Name: analysis of single-cell gene transcription by rna fluorescent in situ hybridization (fish)
Uploaded: 2012-10-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH at JoVE.com

Авторы хотели бы поблагодарить Майкла Alifrangis и Улла Abildtrup для генотипирования паразитов и Кристина Holm за отличную техническую помощь. Эта работа финансировалась Медицинского института Говарда Хьюза (грант 55005511), Lundbeck фонда (грант R9-A840) и Нильс Бор Foundation.

1. Генерация Свежий Выбранный зараженных эритроцитов Для этого теста, лучшие результаты получаются при использовании культур недавно выбранных для поверхностного выражения PfEMP1 белка. В данном эксперименте 3d7 P. тропической линии был выбран с помощью специфических а...

<ol>
	<li>Joergensen, L., Bengtsson, D. C., Bengtsson, A., Ronander, E., Berger, S. S., Turner, L., Dalgaard, M. B., Cham, G. K., Victor, M. E., Lavstsen, T., Theander, T. G., Arnot, D. E., Jensen, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surface+co-expression+of+two+different+PfEMP1+antigens+on+single+Plasmodium+falciparum-infected+erythrocytes+facilitates+binding+to+ICAM1+and+PECAM1.">Surface co-expression of two different PfEMP1 antigens on single Plasmodium falciparum-infected erythrocytes facilitates binding to ICAM1 and PECAM1.</a> PLoS Pathog. 2, 1001083 (2010).</li><li>Pinaud, R., Mello, C. V., Velho, T. A., Wynne, R. D., Tremere, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+two+mRNA+species+at+single-cell+resolution+by+double-fluorescence+in+situ+hybridization.">Detection of two mRNA species at single-cell resolution by double-fluorescence in situ hybridization.</a> Nat. Protoc. 3, 1370-1379 (2008).</li><li>Cheeseborough, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> District Laboratory Practice in Tropical Countries. , (2006).</li><li>Brolin, K. J., Ribacke, U., Nilsson, S., Ankarklev, J., Moll, K., Wahlgren, M., Chen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+transcription+of+duplicated+var2csa+gene+copies+in+individual+Plasmodium+falciparum+parasites.">Simultaneous transcription of duplicated var2csa gene copies in individual Plasmodium falciparum parasites.</a> Genome Biol. 10, R117 (2009).</li><li>Epp, C., Li, F., Howitt, C. A., Chookajorn, T., Deitsch, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chromatin+associated+sense+and+antisense+noncoding+RNAs+are+transcribed+from+the+var+gene+family+of+virulence+genes+of+the+malaria+parasite+Plasmodium+falciparum.">Chromatin associated sense and antisense noncoding RNAs are transcribed from the var gene family of virulence genes of the malaria parasite Plasmodium falciparum.</a> RNA. 15, 116-127 (2009).</li><li>Freitas-Junior, L. H., Hernandez-Rivas, R., Ralph, S. A., Montiel-Condado, D., Ruvalcaba-Salazar, O. K., Rojas-Meza, A. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Telomeric+heterochromatin+propagation+and+histone+acetylation+control+mutually+exclusive+expression+of+antigenic+variation+genes+in+malaria+parasites.">Telomeric heterochromatin propagation and histone acetylation control mutually exclusive expression of antigenic variation genes in malaria parasites.</a> Cell. 121, 25-36 (2005).</li><li>Obernosterer, G., Martinez, J., Alenius, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locked+nucleic+acid-based+in+situ+detection+of+microRNAs+in+mouse+tissue+sections.">Locked nucleic acid-based in situ detection of microRNAs in mouse tissue sections.</a> Nature Protoc. 2, 1508-1514 (2007).</li><li>Li, F., Sonbuchner, L., Kyes, S. A., Epp, C., Deitsch, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nuclear+non-coding+RNA+are+transcribed+from+the+centromeres+of+Plasmodium+falciparum+and+are+associated+with+centromeric+chromatin.">Nuclear non-coding RNA are transcribed from the centromeres of Plasmodium falciparum and are associated with centromeric chromatin.</a> J. Biol. Chem. 283, 5692-5698 (2008).</li><li>Thompson, J., Sinden, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+Pbs21+mRNA+during+sexual+development+of+Plasmodium+berghei.">In situ detection of Pbs21 mRNA during sexual development of Plasmodium berghei.</a> Mol. Biochem. Parasitol. 68, 189-196 (1994).</li><li>Thompson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+situ+detection+of+RNA+in+blood-+and+mosquito-stage+malaria+parasites.">In situ detection of RNA in blood- and mosquito-stage malaria parasites.</a> Methods Mole Med. 72, 225-235 (2002).</li><li>Arnot, D. E., Ronander, E., Bengtsson, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+progression+of+the+intra-erythrocytic+cell+cycle+of+Plasmodium+falciparum+and+the+role+of+the+centriolar+plaques+in+asynchronous+mitotic+division+during+schizogony.">The progression of the intra-erythrocytic cell cycle of Plasmodium falciparum and the role of the centriolar plaques in asynchronous mitotic division during schizogony.</a> Int. J. Parasitol. 41, 71-80 (2011).</li><li>Osborne, C. S., Chakalova, L., Brown, K. E., Carter, D., Horton, A., Debrand, E., Goyenechea, B., Mitchell, J. A., Lopes, S., Reik, W., Fraser, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+genes+dynamically+colocalize+to+shared+sites+of+ongoing+transcription.">Active genes dynamically colocalize to shared sites of ongoing transcription.</a> Nat. Genet. 36, 1065-1071 (2004).</li></ol>

