Name: mouse model of intraluminal mcao: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining
Uploaded: 2012-11-06T12:00:00
Duration: 9 min 40 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining at JoVE.com

وأيد هذه الدراسة من قبل فريق CIHR CTP # 82946 منحة، منحة CIHR # 102741 MOP، وكذلك كرسي كندا # 216684 ومؤسسة شتراوس. وأيد ER من قبل الزمالة الكندية من القلب والسكتة الدماغية مؤسسة.

عابر انسداد الشريان الدماغي الأوسط (MCAO) 1. إجراء جراحة (الشكل 1) يتم تنفيذ عابرة انسداد الشريان الدماغي الأوسط (tMCAO) في 2 - 3-لشهر ذكر العمر C57BL / 6 الفئران (22 28G). وقد وافق هذا البروتوكول من قبل الرعاية أخلاقيات علم الأحياء الحيوانية IRCM اللجنة. تم تعقيم الأدوات الجراحية بواسطة التعقيم (121 ° C في 15 رطل لكل بوصة مربعة لمدة 60 دقيقة). بين كل حيوان، وأنها معقمة باستخدام حبة الساخنة معقم (15 ثانية). ومطهرة طاولة الجراحة وغيرها من المعدات باستخدام الايثانول 70٪. قبل ساعتين من الجراحة، وanalgesized الفئران مع البوبرينورفين (0.03 مغ / كغ bwip). الرقم 1A. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران مع بعمق 5٪ isoflurane ثم الحفاظ على التخدير عند 2.5٪ isoflurane. يتم الاحتفاظ درجة حرارة الجسم ثابتة من الفئران أثناء الجراحة مع وسادة التدفئة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تطهير الفراء وSKفي الايثانول مع 70٪ أو Betadine. منذ الحلاقة تنتج الشعر الإفراج جزء، والتهاب microabrasions التي قد تؤثر على الفيزيولوجيا المرضية السكتة الدماغية، ونحن لا يحلق الفراء الماوس. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إجراء شق خط الوسط والرقبة برفق بعيدا عن الأنسجة الرخوة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تحت المجهر ستيريو (STEMI 2000، زايس)، يتم تنفيذ عملية تشريح حادة لفضح القصبة الهوائية وسحب عضلات لتحديد موقع الشريان السباتي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تشريح بعناية اليسار الشريان السباتي المشترك (CCA) من الأنسجة المحيطة والمغطي مؤقتا CCA من قبل خياطة المؤقتة (1) باستخدام قطع خياطة الحرير 5-0 إلى 20 مم شرائح. ينبغي توخي الحذر الشديد عدم الاساءة الى العصب المبهم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فصل والتشعب من الشريان السباتي الأيسر الداخلية المشتركة (ICA) والخارجية الشريان السباتي المشترك (ECA). يتم وضع خياطة دائمة (2) حول اللجنة الاقتصادية لأفريقيا، بشكل أقصى وقت ممكن، ويتم وضع آخر خياطة مؤقتة ضيق قليلا (3) على اللجنة الاقتصادية لأفريقيا إلى القاصيالتشعب. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> مقطع ICA الأيسر (4) باستخدام ملاقط عكس العمل لتجنب النزيف. ينبغي توخي الحذر الشديد عدم الاساءة الى العصب المبهم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> قطع ثقب صغير في اللجنة الاقتصادية لأفريقيا (5) بين الغرز (3) دائم (2) ومؤقتة. </li></ol> الرقم 1B. <ol start="9" style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إدخال 12 ملم لمدة 6-0 المغلفة السيليكون (حوالي 10MM-9 هو السيليكون مغلفة) خياطة حيدة (شركة Doccol) في اللجنة الاقتصادية لأفريقيا (6)، وقطع تماما ECA البعيدة للخياطة ودائم في قلب مطبق في ICA . ويرتبط بإحكام حول خياطة حيدة لمنع النزيف ويتم إزالة ملاقط عكس العمل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وقدم مطبق لتسد أصل MCA في دائرة ويليس. وقف الإدراج في جميع أنحاء 9-10 ملم إلى ما بعد التشعب من اللجنة الاقتصادية لأفريقيا والتقييم القطري المشترك. يتم حظر مطبق و لا يمكن نقل بعد الآن. يجب الحرص على عدم اختراق الشريان الحنكي. الخيط (3) على اللجنة الاقتصادية لأفريقيا هو TIGتعادل htly لإصلاح حيدة في الموقف. