Name: analysis of single-cell gene transcription by rna fluorescent in situ hybridization (fish)
Uploaded: 2012-10-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH at JoVE.com

فإن الكتاب أود أن أشكر مايكل Alifrangis وAbildtrup العلا للالتنميط الجيني من الطفيليات وهولم كريستينا للمساعدة التقنية الممتازة. وقد تم تمويل هذا العمل من قبل معهد هوارد هيوز الطبي (منحة 55005511)، ومؤسسة وندبيك (R9-A840 منحة) ومؤسسة نيلز بوهر.

1. جيل من تبدي الكريات الحمر المصابة مختارة فرشلي لهذا الفحص، ويتم الحصول على أفضل النتائج عند استخدام الثقافات اختيار طازجة للتعبير سطح PfEMP1 البروتين. في هذه التجربة سيما P. 3D7 وقد تم اختيار النسب المنجلية باستخدام الاجسا?...

<ol>
	<li>Joergensen, L., Bengtsson, D. C., Bengtsson, A., Ronander, E., Berger, S. S., Turner, L., Dalgaard, M. B., Cham, G. K., Victor, M. E., Lavstsen, T., Theander, T. G., Arnot, D. E., Jensen, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+co-expression+of+two+different+PfEMP1+antigens+on+single+Plasmodium+falciparum-infected+erythrocytes+facilitates+binding+to+ICAM1+and+PECAM1.">Surface co-expression of two different PfEMP1 antigens on single Plasmodium falciparum-infected erythrocytes facilitates binding to ICAM1 and PECAM1.</a> PLoS Pathog. 2, 1001083 (2010).</li><li>Pinaud, R., Mello, C. V., Velho, T. A., Wynne, R. D., Tremere, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+two+mRNA+species+at+single-cell+resolution+by+double-fluorescence+in+situ+hybridization.">Detection of two mRNA species at single-cell resolution by double-fluorescence in situ hybridization.</a> Nat. Protoc. 3, 1370-1379 (2008).</li><li>Cheeseborough, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> District Laboratory Practice in Tropical Countries. , (2006).</li><li>Brolin, K. J., Ribacke, U., Nilsson, S., Ankarklev, J., Moll, K., Wahlgren, M., Chen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+transcription+of+duplicated+var2csa+gene+copies+in+individual+Plasmodium+falciparum+parasites.">Simultaneous transcription of duplicated var2csa gene copies in individual Plasmodium falciparum parasites.</a> Genome Biol. 10, R117 (2009).</li><li>Epp, C., Li, F., Howitt, C. A., Chookajorn, T., Deitsch, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromatin+associated+sense+and+antisense+noncoding+RNAs+are+transcribed+from+the+var+gene+family+of+virulence+genes+of+the+malaria+parasite+Plasmodium+falciparum.">Chromatin associated sense and antisense noncoding RNAs are transcribed from the var gene family of virulence genes of the malaria parasite Plasmodium falciparum.</a> RNA. 15, 116-127 (2009).</li><li>Freitas-Junior, L. H., Hernandez-Rivas, R., Ralph, S. A., Montiel-Condado, D., Ruvalcaba-Salazar, O. K., Rojas-Meza, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Telomeric+heterochromatin+propagation+and+histone+acetylation+control+mutually+exclusive+expression+of+antigenic+variation+genes+in+malaria+parasites.">Telomeric heterochromatin propagation and histone acetylation control mutually exclusive expression of antigenic variation genes in malaria parasites.</a> Cell. 121, 25-36 (2005).</li><li>Obernosterer, G., Martinez, J., Alenius, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locked+nucleic+acid-based+in+situ+detection+of+microRNAs+in+mouse+tissue+sections.">Locked nucleic acid-based in situ detection of microRNAs in mouse tissue sections.</a> Nature Protoc. 2, 1508-1514 (2007).</li><li>Li, F., Sonbuchner, L., Kyes, S. A., Epp, C., Deitsch, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nuclear+non-coding+RNA+are+transcribed+from+the+centromeres+of+Plasmodium+falciparum+and+are+associated+with+centromeric+chromatin.">Nuclear non-coding RNA are transcribed from the centromeres of Plasmodium falciparum and are associated with centromeric chromatin.</a> J. Biol. Chem. 283, 5692-5698 (2008).</li><li>Thompson, J., Sinden, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+Pbs21+mRNA+during+sexual+development+of+Plasmodium+berghei.">In situ detection of Pbs21 mRNA during sexual development of Plasmodium berghei.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 68, 189-196 (1994).</li><li>Thompson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+RNA+in+blood-+and+mosquito-stage+malaria+parasites.">In situ detection of RNA in blood- and mosquito-stage malaria parasites.</a> Methods Mole Med. 72, 225-235 (2002).</li><li>Arnot, D. E., Ronander, E., Bengtsson, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+progression+of+the+intra-erythrocytic+cell+cycle+of+Plasmodium+falciparum+and+the+role+of+the+centriolar+plaques+in+asynchronous+mitotic+division+during+schizogony.">The progression of the intra-erythrocytic cell cycle of Plasmodium falciparum and the role of the centriolar plaques in asynchronous mitotic division during schizogony.</a> Int. J. Parasitol. 41, 71-80 (2011).</li><li>Osborne, C. S., Chakalova, L., Brown, K. E., Carter, D., Horton, A., Debrand, E., Goyenechea, B., Mitchell, J. A., Lopes, S., Reik, W., Fraser, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+genes+dynamically+colocalize+to+shared+sites+of+ongoing+transcription.">Active genes dynamically colocalize to shared sites of ongoing transcription.</a> Nat. Genet. 36, 1065-1071 (2004).</li></ol>

