+refractory+to+azithromycin.">Pre-exposure of infected human endometrial epithelial cells to penicillin in vitro renders Chlamydia trachomatis refractory to azithromycin.</a> J. Antimicrob. Chemother. 54, 79-85 (2004).</li><li>Van Voorhis, W. C., Barrett, L. K., Sweeney, Y. T., Kuo, C. C., Patton, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Chlamydia+trachomatis+infection+of+Macaca+nemestrina+fallopian+tubes+produces+a+Th1-like+cytokine+response+associated+with+fibrosis+and+scarring.">Repeated Chlamydia trachomatis infection of Macaca nemestrina fallopian tubes produces a Th1-like cytokine response associated with fibrosis and scarring.</a> Infect. Immun. 65, 2175-2182 (1997).</li></ol>

Ingen interessekonflikter erklæret.

Visualisering af patogen-induceret skade på det inficerede væv er vanskelig og ofte begrænset til eksperimentelle procedurer i mus. Vi har etableret en ex vivo-infektion model i menneskelige æggelederne at analysere C. trachomatis infektioner i de øvre kvindelige kønsorganer. Ved anvendelse af denne fremgangsmåde, var vi i stand til at visualisere C. trachomatis - induceret skader på menneskers æggeleder epitel løbet af en dag efter infektion. Cellulær hævelse og lyse var typiske morfologiske ændringer, der blev observeret i C. trachomatis - inficerede æggelederne, men ikke i ikke-inficerede kontroller. TEM-analyser viste, at chlamydier gennemføre en typisk intracellulær udviklingsmæssig cyklus i inficerede væv, viser store inklusioner med re-opdelte elementære organer, men også mindre indeslutninger med forstørrede netagtige organer, der kunne indikere vedholdenhed. Men det morfologiske billedet alene ikke nok til at skelne mellem REPLicating og vedvarende infektioner, der er karakteriseret ved reduceret metabolisme og forøget resistens over for antimikrobielle 10. Ødelæggelse af epitel i inficerede æggelederne enten på grund af afbrydelse af C. trachomatis - inficerede epitelceller efter afslutningen af den intracellulære udviklingsmæssige cyklus og frigivelse af infektiøse elementære organer eller frigivelsen af pro-inflammatoriske cytokiner 8. Patogen-induceret vævsbeskadigelse og host-inducerede immunreaktioner mod C. trachomatis formodes at være de vigtigste faktorer, der fører til tab af epitelcelle funktion, fibroblast remodellering og endelig tubal infertilitet in vivo 8,11. En af de vigtigste begrænsninger i denne model er fraværet af inflammatoriske celler, som hæmmer analyse af sekundære virkninger af den oprindelige C. trachomatis infektion af æggelederen epitel. Men modellen er APmæssig at undersøge forskellige miljøforhold (f.eks iltindhold), og den første host-immunrespons i akut C. trachomatis-infektioner 8,9. Yderligere planer er at etablere en model for afprøvning af antimikrobielle stoffer mod C. trachomatis i hele humane æggelederne og karakterisere de metaboliske tilstande af de forskellige udviklingsstadier observeret i den tubare epitel ved to-foton laser scanning-mikroskopi.

<table border="1"><tbody><tr><td> Navn på reagenset </td><td> Firma </td><td> Katalog nummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> PAA </td><td> E15-843 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI </td><td> PAA </td><td> R15-802 </td><td></td></tr><tr><td> FCS </td><td> PAA </td><td> A15-101 </td><td></td></tr><tr><td> Cycloheximid </td><td> Sigma - Aldrich </td><td></td><td></td></tr><tr><td> SPG Buffer </td><td> forskellige </td><td></td><td> se opskriften nedenfor </td></tr><tr><td> Montis fiksativ </td><td> forskellige </td><td></td><td> se opskriften nedenfor </td></tr><tr><td> natriumcacodylat-buffer </td><td> forskellige </td><td></td><td> se opskriften nedenfor </td></tr><tr><td> Richardson s pletten </td><td> forskellige </td><td></td><td> se opskriften nedenfor </td></tr></tbody></table> Opskrifter: 1. SPG Buffer <ol><li> Tilsættes 75 g saccharose. </li><li> Tilsættes 2,47 g dinatriumphosphat. </li><li> Tilsættes 0,36 g mononatriumphosphat. </li><li> Tilsættes 0,72 g glutaminsyre. </li><li> Fyld til 1 l med destilleret vand. </li><li> Justere pH til 7,3. </li></ol> 2. 0,1 M natriumcacodylat-buffer, pH 7,35. <ol><li> Tilsættes 42,80 g dimethylarsenic-natriumsalt. </li><li> Tilsættes 68,46 g saccharose. </li><li> Fyld til 1 l med destilleret vand. at få 0,2 M natriumcacodylat-buffer. </li><li> Før brug fortyndet opløsning med destilleret vand. til den ønskede koncentration og pH justeres til 7,35 hvis nødvendigt. </li></ol> 3. Montis fiksativ <ol><li> Tilsættes 156 ml 0,12 M natriumcacodylat-buffer. 3,2 Tilsæt 25 ml 25% glutaraldehyd i destilleret vand. </li><li> Tilsæt 19 ml10% paraformaldehyd i destilleret vand. </li><li> Tilsæt 3 ml 3% CaCl 2 i destilleret vand. </li><li> PH justeres til 7,35 og fyldes med destilleret vand. til 312 ml endelige løsning. </li></ol> 4. Richardsons pletten <ol><li> Bland lige dele 1% methylenblåt i 1% vandig borax opløsning og 1% Azur II i destilleret vand. </li></ol>