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق الجلد مع إغلاق نظام autoclip الجرح. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حقن 1 مل من محلول ملحي تحت الجلد ووضع الفئران تحت مصباح الأشعة تحت الحمراء التدفئة خلال فترة ما بعد كل انسداد في (60 دقيقة). </li></ol> 2. استعادة الشريان المخي الأوسط تدفق الدم قبل reanesthesia، يمكن التحقق من neuroscore لتقييم مدى نجاح العملية الجراحية. <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تخدير الفئران كما هو موضح سابقا وإزالة autoclips. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> فتح قليلا خياطة (3) على اللجنة الاقتصادية لأفريقيا للسماح بانسحاب حيدة وضخه الدم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> ربط بشكل دائم قبالة خياطة مؤقت على اللجنة الاقتصادية لأفريقيا لمنع فقدان الدم. يتم الاحتفاظ حيدة لإعادة الاستخدام. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إزالة خياطة المؤقتة (1) على التقييم القطري المشترك للسماح إعادة تدوير الدم. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> إغلاق الجرح. ينبغي أن الفئران تلقي حل آخر 1 مل تحت الجلد المالحة. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> وضع الفئران تحت مصباح الأشعة تحت الحمراء التدفئة لمدة 1 ساعة. بعد التحقق من أن تستعيد الحركة الحيوانية، يتم إرجاع الماوس لقفصه وترك تحت وسادة التدفئة لمدة 72 ساعة المناشف. لاحظ أن يتم وضع سوى نصف القفص على منصة التدفئة للسماح لاختيار الفئران بيئتهم. لأنه لوحظ بشكل عام بعد الجراحة وفقدان الوزن، يتم وضع الطعام المهروسة في طبق بتري لتشجيع تناول الطعام. اثنتي عشرة ساعة بعد الجراحة، تلقت الفئران جرعة أخرى من البوبرينورفين (0.03 مغ / كغ bwip). </li></ol> 3. عملية الشام لعمليات الشام، وجميع الإجراءات متطابقة إلا أن لم يتم إدخال مطبق. 4. Neuroscore العجز العصبية تسمح تقييم نجاح tMCAO بعد ضخه في وقت لاحق وتقدير درجة خطورة الاصابة. وسجل العجز العصبية كما هو موضح سابقا 5 &lt;/ سوب&gt; وأجريت في 1، 24، 48 و 72 ساعة بعد ضخه. يتم استخدام موسع نطاق ست نقاط: <ul style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 0: عادي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1: خفيف تحلق السلوك مع أو بدون التناوب غير متناسقة عند التقطت من ذيله، &lt;محاولات لتدوير 50٪ إلى الجانب المقابل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 2: معتدل يتفق تحلق،&gt; محاولات لتدوير 50٪ إلى الجانب المقابل. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 3: يتفق قوية وفورية تحلق، الماوس يحتفظ بمكانة التناوب لأكثر من 1-2 ثانية، مع أنفها تصل الى نحو ذيله. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 4: دوران شديد تتقدم الى إنطلاق، وفقدان المشي أو المنعكس التقويمي. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 5: غيبوبة أو المحتضرة. </li></ul> 5. الكريزيل تلوين البنفسج (الشكل 2) بعد نضح حل PBS، يتم تجميد العقول بسرعة في نظير البنتان وتخزينها في -80 درجةقد يكون C. أدمغة فئران perfused أيضا مع بارافورمالدهيد 4٪ (PFA) اعتمادا على دراسات المناعية المخطط لها. يتم تنفيذ ناظم البرد، تخفيضات من أقسام الدماغ الاكليلية (17 ميكرون). يتم جمع مقطع واحد من كل 30 على الشريحة نفسها أن يكون لها ممثل الإصابة الدماغية. لحجم الكمي، ملطخة 2 شرائح من تلطيخ البنفسجي الكريزيل ونظام تحليل الصور تم استخدام (المطعوم شركة، فريدريك، MD) لتقييم الآفة. تم حساب حجم الإصابة في وحدات التعسفي (بكسل)، ومعبرا عنها كنسبة مئوية من المساحة غير lesioned المقابل لكل قسم. يتم الاحتفاظ الشرائح الأخرى في C ° -80 للدراسات المناعية. وبدلا من ذلك، يمكن خفض PFA ثابتة في الدماغ 30-50 ميكرون باستخدام vibratome وحجم احتشاء قياس ما أوصت به هان وآخرون (2009) 6.

