Name: in ovo electroporations of hh stage 10 chicken embryos
Uploaded: 2007-11-01T00:29:01
Description: Watch this Scientific Journal Video about In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos at JoVE.com

<p class="jove_step"> Яйцо обработке </p><ol><li> Яйца можно хранить при температуре 13 ° С не более одной недели до инкубации без значительной потери жизнеспособности (небольшой кулер вино идеально подходит для этой цели). </li><li> До инкубации яиц позволяют нагреться до комнатной температуры, затем поместить в увлаж...

<ol>
	<li>Itasaki, N., Bel-Vialar, S., Krumlauf, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&apos;Shocking&apos;+developments+in+chick+embryology:+electroporation+and+in+ovo+gene+expression.">&apos;Shocking&apos; developments in chick embryology: electroporation and in ovo gene expression.</a> <em style='font-style: italic'>Nat Cell Biol</em>. <b>1</b>, 203-207 (1999).</li></ol>

<p> Этот протокол обеспечивает пошаговое руководство для нейронных электропорации трубки HH10 куриных эмбрионов. В дополнение к показу техники, рекомендации по хранению и обработке яиц также предоставляется. Эта методика имеет широкий спектр применения для генетического анализа, а легкость и низкая ...

<!DOCTYPE html PUBLIC "-//W3C//DTD XHTML 1.0 Transitional//EN" "http://www.w3.org/TR/xhtml1/DTD/xhtml1-transitional.dtd">
<html xmlns="http://www.w3.org/1999/xhtml" xml:lang="en" lang="en">	
		
		<div>
		<table border="1">
		<thead>
		<tr>
		<th>Material Name</th>
		<th>Type</th>
		<th>Company</th>
		<th>Catalogue Number</th>
		<th>Comment</th>
		</tr>
		</thead>
		<tbody>
		
<tr>
<td>Chicken egg incubator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>humidified, set to 37.80&deg;C (100F).  </td>
</tr>
<tr>
<td>Pulse generator </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Genetronics </td>
<td>BTX T820 </td>
<td>Square wave generator or comparable</td>
</tr>
<tr>
<td>Electrodes</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>our electrodes were made from 0.25 mm diameter platinum wire and were 5 mm long and spaced 1 mm apart</td>
</tr>
<tr>
<td>Connecter cables</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Micromanipulator</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Dissecting scope </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>with large working distance</td>
</tr>
<tr>
<td>Glass capillaries </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>and capillary puller or commercial glass needles</td>
</tr>
<tr>
<td>Leibovitz&#x2019;s L-15 media</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>chicken eggs</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>fertilized</td>
</tr>
<tr>
<td>Curved scissors</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>10 ml syringe</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Large bore needle </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>16-18G</td>
</tr>
<tr>
<td>Mouth pipette</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>India ink </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Insulin syringe/syringe </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<tr>
<td>Plasmid DNA </td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>&#x2265; 1&#181;g/&#181;l in sterile TE or 1X PBS containing 0.05% Fast Green dye</td>
</tr>		</tbody>
		</table>
		</div>
			<div>
					</div>
		

in ovo electroporations of hh stage 10 chicken embryos

<p class="jove_content">Большой размер и внешний развития куриного эмбриона уже давно сделали его ценным инструментом в изучении биологии развития. С появлением молекулярно-биологических методов, цыпленок стал полезной системой, в которой для изучения регуляции генов и функции. По electroporating ДНК или РНК конструкции в развивающихся куриных эмбрионов, гены могут быть выражены или сбит с целью анализа в функции гена естественных условиях. Аналогичным образом, репортер конструкций может быть использован для отображения судьбы или для изучения предполагаемых генов регуляторных элементов. По сравнению с аналогичными экспериментами в мыши, птенец электропорации имеет преимущества быть быстрым, простым и недорогим. Это видео демонстрирует первых, как сделать окно в яичной скорлупе манипулировать эмбриона. Затем эмбрион визуализируется с разбавленным раствором тушь вводили ниже эмбриона. Иглой стекло и пипетки используются для введения ДНК и быстрый зеленый краситель в развивающихся нервной трубки, то платиновые электроды расположены параллельно эмбриона и короткие электрические импульсы вводятся с генератора импульсов. Наконец, яйцо запечатанных скотчем и положил обратно в инкубатор для дальнейшего развития. Кроме того, видео показывает правильное хранение и обращение с яйцом и обсуждаются возможные причины эмбриона электропорации следующие потери.</p>

