Name: stereotactic intracranial implantation and in vivo bioluminescent imaging of tumor xenografts in a mouse model system of glioblastoma multiforme
Uploaded: 2012-09-25T11:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme at JoVE.com

Nous sommes reconnaissants envers le Dr Andrew Hollander, Sara Davis, Lee Shuman, Tim Jenkins, et le Dr Xu Xiangsheng pour leur expertise. Nous reconnaissons l&#39;appui du Dr Ann Kennedy. BCB a été pris en charge sur la formation Radiation Biology Grant C5T32CA009677. JFD a été pris en charge sur le prix de Burroughs Wellcome carrière pour les scientifiques médicaux (1006792). JLB a été pris en charge par la subvention hausses (5 R25 CA140116-03). Nous tenons à remercier le Dr Steve Hahn dont les encouragements et le soutien a contribué à rendre notre recherche possible. Nous tenons également à remercier l&#39;Université de Pennsylvanie Centre de Nano-Bio Interface (NBIC) et le Dr Dennis Discher d&#39;encouragement et des commentaires utiles. Nous reconnaissons le Fonds pour l&#39;imagerie des petits animaux (SAIF) à l&#39;Université de Pennsylvanie pour l&#39;utilisation de leurs installations centrales IRM et optique / bioluminescence. Ces techniques ont été développées dans le cadre de projets qui ont été soutenus par le National Institutes of Health (RC1 CA145075 et K08 NS076548-01).

A. Préparation pré-opératoire des cellules tumorales <ol><li> Transduction des cellules U251 glioblastome multiforme avec un vecteur d&#39;expression lentiviral (pGreenFire, Système Biosciences) pour exprimer de manière stable le gène de la luciférase de luciole. </li><li> Ces cellules ont été cultivées dans 10 ml de modification complète de Dulbecco du milieu de Eagle (DMEM), qui se compose de DMEM supplémenté avec du sérum de veau foetal à 10%, 1% de pénicilline-streptomycine et 1% acides aminés non...

<ol>
	<li>Stupp, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma.">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> N. Engl. J. Med. 352, 987-996 (2005).</li><li>Jacobs, V. L., Valdes, P. A., Hickey, W. F., De Leo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+review+of+in+vivo+GBM+rodent+models:+emphasis+on+the+CNS-1+tumour+model.">Current review of in vivo GBM rodent models: emphasis on the CNS-1 tumour model.</a> ASN Neuro. 3, e00063 (2011).</li><li>Shelton, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+pre-clinical+in+vivo+mouse+model+for+malignant+brain+tumor+growth+and+invasion.">A novel pre-clinical in vivo mouse model for malignant brain tumor growth and invasion.</a> J. Neurooncol. 99, 165-176 (2010).</li><li>Brehar, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+xenograft+glioblastoma+implants+in+nude+mice+brain.">The development of xenograft glioblastoma implants in nude mice brain.</a> J. Med. Life. 1, 275-286 (2008).</li><li>Ozawa, T., James, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+Intracranial+Brain+Tumor+Xenografts+With+Subsequent+Analysis+of+Tumor+Growth+and+Response+to+Therapy+using+Bioluminescence+Imaging.">Establishing Intracranial Brain Tumor Xenografts With Subsequent Analysis of Tumor Growth and Response to Therapy using Bioluminescence Imaging.</a> J. Vis. Exp. (41), e1986 (2010).</li><li>Radaelli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistopathological+and+neuroimaging+characterization+of+murine+orthotopic+xenograft+models+of+glioblastoma+multiforme+recapitulating+the+most+salient+features+of+human+disease.">Immunohistopathological and neuroimaging characterization of murine orthotopic xenograft models of glioblastoma multiforme recapitulating the most salient features of human disease.</a> Histol. Histopathol. 24, 879-891 (2009).</li><li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+the+efficacy+of+drug-loaded+nanocarriers+against+brain+tumors+by+targeted+radiation+therapy.">Enhancing the efficacy of drug-loaded nanocarriers against brain tumors by targeted radiation therapy.</a> , (2012).</li><li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+method+for+reproducible+and+accurate+image-guided+stereotactic+cranial+irradiation+of+brain+tumors+using+the+Small+Animal+Radiation+Research+Platform+(SARRP).">An integrated method for reproducible and accurate image-guided stereotactic cranial irradiation of brain tumors using the Small Animal Radiation Research Platform (SARRP).</a> Transl. Oncol. , (2012).</li><li>Park, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroPET/CT+imaging+of+an+orthotopic+model+of+human+glioblastoma+multiforme+and+evaluation+of+pulsed+low-dose+irradiation.">MicroPET/CT imaging of an orthotopic model of human glioblastoma multiforme and evaluation of pulsed low-dose irradiation.</a> Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 80, 885-892 (2011).</li><li>Szentirmai, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+bioluminescence+imaging+of+luciferase+expressing+intracranial+U87+xenografts:+correlation+with+magnetic+resonance+imaging+determined+tumor+volume+and+longitudinal+use+in+assessing+tumor+growth+and+antiangiogenic+treatment+effect.">Noninvasive bioluminescence imaging of luciferase expressing intracranial U87 xenografts: correlation with magnetic resonance imaging determined tumor volume and longitudinal use in assessing tumor growth and antiangiogenic treatment effect.</a> Neurosurgery. 58, 365-372 (2006).</li><li>Dinca, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+monitoring+of+intracranial+glioblastoma+xenograft:+response+to+primary+and+salvage+temozolomide+therapy.">Bioluminescence monitoring of intracranial glioblastoma xenograft: response to primary and salvage temozolomide therapy.</a> J. Neurosurg. 107, 610-616 (2007).</li></ol>