<ol>
	<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema,+I:+a+new+experimental+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area.">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimental model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn. J. Stroke. 8, 1-8 (1986).</li><li>Chan, P. H., Kamii, H., Yang, G., Gafni, J., Epstein, C. J., Carlson, E., Reola, L. B. r. a. i. n. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=infarction+is+not+reduced+in+SOD-1+transgenic+mice+after+a+permanent+focal+cerebral+ischemia.">infarction is not reduced in SOD-1 transgenic mice after a permanent focal cerebral ischemia.</a> Neuroreport. 5, 293-296 (1993).</li><li>Yang, G., Chan, P. H., Chen, J., Carlson, E., Chen, S. F., Weinstein, P., Epstein, C. J., Kamii, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+copper-zinc+superoxide+dismutase+transgenic+mice+are+highly+resistant+to+reperfusion+injury+after+focal+cerebral+ischemia.">Human copper-zinc superoxide dismutase transgenic mice are highly resistant to reperfusion injury after focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 25, 165-170 (1994).</li><li>Liu, S., Zhen, G., Meloni, B. P., Campbell, K., Winn, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rodent+stroke+model+guidelines+for+preclinical+stroke+trials+(1st+edition.">Rodent stroke model guidelines for preclinical stroke trials (1st edition.</a> J. Exp. Stroke Transl. Med. 2, 2-27 (2009).</li><li>Jiang, S. X., Lertvorachon, J., Hou, S. T., Konishi, Y., Webster, J., Mealing, G., Brunette, E., Tauskela, J., Preston, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chlortetracycline+and+demeclocycline+inhibit+calpains+and+protect+mouse+neurons+against+glutamate+toxicity+and+cerebral+ischemia.">Chlortetracycline and demeclocycline inhibit calpains and protect mouse neurons against glutamate toxicity and cerebral ischemia.</a> J. Biol. Chem. 280, 33811-33888 (2005).</li><li>Han, R. Q., Ouyang, Y. B., Xu, L., Agrawal, R., Patterson, A. J., Giffard, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postischemic+brain+injury+is+attenuated+in+mice+lacking+the+beta2-adrenergic+receptor.">Postischemic brain injury is attenuated in mice lacking the beta2-adrenergic receptor.</a> Anesth. Analg. 108, 280-287 (2009).</li><li>Rousselet, E., Marcinkiewicz, J., Kriz, J., Zhou, A., Hatten, M. E., Prat, A., Seidah, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PCSK9+reduces+the+protein+levels+of+the+LDL+receptor+in+mouse+brain+during+development+and+after+ischemic+stroke.">PCSK9 reduces the protein levels of the LDL receptor in mouse brain during development and after ischemic stroke.</a> J. Lipid Res. 52, 1383-1391 (2011).</li><li>Tamura, A., Graham, D. I., McCulloch, J., Teasdale, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+cerebral+ischaemia+in+the+rat:+1.+Description+of+technique+and+early+neuropathological+consequences+following+middle+cerebral+artery+occlusion.">Focal cerebral ischaemia in the rat: 1. Description of technique and early neuropathological consequences following middle cerebral artery occlusion.</a> J. Cereb. Blood Flow Metab. 1, 53-60 (1986).</li><li>Chen, Y., Ito, A., Takai, K., Saito, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blocking+pterygopalatine+arterial+blood+flow+decreases+infarct+volume+variability+in+a+mouse+model+of+intraluminal+suture+middle+cerebral+artery+occlusion.">Blocking pterygopalatine arterial blood flow decreases infarct volume variability in a mouse model of intraluminal suture middle cerebral artery occlusion.</a> J. Neurosci. Methods. 174, 18-24 (2008).</li><li>Tsuchiya, D., Hong, S., Kayama, T., Panter, S. S., Weinstein, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+suture+size+and+carotid+clip+application+upon+blood+flow+and+infarct+volume+after+permanent+and+temporary+middle+cerebral+artery+occlusion+in+mice.">Effect of suture size and carotid clip application upon blood flow and infarct volume after permanent and temporary middle cerebral artery occlusion in mice.</a> Brain Res. 970, 131-192 (2003).</li><li>Tureyen, K., Vemuganti, R., Sailor, K. A., Dempsey, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infarct+volume+quantification+in+mouse+focal+cerebral+ischemia:+a+comparison+of+triphenyltetrazolium+chloride+and+cresyl+violet+staining+techniques.">Infarct volume quantification in mouse focal cerebral ischemia: a comparison of triphenyltetrazolium chloride and cresyl violet staining techniques.</a> J. Neurosci. Methods. 139, 203-207 (2004).</li></ol>