Watch this Scientific Journal Video about In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos at JoVE.com

In Ovo Electroporations of HH Stage 10 Chicken Embryos

<p class="jove_content">Чик в ово электропорации это техника, которая позволяет генетические манипуляции птичьего эмбриона. Общие применения этого метода относятся функциональный анализ генов и предполагаемых элементов усилителя. Это видео демонстрирует нейронных электропорации трубки в HH 10 куриных эмбрионов. Техника инъекций и надлежащее обращение с яйцом обсуждаются.</p>

В Ovo Electroporations Его Святейшества Стадия 10 эмбрионов куриного

Large size and external development of the chicken embryo have long made it a valuable tool in the study of developmental biology.  With the advent of ...

Research

JoVE Journal

Biology

Preparation of Neuronal Cultures from Midgastrula Stage Drosophila Embryos

Подготовка нейронных культур от Midgastrula этапе эмбрионы дрозофилы

This video illustrates the procedure for making primary neuronal cultures from midgastrula stage Drosophila embryos. The methods for collecting embryos ...

Windowing Chicken Eggs for Developmental Studies

Windowing куриные яйца целях развития исследований

The study of development has been greatly aided by the use of the chick embryo as an experimental model.  The ease of accessibility of the embryo has ...

Placing Growth Factor-Coated Beads on Early Stage Chicken Embryos

Размещение фактор роста покрытием бисер на ранних эмбрионов куриного этап

The neural tube expresses many proteins in specific spatiotemporal patterns during development.   These proteins have been shown to be critical for cell ...

Chick <em>ex ovo</em> Culture and <em>ex ovo</em> CAM Assay: How it Really Works

Chick ex ovo Culture and ex ovo CAM Assay: How it Really Works

Цыпленок<em> Ех ово</em> Культура и<em> Ех ово</em> CAM Пробирной: как это действительно работает

Chicken eggs in the early phase of breeding are between in vitro and in vivo systems and provide a vascular test environment not only to study ...

<em>In-vivo</em> Centrifugation of <em>Drosophila</em> Embryos

In-vivo Centrifugation of Drosophila Embryos

<em>В естественных условиях</em> центрифугирования эмбрионов <em>дрозофилы</em>

A major strategy for purifying and isolating different types of intracellular organelles is to separate them from each other based on differences in ...

An <em>ex-ovo</em> Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

An ex-ovo Chicken Embryo Culture System Suitable for Imaging and Microsurgery Applications

<em> Экс-ово</em> Куриного эмбриона культуры систему, пригодную для обработки изображений и микрохирургии Приложения

Understanding the relationships between genetic and microenvironmental factors that drive normal and malformed embryonic development is fundamental for ...

Imaging Cell Shape Change in Living <em>Drosophila</em> Embryos

Imaging Cell Shape Change in Living Drosophila Embryos

Изображениями сотовый изменения формы в живых<em> Drosophila</em> Эмбрионы

The developing Drosophila melanogaster embryo undergoes a number of cell shape changes that are highly amenable to live confocal imaging.  Cell shape ...

Chromatin Immunoprecipitation Assay for Tissue-specific Genes using Early-stage Mouse Embryos

Хроматин Иммунопреципитация Пробирной для тканеспецифические Гены использованием ранней стадии эмбрионы мыши

Chromatin immunoprecipitation (ChIP) is a powerful tool to identify protein:chromatin interactions that occur in the context of living cells 1-3. This ...

<em>In Ovo</em> Electroporation in Embryonic Chick Retina

In Ovo Electroporation in Embryonic Chick Retina

<em>В Ovo</em> Электропорация в эмбриональной сетчатки Chick

Chicken embryonic retina is an excellent tool to study retinal development in higher vertebrates. Because of large size and external development, it is ...

Gene Transfer into Older Chicken Embryos by <em>ex ovo</em> Electroporation

Gene Transfer into Older Chicken Embryos by ex ovo Electroporation

Перенос генов в старых куриных эмбрионов на<em&gt; Бывший ово</em&gt; Электропорация

The chicken embryo provides an  excellent model system for studying gene function and regulation during  embryonic development. In ovo electroporation is ...