РНК FISH анализ, в отличие от методов, таких как Северная блоттинга и RT-PCR, позволяющий дискриминации конкретных транскриптов мРНК на одном уровне клетки. Это позволяет различать транскрипционно активные и неактивные клетки, в данном примере, P. тропической паразитических простейших...

<table border="1"><tbody><tr><td> Название реагента </td><td> Компания </td><td> Номер в каталоге </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td> Уксусной кислоты </td><td> Sigma / Aldrich </td><td> 338 826-100мл </td><td></td></tr><tr><td> Albumax СМИ: RPMI 1640 Глютамин решения </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 500 мл RPMI 1640 5 мл глутамина решения </td></tr><tr><td> Albumax СМИ: гентамицина сульфат Albumax-решения </td><td> Lonza </td><td> BE02-012E </td><td> 2,5 мл гентамицина сульфат 50 мл раствора Albumax </td></tr><tr><td> Albumax-решения: гипоксантин </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> H9377 </td><td> 0,8 г гипоксантин </td></tr><tr><td> Albumax-решения: AlbuMAX II </td><td> Яnvitrogen </td><td> 11021-037 </td><td> 200 г Albumax </td></tr><tr><td> Albumax-решения: RPMI 1640 </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 4-литровый RPMI 1640 Растворите с магнитом на макс. 50 ° C. Фильтр стерилизуют и хранят при температуре -20 ° C в аликвоты. </td></tr><tr><td> Amberlite </td><td> Сигма </td><td> A5710-110G </td><td> Смола для deionize формамида. </td></tr><tr><td> Anti-биотин козы PAB пероксидазой </td><td> Calbiochem </td><td> 203206 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-Dig антител </td><td> Novus биологические </td><td> NB100-41330 </td><td></td></tr><tr><td> Anti-реагента с исчезают DAPI </td><td> Invitrogen </td><td> P36931 </td><td> Монтаж средств массовой информации имеет вылечить в течение 24 ч до герметизации слайд полностью. </td></tr><tr><td> Биотин РНК маркировки Mix </td><td&gt; Roche </td><td> 11685597910 </td><td></td></tr><tr><td> Камера цифровая </td><td> Nikon цифровых взгляд DC-F11 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Покровные </td><td> Менцель-Glaser </td><td> 631-1570 </td><td></td></tr><tr><td> культуры колбы 25 см 2 поверхности Nunclon </td><td> Nunc </td><td> 156340 </td><td></td></tr><tr><td> DEPC </td><td> Fluka / Sigma </td><td> 32 490-100мл </td><td> 1 мл DEPC в 1000 мл deinonized воды. Добавить мешалку и перемешивают в течение 12 часов. Автоклаве в течение 30 мин. </td></tr><tr><td> Цифровой фотоаппарат </td><td> Nikon цифровых взгляд DC-F11 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Dynabeads белка </td><td> Invitrogen </td><td> 10002D </td><td></td></tr><tr><td> DynaMaq-15 Магнит </td><td> Invitrogen </td><td> 123-01D </td><td></td></tr><tr><td> Формамид bioultra 99% </td><td> Fluka/ Sigma </td><td> 47671-1L-F </td><td> Деионизированная формамида: 5 г ионообменных смол на 100 мл формамида. Размешайте 30 мин. Фильтр по ватмана. </td></tr><tr><td> . Желатин 0 75% раствор: Желатин </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> G2500 </td><td> 3,75 г желатина в 500 мл RPMI 1640. Нагреть до 56 ° C до растворения. Фильтр стерилизовать при 56 ° C. Хранить при -20 ° C в аликвоты. </td></tr><tr><td> . Желатин 0 75% раствор: RPMI 1640 </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 3,75 г желатина в 500 мл RPMI 1640. Нагреть до 56 ° C до растворения. Фильтр стерилизовать при 56 ° C. Хранить при -20 ° C в аликвоты. </td></tr><tr><td> Глютамин решение: L-глутамина </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> G3126 </td><td> 14,6 г L глутамина в 500 мл 0,9% NaCl. Растворить, фильтр сterilize и хранить при температуре -20 ° C в аликвоты. </td></tr><tr><td> Глютамин решение: HCl </td><td> Сигма </td><td> H1758 </td><td> 14,6 г L глутамина в 500 мл 0,9% NaCl. Растворить, фильтр стерилизовать и хранить при температуре -20 ° C в аликвоты. </td></tr><tr><td> Гибридизация решение: Формамид Bio ультра 99% SSC 20x </td><td> Fluka / Sigma </td><td> 47671-1L-F </td><td> Всего 20 мл, держать замораживали при -20 ° C в аликвотах 10 мл деионизированной формамида </td></tr><tr><td> Гибридизация решение: 50x концентрат Денхардта </td><td> Сигма </td><td> D2532 </td><td> 5 мл 20xSSC </td></tr><tr><td> Гибридизация решение: Дрожжи tRNARoche блокирующий реагент </td><td> Сигма </td><td> R-6750 </td><td> 2 мл 50х Денхардта 250 мкл 20 мг на мл дрожжевой тРНК </td></tr><tr><td><sЧонг&gt; Гибридизация решение: ДНК спермы лосося </td><td> Fluka / Sigma </td><td> Тридцать одна тысяча сто сорок девять-106GF </td><td> 0,4 г Roche блокирующий реагент 1 мл 10 мг на мл ДНК спермы лосося (Critical: денатурация лосося spermDNA при 96 ° С в течение 5 мин перед добавлением в раствор для гибридизации) </td></tr><tr><td> Hybridizer Thermostar 100 HC4 </td><td> Quantifoil Instruments GmbH </td><td> 1004-0011 </td><td> Может быть заменен печи гибридизации и РНКазы бесплатно камер гибридизации дополняется DEPC воды. </td></tr><tr><td> Погружение масла УФ-прозрачным флуоресценции бесплатно </td><td> Сигма </td><td> 10976-1шт </td><td></td></tr><tr><td> Иммунофлуоресценции и конфокальной микроскопии </td><td> Nikon D-Eclipse TE2000C </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Nailpolish </td><td> Доступна в любой аптеке </td><td></td><td></td></tr><tr><td> PBS 20x: NaCl KCl Na 2 HPO 4 х 2H 2 O KH 2 PO 4 DEPC деионизованной H 2 O </td><td></td><td></td><td> Изправлена ​​рН до 7,4 160 г 4 г 23 г 4 г 1 л </td></tr><tr><td> Параформальдегид 4% </td><td> Fluka / chemika </td><td> 76240 </td><td> 4 г PFA в 80 мл PBS / DEPC. Нагреть до 65 ° C до PFA растворяется. Добавить 20 мл PBS, дайте раствору остыть. Отрегулируйте рН до 7,4. Фильтр. Хранить в аликвоты при -20 ° C. </td></tr><tr><td> Параформальдегид 4% / Кислота уксусная 5% </td><td></td><td></td><td> 950 мкл paraformaldhyde + 50 мкл уксусной кислоты </td></tr><tr><td> Пепсин </td><td> Sigma / Aldrich </td><td> P7000 </td><td></td></tr><tr><td> Пероксидаза-сопряженных анти-биотин </td><td> Calbiochem </td><td> 203206 </td><td></td></tr><tr><td> РБК-стирка СМИ: RPMI 1640 Глютамин решения </td><td> Lonza </td><td> BE12-115F </td><td> 500 мл RPMI 1640, 5 мл глутамина решения </td></tr><tr><td> РБК-стирка СМИ: гентамицина сульфат </td><td> Lonza </td><td> BE02-012E </td><td> 2,5 мл гентамицина сульфат </td></tr><tr><td> РНКазы </td><td> Sigma / Aldrich </td><td></td><td> Сделайте 10 мг / мл маточного раствора. </td></tr><tr><td> РНКазы бесплатно 1,5 мл трубки </td><td> Ambion </td><td> AM12450 </td><td></td></tr><tr><td> РНКазы Зап </td><td> Ambion </td><td> AM9780 </td><td></td></tr><tr><td> Слайды 4 скважины 11мм </td><td> Thermo Scientific </td><td> MENZXER306W </td><td></td></tr><tr><td> SSC 20x: NaCl </td><td> Sigma / Aldrich </td><td> S9625 </td><td> 3 М NaCl (175 г / л) 0,3 М Na 3 цитрата х H 2 O (88 г / л) Отрегулируйте рН до 7,0 с помощью 1М HCl </td></tr><tr><td> SSC 20x: дигидрат цитрат натрия </td><td> Sigma / Aldrich </td><td> W302600 </td><td> 3 М NaCl (175 г / л) 0,3 М Na 3 цитрата х H 2 O (88 г / л) Отрегулируйте рН до 7,0 с помощью 1М HCl </td></tr><tr><td> ГНПП 20x: NaCl </td><td> Sigma / Aldrich </td><td> S9625 </td><td> 175,3 г NaCl </td></tr><tr><td> ГНПП 20x: NaH 2 PO 4 </td><td> Sigma / Aldrich </td><td> S0751 </td><td> 27,6 г NaH 2 PO 4. </td></tr><tr><td> ГНПП 20x: 4 EDTA порошок </td><td></td><td></td><td> 9,4 г порошка ЭДТА Добавить DEPC воды, отрегулировать рН 7,4. Автоматическийнаколол в течение 20 мин </td></tr><tr><td> TNB буфера: TNT буфер </td><td></td><td></td><td> 10 мл TNT буфер </td></tr><tr><td> TNB буфера: блокирующий реагент </td><td></td><td></td><td> 0,05 г блокирующий реагент Для растворения блокирующий реагент, нагрейте раствор до 60 ° C в течение одного часа при перемешивании. Хранить при -20 ° C. (Производное от Perkin Elmer TSA-протокол). </td></tr><tr><td> TNT буфера: Tris / HCl </td><td> Сигма </td><td> T1503 </td><td> 1М Tris / HCl, рН 8,0 </td></tr><tr><td> TNT буфера: NaCl </td><td> Sigma Aldrich </td><td> S9625 </td><td> 100 мл </td></tr><tr><td> TNT буфера: Tween20 </td><td> Сигма </td><td> 93773 </td><td> 5 М NaCl 30 мл 1 мл DEPC дН 2 O869 Ml Отрегулируйте рН до 7,5 при комнатной температуре. (Производное от Perkin Elmer TSA-протокол). </td></tr><tr><td> TSA плюс Cyanine3 / Fluorescein системы </td><td> Perkin Elmer </td><td> NEL753000IKT </td><td> Читайте протокол от TSA Plus флуоресценции Палитра системы, прежде чем начать эксперимент. </td></tr><tr><td> Трубы 14 мл стерильной </td><td> Almeco - CM LAB Aps </td><td> 91016 </td><td></td></tr></tbody></table>

