Name: a human fallopian tube model for investigation of c. trachomatis infections
Uploaded: 2012-08-11T14:00:00
Duration: 9 min 11 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections at JoVE.com

Detta arbete stöddes av DFG-Cluster of Excellence &quot;Inflammation i Gränsland&quot; (RA-Om RA-D). Vi är tacksamma för den utmärkta tekniskt stöd Kristin Wischnat.

1. Beredning av Chlamydia trachomatis Serovar D Stock <ol><li> Infekterar sammanflytande 175 cm 2 kolv cellkultur som innehåller HeLa-229 celler med 4 ml C. trachomatis D i SPG buffert. </li><li> Inkubera under en timme vid 37 ° C under konstant skakning. </li><li> Tillsätt 20 ml DMEM med 10% FCS och 240 | il cykloheximid. </li><li> Inkubera i en fuktad inkubator under 48 h vid 37 ° C och 5% CO2. </li><li> Tillsätt 5 ml sterila glaspärlor, starka skaka loss och förstöra C. trachomatis härbärgerar HeLa-229-celler. </li><li> Samla supernatanten och tillsätt ytterligare 5 ml sterila glaspärlor. </li><li> Rock tre gånger för 1 minut att förstöra alla HeLa-229 celler och utsläpp C. trachomatis. </li><li> Centrifug under 5 min vid 1000 RPMI och 4 ° C för att bli av cellulärt skräp. </li><li> Samla upp supernatanten för infektion av 8 till 10 175 cm 2 cellkultur kolvar sammanflytande grown med HeLa 229-celler. </li><li> Inkubera alla kolv med 4 ml SPG buffert och 4 ml supernatant från tidigare infektion under en timme vid 37 ° C med konstant skakning. </li><li> Efter en timme tillsätt 15 ml DMEM med 10% FCS och 230 | il cykloheximid följt av 48 h inkubation vid 37 ° C och 5% CO2. </li><li> Tillsätt 5 ml sterila glaspärlor, skaka för att lossa och förstöra C. trachomatis härbärgerar HeLa-229-celler. </li><li> Samla upp supernatanten och tillsätt ytterligare 5 ml sterila glaspärlor. </li><li> Rock tre gånger för 1 minut att förstöra alla HeLa-229 celler och utsläpp C. trachomatis. </li><li> Centrifug under 5 min vid 1000 RPMI vid 4 ° C för att bli av cellulärt skräp. </li><li> Samla upp supernatanten. </li><li> Fyll 40 ml av supernatanten i 50 ml Falcon rör, centrifugera i 99 min med 11.000 RPMI. </li><li> Efter centrifugering kassera supernatanten och tvätta pelleten med 1 ml SPG buffert. </li><li> Homogeniserapelleten i 1 ml SPG och alikvot 20 | il i en 1, 5 ml Eppendorf-rör, förvara vid -70 ° C fram till användning. Biologiska aktiviteten hos den framställda lagret bekräftades i en etablerad HeLa-229 cell-infektionsmodell. </li></ol> 2. Beredning av Human äggledaren <ol><li> Lagra mänskliga äggledarna (HFT) från kvinnor som genomgår hysterektomi omedelbart efter kirurgi i RPMI innehållande 5% FCS utan antibiotika i 4 ° C tills beredningen. Protokollet godkändes av den etiska kommittén vid universitetet i Lübeck (09-153). Kvinnor som ingår i studien (ålder 34 till 53) hade ingen historia av tidigare C. trachomatis infektion. Vävnad i äggledarna samlades vid förlossningen sterilisering på moderns begäran under kejsarsnitt eller under hysterektomier på grund av symtomatiska myom i lutealfas. Alla HFT testades negativt för C. trachomatis genom PCR. </li><li> Dissekera HFT i en Petri-skål innehållande RPMI med5% FCS utan antibiotika. Under hela bearbetningen vävnaden bör nedsänkas i mediet för att förhindra torkning. </li><li> Skär