تحليل FISH RNA، وعلى النقيض من الأساليب مثل النشاف الشمالية وRT PCR-، يسمح التمييز النصوص مرنا محددة على المستوى خلية واحدة. هذا يجعل من الممكن التمييز بين الخلايا النشطة وغير النشطة transcriptionally، في هذا المثال، P. البروتوزوا الطفيلية المنجلية داخل خلايا الدم الحمرا...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> كتالوج رقم </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> حمض الخليك </td><td> سيغما / الدريتش </td><td> 338826-100ML </td><td></td></tr><tr><td> Albumax وسائل الإعلام: RPMI حل الجلوتامين 1640 </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 500 مل RPMI 1640 محلول 5 مل الجلوتامين </td></tr><tr><td> Albumax وسائل الإعلام: جنتاميسين سلفات Albumax-الحل </td><td> Lonza </td><td> BE02-012E </td><td> جنتاميسين سلفات 2.5 مل 50 مل Albumax-الحل </td></tr><tr><td> Albumax-الحل: الهيبوزانتين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> H9377 </td><td> 0،8 ز الهيبوزانتين </td></tr><tr><td> Albumax-الحل: AlbuMAX II </td><td> أناnvitrogen </td><td> 11021-037 </td><td> 200 غ Albumax </td></tr><tr><td> Albumax-الحل: RPMI 1640 </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 4 لتر RPMI 1640 حل مع المغناطيس في حد أقصى. 50 ° C. تصفية تعقيم وتخزين في -20 درجة مئوية في مأخوذة. </td></tr><tr><td> Amberlite </td><td> سيجما </td><td> A5710-110G </td><td> الراتنج لdeionize الفورماميد. </td></tr><tr><td> مكافحة البيوتين البيروكسيداز PAB الماعز المتقارنة </td><td> Calbiochem </td><td> 203206 </td><td></td></tr><tr><td> المضادة للحفر الأجسام المضادة </td><td> نوفوس البيولوجية </td><td> NB100-41330 </td><td></td></tr><tr><td> مكافحة تتلاشى مع كاشف دابي </td><td> إينفيتروجن </td><td> P36931 </td><td> وسائل الإعلام لديها تركيب لعلاج لمدة 24 ساعة قبل أن ينتزع الشريحة تماما. </td></tr><tr><td> البيوتين RNA وصفها ميكس </td><td&gt; روش </td><td> 11685597910 </td><td></td></tr><tr><td> كاميرا رقمية </td><td> نيكون الرقمية DC-F11 البصر </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Coverslips </td><td> منزل-جلاسر </td><td> 631-1570 </td><td></td></tr><tr><td> ثقافة قارورة 25 سم سطح Nunclon 2 </td><td> نونك </td><td> 156340 </td><td></td></tr><tr><td> DEPC </td><td> Fluka / سيجما </td><td> 32490-100ML </td><td> 1 مل DEPC في الماء 1000 مل deinonized. إضافة شريط ضجة ويحرك المزيج لمدة 12 ساعة. الأوتوكلاف لمدة 30 دقيقة. </td></tr><tr><td> كاميرا رقمية </td><td> نيكون الرقمية DC-F11 البصر </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Dynabeads البروتين </td><td> إينفيتروجن </td><td> 10002D </td><td></td></tr><tr><td> DynaMaq-15 المغناطيس </td><td> إينفيتروجن </td><td> 123-01D </td><td></td></tr><tr><td> الفورماميد bioultra 99٪ </td><td> Fluka/ سيجما </td><td> 47671-1L-F </td><td> منزوع الأيونات الفورماميد: 5 غ من راتنج التبادل الأيوني لكل 100 مل من الفورماميد. يحرك المزيج 30 دقيقة. من خلال ورقة ترشيح