Name: collection protocol for human pancreas
Uploaded: 2012-05-23T12:00:00
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저자는 기증자의 가족과 전문가의 도움이 연구와 마리아 마티노와 이리나 Kusmartseva에 관련된 장기 조달 기관 감사드립니다. 이 작품은 당뇨병과 췌장 장기 기증자를위한 네트워크를 지원 소아 당뇨병 연구 재단 (MC-T., MA)에 의해 재정 지원되었다.

1. 설정 <ol><li> 연필로, 또는 자동으로 카세트 프린터 수동으로 파라핀 블록에 대한 라벨 카세트. 기증자 식별자 (CaseID), 샘플 종류, 나누어지는 번호 및 추가 고유 식별합니다 (사례 워크시트 등이 <a href="http://jove.com/files/ftp_upload/4039/4039appendix1.doc" target="_blank">부록 1</a> ). </li><li> 영구 마커와 카세트뿐 아니라 라벨 10월 금형. 알루미늄 호일의 5~10센티미터의 직사각형을 잘라 버릴거야. </li><li> 영구...

<ol>
	<li>Brissova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+human+pancreatic+islet+architecture+and+composition+by+laser+scanning+confocal+microscopy.">Assessment of human pancreatic islet architecture and composition by laser scanning confocal microscopy.</a> J. Histochem. Cytochem. 53, 1087-1097 (2005).</li><li>Rahier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pancreatic+polypeptide+cells+in+the+human+pancreas:+the+effects+of+age+and+diabetes.">The pancreatic polypeptide cells in the human pancreas: the effects of age and diabetes.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 56, 441-444 (1983).</li><li>Uchida, T., Takada, T., Ammori, B. J., Suda, K., Takahashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+reconstruction+of+the+ventral+and+dorsal+pancreas:+a+new+insight+into+anatomy+and+embryonic+development.">Three-dimensional reconstruction of the ventral and dorsal pancreas: a new insight into anatomy and embryonic development.</a> J. Hepatobiliary Pancreat. Surg. 6, 176-180 (1999).</li><li>Wittingen, J., Frey, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+concentration+in+the+head,+body,+tail+and+uncinate+process+of+the+pancreas.">Islet concentration in the head, body, tail and uncinate process of the pancreas.</a> Ann. Surg. 179, 412-414 (1974).</li><li>Rahier, J., Goebbels, R., Henquin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+composition+of+the+human+diabetic+pancreas.">Cellular composition of the human diabetic pancreas.</a> Diabetologia. 24, 366-371 (1983).</li><li>Vaught, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+NCI+perspective+on+creating+sustainable+biospecimen+resources.">An NCI perspective on creating sustainable biospecimen resources.</a> J. Natl. Cancer Inst. Monogr. 42, 1-7 (2011).</li><li>Gianani, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+results+of+screening+of+nondiabetic+organ+donors+for+expression+of+islet+autoantibodies.">Initial results of screening of nondiabetic organ donors for expression of islet autoantibodies.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 91, 1855-1861 (2006).</li><li>Tauriainen, S., Salmela, K., Rantala, I., Knip, M., Hy&#246;ty, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collecting+high-quality+pancreatic+tissue+for+experimental+study+from+organ+donors+with+signs+of+&#946;-cell+autoimmunity.">Collecting high-quality pancreatic tissue for experimental study from organ donors with signs of &#946;-cell autoimmunity.</a> Diabetes Metab. Res. Rev. 26, 585-592 (2010).</li><li>In't Veld, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+insulitis+in+adult+autoantibody-positive+organ+donors.">Screening for insulitis in adult autoantibody-positive organ donors.</a> Diabetes. 56, 2400-2404 (2007).</li><li>T&#246;ns, H. A., Terpstra, O. T., Bouwman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+human+pancreata+in+perspective+of+the+isolation+of+the+islets+of+langerhans.">Heterogeneity of human pancreata in perspective of the isolation of the islets of langerhans.</a> Transplant Proc. 40, 367-369 (2008).</li></ol>