av och kasta bindväv och vävnader förstörs under operation. </li><li> Efter dissektion öppna HFT försiktigt med en liten skalpell. </li><li> För ytterligare experiment framställa bitar av vävnad i storlek av 0,5 cm x 0,5 cm upp till 1 cm x 1 cm. </li><li> För infektion butiken HFT förlagan i 1 ml RPMI innehållande 5% FCS utan antibiotika. HFT prover var infekterade med 5.5x10 5 IFU (Tillägg forming units) av C. trachomatis. </li><li> Inkubera HFT provet i 37 ° C, 5% CO2 och 21% O2 och i 37 ° C, 5% CO2 och 2% O2 under 24 timmar. </li><li> Efter inkubationstid samlar prov och förvara i Montis fixativ i minst tre dagar vid 4 ° C tills SEM / TEM beredning. </li></ol> 3. Framställning av HFT Prov för TEM <ol><li> FörTEM bort prov från Montis fixativ och skär 2 x 2 mm till 4 x 5 mm bitar. Den återstående vävnaden kan användas för SEM. </li><li> Tvätta bitar med natriumkakodylatbuffert, pH 7,35 under 1 timme. </li><li> Inkubera i 1% (vikt / volym) osmiumtetroxid i dest. över natten. </li><li> Avlägsna överskott av osmiumtetroxid genom tvättning 6x5 min i natriumkakodylatbuffert, pH 7,35. </li><li> Avlägsna vatten genom inkubering i ökande koncentrationer av etanol i vatten (volym / volym) (30% i 2 h, 40% i 2 h, 50% i 2 h, 60% i 2 h, 70% över natten, 80% för 2 h, 90% under 1 timme, 95% i 1 h, 100% under 1 timme. </li><li> Tvätta ut etanol under 2 x 15 min i propylenoxid och därefter överföra till en blandning av 50% (volym / volym) nyframställd Araldite (inklusive alla komponenter) i propylenglykol och inkubera över natten. </li><li> Överföra till nyframställd Araldite (inklusive alla komponenter) under minst 1 tim. </li><li> Överföring till platta inbäddningsmedel formar och fyll med Araldite. </li><li> Låt Araldite härdaåtminstone 48 timmar vid 60 ° C </li><li> Efter trimning av inbäddade prov skär semi tunna sektioner (700 nm) på en ultramikrotom med glas knivar eller en histo diamant kniv och färga med Richardsons fläcken. </li><li> Klipp ultra-tunna sektioner (ca 70 nm) med en diamant kniv och överföring till koppar nät (t.ex. 150 kvadratiska maskor). </li><li> Stain ultratunna sektioner med 0,5% (vikt / volym) uranylacetat i dest. följt av 3% (vikt / volym) blycitrat i dest. i en automatisk avsnitt Stainer. Alternativt kan delar färgas manuellt genom att lämna galler 15 min på en mättad centrifugerad lösning av uranylacetat i aqua dest. följt av 0,3% blycitrat (vikt / volym) i dest. </li></ol> 4. Framställning av HFT prov för SEM <ol><li> För SEM bort prov från Montis fixativ, orientera med epitel uppåt på en 1,5 x 1 cm kork ark och fäst position med hjälp insekter nålar. </li><li> Överför provet på korken till lämpliga metall korgar ochTvätta under 30 min i natriumkakodylatbuffert, pH 7,35. </li><li> Avlägsnande av vatten genom att inkubera provet i ökande koncentration av aceton / vatten-blandningar (volym / volym) 30% under 6 h, 40% i 6 h, 60% i 8 h, 70% över natten, 80% i 2 h, 90% för 2 h och 100% över natten (var extremt försiktig för att hålla provet kontinuerligt under vatten). </li><li> Överföring till Fresh 100% aceton och torka prov genom kritisk punkt torkning (temperatur 40 ° C, tryck 80 bar). </li><li> Ta bort nålar, kork och lim prov med epitelet uppåt