الكتاب ليس لديهم مصالح متضاربة الكشف. ويرعى الإنتاج وحرية الوصول إلى هذه المقالة عن طريق زايس، وشركة

وقد تم تطوير نماذج مختلفة السكتة الدماغية السكتة الدماغية لتقليد الآثار في المرضى. اختيار نموذج السكتة الدماغية يعتمد على مسألة البيولوجية. نموذج يحاكي MCAO داخل اللمعة واحدة من الأنواع الأكثر شيوعا من السكتة الدماغية في المرضى وأقل الغازية وأكثر اتساقا من النموذج تامورا 4،7. بل هو نموذج للاهتمام حقا لتحاليل الموت العصبية، وneurorepair الخلية. نجاح النموذج داخل اللمعة يعتمد على العديد من العوامل مثل الجنس الحيوانية والعمر والوزن ودرجة الحرارة، والتخدير ووقت الجراحة، والتي لا بد من السيطرة عليها. والآداب المادي للمطبق (قطر الحافة، وطول وشكل وfexibility) هي الحاسمة لاتساق MCAO 4. هنا، ونحن نستخدم 12 ملم لمدة 6-0 حيدة المغلفة مع السيليكون في 9-10 مم من شركة Doccol. ميزة كبيرة لهذا حيدة هو الحد من نزيف تحت العنكبوتية، ولأن طوله يغطي جميع ICAيتم منع الطول، تدفق الدم المتبقية، والتي تأتي من الشرايين الأمامية والخلفية من دائرة التواصل ويليس والمؤسسة العامة للتقاعد، و 8 التباين في انخفاض حجم احتشاء (15٪ من التباين في أيدينا). الخيط من CCA يقلل أيضا من تباين حجم احتشاء 9. ويمكن تقييم مدى إصابة الدماغ tMCAO التالية بطرق مختلفة. ويمكن قياس العجز العصبية كما ذكر سابقا. ومع ذلك، فإنه من الصعب أن يكون هناك مقياس كفاءة من خلال هذا الطريق. عادة يتم تنفيذ مدى احتشاء من تلطيخ TTC. وفي الآونة الأخيرة، كما تستخدم تقنيات الرنين المغناطيسي، وهي تقنية مثيرة للاهتمام بشكل خاص لعلاج الأعصاب. لفهم الآليات الكامنة الخلوية المشاركة في مثل السكتة الدماغية الموت neurorepair الخلية، أو تكاثر الخلايا، ودراسة علامات مختلفة عن طريق أمر بالغ الأهمية المناعية ومفيدة للغاية. وهكذا، لدينا protocرأ من الاستعدادات القسم الدماغ لديه ميزة كبيرة بالسماح لهذه التحليلات، ويقلل من عدد من الفئران المستخدمة. وعلاوة على ذلك، وآخرون Tureyen 10 وأفادت أن هناك علاقة جيدة بين البنفسجي تلطيخ الكريزيل وTTC.

