Name: collection protocol for human pancreas
Uploaded: 2012-05-23T12:00:00
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著者らは、ドナーの家族や専門家の支援のため、本研究とマリア·マルティーノとイリーナKusmartsevaに関与する臓器調達機関に感謝します。この作品は、糖尿病患者の膵臓の臓器提供者のネットワークをサポートする青少年糖尿病研究財団（MC-T.、MA）によって資金を供給された。

1。セットアップ<ol><li>鉛筆で、または自動的にカセット·プリンタを手動でパラフィンブロックのラベルカセット。ドナー識別子（CaseID）、サンプルの種類、分量番号、および任意の追加を一意に識別（ケースワークシートが含ま<a href="http://jove.com/files/ftp_upload/4039/4039appendix1.doc" target="_blank">付録1</a> ）。 </li><li>永久的なマーカーでカセットのラベルとして10月の金型。アルミ箔の5-10 cmの長...

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	<li>Brissova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+human+pancreatic+islet+architecture+and+composition+by+laser+scanning+confocal+microscopy.">Assessment of human pancreatic islet architecture and composition by laser scanning confocal microscopy.</a> J. Histochem. Cytochem. 53, 1087-1097 (2005).</li><li>Rahier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pancreatic+polypeptide+cells+in+the+human+pancreas:+the+effects+of+age+and+diabetes.">The pancreatic polypeptide cells in the human pancreas: the effects of age and diabetes.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 56, 441-444 (1983).</li><li>Uchida, T., Takada, T., Ammori, B. J., Suda, K., Takahashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+reconstruction+of+the+ventral+and+dorsal+pancreas:+a+new+insight+into+anatomy+and+embryonic+development.">Three-dimensional reconstruction of the ventral and dorsal pancreas: a new insight into anatomy and embryonic development.</a> J. Hepatobiliary Pancreat. Surg. 6, 176-180 (1999).</li><li>Wittingen, J., Frey, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+concentration+in+the+head,+body,+tail+and+uncinate+process+of+the+pancreas.">Islet concentration in the head, body, tail and uncinate process of the pancreas.</a> Ann. Surg. 179, 412-414 (1974).</li><li>Rahier, J., Goebbels, R., Henquin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+composition+of+the+human+diabetic+pancreas.">Cellular composition of the human diabetic pancreas.</a> Diabetologia. 24, 366-371 (1983).</li><li>Vaught, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+NCI+perspective+on+creating+sustainable+biospecimen+resources.">An NCI perspective on creating sustainable biospecimen resources.</a> J. Natl. Cancer Inst. Monogr. 42, 1-7 (2011).</li><li>Gianani, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+results+of+screening+of+nondiabetic+organ+donors+for+expression+of+islet+autoantibodies.">Initial results of screening of nondiabetic organ donors for expression of islet autoantibodies.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 91, 1855-1861 (2006).</li><li>Tauriainen, S., Salmela, K., Rantala, I., Knip, M., Hy&#246;ty, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collecting+high-quality+pancreatic+tissue+for+experimental+study+from+organ+donors+with+signs+of+&#946;-cell+autoimmunity.">Collecting high-quality pancreatic tissue for experimental study from organ donors with signs of &#946;-cell autoimmunity.</a> Diabetes Metab. Res. Rev. 26, 585-592 (2010).</li><li>In't Veld, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+insulitis+in+adult+autoantibody-positive+organ+donors.">Screening for insulitis in adult autoantibody-positive organ donors.</a> Diabetes. 56, 2400-2404 (2007).</li><li>T&#246;ns, H. A., Terpstra, O. T., Bouwman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+human+pancreata+in+perspective+of+the+isolation+of+the+islets+of+langerhans.">Heterogeneity of human pancreata in perspective of the isolation of the islets of langerhans.</a> Transplant Proc. 40, 367-369 (2008).</li></ol>