på SEM provet montering utrustade med en ledande kol flik med ledande kol cement. Flytande ledande silver för att förbättra ledningsförmågan mellan fästet och det ledande kolet fliken. </li><li> Framställa en ledande platina, guld eller palladium beläggning av provet med användning av en förstoftningsbeläggare. </li></ol> 5. Färgning av Semi tunna sektioner med Richardson Stain <ol><li> Låt semi tunna sektioner torr bild. </li><li> Fläcka sektioner med färgning lösning vid 60 ° C under 1-2 minuter. </li><li> Tvätta i aqua dest. </li><li> Torra sektioner och täckglas. </li></ol> 6. Representativa resultat Inom den humana äggledaren infektionsmodell kunde vi att visualisera skillnader i epitelial morfologi mellan de icke-infekterade kontroller (Figur 1) och C. trachomatis - infekterade rör (figur 2) under normoxisk skick. Karakteristiska morfologiska skillnader underförstått patogen-inducerad svullnad och lys av äggledaren epitelceller som inte kunde detekteras i icke-infekterade kontroller. Med semi tunna sektioner och transmissionselektronmikroskopi kunde vi bevisa intracellulär C. trachomatis inkludering bildning i ex vivo-infekterade humana äggledaren vävnad (fig 3, 5) men inte i icke-infekterade kontroller (Figur 4). Eftersom syrgas koncentrationtioner i den kvinnliga könsorgan redan låga under fysiologiska förhållanden 11, och ytterligare minska under en inflammatorisk process som vi också undersökt vår modell under hypoxiska förhållanden. Preliminära resultat indikerar modellen är användbar för att analysera klamydia tillväxt och avkomman under varierande syrehalter. Klamydia-inducerad epitelcellskada måste skiljas från artefakter som förmedlas via oförsiktig beredning och hantering av äggledarna före infektion (Figur 6). <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig1.jpg" alt="Figur 1" /> Figur 1. Svepelektronmikroskopi (SEM) av en icke-infekterad människa fallopian efter en dag inkubation i kontroll medium (grön pil visar cilierad cell, blå pil visar inte cilierad cell). <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig2.jpg" alt="Figur 2" /> Figur 2. Scanning electron MICROS<html> kopia (SEM) av en ex vivo C. trachomatis infekterade humana äggledaren en dag efter infektion (vit pil uppbrutna integration). <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig3.jpg" alt="Figur 3" /> Figur 3. Semi tunna sektioner uppvisar typiska intracellulära inneslutningar (vita pilar) 1d efter infektion av det humana äggledaren med C. trachomatis ex vivo. <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig4.jpg" alt="Figur 4" /> Figur 4. Transmissionselektronmikroskopi (TEM) av ett icke-infekterad human äggledar efter en dag inkubation i kontrollmediet. <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig5.jpg" alt="Figur 5" /> Figur 5. Transmissionselektronmikroskopi (TEM) av ett ex vivo C. trachomatis infekterade mänskliga äggledaren en dag efter infektion (vita pilar markerar klamydia inneslutningar). ve_content &quot;&gt; <img src="/files/ftp_upload/4036/4036fig6.jpg" alt="Figur 6" /> Figur 6. Svepelektronmikroskopi (SEM) av äggledaren epitel skadas genom oförsiktig beredning och hantering av prov (vita pilar varumärket förstörs epitelial vävnad).