WHATMAN. </td></tr><tr><td> . الجيلاتين 0 حل 75٪: الجيلاتين </td><td> سيغما الدريخ </td><td> G2500 </td><td> 3،75 ز الجيلاتين في 500 مل من RPMI 1640. الحرارة إلى 56 ° C إلى حل. تصفية تعقيم 56 ° C. عندما المحل في -20 درجة مئوية في مأخوذة. </td></tr><tr><td> . الجيلاتين 0 حل 75٪: 1640 RPMI </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 3،75 ز الجيلاتين في 500 مل من RPMI 1640. الحرارة إلى 56 ° C إلى حل. تصفية تعقيم 56 ° C. عندما المحل في -20 درجة مئوية في مأخوذة. </td></tr><tr><td> الجلوتامين الحل: L-glutamin </td><td> سيغما الدريخ </td><td> G3126 </td><td> الجلوتامين L 14،6 غرام في 500 مل من كلوريد الصوديوم 0،9٪. حل وتصفية قterilize وتخزينها في -20 درجة مئوية في مأخوذة. </td></tr><tr><td> الجلوتامين الحل: حمض الهيدروكلوريك </td><td> سيجما </td><td> H1758 </td><td> الجلوتامين L 14،6 غرام في 500 مل من كلوريد الصوديوم 0،9٪. حل، تصفية تعقيم وتخزينها في -20 درجة مئوية في مأخوذة. </td></tr><tr><td> حل التهجين: الفورماميد بيو جدا 99٪ SSC 20X </td><td> Fluka / سيجما </td><td> 47671-1L-F </td><td> المجموع 20 مل، والحفاظ على تجميد في -20 ° C مأخوذة في 10 مل الفورماميد منزوع الأيونات </td></tr><tr><td> حل التهجين: التركيز على Denhardt 50X </td><td> سيجما </td><td> D2532 </td><td> 5ml 20xSSC </td></tr><tr><td> حل التهجين: كاشف الخميرة حجب tRNARoche </td><td> سيجما </td><td> R-6750 </td><td> 2 مل 50X Denhardt في 250 ميكرولتر 20 ملغ لكل مل الخميرة الحمض الريبي النووي النقال </td></tr><tr><td><sترونج&gt; حل التهجين: سمك السلمون الحيوانات المنوية DNA </td><td> Fluka / سيجما </td><td> 31149-106GF </td><td> 0.4g روش حظر كاشف 1 مل من 10 ملغ في سمك السلمون مل DNA الحيوانات المنوية (الحرج: تفسد spermDNA السلمون في 96 درجة مئوية لمدة 5 دقائق قبل إضافة إلى حل التهجين) </td></tr><tr><td> Hybridizer ThermoStar 100 HC4 </td><td> Quantifoil الآلات محدودة </td><td> 1004-0011 </td><td> ويمكن الاستعاضة عن الفرن التهجين التهجين وغرف ريبونوكلياز مجانا مبطن بالماء DEPC. </td></tr><tr><td> الغمر النفط UV شفافة مضان مجانا </td><td> سيجما </td><td> 10976-1EA </td><td></td></tr><tr><td> المناعي أو مبائر المجهر </td><td> نيكون D-الكسوف TE2000C </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Nailpolish </td><td> متوفرة في أي صيدلية </td><td></td><td></td></tr><tr><td> PBS 20X: كلوريد الصوديوم بوكل نا 2 HPO 4 × 2H 2 O KH 2 PO 4 DEPC منزوع الأيونات H 2 O </td><td></td><td></td><td> Ajust درجة الحموضة إلى 7.4 160 غ 4 غرام 23 ز 4 غرام 1 لتر </td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد 4٪ </td><td> Fluka / chemika </td><td> 76240 </td><td> PFA 4 غرام في PBS مل 80 / DEPC. الحرارة إلى 65 درجة مئوية حتى يذوب PFA. إضافة 20 مل PBS، تسمح الحل لتبرد. ضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7.4. تصفيتها. متجر في مأخوذة في -20 ° C. </td></tr><tr><td> بارافورمالدهيد 4٪ / حامض الخليك 5٪ </td><td></td><td></td><td> 950 + 50 ميكرولتر paraformaldhyde حمض الخليك ميكرولتر </td></tr><tr><td> البيبسين </td><td> سيغما / الدريتش </td><td> P7000 </td><td></td></tr><tr><td> البيروكسيديز، مترافق المضادة للالبيوتين </td><td> Calbiochem </td><td> 203206 </td><td></td></tr><tr><td> RBC غسل وسائل الإعلام: RPMI حل الجلوتامين 1640 </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 500 مل RPMI 1640 الجلوتامين 5 مل الحل </td></tr><tr><td> RBC غسل وسائل الإعلام: جنتاميسين سلفات </td><td> Lonza </td><td> BE02-012E </td><td> جنتاميسين سلفات 2.5 مل </td></tr><tr><td> ريبونوكلياز </td><td> سيغما / الدريتش </td><td></td><td> جعل 10 ملغ / مل محلول المخزون. </td></tr><tr><td> ريبونوكلياز الحرة أنبوب 1.5 مل </td><td> Ambion </td><td> AM12450 </td><td></td></tr><tr><td> ريبونوكلياز زاب </td><td> Ambion </td><td> AM9780 </td><td></td></tr><tr><td> الشرائح 4 آبار 11MM </td><td> الحرارية العلمية </td><td> MENZXER306W </td><td></td></tr><tr><td> SSC 20X: كلوريد الصوديوم </td><td> سيغما / شركةdrich </td><td> S9625 </td><td> 3 M كلوريد الصوديوم (175 غرام / لتر) 0.3M 3 سترات الصوديوم X H 2 O (88 غرام / لتر) ضبط درجة الحموضة إلى 7.0 مع حمض الهيدروكلوريك 1M </td></tr><tr><td> SSC 20X: الصوديوم سترات يذوى </td><td> سيغما / الدريتش </td><td> W302600 </td><td> 3 M كلوريد الصوديوم (175 غرام / لتر) 0.3M 3 سترات الصوديوم X H 2 O (88 غرام / لتر) ضبط درجة الحموضة إلى 7.0 مع حمض الهيدروكلوريك 1M </td></tr><tr><td> SSPE 20X: كلوريد الصوديوم </td><td> سيغما / الدريتش </td><td> S9625 </td><td> 175،3 ز كلوريد الصوديوم </td></tr><tr><td> SSPE 20X: ناه 2 ص 4 </td><td> سيغما / الدريتش </td><td> S0751 </td><td> 27،6 ز ناه 2 PO 4. </td></tr><tr><td> SSPE 20X: 4 EDTA مسحوق </td><td></td><td></td><td> 9،4 ز EDTA مسحوق إضافة الماء DEPC، وضبط درجة الحموضة 7.4. السياراتالعصا لمدة 20 دقيقة </td></tr><tr><td> TNB العازلة: العازلة TNT </td><td></td><td></td><td> 10 مل العازلة TNT </td></tr><tr><td> TNB العازلة: كاشف الحظر </td><td></td><td></td><td> 0.05g كاشف الحظر حل كاشف حظر، تسخين حل لC ° 60 لمدة ساعة مع التحريك. مخزن في -20 ° C. (مشتقة من إلمر بيركن TSA-البروتوكول.) </td></tr><tr><td> TNT العازلة: تريس / حمض الهيدروكلوريك </td><td> سيجما </td><td> T1503 </td><td> 1M تريس / حمض الهيدروكلوريك، ودرجة الحموضة 8.0 </td></tr><tr><td> TNT العازلة: كلوريد الصوديوم </td><td> سيغما الدريتش </td><td> S9625 </td><td> 100 مل </td></tr><tr><td> TNT العازلة: Tween20 </td><td> سيجما </td><td> 93773 </td><td> 5 M كلوريد الصوديوم 30 مل 1 مل DEPC DH 2 O869 مل ضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7.5 في درجة حرارة الغرفة. (مشتقة من إلمر بيركن TSA-البروتوكول.) </td></tr><tr><td> بالإضافة إلى TSA Cyanine3 / فلوريسئين النظام </td><td> بيركن إلمر </td><td> NEL753000IKT </td><td> قراءة البروتوكول من نظام TSA زائد الإسفار لوح بعناية قبل بدء التجربة. </td></tr><tr><td> 14 مل أنابيب معقمة </td><td> Almeco - CM LAB نقاط و </td><td> 91016 </td><td></td></tr></tbody></table>

