Name: analysis of single-cell gene transcription by rna fluorescent in situ hybridization (fish)
Uploaded: 2012-10-07T14:00:00
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著者らは、優れた技術支援のために寄生虫やクリスティーナ·ホルムの遺伝子型のマイケルAlifrangisとウラAbildtrupに感謝したいと思います。この作品はハワードヒューズ医学研究所（助成55005511）、ルンドベック財団（助成R9-A840）およびニールス·ボーア財団によって資金を供給された。

1。たての選択感染赤血球の生成 PfEMP1タンパク質の表面発現のために新たに選択したカルチャを使用しているときは、このアッセイのために、最良の結果が得られる。この特定の実験3D7 Pにおける熱帯熱マラリア原虫の系統は、前述の1と特異的な抗体を用いて選択した。 1日目<ol><li> Pから満員の血液細胞の収穫を200μl ?...

<ol>
	<li>Joergensen, L., Bengtsson, D. C., Bengtsson, A., Ronander, E., Berger, S. S., Turner, L., Dalgaard, M. B., Cham, G. K., Victor, M. E., Lavstsen, T., Theander, T. G., Arnot, D. E., Jensen, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+co-expression+of+two+different+PfEMP1+antigens+on+single+Plasmodium+falciparum-infected+erythrocytes+facilitates+binding+to+ICAM1+and+PECAM1.">Surface co-expression of two different PfEMP1 antigens on single Plasmodium falciparum-infected erythrocytes facilitates binding to ICAM1 and PECAM1.</a> PLoS Pathog. 2, 1001083 (2010).</li><li>Pinaud, R., Mello, C. V., Velho, T. A., Wynne, R. D., Tremere, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+two+mRNA+species+at+single-cell+resolution+by+double-fluorescence+in+situ+hybridization.">Detection of two mRNA species at single-cell resolution by double-fluorescence in situ hybridization.</a> Nat. Protoc. 3, 1370-1379 (2008).</li><li>Cheeseborough, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> District Laboratory Practice in Tropical Countries. , (2006).</li><li>Brolin, K. J., Ribacke, U., Nilsson, S., Ankarklev, J., Moll, K., Wahlgren, M., Chen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+transcription+of+duplicated+var2csa+gene+copies+in+individual+Plasmodium+falciparum+parasites.">Simultaneous transcription of duplicated var2csa gene copies in individual Plasmodium falciparum parasites.</a> Genome Biol. 10, R117 (2009).</li><li>Epp, C., Li, F., Howitt, C. A., Chookajorn, T., Deitsch, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromatin+associated+sense+and+antisense+noncoding+RNAs+are+transcribed+from+the+var+gene+family+of+virulence+genes+of+the+malaria+parasite+Plasmodium+falciparum.">Chromatin associated sense and antisense noncoding RNAs are transcribed from the var gene family of virulence genes of the malaria parasite Plasmodium falciparum.</a> RNA. 15, 116-127 (2009).</li><li>Freitas-Junior, L. H., Hernandez-Rivas, R., Ralph, S. A., Montiel-Condado, D., Ruvalcaba-Salazar, O. K., Rojas-Meza, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Telomeric+heterochromatin+propagation+and+histone+acetylation+control+mutually+exclusive+expression+of+antigenic+variation+genes+in+malaria+parasites.">Telomeric heterochromatin propagation and histone acetylation control mutually exclusive expression of antigenic variation genes in malaria parasites.</a> Cell. 121, 25-36 (2005).</li><li>Obernosterer, G., Martinez, J., Alenius, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locked+nucleic+acid-based+in+situ+detection+of+microRNAs+in+mouse+tissue+sections.">Locked nucleic acid-based in situ detection of microRNAs in mouse tissue sections.</a> Nature Protoc. 2, 1508-1514 (2007).</li><li>Li, F., Sonbuchner, L., Kyes, S. A., Epp, C., Deitsch, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nuclear+non-coding+RNA+are+transcribed+from+the+centromeres+of+Plasmodium+falciparum+and+are+associated+with+centromeric+chromatin.">Nuclear non-coding RNA are transcribed from the centromeres of Plasmodium falciparum and are associated with centromeric chromatin.</a> J. Biol. Chem. 283, 5692-5698 (2008).</li><li>Thompson, J., Sinden, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+Pbs21+mRNA+during+sexual+development+of+Plasmodium+berghei.">In situ detection of Pbs21 mRNA during sexual development of Plasmodium berghei.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 68, 189-196 (1994).</li><li>Thompson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+RNA+in+blood-+and+mosquito-stage+malaria+parasites.">In situ detection of RNA in blood- and mosquito-stage malaria parasites.</a> Methods Mole Med. 72, 225-235 (2002).</li><li>Arnot, D. E., Ronander, E., Bengtsson, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+progression+of+the+intra-erythrocytic+cell+cycle+of+Plasmodium+falciparum+and+the+role+of+the+centriolar+plaques+in+asynchronous+mitotic+division+during+schizogony.">The progression of the intra-erythrocytic cell cycle of Plasmodium falciparum and the role of the centriolar plaques in asynchronous mitotic division during schizogony.</a> Int. J. Parasitol. 41, 71-80 (2011).</li><li>Osborne, C. S., Chakalova, L., Brown, K. E., Carter, D., Horton, A., Debrand, E., Goyenechea, B., Mitchell, J. A., Lopes, S., Reik, W., Fraser, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+genes+dynamically+colocalize+to+shared+sites+of+ongoing+transcription.">Active genes dynamically colocalize to shared sites of ongoing transcription.</a> Nat. Genet. 36, 1065-1071 (2004).</li></ol>

