Name: collection protocol for human pancreas
Uploaded: 2012-05-23T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Collection Protocol for Human Pancreas at JoVE.com

Авторы благодарят доноров, семей и органов заготовительных организаций, участвующих в этом исследовании и Мария Мартино и Ирина Kusmartseva за экспертную помощь. Эта работа финансировалась по делам несовершеннолетних исследований диабета Foundation (MC-T., MA) в поддержку сети поджелудочной доноров органов с диабетом.

1. Настройка <ol><li> Этикетка кассеты для парафиновых блоков вручную с помощью карандаша или автоматически с помощью кассеты принтера. Включите доноров идентификатор (CaseID), образец типа, аликвоту количество, и любой дополнительный уникальный идентификатор (на примере листа, <a href="http://jove.co...

<ol>
	<li>Brissova, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+human+pancreatic+islet+architecture+and+composition+by+laser+scanning+confocal+microscopy.">Assessment of human pancreatic islet architecture and composition by laser scanning confocal microscopy.</a> J. Histochem. Cytochem. 53, 1087-1097 (2005).</li><li>Rahier, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pancreatic+polypeptide+cells+in+the+human+pancreas:+the+effects+of+age+and+diabetes.">The pancreatic polypeptide cells in the human pancreas: the effects of age and diabetes.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 56, 441-444 (1983).</li><li>Uchida, T., Takada, T., Ammori, B. J., Suda, K., Takahashi, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+reconstruction+of+the+ventral+and+dorsal+pancreas:+a+new+insight+into+anatomy+and+embryonic+development.">Three-dimensional reconstruction of the ventral and dorsal pancreas: a new insight into anatomy and embryonic development.</a> J. Hepatobiliary Pancreat. Surg. 6, 176-180 (1999).</li><li>Wittingen, J., Frey, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Islet+concentration+in+the+head,+body,+tail+and+uncinate+process+of+the+pancreas.">Islet concentration in the head, body, tail and uncinate process of the pancreas.</a> Ann. Surg. 179, 412-414 (1974).</li><li>Rahier, J., Goebbels, R., Henquin, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+composition+of+the+human+diabetic+pancreas.">Cellular composition of the human diabetic pancreas.</a> Diabetologia. 24, 366-371 (1983).</li><li>Vaught, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+NCI+perspective+on+creating+sustainable+biospecimen+resources.">An NCI perspective on creating sustainable biospecimen resources.</a> J. Natl. Cancer Inst. Monogr. 42, 1-7 (2011).</li><li>Gianani, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Initial+results+of+screening+of+nondiabetic+organ+donors+for+expression+of+islet+autoantibodies.">Initial results of screening of nondiabetic organ donors for expression of islet autoantibodies.</a> J. Clin. Endocrinol. Metab. 91, 1855-1861 (2006).</li><li>Tauriainen, S., Salmela, K., Rantala, I., Knip, M., Hy&#246;ty, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Collecting+high-quality+pancreatic+tissue+for+experimental+study+from+organ+donors+with+signs+of+&#946;-cell+autoimmunity.">Collecting high-quality pancreatic tissue for experimental study from organ donors with signs of &#946;-cell autoimmunity.</a> Diabetes Metab. Res. Rev. 26, 585-592 (2010).</li><li>In't Veld, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+for+insulitis+in+adult+autoantibody-positive+organ+donors.">Screening for insulitis in adult autoantibody-positive organ donors.</a> Diabetes. 56, 2400-2404 (2007).</li><li>T&#246;ns, H. A., Terpstra, O. T., Bouwman, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterogeneity+of+human+pancreata+in+perspective+of+the+isolation+of+the+islets+of+langerhans.">Heterogeneity of human pancreata in perspective of the isolation of the islets of langerhans.</a> Transplant Proc. 40, 367-369 (2008).</li></ol>

Целью этой процедуры является определение стандартной обработки поджелудочной железы, которые могут быть согласованы на нескольких сайтах сбор и таким образом позволяет сравнение результатов, полученных разными группами. Вскрытие метод основан на стандартной хирургической патолог...