La méthode d&#39;implantation stéréotaxique de cellules cancéreuses chez les souris décrites dans cet article génère de façon reproductible des tumeurs qui sont raisonnablement récapitulent le modèle d&#39;infiltration et de croissance rapide du glioblastome multiforme clinique 2, 6-8. Cette technique est particulièrement bien adaptée à une stratification des expériences souris uniformément sur différents groupes de traitement où les tumeurs de taille comparable reproductibles et les proprié...

<table border="1"><tbody><tr><td> Description </td><td> Fournisseur </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Numérique Juste pour souris stéréotaxique Instrument </td><td> Stoelting </td><td> 51730D </td><td> Plate-forme pour l&#39;implantation stéréotaxique de souris </td></tr><tr><td> La kétamine / xylazine </td><td></td><td></td><td> Anesthésie injectable </td></tr><tr><td> Pommade Vétérinaire Puralube (ophtalmique) </td><td> Amazon.com </td><td></td><td> Pour éviter le dessèchement des yeux de la souris </td></tr><tr><td> percer support pour la plate-forme stéréotaxique </td><td> Stoelting </td><td> 51681 </td><td></td></tr><tr><td> Micromoteur Perceuse électrique </td><td> Stoelting </td><td> 51449 </td><td> Pour percer à travers le crâne </td></tr><tr><td> 0,45 mm bits foret en carbure </td><td> Stoelting </td><td> 514551 </td><td></td></tr><tr><td> Cotons-tiges stériles </td><td> Fisher Scientific </td><td> 23-400-100 </td><td></td></tr><tr><td> Billes de verre sec stérilisateur (Germinator 500) </td><td> Braintree scientifique </td><td> GER-5287 </td><td> Pour stériliser les instruments chirurgicaux en métal </td></tr><tr><td> Souris sonde rectale </td><td> Braintree scientifique </td><td> RET-3-ISO </td><td> Compatible avec le régulateur de température </td></tr><tr><td> Contrôleur de température (TCAT-2DF) </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 727561 </td><td> Régulateur de température pour maintenir la température des animaux au cours de la chirurgie </td></tr><tr><td> Petite plaque chauffante </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 727617 </td><td> Pour une utilisation avec régulateur de température pour chauffer la souris pendant la chirurgie. La plaque chauffante place sous la souris sur la plate-forme stéréotaxique. </td></tr><tr><td> Scalpels jetables </td><td> BD Bard-Parker </td><td> 2015-11 </td><td> N ° 10 scalpel </td></tr><tr><td> Seringue de 10 microlitre </td><td> Hamilton </td><td> 7635-01 </td><td> Pour l&#39;injection des cellules tumorales </td></tr><tr><td> 30 aiguilles de calibre, 1 &quot;de long, à bout plat </td><td> Hamilton </td><td> Divers </td><td> Doivent être compatibles avec la seringue de 10 ul </td></tr><tr><td> Nanomite pompe seringue programmable </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 704507 </td><td> Numérique motorisé seringue d&#39;injection pour appareil stéréotaxique </td></tr><tr><td> Cellulose compresses stériles lance chirurgicales </td><td> Ultracell </td><td> 40410 </td><td> Pour sécher le domaine de la chirurgie </td></tr><tr><td> La cire à os </td><td> Ethicon </td><td> W31 </td><td> Pour sceller le trou de trépan </td></tr><tr><td> Tissumend II synthétique résorbable histoadhésif </td><td> Des produits vétérinaires Laboratoires </td><td> 3002931 </td><td> Pour sceller l&#39;incision </td></tr><tr><td> Pompe d&#39;eau chaude avec coussin chauffant </td><td> Gaymar </td><td> TP-650 </td><td> Souris réchauffe en période post-opératoire </td></tr><tr><td> IVIS Lumina II </td><td> Caliper Life Sciences </td><td></td><td> Bioluminescent imageur </td></tr><tr><td> Sel de potassium de D-luciférine </td><td> Or la biotechnologie </td><td> CHANCE-1 </td><td> Luciférine pour l&#39;imagerie bioluminescente </td></tr></tbody></table>