のRNA FISH分析は、例えば、ノーザンブロットおよびRT-PCRなどの方法とは対照的に、単一細胞レベルで特定のmRNA転写物の識別を可能にします。これにより、P.、この例では、転写活性および不活性細胞を区別することができ寄生原虫は、ヒト赤血球内原虫。このような全細胞の観察はしばしば必要であり、重要かつ新規な転写パターン1を解明することがあります。 <p cla...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬の名称 </td><td> 会社 </td><td> カタログ番号 </td><td> 注釈 </td></tr><tr><td>酢酸</td><td>シグマ/アルドリッチ</td><td> 338826〜100ミリリットル</td><td></td></tr><tr><td> Albumaxメディア：RPMI 1640グルタミンソリューション</td><td>ロンザ</td><td> BE12-115F </td><td> 500ミリリットルのRPMI 1640 5 mlのグルタミンソリューション</td></tr><tr><td> Albumaxメディア：ゲンタマイシン硫酸Albumax溶</td><td>ロンザ</td><td> BE02-012E </td><td> 2.5ミリリットルゲンタマイシン硫酸塩 50ミリリットルAlbumax溶</td></tr><tr><td> Albumax-ソリューション：ヒポキサンチン</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> H9377 </td><td> 0,8グラムヒポキサン​​チン</td></tr><tr><td> Albumax-ソリューション：AlbuMAX II </td><td>私nvitrogen </td><td> 11021-037 </td><td> 200グラムAlbumax </td></tr><tr><td> Albumax-溶液：RPMI 1640 </td><td>ロンザ</td><td> BE12-115F </td><td> 4リットルRPMI1640中 maxで磁石で溶かす。 50℃フィルタリング殺菌し、アリコートで-20℃で保管してください。 </td></tr><tr><td>アンバーライト</td><td>シグマ</td><td> A5710-110G </td><td>脱イオンホルムアミドをする樹脂。 </td></tr><tr><td>抗ビオチンヤギpAbのペルオキシダーゼコンジュゲート</td><td>カルビオケム</td><td> 203206 </td><td></td></tr><tr><td>抗DIG抗体</td><td> Novusの生物学的製剤</td><td> NB100-41330 </td><td></td></tr><tr><td> DAPIでアンチフェード試薬</td><td>インビトロジェン</td><td> P36931 </td><td>マウントメディアを完全にスライドを密封する24時間前に硬化されています。 </td></tr><tr><td>ビオチンRNAラベリングミックス</td><td&gt;ロシュ</td><td> 11685597910 </td><td></td></tr><tr><td>デジタルカメラ</td><td> Nikonデジタル視力DC-F11 </td><td></td><td></td></tr><tr><td>カバースリップ</td><td>メンツェル·グレイザー</td><td> 631-1570 </td><td></td></tr><tr><td>培養フラスコ25cm 2の Nunclon面</td><td>ヌンク</td><td> 156340 </td><td></td></tr><tr><td> DEPC </td><td>フルカ/シグマ</td><td> 32490〜100ミリリットル</td><td>千ミリリットルdeinonized水で1mlのDEPC。攪拌棒を追加し、12時間撹拌した。 30分間オートクレーブ。 </td></tr><tr><td>デジタルカメラ</td><td> Nikonデジタル視力DC-F11 </td><td></td><td></td></tr><tr><td>ダイナプロテイン</td><td>インビトロジェン</td><td> 10002D </td><td></td></tr><tr><td> DynaMaq-15マグネット</td><td>インビトロジェン</td><td> 123-01D </td><td></td></tr><tr><td>ホルムアミドbioultra 99パーセント</td><td>フルカシグマ/ </td><td> 47671〜1リットル-F </td><td>脱イオン化ホルムアミド：ホルムアミド100ml当たりのイオン交換樹脂が5グラム。 30分かき混ぜる。ワットマン濾紙でろ過。 </td></tr><tr><td> ゼラチン0 75％溶液：ゼラチン</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> G2500 </td><td> 500ミリリットルRPMI 1640中3.75グラムゼラチン。 〜56℃に加熱溶解する。ときに56℃殺菌フィルタリング分注して-20℃で保存。 </td></tr><tr><td> 。ゼラチン0 75％溶液：RPMI 1640 </td><td>ロンザ</td><td> BE12-115F </td><td> 500ミリリットルRPMI 1640中3.75グラムゼラチン。 〜56℃に加熱溶解する。ときに56℃殺菌フィルタリング分注して-20℃で保存。 </td></tr><tr><td> グルタミン溶液：L-グルタミン</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> G3126 </td><td> 500ミリリットル0.9％NaCl中14.6グラムのLグルタミン。溶かし、フィルターのterilizeとアリコートで-20℃で保管してください。 </td></tr><tr><td> グルタミン溶液：塩酸</td><td>シグマ</td><td> H1758 </td><td> 500ミリリットル0.9％NaCl中14.6グラムのLグルタミン。溶解、滅菌フィルタし、アリコートで-20℃で保管してください。 </td></tr><tr><td> ハイブリダイゼーション溶液：ホルムアミドバイオ超99パーセントSSCの20倍</td><td>フルカ/シグマ</td><td> 47671〜1リットル-F </td><td>合計20ミリリットルは、アリコートで-20℃で凍結させておく 10ミリリットル脱イオン化ホルムアミド</td></tr><tr><td> ハイブリダイゼーション溶液：デンハルト50倍濃縮</td><td>シグマ</td><td> D2532 </td><td> 5ミリリットル20xSSC </td></tr><tr><td> ハイブリダイゼーション溶液：酵母tRNARocheブロッキング試薬</td><td>シグマ</td><td> R-6750 </td><td> 2ミリリットル50倍デンハルト 酵母tRNAミリリットル当たり250μlの20 mgの</td></tr><tr><td><sチョン·&gt;ハイブリダイゼーション溶液：サケ精子DNA </td><td>フルカ/シグマ</td><td> 31149-106GF </td><td> 0.4グラムロシュブロッキング試薬 mlのサケ精子DNAあたり10mg（：変性サケspermDNA 96で5分間℃のハイブリダイゼーション溶液に添加する前にクリティカル）の1ミリリットル</td></tr><tr><td>ハイブリダイThermoStar 100 HC4 </td><td> Quantifoilインスツルメンツ社</td><td> 1004-0011 </td><td>ハイブリダイゼーションオーブンとDEPC水で水増しRNaseフリーのハイブリダイゼーションチャンバーに置き換えることができます。 </td></tr><tr><td>浸油UV透過蛍光無料</td><td>シグマ</td><td> 10976-1EA </td><td></td></tr><tr><td>免疫蛍光または共焦点顕微鏡</td><td>ニコンD-EclipseのTE2000C </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Nailpolish </td><td>任意のドラッグストアで利用可能</td><td></td><td></td></tr><tr><td> PBSで20倍：塩化ナトリウム KClを のNa 2 HPO 4×2H 2 O KH 2 PO 4 DEPC脱イオンH 2 O </td><td></td><td></td><td> pHを7.4にアジャスト 160グラム 4グラム 23グラム 4グラム 1リットル</td></tr><tr><td>パラ4パーセント</td><td>フルカ/ chemika </td><td> 76240 </td><td> 80ミリリットルのPBS / DEPCで4グラムPFA。 65℃の熱PFAが溶けるまで。 20ミリリットルのPBSを加え、溶液が冷却させます。 pHを7.4に調整してください。フィルター。 -20℃でアリコートで保管</td></tr><tr><td>パラ4パーセント/酢酸五パーセント</td><td></td><td></td><td> 950μlのparaformaldhyde +50μlの酢酸</td></tr><tr><td>ペプシン</td><td>シグマ/アルドリッチ</td><td> P7000 </td><td></td></tr><tr><td>ペルオキシダーゼ標識抗ビオチン</td><td>カルビオケム</td><td> 203206 </td><td></td></tr><tr><td> RBC-ウォッシュメディア：RPMI 1640グルタミンソリューション</td><td>ロンザ</td><td> BE12-115F </td><td> 500ミリリットルのRPMI 1640 5mlのグルタミンソリューション</td></tr><tr><td> RBC-ウォッシュメディア：硫酸ゲンタマイシン</td><td>ロンザ</td><td> BE02-012E </td><td> 2.5ミリリットルゲンタマイシン硫酸塩</td></tr><tr><td>アーゼ</td><td>シグマ/アルドリッチ</td><td></td><td> 10 mg / mlの原液を作る。 </td></tr><tr><td> RNaseフリーの1.5 mlチューブ</td><td>アンビオン</td><td> AM12450 </td><td></td></tr><tr><td> RNaseのザップ</td><td>アンビオン</td><td> AM9780 </td><td></td></tr><tr><td> 4ウェル11ミリメートルスライド</td><td>サーモサイエンティフィック</td><td> MENZXER306W </td><td></td></tr><tr><td> SSCの20倍：塩化ナトリウム</td><td>シグマ/アルdrich </td><td> S9625 </td><td> 3 MのNaCl（175グラム/リットル）0.3MのNa 3クエンX、H 2 O（88グラム/リットル）は、1M HClでpHを7.0に調整し</td></tr><tr><td> SSCの20倍：クエン酸ナトリウム水和物</td><td>シグマ/アルドリッチ</td><td> W302600 </td><td> 3 MのNaCl（175グラム/リットル）0.3MのNa 3クエンX、H 2 O（88グラム/リットル）は、1M HClでpHを7.0に調整し</td></tr><tr><td> 20X SSPE：NaClを</td><td>シグマ/アルドリッチ</td><td> S9625 </td><td> 175.3グラムのNaCl </td></tr><tr><td> SSPE 20X：のNaH 2 PO 4 </td><td>シグマ/アルドリッチ</td><td> S0751 </td><td> 27.6グラムのNaH 2 PO 4。 </td></tr><tr><td> SSPE 20X：4 EDTA粉</td><td></td><td></td><td> 9.4グラムのEDTA粉 DEPC処理水を加え、pHを7.4に調整。オート20分間オ​​ートクレーブ</td></tr><tr><td> TNBバッファー：TNTバッファー</td><td></td><td></td><td> 10ミリリットルのTNTバッファー</td></tr><tr><td> TNBバッファー：ブロッキング試薬</td><td></td><td></td><td> 0.05グラムブロッキング試薬 ブロッキング試薬を溶解するために、攪拌しながら1時間60℃に溶液を加熱する。 -20℃で保存する。 （パーキンエルマー社TSA-プロトコルから派生したもの。） </td></tr><tr><td> TNTバッファー：トリス/ HCl </td><td>シグマ</td><td> T1503 </td><td> 1Mトリス/ HCl、pH8.0で</td></tr><tr><td> TNT緩衝液：塩化ナトリウム</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> S9625 </td><td> 100ミリリットル </td></tr><tr><td> TNT緩衝液：ツイーン20 </td><td>シグマ</td><td> 93773 </td><td> 5 M NaClを30ミリリットル 1ミリリットルのDEPCのdH 2 O869 M1の 室温でpHを7.5に調整してください。 （パーキンエルマー社TSA-プロトコルから派生したもの。） </td></tr><tr><td> TSAはプラスCyanine3 /フルオレセインシステム</td><td>パーキンエルマー</td><td> NEL753000IKT </td><td>実験を開始する前に、慎重にTSAからプロトコルプラス蛍光パレットシステムをお読みください。 </td></tr><tr><td>滅菌チューブ14ミリリットル</td><td> Almeco - CM LABのAP </td><td> 91016 </td><td></td></tr></tbody></table>