<table border="1"&gt;<tr&gt;<td<strong&gt; وصف</strong</td&gt;<td<strong&gt; شركة</strong</td&gt;<td<strong&gt; كتالوج عدد</strong</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; ستيريو المجهر</td&gt;<td&gt; زايس</td&gt;<td&gt; STEMI 2000</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; الألياف عالية الكثافة الخفيفة المنور</td&gt;<td&gt; دولان-جينر شركة الصناعات</td&gt;<td</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; نظام التخدير لisoflurane</td&gt;<td</td&gt;<td</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<tdIsoflurane&gt;</td&gt;<td&gt; CDMV</td&gt;<td&gt; 108737</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; التدفئة بطانية</td&gt;<td&gt; Gaymar Medsearch</td&gt;<td&gt; TP22G</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; مصباح الأشعة تحت الحمراء التدفئة</td&gt;<td</td&gt;<td</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; الترا غرامة ملاقط، على غرار 5</td&gt;<td&gt; العلوم المجهر الإلكتروني</td&gt;<td&gt; 78320-5TI</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Vannas مقص 3 طليعة مم، مستقيم</td&gt;<td&gt; العلوم المجهر الإلكتروني</td&gt;<td&gt; 72932-01</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; نمط LA-1 و 1-MPF جميع شفرات ناعمة</td&gt;<td&gt; العلوم المجهر الإلكتروني</td&gt;<td&gt; 77926-5S</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; ملاقط العمل السلبي، KOPINC أسلوب 5</td&gt;<td&gt; العلوم المجهر الإلكتروني</td&gt;<td&gt; 72850-F</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; تشريح مقص 5 1/2 &quot;مستقيم</td&gt;<td&gt; Cedarlane</td&gt;<td&gt; 72960</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Autoclip كاتب مجموعة</td&gt;<td&gt; هارفارد جهاز</td&gt;<td&gt; 34-0557</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<tdبالجروح&gt; BD Autoclip SYST الإقفال.، 9MM طويلة، 100/pk</td&gt;<td&gt; فيشر</td&gt;<td&gt; 01-804-5</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; 5-0 خياطة</td&gt;<td&gt; هارفارد جهاز</td&gt;<td&gt; 517763</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; خياطة المواد حيدة II PDS البنفسجي، 5-0، RB-1؛ Z303H</td&gt;<td&gt; CDMV</td&gt;<td&gt; 6167</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; 12 ملم لمدة 6-0 خياطة حيدة المغلفة السيليكون</td&gt;<td&gt; شركة Doccol</td&gt;<td&gt; 60SPRePK5</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; Seringes 1ML</td&gt;<td&gt; فيشر</td&gt;<td&gt; 14-823-2F</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td&gt; إبر 26G1 / 2</td&gt;<td&gt; فيشر</td&gt;<td&gt; BD-305111</td&gt;</tr&gt;<tr&gt;<td<em&gt; C57BL / 6</em&gt; الفئران</td&gt;<td&gt; IRCM</td&gt;<td</td&gt;</tr&gt;</table

mouse model of intraluminal mcao: cerebral infarct evaluation by cresyl violet staining