이 절차의 목적은 여러 컬렉션 사이트 전반에 걸쳐 조화가 될 수있는 표준 췌장 처리를 정의하고 있으므로 다른 그룹에 의해 얻은 결과의 비교를 허용하는 것입니다. 절개 방법은 내부 - 지역 제트 연료의 파이프 뒤에 주요 췌장 영역의 주석에 대한 추가 단계와 일반 외과 병리학 관행에 따라 달라집니다. biospecimen 처리 방법의 표준화와 같은 국립 암 연구소 6 등 국가 biobanking 기관 biospecime...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 댓글 </td></tr><tr><td> 22 블레이드와 scalpels 포함한 절개 악기 </td><td> 여러 </td><td> 여러 </td><td></td></tr><tr><td> 원심 분리기 튜브 (15 및 50 ML) </td><td> 피셔 과학 </td><td> 05-539-5, 430,828 </td><td> 불모의 </td></tr><tr><td> Cryotubes (1.8 ml) 쇼핑 </td><td> VWR 북미 </td><td> 89004-300 </td><td> 멸균, 바코드 선택 </td></tr><tr><td> RNAlater </td><td> Ambion </td><td> AM7021 </td><td></td></tr><tr><td> 외과 병리학 잉크 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 카세트 </td><td> 메르세데스 의료 </td><td> CAS ECO109 </td><td></td></tr><tr><td> 일중립 0 % 포르말린 버퍼 </td><td> 피셔 과학 </td><td> 23-245-685 </td><td></td></tr><tr><td> 10월 냉동 미디어 </td><td> TissueTek </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> 금형 </td><td> ThermoScientific </td><td> 58,952 </td><td> 다양한 크기 </td></tr><tr><td> 이소펜탄 </td><td> 피셔 과학 </td><td> O3551-4 </td><td> 10월 추워서 목욕 </td></tr><tr><td> 드라이 아이스 </td><td></td><td></td><td> 10월 추워서 목욕 </td></tr><tr><td> Dewar 플라스크에 액체 질소 </td><td></td><td></td><td> 냉동 cryovials 낚아채 </td></tr><tr><td> 세포 배양 접시 (100mm) </td><td> 코닝 </td><td> 430,167 </td><td> 불모의 </td></tr><tr><td> Hyclone DMEF </td><td> ThermoScientific </td><td> SH30023.01 </td><td> 멸균 가게에 냉장, 글루타민 포함 </td></tr><tr> &lt;TD&gt; 태아 소 혈청 </td><td> Cellgro </td><td> 35-010 - 이력서 </td><td> 멸균, 냉동 저장 aliquots </td></tr><tr><td> 페니실린 / 스트렙토 마이신 / Antifungal </td><td> GIBCO </td><td> 15240-062 </td><td> 멸균, 냉동 저장 aliquots </td></tr><tr><td> 9 파라핀을 입력 </td><td> 리차드 - 앨런 과학 </td><td> 8337 </td><td></td></tr><tr><td> 1X D-PBS </td><td> GIBCO </td><td> 14190-144 </td><td> 불모의 </td></tr><tr><td> 16 % Paraformaldehyde </td><td> EM 과학 </td><td> 15,710 </td><td> 신선 저장소가 냉장하십시오 </td></tr><tr><td> 8 % 글루 타 알데히드 </td><td> EM 과학 </td><td> 16,019 </td><td> 신선 저장소가 냉장하십시오 </td></tr><tr><td> Biosafety 레벨 2 후드 </td><td> 여러 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 초저 냉동고 </td><td> 여러 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 사쿠라 카세트 프린터 </td><td> 사쿠라 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 사쿠라 VIP300 </td><td> 사쿠라 </td><td></td><td> 자동 파라핀 프로세서 </td></tr><tr><td> 파라핀의 임베딩 역 </td><td> ThermoFisher </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> 표 1. 특정 시약 및 장비.