<ol>
	<li>Dean, D., Suchland, R. J., Stamm, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+long-term+cervical+persistence+of+Chlamydia+trachomatis+by+omp1+genotyping.">Evidence for long-term cervical persistence of Chlamydia trachomatis by omp1 genotyping.</a> J. Infect. Dis. 182, 909-916 (2000).</li><li>Campbell, L. A., Patton, D. L., Moore, D. E., Cappuccio, A. L., Mueller, B. A., Wang, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+Chlamydia+trachomatis+deoxyribonucleic+acid+in+women+with+tubal+infertility.">Detection of Chlamydia trachomatis deoxyribonucleic acid in women with tubal infertility.</a> Fertil. Steril. 59, 45-50 (1993).</li><li>Peipert, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+practice.+Genital+chlamydial+infections.">Clinical practice. Genital chlamydial infections.</a> N. Engl. J. Med. 349, 2424-2430 (2003).</li><li>Mardh, P. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tubal+factor+infertility,+with+special+regard+to+chlamydial+salpingitis.">Tubal factor infertility, with special regard to chlamydial salpingitis.</a> Curr. Opin. Infect. Dis. 17, 49-52 (2004).</li><li>Ertel, A., Verghese, A., Byers, S. W., Ochs, M., Tozeren, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathway-specific+differences+between+tumor+cell+lines+and+normal+and+tumor+tissue+cells.">Pathway-specific differences between tumor cell lines and normal and tumor tissue cells.</a> Mol. Cancer. 5, 55 (2006).</li><li>Roshick, C., Wood, H., Caldwell, H. D., McClarty, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+gamma+interferon-mediated+antichlamydial+defense+mechanisms+in+human+and+mouse+cells.">Comparison of gamma interferon-mediated antichlamydial defense mechanisms in human and mouse cells.</a> Infect. Immun. 74, 225-238 (2006).</li><li>Mestas, J., Hughes, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Of+mice+and+not+men:+differences+between+mouse+and+human+immunology.">Of mice and not men: differences between mouse and human immunology.</a> J. Immunol. 172, 2731-2738 (2004).</li><li>Hvid, M., Baczynska, A., Deleuran, B., Fedder, J., Knudsen, H. J., Christiansen, G., Birkelund, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-1+is+the+initiator+of+Fallopian+tube+destruction+during+Chlamydia+trachomatis+infection.">Interleukin-1 is the initiator of Fallopian tube destruction during Chlamydia trachomatis infection.</a> Cell Microbiol. 9, 2795-2803 (2007).</li><li>Roth, A., Konig, P., van, Z. G., Klinger, M., Hellwig-Burgel, T., Daubener, W., Bohlmann, M. K., Rupp, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoxia+abrogates+antichlamydial+properties+of+IFN-gamma+in+human+fallopian+tube+cells+in+vitro+and+ex+vivo.">Hypoxia abrogates antichlamydial properties of IFN-gamma in human fallopian tube cells in vitro and ex vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 19502-19507 (2010).</li><li>Wyrick, P. B., Knight, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pre-exposure+of+infected+human+endometrial+epithelial+cells+to+penicillin+in+vitro+renders+Chlamydia+trachomatis+refractory+to+azithromycin.">Pre-exposure of infected human endometrial epithelial cells to penicillin in vitro renders Chlamydia trachomatis refractory to azithromycin.</a> J. Antimicrob. Chemother. 54, 79-85 (2004).</li><li>Van Voorhis, W. C., Barrett, L. K., Sweeney, Y. T., Kuo, C. C., Patton, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Chlamydia+trachomatis+infection+of+Macaca+nemestrina+fallopian+tubes+produces+a+Th1-like+cytokine+response+associated+with+fibrosis+and+scarring.">Repeated Chlamydia trachomatis infection of Macaca nemestrina fallopian tubes produces a Th1-like cytokine response associated with fibrosis and scarring.</a> Infect. Immun. 65, 2175-2182 (1997).</li></ol>