analysis of single-cell gene transcription by rna fluorescent in situ hybridization (fish)

マラリア感染時のヒト内皮受容体に熱帯熱マラリア原虫感染赤血球（IE）の接着は 、var遺伝子によってコードされたPfEMP1タンパク質変異体の発現によって媒介される。 ハプロイドP.熱帯熱マラリア原虫のゲノムは1つだけですが、感染症の血液の段階で一度にセルごとに転写されると考えられていたそのうちの約60種類のvarの遺伝子を抱いている。 varの遺伝子転写のような相互に排他的な規制がどのように実現されるか、個々の遺伝子やvarの異なる受容体とPの臨床転帰の差動結合の結果に関連付けられているvarの遺伝子のサブグループの識別があるので、不明である熱帯熱マラリア原虫感染症。最近では、相互に排他的な転写のパラダイムは、個々のPに基づいて転写アッセイによって疑問に呼ばれてきたシングルinfに熱帯熱マラリア原虫の転写産物の同定Pの個々の核内寄生虫によるvarの遺伝子転写のin situハイブリダイゼーション（FISH）分析に蛍光RNAを用いてected赤血球細胞熱帯熱マラリア原虫 、IE 1。 ここでは、Pの単核の var遺伝子転写の解析のためのRNA-FISH法を実施するための詳細なプロトコルを提示熱帯熱マラリア原虫は、ヒト赤血球に感染した。方法はジゴキシゲニンとTSA Plusの蛍光パレットシステム2（パーキンエルマー）、顕微鏡分析と新たに選択されたPを使用してビオチン標識アンチセンスRNAプローブの使用に基づいています熱帯熱マラリア原虫のIE。 in situハイブリダイゼーション法Pのさまざまな段階で発現している遺伝子の多様性の転写および規制を監視するために使用することができます熱帯熱マラリア原虫のライフサイクルとは、他のマラリア原虫種と他の生物や細胞のタイプに適応可能です。