السكتة الدماغية هي ثالث سبب للوفيات والسبب الرئيسي للعجز في العالم. السكتة الدماغية الإقفارية حسابات لحوالي 80٪ من كل السكتات الدماغية. ومع ذلك، فإن الأنسجة منشط البلازمينوجين الحالة للخثرة (TPA) هو العلاج الوحيد من السكتة الدماغية الحادة موجود. هذا أدى إلى تطوير الباحثون عدة نماذج السكتة الدماغية في مجموعة متنوعة من الأنواع. وقد وضعت نوعين رئيسيين من النماذج القوارض: نماذج من نقص التروية الدماغية العالمية أو نقص التروية الدماغية البؤرية. لتقليد السكتة الدماغية في المرضى، ومنهم حوالي 80٪ السكتات الدماغية صمي تحدث الجلطة أو في إقليم الشريان الدماغي الأوسط (MCA)، وداخل اللمعة الأوسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) النموذج هو ذات الصلة تماما للدراسات السكتة الدماغية. كان أول من طور هذا النموذج في الفئران عن طريق كويزومي وآخرون في 1986 1. بسبب سهولة التلاعب الجيني في الفئران، كما تم تطوير هذه النماذج في هذا النوع 2-3. المحتوى &quot;&gt; هنا، نقدم عابرة الإجراء انسداد MCA في C57/Bl6 الفئران. دراسات سابقة قد ذكرت أن الخصائص الفيزيائية للمطبق مثل قطر الحافة، الطول، الشكل، والمرونة هي حاسمة بالنسبة للاستنساخ من حجم احتشاء 4. وهنا، تم استخدام السيليكون التجارية الأحادية المغلفة (Doccol شركة). آخر ميزة كبيرة هي أن هذا حيدة يقلل من خطر النزيف تحت العنكبوتية للحث. باستخدام المجهر ستيريو زايس STEMI 2000، عرض حيدة السيليكون المغلفة في الشريان السباتي الداخلي (ICA) عن طريق خفض في الشريان السباتي الخارجي (ECA) حتى حيدة occludes قاعدة MCA. تم استعادة تدفق الدم بعد 1 ساعة من إزالة حيدة لتقليد استعادة تدفق الدم بعد تحلل الجلطة من الانصمام الخثاري في البشر. يمكن تقييم مدى احتشاء دماغي الاولى لدرجة العصبية وقياس حجم احتشاء.وقد تم تحليل بالتالي الفئران الدماغية العصبية لدرجاتهم في أوقات ما بعد ضخه مختلفة. لتقييم حجم احتشاء، مع تلطيخ 2،3،5-triphenyltetrazolium كلوريد (TTC) تم تنفيذ عادة. هنا، كنا الكريزيل تلطيخ البنفسجي لأنه يتيح الفرصة لاختبار العديد من علامات الحرجة المناعية. في هذا الفيديو، ونحن التقرير الإجراء MCAO؛ عشرات العصبية وتقييم حجم احتشاء من تلطيخ البنفسجي الكريزيل.