この手順の目的は、複数のコレクションのサイト間で調和することができます標準の膵臓の処理を定義するため、異なったグループによって得られた結果の比較を可能にすることです。解剖法は、域内の分割に続く主要な膵臓領域の注釈の追加の手順と標準的な外科病理プラクティスに基づいています。生物検体処理方法の標準化などの国立がん研究所6として国家のバイオバンクの?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名前 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> コメント </td></tr><tr><td> 22ブレードを搭載したメスを含む解剖器具</td><td>さまざまな</td><td>さまざまな</td><td></td></tr><tr><td>遠心管（15〜50 ml）を</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 05-539-5、430828 </td><td>無菌の</td></tr><tr><td>クリオチューブ（1.8 ml）を</td><td> VWR北米</td><td> 89004-300 </td><td>滅菌、バーコードオプション</td></tr><tr><td> RNAlaterは</td><td> Ambionの</td><td> AM7021 </td><td></td></tr><tr><td>病理インク</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>カセット</td><td>メルセデスメディカル</td><td> CAS ECO109 </td><td></td></tr><tr><td> 1ニュートラル0％緩衝ホルマリン</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> 23-245-685 </td><td></td></tr><tr><td> OCT凍結メディア</td><td> TissueTek </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td>金型</td><td> ThermoScientific </td><td> 58952 </td><td>様々なサイズ</td></tr><tr><td>イソペンタン</td><td>フィッシャー·サイエンティフィック</td><td> O3551-4 </td><td> 10月ゾッとお風呂</td></tr><tr><td>ドライアイス</td><td></td><td></td><td> 10月ゾッとお風呂</td></tr><tr><td>デュワーフラスコ内の液体窒素</td><td></td><td></td><td>凍結cryovialsスナップ</td></tr><tr><td>細胞培養皿（長さ100mm） </td><td>コー​​ニング</td><td> 430167 </td><td>無菌の</td></tr><tr><td>ハイクローンDMEF </td><td> ThermoScientific </td><td> SH30023.01 </td><td>滅菌、保管、冷蔵、グルタミンが含まれている</td></tr><tr> &lt;TD&gt;ウシ胎児血清</td><td> Cellgro </td><td> 35から010-CV </td><td>滅菌、保管、冷凍のアリコート</td></tr><tr><td>ペニシリン/ストレプトマイシン/抗真菌薬</td><td> GIBCO </td><td> 15240-062 </td><td>滅菌、保管、冷凍のアリコート</td></tr><tr><td>タイプ9パラフィン</td><td>リチャード·アラン·サイエンティフィック</td><td> 8337 </td><td></td></tr><tr><td> 1X D-PBS </td><td> GIBCO </td><td> 14190-144 </td><td>無菌の</td></tr><tr><td> 16％パラホルムアルデヒド</td><td> EMサイエンス</td><td> 15710 </td><td>冷蔵新鮮な店を作る</td></tr><tr><td> 8％のグルタルアルデヒド</td><td> EMサイエンス</td><td> 16019 </td><td>冷蔵新鮮な店を作る</td></tr><tr><td>バイオセーフティレベル2のフード</td><td>さまざまな</td><td></td><td></td></tr><tr><td>超低冷凍庫</td><td>さまざまな</td><td></td><td></td></tr><tr><td>さくらカセットプリンター</td><td>桜</td><td></td><td></td></tr><tr><td>さくらVIP300 </td><td>桜</td><td></td><td>自動パラフィンプロセッサ</td></tr><tr><td>パラフィン包埋ステーション</td><td>サーモフィッシャー</td><td></td><td></td></tr></tbody></table> 表1特異的試薬および装置。