collection protocol for human pancreas

이러한 해부 및 샘플링 절차는 시체 같은 장기 기증자에게서 채취한 췌장의 준비을 표준화하기 위해 당뇨병 (nPOD) 프로그램과 췌장 장기 기증자에 대한 네트워크를 위해 개발되었습니다. 췌장은 가로 축에 중간에 걸쳐 일련 가로 섹션에 다음 세 주요 영역 (머리, 몸, 꼬리)으로 나누어져 있습니다. 번갈아 섹션 고정 파라핀 및 신선한 냉동 블록 및 잔여 샘플에 사용되는가 DNA, RNA 또는 단백질 분리를 위해 함께 또는 RNAse 억제제없이도 스냅 냉동 시료 준비에 대한 다진있다. 췌장의 해부 절차의 전반적인 목표는 해부 학적 방향을 유지하면서 전체 췌장을 맛볼 것입니다. 섬 조성, 크기와 숫자의 관점에서 내분비 세포 이질은 쥐 islets 1로 비교해 인간 islets에 대해보고됩니다. 췌장의 머리에서 인간 islets의 대부분은 몸과 꼬리 영역은 인슐린 containin으로 구성되어 있습니다g의 β-세포의 낮은 비율이어서 글루카곤 함유 α-세포 및 δ-세포를 somatostatin 함유합니다. 췌장 폴리펩티드 함유 PP 전지 및 ghrelin 함유 엡실론 세포도 존재하지만, 작은 숫자입니다. 반대로, uncinate 지역은 주로 췌장 폴리펩티드 함유 PP 전지 2로 구성되어있다 islets가 포함되어 있습니다. 이러한 지역 섬 변형은 발달의 차이에서 발생합니다. 췌장 foregut과 위장과 십이지장, 지느러미 3 복부 엽 이동 및 퓨즈의 회전 후 복부와 지느러미 췌장 꽃봉오리에서 개발하고 있습니다. 복부 기억 상실증이 지느러미 엽은 장기 나머지 상승을 제공하면서 uncinate 과정을 포함한 머리의 후부 부분을 형성하고 있습니다. 지역 췌장 편차도 꼬리 지역은 1 형 당뇨병에서 선택적 위축을받은 다른 지역과 지느러미 엽 - 파생 부품에 비해 더 높은 섬 밀도를 갖는으로보고됩니다 <s최대&gt; 4,5. 추가 장기와 조직은 종종 장기 기증자로부터 복구 및 췌장 림프절, 비장 및 비 췌장 림프절을 포함합니다. 이러한 샘플은 cryopreserved 세포 분리의 추가와 췌장에 대한 이와 유사한 형식으로 회복됩니다. 근위 십이지장은 췌장에 포함된 경우, 십이지장 점막은 파라핀 및 냉동 블록과 다진 스냅 냉동 준비를 위해 수집됩니다.

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Collection Protocol for Human Pancreas

이 비디오는 여러 스토리지 형식으로 인간의 췌장을 처리를위한 해부 절차를 보여줍니다. 해부 학적 방향이 지역의 섬 조성 및 밀도의 정의를 허용하도록 췌장 영역에 걸쳐 유지됩니다.

인간의 췌장을위한 컬렉션 프로토콜

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

수술 표본에서 인간 췌장 섬의 레이저 Microdissection을위한 개선 된 프로토콜

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

연구

의학

Collection, Isolation, and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Samples

컬렉션, 격리, 인간 자궁 경부 샘플의 유세포 분석

Despite the public health importance of mucosal pathogens (including HIV), relatively little is known about mucosal immunity, particularly at the female ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

소설을 사용하여 땀 모니터링에 대한 자세한 프로토콜, 소형, 무선 장치

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

췌 장 이식 수정된 팔목 기술을 사용 하 여 마우스 모델

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

조직학 분석 및 대사 프로 파일링에 대 한 마우스 췌의 해 부

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Robotic Lateral Pancreaticojejunostomy for Chronic Pancreatitis

만성 췌장염에 대한 로봇 측면 췌장 췌장 절제술

Lateral pancreaticojejunostomy (LPJ) has shown good postoperative outcomes in patients with painful, morphine dependent, chronic pancreatitis (CP). The ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

췌장암복강경 급진좌 췌장절제술: 수술 전략 및 기술 비디오

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Robot-Assisted Kidney Transplantation

로봇 보조 신장 이식

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

췌장 인트라바이탈 이미징 창이 있는 뮤린 모델에서 췌장의 생체 내 세포 수준 시각화안정화

Direct in vivo cellular-resolution imaging of the pancreas in a live small animal model has been technically challenging. A recent intravital imaging ...

Collection, Expansion, and Differentiation of Primary Human Nasal Epithelial Cell Models for Quantification of Cilia Beat Frequency

섬모 박동 빈도의 정량화를 위한 1차 인간 비강 상피 세포 모델의 수집, 확장 및 분화

Measurements of cilia function (beat frequency, pattern) have been established as diagnostic tools for respiratory diseases such as primary ciliary ...