analysis of single-cell gene transcription by rna fluorescent in situ hybridization (fish)

وتوسطت التصاق الكريات الحمراء المنجلية من المصابين (IE) لمستقبلات البطانية الإنسان خلال الإصابة بمرض الملاريا بنسبة التعبير عن المتغيرات البروتين المشفرة بواسطة PfEMP1 الجينات فار. وفرداني P. المنجلية الجينوم تؤوي ما يقرب من 60 جينات مختلفة من فار الذي يعتقد الشخص الوحيد الذي كتب في الخلية في وقت الدم خلال المرحلة العدوى. كيف يتم تحقيق مثل هذه اللائحة يستبعد بعضها بعضا من النسخ الجيني فار غير واضح، كما هو تحديد الجينات الفردية أو فار مجموعات فرعية من الجينات المرتبطة فار المستقبلات المختلفة، وذلك من الربط الفرق على نتائج السريرية لP. المنجلية العدوى. مؤخرا، تم استدعاء النموذج النسخ يستبعد بعضها بعضا في شك من المقايسات النسخ يعتمد على الفردية P. تحديد نص في المنجلية واحد INFخلايا الدم الحمراء ected باستخدام RNA الفلورسنت في الموقع التهجين (FISH) تحليل النسخ الجيني فار من الطفيل في نوى الفردية P. IE المنجلية 1. هنا، نقدم بروتوكول مفصلة لتنفيذ منهجية RNA-FISH لتحليل النسخ الجيني فار في نوى وحيد من P. المنجلية المصابة الكريات الحمراء الإنسان. وتستند هذه الطريقة على استخدام digoxigenin والبيوتين التي تحمل علامات مضاد تحقيقات RNA باستخدام TSA زائد الإسفار لوح النظام 2 (بيركن إلمر)، P. التحليلات المجهرية وتحديد طازجة IE المنجلية. يمكن استخدام أسلوب التهجين في الموقع لمراقبة النسخ وتنظيم مجموعة متنوعة من الجينات التي أعرب عنها خلال مراحل مختلفة من P. المنجلية دورة الحياة، وقابلة للتكيف مع الأنواع الأخرى طفيل الملاريا وغيرها من الكائنات وأنواع الخلايا.