analysis of single-cell gene transcription by rna fluorescent in situ hybridization (fish)

Адгезия Plasmodium тропической инфицированных эритроцитов (IE) в человеческих эндотелиальных рецепторов во время заражения малярией при посредничестве выражения PfEMP1 вариантов белка, кодируемого VAR генов. Гаплоидный P. тропической таит в геноме около 60 различных вар генов, из которых только один был Считается, что транскрибируется в камере в то время, в течение кровью стадии инфекции. Как такие взаимоисключающие регулирования VAR транскрипции генов достигается неясно, как это идентификация отдельных генов или VAR подгруппы VAR генов, связанных с различными рецепторами и следствие дифференциальной обязательными для клинического исхода П. тропической инфекции. В последнее время взаимоисключающие парадигмы транскрипции была поставлена ​​под сомнение транскрипции анализы, основанные на отдельных P. тропической стенограммы идентификации в разовыхected эритроцитарных клеток с помощью РНК-флуоресцентной гибридизации (FISH) анализ VAR транскрипции генов паразита в отдельных ядер P. тропической IE 1. Здесь мы представляем подробный протокол для проведения РНК-FISH методологии анализа VAR транскрипции генов в одно-ядрах P. тропической инфицированных эритроцитов человека. Метод основан на использовании дигоксигенином и биотин-меченых зондов антисмысловой РНК помощью TSA Plus флуоресценции Палитра Система 2 (Perkin Elmer), микроскопические анализы и недавно выбранный P. тропической IE. На месте методом гибридизации может быть использован для контроля транскрипции и регулирования различных генов, выраженных в ходе различных этапов P. тропической жизненного цикла и может быть адаптирована к другим малярийных паразитов рыб и других организмов и типов клеток.