تقييم neuroscore يؤكد نجاح tMCAO بعد السكتة الدماغية ويحدد كفاءة tMCAO بعد ضخه. في أيدينا، وجميع الفئران إخضاعها لإجراءات داخل اللمعة قدم ما لا يقل عن الشباك خفيفة متناسقة (neuroscore 2) وعجز عصبي مستقرة عموما تصل إلى 72 ساعة. معظم الفئران يحمل الشباك خفيفة متناسقة (neuroscore 2). ويستثنى الفئران تبين عدم وجود الشباك من الدراسة. ومع ذلك، فإن التقييم neuroscore لا تسمح لنا أن نميز بين الفئران مع الحصين الجرحى وأولئك الذين لديهم قرن آمون سليمة. لم يلاحظ أي وفيات خلال اليوم لعملية جراحية، مما يوحي بأن نزيف تحت العنكبوتية لم يحدث. عندما يتم التعرف نزيف تحت العنكبوتية في الماوس، يتم استبعاد منهجي هذا واحد من التحليل. استخدام السيليكون المغلفة حيدة من شركة Doccol، وهو أكثر سلاسة من المنزل استعدادا الأحادية، ويزيد من نجاحtMCAO ويقلل نزيف تحت العنكبوتية. وفيات بين 24 ساعة وساعة 72 هو 14٪ في هذا النموذج، كما ذكرت عموما لمدة 60 دقيقة من الانسداد. وفيات وحظ ربما يرجع إلى وحدة تخزين كبيرة احتشاء في هذه السلالة الماوس. A استنساخ الآفة قوية كما لوحظ (الانحراف المعياري هو 15٪)، والتي هي مثيرة جدا للاهتمام لدراسة الجزيئات العصبية التي يمكن أن تكون مخفية تأثيرها (ق) من التباين للنموذج. لتقييم مدى إصابة الدماغ بعد tMCAO، اخترنا لاستخدام الكريزيل تلطيخ البنفسجي (الشكل 2) بدلا من TTC من أجل الحصول على الكثير من المواد ذات الصلة لاختبار علامات 6. مدى الآفة يتسق نسبيا. ومع ذلك، لاحظنا أنه في بعض الفئران، أصيب قرن آمون (حوالي 30٪ من الفئران). ومن المثير للاهتمام أن نلاحظ أن يمكن تطبيق تلطيخ البنفسجي الكريزيل تصل إلى 1 بعد أسبوع. في الأدب، واحتشاء الدماغ نسبة تختلف مندراسة إلى أخرى. ذلك يعتمد على اختيار سلالة الفأر، والتخدير، وسمك أقسام الدماغ، وحيدة تستخدم، أو تستخدم تلطيخ 6 و 7. <img src="/files/ftp_upload/4038/4038fig1.jpg" alt="الشكل 1" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/4038/4038fig1highres.jpg" /> الشكل 1. مخطط انسداد الشريان الدماغي الأوسط في استخدام السيليكون المغلفة حيدة داخل اللمعة. A المخطط. المبسطة الدماغ والشرايين الدماغية الماوس تظهر الغرز المتعاقبة ومقطع لإعداد مقدمة من السيليكون المغلفة حيدة. B. ويمثل موقف حيدة من خلال دائرة ويليس. وقدم حيدة في ICA عبر اللجنة الاقتصادية لأفريقيا تسد قاعدة ACA MCA، الشريان المخي الأمامي؛ BA، الشريان القاعدي؛ CCA، الشريان السباتي المشترك؛ C. ويليس، دائرة ويليس، اللجنة الاقتصادية لأفريقيا، الخارجية السباتي آرتيراي؛ ICA، الداخلية الشريان السباتي؛ MCA الشريان الأوسط، الدماغي، PCA، الاتصال الشريان الخلفي؛ PPA، الشريان الحنكي. <img src="/files/ftp_upload/4038/4038fig2.jpg" alt="الشكل 2" /> الشكل 2. أقسام الاكليلية ممثل مخ الفأر ملطخة البنفسجي الكريزيل بعد 72 ساعة بعد ضخه منطقة عائق. (المخطط أساسا، والقشرة مناطق الدماغ المجاورة) يظهر باللون الأبيض (غير ملوثين من البنفسجي الكريزيل). بلغ حجم الإصابة (الجزء الأبيض، النصف الأيمن) محدد، وأعرب عن كنسبة مئوية من المساحة غير lesioned المقابل (نصف الكرة المخية الأيسر).

Watch this Scientific Journal Video about Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining at JoVE.com

Mouse Model of Intraluminal MCAO: Cerebral Infarct Evaluation by Cresyl Violet Staining

ويرد هنا في داخل اللمعة الأوسط نموذج انسداد الدماغي في الفئران. يتم تقييم مدى احتشاء دماغي من قبل على درجة عصبية والكريزيل تلطيخ البنفسجي، وهو بديل لتلطيخ TTC، وتقدم ميزة كبيرة لاختبار بالتوازي علامات الاهتمام عديدة.