Inga intressekonflikter deklareras.

Visualisering av patogen-inducerade skador på den infekterade vävnaden är besvärlig och ofta begränsat till experimentella procedurer hos möss. Vi etablerade ett ex-modell vivo-infektion i mänskliga äggledarna för att analysera C. trachomatis infektioner i de övre kvinnliga könsorgan. Genom användning av denna metod, kunde vi att visualisera C. trachomatis - inducerad skada på människors äggledaren epitel inom ett dygn efter infektion. Cellulär svallning och lys var typiska morfologiska förändringar som observerades i C. trachomatis - infekterade äggledarna, men inte hos icke-infekterade kontroller. TEM analyser visade att chlamydia genomföra en typisk intracellulär utvecklingscykel i infekterade vävnader, som visar stora inneslutningar med re-differentierade elementära organ men också mindre inneslutningar med förstorade retikulära organ som kan tyda uthållighet. Däremot räcker den morfologiska bilden ensamt att inte diskriminera mellan replicating och ihållande infektioner, som kännetecknas av minskad ämnesomsättning och ökad motståndskraft mot antibiotika 10. Förstörelse av epitelet i infekterade äggledarna är antingen på grund av störningar av C. trachomatis - infekterade epitelceller efter avslutad den intracellulära utvecklingscykel och frisättning av infektiösa elementära organ eller frisättningen av pro-inflammatoriska cytokiner 8. Patogen-inducerad vävnadsskada och värd-inducerade immunreaktioner mot C. trachomatis är tänkta att vara de främsta orsakerna till förlust av epitelceller funktion, fibroblast ombyggnad och slutligen Tubal infertilitet in vivo 8,11. En av de stora begränsningarna i denna modell är avsaknaden av inflammatoriska celler som hindrar en analys av sekundära effekter till den ursprungliga C. trachomatis infektion i äggledaren epitelet. Emellertid är den modell aphov av utomstående för att undersöka olika miljöförhållanden (t.ex. syrehalt) och den ursprungliga värd-immunsvar hos akut C. trachomatis-infektioner 8,9. Ytterligare planer är att skapa en modell för testning av antibiotika mot C. trachomatis i hela mänskliga äggledarna och för att karakterisera de metaboliska tillstånd för de olika utvecklingsstadier som observerats i äggledarna epitelet med 2-foton laserskanning mikroskopi.

<table border="1"><tbody><tr><td> Namnet på reagens </td><td> Företaget </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> DMEM </td><td> PAA </td><td> E15-843 </td><td></td></tr><tr><td> RPMI </td><td> PAA </td><td> R15-802 </td><td></td></tr><tr><td> FCS </td><td> PAA </td><td> A15-101 </td><td></td></tr><tr><td> Cykloheximid </td><td> Sigma - Aldrich </td><td></td><td></td></tr><tr><td> SPG-buffert </td><td> olika </td><td></td><td> se recept nedan </td></tr><tr><td> Montis fixativ </td><td> olika </td><td></td><td> se recept nedan </td></tr><tr><td> natriumkakodylatbuffert </td><td> olika </td><td></td><td> se recept nedan </td></tr><tr><td> Richardson fläckning </td><td> olika </td><td></td><td> se recept nedan </td></tr></tbody></table> Recept: 1. SPG-buffert <ol><li> Lägg 75 g sackaros. </li><li> Lägg 2,47 g dinatriumfosfat. </li><li> Tillsätt 0,36 g mononatriumfosfat. </li><li> Tillsätt 0,72 g glutaminsyra. </li><li> Fyll till 1 liter med aqua dest. </li><li> Justera pH till 7,3. </li></ol> 2. 0,1 M natriumkakodylatbuffert, pH 7,35. <ol><li> Tillsätt 42,80 g dimethylarsenic salt-syra-natrium. </li><li> Tillsätt 68,46 g sackaros. </li><li> Fyll till 1 liter med aqua dest. för att få 0,2 M buffert natriumkakodylat. </li><li> Före användning utspädd lösning med aqua dest. till önskad koncentration och justera pH till 7,35 vid behov. </li></ol> 3. Montis fixativ <ol><li> Lägg 156 ml 0,12 M buffert natriumkakodylat. 3,2 Tillsätt 25 ml 25% glutardialdehyd i aqua dest. </li><li> Tillsätt 19 ml10% paraformaldehyd i aqua dest. </li><li> Tillsätt 3 ml 3% CaCl2 i dest. </li><li> Justera pH till 7,35 och fylla med aqua dest. till 312 ml slutlig lösning. </li></ol> 4. Richardson fläcken <ol><li> Blanda lika delar av 1% metylenblått i 1% vattenhaltig boraxlösning och 1% Azur II i dest. </li></ol>