<table border="1"><tbody><tr><td> Название реагента </td><td> Компания </td><td> Номер по каталогу </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td> Вскрытие инструментов, включая скальпели с 22 лезвиями </td><td> Различный </td><td> Различный </td><td></td></tr><tr><td> Пробирки центрифужные (15 и 50 мл) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 05-539-5, 430828 </td><td> Стерильный </td></tr><tr><td> Cryotubes (1,8 мл) </td><td> VWR Северной Америке </td><td> 89004-300 </td><td> Стерильные, штрих-коды дополнительно </td></tr><tr><td> RNAlater </td><td> Ambion </td><td> AM7021 </td><td></td></tr><tr><td> Хирургические патологии Ink </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Кассеты </td><td> Mercedes медицинской </td><td> CAS ECO109 </td><td></td></tr><tr><td> 10% нейтральный буферный формалин </td><td> Fisher Scientific </td><td> 23-245-685 </td><td></td></tr><tr><td> СМИ октября замораживания </td><td> TissueTek </td><td> 4583 </td><td></td></tr><tr><td> Пресс-формы </td><td> ThermoScientific </td><td> 58952 </td><td> Различные размеры </td></tr><tr><td> Изопентан </td><td> Fisher Scientific </td><td> O3551-4 </td><td> Октябрь охлаждения ванны </td></tr><tr><td> Сухой лед </td><td></td><td></td><td> Октябрь охлаждения ванны </td></tr><tr><td> Жидкий азот в сосуд Дьюара </td><td></td><td></td><td> Привязать замораживание криопробирки </td></tr><tr><td> Клеточные культуры блюдо (100 мм) </td><td> Гранулирование </td><td> 430167 </td><td> Стерильный </td></tr><tr><td> Hyclone DMEF </td><td> ThermoScientific </td><td> SH30023.01 </td><td> Стерильные, хранения охлажденного, глютамин включен </td></tr><tr> &lt;TD&gt; фетальной телячьей сыворотки </td><td> CellGro </td><td> 35-010-CV </td><td> Стерильные, хранения замороженных аликвоты </td></tr><tr><td> Пенициллина / стрептомицина / Противогрибковые </td><td> GIBCO </td><td> 15240-062 </td><td> Стерильные, хранения замороженных аликвоты </td></tr><tr><td> Тип 9 парафиновые </td><td> Ричард Аллан научно- </td><td> 8337 </td><td></td></tr><tr><td> 1X D-PBS </td><td> GIBCO </td><td> 14190-144 </td><td> Стерильный </td></tr><tr><td> 16% параформальдегид </td><td> EM наук </td><td> 15710 </td><td> Сделайте свежие, охлажденные магазин </td></tr><tr><td> 8% глутаральдегида </td><td> EM наук </td><td> 16019 </td><td> Сделайте свежие, охлажденные магазин </td></tr><tr><td> 2-го уровня биобезопасности капот </td><td> Различный </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Ультра-низкие морозильник </td><td> Различный </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Сакура принтер кассеты </td><td> Сакура </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Сакура VIP300 </td><td> Сакура </td><td></td><td> Автоматический процессор парафин </td></tr><tr><td> Внедрение станции Парафин </td><td> ThermoFisher </td><td></td><td></td></tr></tbody></table> Таблица 1. Специальные реагенты и оборудование.

collection protocol for human pancreas

Это рассечение и процедуры отбора образцов, был разработан для сети поджелудочной доноров органов с диабетом (nPOD) в рамках программы стандартизации подготовки поджелудочной железы оправился от трупных доноров органов. Поджелудочная железа состоит из 3 основных регионов (голова, тело, хвост), а затем серийных поперечных срезов всей медиальной к поперечной оси. Переменный разделы предназначены для фиксированного парафина и свежезамороженной блоков и остатков образцов фарш для оснастки замороженных препаратов образца, с или без РНКазы ингибиторов ДНК, РНК или белка изоляции. Основная цель процедуры вскрытия поджелудочной железы, чтобы попробовать все поджелудочной железы при сохранении анатомической ориентации. Эндокринные клетки неоднородность с точки зрения островок состав, размер, и количество сообщается на человека островков по сравнению с грызунами островки 1. Большинство человеческих островков из поджелудочной железы головы, тела и хвоста регионов состоят из инсулина containinг β-клеток, затем нижние пропорции глюкагон содержащие α-клеток и соматостатин-содержащие δ-клетками. Панкреатический полипептид содержащих ПП клетки и грелина содержащих клетки эпсилон также присутствуют, но в небольших количествах. В отличие от крючковатыми область содержит островков, которые в основном состоят из панкреатический полипептид, содержащий клетки PP 2. Эти региональные различия островок возникают развития различий. Поджелудочная железа развивается из брюшной и спинной поджелудочной почки в кишки и после поворота желудка и двенадцатиперстной кишки, брюшной движется доли и сливается с спинной 3. Вентральной доли является задняя часть головы, включая крючковатыми процесса, а спинной доли приводит к остальной части органа. Региональные изменения поджелудочной железы также сообщил, с хвостом области, имеющие высшее островок плотность по сравнению с другими регионами и спинной доли производные компоненты проходят выборочный атрофии сахарным диабетом 1 типа <sдо&gt; 4,5. Дополнительная органов и тканей часто оправился от доноров органов и включать поджелудочной железы лимфатических узлов, селезенки и поджелудочной железы, не лимфатических узлов. Эти образцы будут восстановлены с подобными форматами, как и для поджелудочной железы с добавлением изоляции криоконсервированных клеток. При проксимальной части двенадцатиперстной кишки входит поджелудочной железы, слизистой оболочки двенадцатиперстной кишки могут быть собраны для парафиновых и замороженных блоков и оснастки фарш замороженные препараты.