الشكل 1 يوضح المخطط الانسيابي من الخطوات الرئيسية والمدة الزمنية للمنهجية FISH RNA. هذه سلسلة من الصور ممثل بشكل جيد والحفاظ سيئة الملون التجارب FISH مرنا باستخدام واحد P. وتظهر المنجلية IE في الشكل 2. هذه الخ?...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH at JoVE.com

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

فلوري<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH) لتحديد النصوص مرنا في الخلايا الفردية يسمح تحليل النشاط جينائي مثل النسخ في وقت واحد من أكثر من عضو واحد في<em&gt; فار</em&gt; الأسرة متعددة الجينات في<em&gt; المتصورة المنجلية</em&gt; الكريات الحمراء المصابة<sup&gt; 1</sup&gt;. أسلوب قابل للتكيف ويمكن استخدامها على أنواع مختلفة من الخلايا والجينات والكائنات الحية.

تحليل النسخ الجيني وحيدة الخلية التي كتبها نيون RNA<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Research

JoVE Journal

Biology

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

الزرد الجامع جبل الرفيع قرار مزدوج نيون في الموقع التهجين

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

مضان في الموقع التهجين (FISH) البروتوكول في الحيوانات المنوية البشرية

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

In vitro Transcription and Capping of Gaussia Luciferase mRNA Followed by HeLa Cell Transfection

In vitro Transcription and Capping of Gaussia Luciferase mRNA Followed by HeLa Cell Transfection

في المختبر، والسد النسخ من مرنا luciferase المراسل Gaussia تلاه ترنسفكأيشن الخلية هيلا

In vitro transcription is the synthesis of RNA transcripts by RNA polymerase from a linear DNA template containing the corresponding promoter sequence ...

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

المشعة في الموقع التهجين، لتحديد متنوعة أنماط التعبير الجيني في الأنسجة

Knowing the timing, level, cellular localization, and cell type that a gene is expressed in contributes to our understanding of the function of the gene. ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

الكشف عن الحمض النووي الريبي الفيروسي بواسطة الإسفار<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين (FISH)

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

التوقيت كروموسوم النسخ المتماثل جنبا إلى جنب مع نيون<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times during S phase, following a temporal replication program. The ...

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

كله جبل RNA نيون<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين من<em&gt; ذبابة الفاكهة</em&gt; الأجنة

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA<em&gt; في الموقع</em&gt; التهجين في الأجنة جبل الجامعة وعلم الأنسجة الخلية مقتبس عن Elasmobranchs البحرية

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

التصور والتحليل من جزيئات الرنا المرسال عن طريق الإسفار<em&gt; في الموضع</em&gt; التهجين في<em&gt; خميرة الخباز</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Analysis of Global RNA Synthesis at the Single Cell Level following Hypoxia

تحليل الحمض النووي الريبي العالمي التجميعي على مستوى خلية واحدة نقص الأكسجة التالي

Hypoxia or lowering of the oxygen availability is involved in many physiological and pathological processes. At the molecular level, cells initiate a ...