a human fallopian tube model for investigation of c. trachomatis infections

Genitala infektioner med Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) är den vanligaste överförs sexuellt sjukdomar hos kvinnor världen över. Ineffektiv clearance eller kvarstående patogener kan leda till stigande infektioner i de övre könsorgan och är tänkta att orsaka kronisk inflammatorisk skada på infekterade vävnader 1,2. Som en konsekvens kan allvarlig kliniska följdsymtom som inflammatoriska sjukdomar (PID), Tubal ocklusion och infertilitet förekommer 3,4. Merparten av forskningen med C. trachomatis har utförts i epitelcellinjer (t.ex. HEp-2 celler och HeLa-229) eller i möss. Men som med cell-kultur baserade modeller, inte återspeglar de varken fysiologi naturliga vävnaden eller patofysiologin av C. trachomatis genitala infektioner in vivo 5. Ytterligare begränsningar ges av det faktum att de centrala signalkaskader (t.ex. IFN-γ mediatED JAK / STAT signalväg) som styr intracellulära klamydia tillväxten skiljer sig fundamentalt mellan möss och människor 6,7. Vi och andra etablerade därmed ett helt organ äggledaren modellen för att undersöka direkta interaktioner mellan C. trachomatis och mänskliga fallopian celler tube ex vivo 8,9. För detta ändamål odlades humana äggledarna från kvinnor som genomgår hysterektomi uppsamlades och infekterade med C. trachomatis serumvariant D. Inom 24 h efter infektion, prov där analyserades med användning av svepelektronmikroskopi (SEM) och transmissionselektronmikroskopi (TEM) för att detektera Chlamydia trachomatis medieras epitelskada och C. trachomatis ingå bildning i fallopian vävnaden.

Watch this Scientific Journal Video about A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections at JoVE.com

A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections

Vi beskriver ett<em&gt; Ex vivo-infektion</em&gt; Modell för visualisering av direkta interaktioner från bakteriella patogener med humana äggledaren celler. Hela organvävnad modell inrättades för att undersöka<em&gt; C. trachomatis</em&gt; Inducerad patologi till den kvinnliga äggledaren under rubriken verklighetstrogna &quot;förhållanden.

A Human äggledaren Modell för utredning av<em&gt; C. trachomatis</em&gt; Infektioner

Genital tract infections with Chlamydia trachomatis (C. trachomatis) are the most frequent transmitted sexually disease in women worldwide. Inefficient ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Human Fallopian Tube Model for Investigation of C. trachomatis Infections

Processing of Human Reduction Mammoplasty and Mastectomy Tissues for Cell Culture

Behandling av mänskliga Minskning mammoplasty och vävnader mastektomi för cellodling

Experimental  examination of normal human mammary epithelial cell (HMEC) behavior, and how  normal cells acquire abnormal properties, can be facilitated ...

Murine Model of Wound Healing

Murinmodell sårläkning

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

En Orthotopic Murina Model of Human Prostate cancer metastaser

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxisk Stimulering av Brain Microslices som en<em&gt; In vitro</em&gt; Modell av stroke

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Induktion av accelererad åderförkalkning hos möss: "Wire-skada" Modell

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Fosfor-31-magnetisk resonansspektroskopi: ett verktyg för att mäta<em&gt; In Vivo</em&gt; Mitochondrial oxidativ fosforylering Kapacitet i human skelettmuskel

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Tubal Cytology of the Fallopian Tube as a Promising Tool for Ovarian Cancer Early Detection

Tubal Cytology of the Fallopian Tube som ett lovande verktyg för ovarian cancer Early Detection

Currently, it is widely accepted that the vast majority of ovarian high-grade serous carcinoma (HGSC) originate from the fallopian tube. However, due to ...

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro and In Vivo Detection of Mitophagy in Human Cells, C. Elegans, and Mice

In Vitro och In Vivo upptäckt av Mitophagy i mänskliga celler, C. Elegansoch möss

Mitochondria are the powerhouses of cells and produce cellular energy in the form of ATP. Mitochondrial dysfunction contributes to biological aging and a ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet mätning av mus mesenterica artär med Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

A Porcine Corneal Endothelial Organ Culture Model Using Split Corneal Buttons

En porcin hornhinnan endotelial orgel kultur modell med Split hornhinnan knappar

Experimental research on corneal endothelial cells is associated with several difficulties. Human donor corneas are scarce and rarely available for ...