a human fallopian tube model for investigation of c. trachomatis infections

Genitale infektioner med Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) er den hyppigste overføres seksuelt hos kvinder på verdensplan. Ineffektiv clearance eller persistens af patogener, som kan føre til opad infektioner i de øvre genitale område og formodes at forårsage kronisk inflammatorisk beskadigelse inficeret væv 1,2. Som en konsekvens heraf, kan det give alvorlige kliniske følgetilstande som pelvic inflammatory disease (PID), æggelederne okklusion og infertilitet forekomme 3,4. Det meste af forskningen med C. trachomatis er udført i epiteliale cellelinjer (fx HEp-2 celler og HeLa-229) eller i mus. Som med celle-kultur-modeller, har de ikke afspejler fysiologi native væv eller patofysiologien af C. trachomatis genitale infektioner in vivo 5. Yderligere begrænsninger er givet ved det faktum, at de centrale signaleringskaskader (f.eks IFN-γ mediatED JAK / STAT signalering pathway), der kontrollerer intracellulære chlamydia vækst fundamentalt forskellig fra mus og mennesker 6,7. Vi og andre derfor etableret et helt organ æggelederen model til at undersøge direkte vekselvirkninger mellem C. trachomatis og humane æggelederen celler ex vivo 8,9. Til dette formål blev humane æggeledere fra kvinder, der gennemgår hysterektomi indsamlet og inficeret med C. trachomatis serovar D Inden 24 timer efter infektion, model hvor analyseret ved anvendelse af scanningselektronmikroskopi (SEM) og transmissionselektronmikroskopi (TEM) til at detektere Chlamydia trachomatis medieret epitelbeskadigelse samt C. trachomatis optagelse dannelse af æggeledervæv.

Watch this Scientific Journal Video about A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections at JoVE.com

A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections

Beskriver vi en<em&gt; Ex vivo infektion</em&gt; Model til visualisering af direkte interaktioner fra bakterielle patogener med humane æggeleder celler. Hele organvæv model blev etableret for at undersøge<em&gt; C. trachomatis</em&gt; Induceret patologi til den kvindelige æggelederen under &quot;liv-lignende&quot; forhold.

En human æggelederen Model til undersøgelse af<em&gt; C. trachomatis</em&gt; Infektioner

Genital tract infections with Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) are the most frequent transmitted sexually disease in women worldwide. Inefficient ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections

Processing of Human Reduction Mammoplasty and Mastectomy Tissues for Cell Culture

Behandling af human Reduction mammoplasty og mastektomi væv til celledyrkning

Experimental  examination of normal human mammary epithelial cell (HMEC) behavior, and how  normal cells acquire abnormal properties, can be facilitated ...

Murine Model of Wound Healing

Musemodel af Sårheling

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

En ortotopisk musemodel for Human Prostata Cancer metastaser

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoksiske Stimulering af Brain Microslices som en<em&gt; In vitro</em&gt; Model of Stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Induktion af accelereret åreforkalkning i Mus: Den "Wire-Skade" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Fosfor-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: et redskab til måling<em&gt; In vivo</em&gt; Mitokondrie Oxidativ phosphorylering Kapacitet i human skeletmuskulatur

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection

Tubal Cytology of the Fallopian Tube som et lovende værktøj til tidlig opdagelse af ovariecancer

Currently, it is widely accepted that the vast majority of ovarian high-grade serous carcinoma (HGSC) originate from the fallopian tube. However, due to ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro og In Vivo påvisning af Mitophagy i humane celler, C. Elegansog mus

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet måling af musen mesenterica arterie ved hjælp af Wire blodkar

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

En Ornesen Endothelial organ kultur model ved hjælp af Split cornea-knapper

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...