collection protocol for human pancreas

この解離およびサンプリング手順は、死体臓器提供者から回収された膵臓の準備を標準化するための糖尿病（nPOD）プログラムと膵臓の臓器提供者のためのネットワーク用に開発されました。膵臓は、横軸の内側全体に連続横断切片に続いて3つの主要領域（頭、体、尾）に分かれています。交互にセクションが固定パラフィン包埋に使用され、新鮮凍結ブロックと残りのサンプルは、DNA、RNA、またはタンパク質を分離するため、RNアーゼ阻害剤の有無に関わらずどちらかは、スナップ凍結試料調製のために刻まれています。膵臓の解剖手順の全体的な目標は、解剖学的配向性を維持しながら、全体の膵臓をサンプリングすることである。 膵島組成、サイズ、および数字の面で内分泌細胞の不均一性は、齧歯類膵島1に比べてヒト膵島 ​​のために報告されています。膵頭部、膵体尾部領域からのヒト膵島の大半はインスリンcontaininで構成されていますgのβ細胞は、低い割合に続いてグルカゴンを含有するα細胞、δ細胞をソマトスタチン含有します。膵臓ポリペプチドを含有するPP細胞とグレリン含有イプシロン細胞も存在するが、少数である。対照的に、鉤状領域は主に2膵ポリペプチドを含有するPP細胞から構成されている島が含まれています。これらの地域の膵島バリエーションが発達の違いから生じる。膵臓は、前腸と胃や十二指腸、背3腹葉の動きやヒューズの回転後の腹側と背側膵臓芽から開発しています。腹葉は背側葉、臓器の残りの部分を生じさせる一方鉤状突起を含む頭部の後方部分を形成する。地域の膵臓の変化はまた、尾部領域では1型糖尿病で選択萎縮を受けて他の地域と背側葉由来の成分に比べて高い膵島密度を有すると報告されている<sアップ&gt; 4,5。 追加の臓器や組織は、多くの場合、臓器提供者から回収し、膵臓のリンパ節、脾臓および非膵臓リンパ節を含んでいる。これらのサンプルは、凍結保存細胞の単離を加えた膵臓の場合と同様の形式で回収される。近位十二指腸が膵臓に含まれている場合は、十二指腸粘膜にはパラフィンや冷凍ブロックとひき肉スナップ凍結の準備のために収集されることがあります。

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Collection Protocol for Human Pancreas

このビデオでは、複数のストレージ形式にヒト膵臓を処理するための解剖の手順を示しています。解剖学的なオリエンテーションは、地域の膵島の組成と密度の定義を可能にするために、膵臓領域を通して維持されています。

ヒト膵臓の収集プロトコル

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

手術標本からヒト膵島のレーザーマイクロダイセクションのために改良されたプロトコル

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Collection, Isolation, and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Samples

人間頸管サンプルの採取、単離、およびフローサイトメトリー分析

Despite the public health importance of mucosal pathogens (including HIV), relatively little is known about mucosal immunity, particularly at the female ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

汗は小説、小型、ワイヤレスデバイスを使用した監視するための詳細なプロトコル

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

変更されたカフを用いた膵臓移植マウス モデル

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

マウスの膵臓の組織学的解析と代謝プロファイリングに対する郭清

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Robotic Lateral Pancreaticojejunostomy for Chronic Pancreatitis

慢性膵炎に対するロボット横膵イェノ間切全切全切全切り

Lateral pancreaticojejunostomy (LPJ) has shown good postoperative outcomes in patients with painful, morphine dependent, chronic pancreatitis (CP). The ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

膵臓癌のための腹腔鏡下左膵切れ切れ:手術戦略と技術ビデオ

Radical resection margins, resection of Gerota&#8217;s (perirenal) fascia, and adequate lymph node dissection are crucial for an adequate oncological ...

Robot-Assisted Kidney Transplantation

ロボット支援腎移植

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

膵臓内イメージングウィンドウを用いたマウスモデルにおける膵臓の細胞レベル可視化におけるビ ボ における縦方向の安定化

Direct in vivo cellular-resolution imaging of the pancreas in a live small animal model has been technically challenging. A recent intravital imaging ...

Collection, Expansion, and Differentiation of Primary Human Nasal Epithelial Cell Models for Quantification of Cilia Beat Frequency

繊毛拍動頻度の定量化のための初代ヒト鼻上皮細胞モデルの収集、拡大、および分化

Measurements of cilia function (beat frequency, pattern) have been established as diagnostic tools for respiratory diseases such as primary ciliary ...