На рисунке 1 показана блок-схема основных этапов и длительности методологии FISH РНК. Серия представитель изображениями хорошо, и плохо сохранившиеся окрашенных экспериментов FISH мРНК с использованием одной P. тропической IE показано на рисунке 2. Это...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH at JoVE.com

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization FISH

Флуоресцентный<em&gt; На месте</em&gt; Гибридизации (FISH) для выявления транскриптов мРНК в отдельных клетках позволяет провести анализ полигенных деятельности, такие как одновременное транскрипции более чем одного члена<em&gt; Var</em&gt; Мультигенного семьи в<em&gt; Plasmodium тропической</em&gt; Инфицированных эритроцитов<sup&gt; 1</sup&gt;. Этот метод является гибкой и может быть использована на различные типы генов, клеток и организмов.

Анализ одноклеточных транскрипции гена РНК-флуоресцентный<em&gt; В Situ</em&gt; Гибридизация (FISH)

Adhesion of Plasmodium falciparum infected erythrocytes (IE) to human endothelial receptors during malaria infections is mediated by expression of PfEMP1 ...

Research

JoVE Journal

Biology

Analysis of Single-cell Gene Transcription by RNA Fluorescent In Situ Hybridization (FISH)

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Zebrafish Whole Mount High-Resolution Double Fluorescent In Situ Hybridization

Данио рерио Всего горе высокого разрешения двумя люминесцентными В Ситу Гибридизация

Whole mount in situ hybridization is one of the most widely used techniques in developmental biology.  Here, we present a high-resolution double ...

Fluorescence in situ hybridization (FISH) Protocol in Human Sperm

Fluorescence in situ hybridization FISH Protocol in Human Sperm

Флуоресценция На месте Гибридизации (FISH) протокола в человеческой сперме

Aneuploidies are the most frequent chromosomal abnormalities in humans. Most of these abnormalities result from meiotic errors during the gametogenic ...

In vitro Transcription and Capping of Gaussia Luciferase mRNA Followed by HeLa Cell Transfection

In vitro Transcription and Capping of Gaussia Luciferase mRNA Followed by HeLa Cell Transfection

В пробирке транскрипции и укупорки мРНК люциферазы Gaussia Вслед за Трансфекция Сотовые HeLa

In vitro transcription is the synthesis of RNA transcripts by RNA polymerase from a linear DNA template containing the corresponding promoter sequence ...

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

Radioactive in situ Hybridization for Detecting Diverse Gene Expression Patterns in Tissue

Радиоактивный На месте Гибридизации для обнаружения разнообразных шаблонов экспрессии генов в ткани

Knowing the timing, level, cellular localization, and cell type that a gene is expressed in contributes to our understanding of the function of the gene. ...

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization (FISH)

Detection of Viral RNA by Fluorescence in situ Hybridization FISH

Обнаружение вирусной РНК с помощью флуоресцентного<em&gt; На месте</em&gt; Гибридизация (FISH)

Viruses  that infect cells elicit specific changes to normal cell functions which serve  to divert energy and resources for viral replication. Many ...

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

Chromosome Replicating Timing Combined with Fluorescent In situ Hybridization

Хромосома Репликация времени в сочетании с Флуоресцентные<em&gt; В месте</em&gt; Гибридизация

Mammalian DNA replication initiates at multiple sites along chromosomes at different times during S phase, following a temporal replication program. The ...

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Whole Mount RNA Fluorescent in situ Hybridization of Drosophila Embryos

Всего горы РНК Флуоресцентные<em&gt; На месте</em&gt; Гибридизация<em&gt; Drosophila</em&gt; Эмбрионы

Assessing  the expression pattern of a gene, as well as the subcellular localization  properties of its transcribed RNA, are key features for ...

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

RNA In situ Hybridization in Whole Mount Embryos and Cell Histology Adapted for Marine Elasmobranchs

РНК<em&gt; В месте</em&gt; Гибридизации эмбрионов Всего в гору и сотовых гистологии адаптированный для морских хрящевых рыб

Marine  elasmobranchs are valued animal models for biomedical and genomic studies as  they are the most primitive vertebrates to have adaptive immunity ...

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Visualization and Analysis of mRNA Molecules Using Fluorescence In Situ Hybridization in Saccharomyces cerevisiae

Визуализации и анализа молекул мРНК с помощью флуоресцентной<em&gt; В Ситу</em&gt; Гибридизация в<em&gt; Saccharomyces CEREVISIAE</em

The Fluorescence in situ Hybridization (FISH) method allows one to detect nucleic acids in the native cellular environment. Here we provide a protocol for ...

Analysis of Global RNA Synthesis at the Single Cell Level following Hypoxia

Анализ глобальной РНК синтеза на уровне одной клетки следующем Гипоксия

Hypoxia or lowering of the oxygen availability is involved in many physiological and pathological processes. At the molecular level, cells initiate a ...