نموذج الفأر من MCAO داخل اللمعة: الدماغي التقييم عائق من قبل تلوين البنفسج الكريزيل

Stroke is the third  cause of mortality and the leading cause of disability in the World. Ischemic  stroke accounts for approximately 80% of all strokes. ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Mouse Model of Middle Cerebral Artery Occlusion

نموذج الفأر من انسداد الشريان الدماغي الأوسط

Stroke is the most common fatal neurological disease in the United States 1. The majority of strokes (88%) result from blockage of blood vessels in the ...

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Mice

الشريان الدماغي الأوسط انسداد داخل اللمعة (MCAO) النموذجي للاصابة بالسكتة الدماغية مع توجيه الليزر دوبلر Flowmetry في الفئران

Stroke is the third leading cause of death and the leading cause of disability in the world, with an estimated cost of near $70 billion 
in the United ...

Optimized System for Cerebral Perfusion Monitoring in the Rat Stroke Model of Intraluminal Middle Cerebral Artery Occlusion

الأمثل نظام لرصد الإرواء الدماغي في نموذج الفئران من السكتة الدماغية داخل اللمعة انسداد الشريان الدماغي الأوسط

The translational potential of pre-clinical stroke research depends on the accuracy of experimental modeling. Cerebral perfusion monitoring in animal ...

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion (MCAO) for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

Embolic Middle Cerebral Artery Occlusion MCAO for Ischemic Stroke with Homologous Blood Clots in Rats

صمي الأوسط انسداد الشريان الدماغي (MCAO) لالدماغية السكتة الدماغية مع مثلي تجلط الدم في الجرذان

Clinically, thrombolytic therapy with use of recombinant tissue plasminogen activator (tPA) remains the most effective treatment for acute ischemic ...

Evaluation of Lung Metastasis in Mouse Mammary Tumor Models by Quantitative Real-time PCR

تقييم الرئة الانبثاث في ماوس الثديية ورم المجموعات بواسطة الكمي في الوقت الحقيقي PCR

Metastatic disease is the spread of malignant tumor cells from the primary cancer site to a distant organ and is the primary cause of cancer associated ...

A Battery of Motor Tests in a Neonatal Mouse Model of Cerebral Palsy

مجموعة من الاختبارات للسيارات في ماوس نموذج حديثي الولادة من الشلل الدماغي

As the sheer number of transgenic mice strains grow and rodent models of pediatric disease increase, there is an expanding need for a comprehensive, ...

Intraluminal Drug Delivery to the Mouse Arteriovenous Fistula Endothelium

داخل اللمعة توصيل الدواء للماوس شرياني الناسور البطانة Endothelium

Delivery of therapeutic agents to enhance arteriovenous fistula (AVF) maturation can be administered either via intraluminal or external routes. The ...

Construction and Evaluation of a Murine Calvarial Osteolysis Model by Exposure to CoCrMo Particles in Aseptic Loosening

البناء وتقييم نموذج عظام النهايات كالفاريال مورين بالتعرض للجسيمات كوكرمو في تخفيف العقيم

Wear particle-induced osteolysis is a major cause of aseptic loosening in arthroplasty failure, but the underlying mechanism remains unclear. Due to long ...

Induction and Micro-CT Imaging of Cerebral Cavernous Malformations in Mouse Model

التعريفي والصغرى-CT تصوير التشوهات مجوف الدماغي في طراز الماوس

Mutations in the CCM1 (aka KRIT1), CCM2, or CCM3 (aka PDCD10) gene cause cerebral cavernous malformation (CCM) in humans. Mouse models of CCM disease have ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

متساوي القياس كونتراكتيليتي القياس الشريان المساريقي العلوي الماوس باستخدام أسلاك ميوجرافي

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...