Watch this Scientific Journal Video about Collection Protocol for Human Pancreas at JoVE.com

Collection Protocol for Human Pancreas

В этом видеоролике показано вскрытие процедуры для обработки поджелудочной железы человека в различных форматах хранения. Анатомические ориентация сохраняется в течение поджелудочной регионов позволяют определить состав региональных островок и плотности.

Коллекция протокол для поджелудочной железы человека

This dissection and sampling procedure was developed for the Network for Pancreatic Organ Donors with Diabetes (nPOD) program to standardize preparation ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Improved Protocol For Laser Microdissection Of Human Pancreatic Islets From Surgical Specimens

Улучшенный протокол для лазерных микродиссекции человека панкреатических островков от хирургических образцах

Laser microdissection (LMD) is a technique that allows the recovery of selected cells and tissues from minute amounts of parenchyma 1,2. The dissected ...

Collection, Isolation, and Flow Cytometric Analysis of Human Endocervical Samples

Коллекция, Изоляция и проточной цитометрии анализа человеческой Endocervical образцов

Despite the public health importance of mucosal pathogens (including HIV), relatively little is known about mucosal immunity, particularly at the female ...

A Detailed Protocol for Perspiration Monitoring Using a Novel, Small, Wireless Device

Подробный протокол потоотделения мониторинга с использованием нового, Малый, беспроводное устройство

Perspiration monitoring can be utilized for the detection of certain diseases, such as thermoregulation and mental disorders, particularly when the ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Модель мыши для трансплантации поджелудочной железы с помощью модифицированных манжеты

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Dissection of the Mouse Pancreas for Histological Analysis and Metabolic Profiling

Рассечение поджелудочной железы мыши для гистологического анализа и метаболические профили

We have been investigating the pancreas specific transcription factor, 1a cre-recombinase; lox-stop-lox- Kristen rat sarcoma, glycine to aspartic acid at ...

Robotic Lateral Pancreaticojejunostomy for Chronic Pancreatitis

Роботизированная боковая панкреатикиджиджунозтомия для хронического панкреатита

Lateral pancreaticojejunostomy (LPJ) has shown good postoperative outcomes in patients with painful, morphine dependent, chronic pancreatitis (CP). The ...

Laparoscopic Radical Left Pancreatectomy for Pancreatic Cancer: Surgical Strategy and Technique Video

Лапароскопическая радикальная левая пантомиика для рака поджелудочной железы: Хирургическая стратегия и техника Видео

Radical resection margins, resection of Gerota&#8217;s (perirenal) fascia, and adequate lymph node dissection are crucial for an adequate oncological ...

Robot-Assisted Kidney Transplantation

Роботизированная трансплантация почки

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

Stabilized Longitudinal In Vivo Cellular-Level Visualization of the Pancreas in a Murine Model with a Pancreatic Intravital Imaging Window

Стабилизированная продольная визуализация поджелудочной железы in vivo на клеточном уровне с мышиной моделью с окном приживной визуализации поджелудочной железы

Direct in vivo cellular-resolution imaging of the pancreas in a live small animal model has been technically challenging. A recent intravital imaging ...

Collection, Expansion, and Differentiation of Primary Human Nasal Epithelial Cell Models for Quantification of Cilia Beat Frequency

Сбор, расширение и дифференциация первичных моделей эпителиальных клеток носа человека для количественной оценки частоты биения ресничек

Measurements of cilia function (beat frequency, pattern) have been established as diagnostic tools for respiratory diseases such as primary ciliary ...