図1に、主な手順やRNA FISH法の持続時間を示すフローチャートである。 シングルPを使用してよく、不十分保存ステンドmRNAのFISH実験の代表的な一連の画像熱帯熱マラリア原虫のIEを図2に示します。この細胞内原虫はDAPIで青色に染色されている小さな（1〜1.5μmの直径）は核を持っています。二十四時間Pの赤血球侵入後<em...

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Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

蛍光灯<em&gt;その場で</em個々の細胞におけるmRNA転写産物を同定する&gt;ハイブリダイゼーション（FISH）は、複数のメンバーを同時に転写などの多遺伝子活性の分析を可能に<em&gt; VAR</em&gt;多重遺伝子ファミリーで<em&gt;熱帯熱マラリア原虫（Plasmodium falciparum）</em&gt;感染した赤血球<sup&gt; 1</sup&gt;。技術が適応さや遺伝子、細胞及び生物のさまざまな種類で使用することができます。

RNAの蛍光による単一細胞遺伝子転写の解析<em&gt; in situで</em&gt;ハイブリダイゼーション（FISH）

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Research

JoVE Journal

Biology

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

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ゼブラフィッシュの全マウント高分解能二重蛍光上皮内ハイブリダイゼーション

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

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蛍光その場で</emヒト精子の>ハイブリダイゼーション（FISH）プロトコル

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

In vitro Transcription and Capping of Gaussia Luciferase mRNA Followed by HeLa Cell Transfection

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HeLa細胞のトランスフェクションに続いてGaussiaルシフェラーゼmRNA のインビトロ転写とキャッピングの

In vitro transcription is the synthesis of RNA transcripts by RNA polymerase from a linear DNA template containing the corresponding promoter sequence ...

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

放射性その場で</em組織における多様な遺伝子発現パターンを検出するための>ハイブリダイゼーション

Knowing the timing, level, cellular localization, and cell type that a gene is expressed in contributes to our understanding of the function of the gene. ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

蛍光によるウイルスRNAの検出<em&gt;その場で</em&gt;ハイブリダイゼーション（FISH）

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

蛍光灯と組み合わせることで染色体の複製タイミング<em&gt;その場</em&gt;ハイブリダイゼーション

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times during S phase, following a temporal replication program. The ...

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

ホールマウントRNAを蛍光<em&gt;その場で</emの&gt;ハイブリダイゼーション<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;胚

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNAを<em&gt;その場</emホールマウント胚および細胞組織学で&gt;ハイブリダイゼーションは、海洋軟骨魚類に適合した

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

蛍光を用いたmRNA分子の可視化と分析<em&gt;その場で</emで&gt;ハイブリダイゼーション<em&gt;サッカロミセス·セレビシエ（Saccharomyces cerevisiae）</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Analysis of Global RNA Synthesis at the Single Cell Level following Hypoxia

低酸素症後単一細胞レベルでのグローバルのRNA合成の分析

Hypoxia or lowering of the oxygen availability is involved in many physiological and pathological processes. At the molecular level, cells initiate a ...