stereotactic intracranial implantation and in vivo bioluminescent imaging of tumor xenografts in a mouse model system of glioblastoma multiforme

Le glioblastome multiforme (GBM) est un cancer de haut grade du cerveau primaire avec une survie médiane de seulement 14,6 mois chez les humains, malgré norme tri-modalité de traitement consistant en une résection chirurgicale, la radiothérapie post-opératoire et la chimiothérapie témozolomide 1. De nouvelles approches thérapeutiques sont clairement nécessaires pour améliorer la survie des patients et la qualité de vie. Le développement de stratégies de traitement plus efficaces serait facilitée par des modèles animaux de GBM qui récapitulent les maladies humaines tout en permettant l&#39;imagerie en série pour contrôler la croissance tumorale et la réponse au traitement. Dans cet article, nous décrivons notre technique d&#39;implantation stéréotaxique précise de bio-imageables cellules cancéreuses GBM dans le cerveau des souris nude résultant de xénogreffes tumorales qui récapitulent les principales caractéristiques cliniques de GBM 2. Cette méthode donne des tumeurs qui sont reproductibles et sont situés dans des endroits précis anatomiques tout en permettant l&#39;imagerie in vivo de marqueurs bioluminescents série surveiller intrala croissance des xénogreffes crânienne et de la réponse aux traitements de 3-5. Cette méthode est également bien toléré par les animaux avec une morbidité péri-opératoire faible et la mortalité.

Watch this Scientific Journal Video about Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme at JoVE.com

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Nous décrivons une méthode intégrée pour la précision, l&#39;implantation stéréotaxique de cellules humaines de glioblastome multiforme dans le cerveau des souris nude et de série subséquente<em&gt; In vivo</em&gt; Imagerie pour surveiller la croissance et de la réponse au traitement des xénogreffes qui en résultent.

Implantation stéréotaxique intracrânienne et<em&gt; In vivo</em&gt; Imagerie bioluminescente de xénogreffes tumorales dans un système de modèle de souris de glioblastome multiforme

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Multi-photon imagerie de l&#39;invasion des cellules tumorales dans un modèle de souris orthotopique du carcinome épidermoïde oral

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Recherche

Médecine

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

Dans l&#39;imagerie de bioluminescence in vivo de la tumeur Dynamics hypoxie des métastases cérébrales du cancer du sein dans un modèle murin

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

In vivo double Substrat Bioluminescent Imaging

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate ...

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

Implantation intracrânienne avec 3D ultérieures In Vivo Bioluminescent imagerie des gliomes murin

The mouse glioma 261 (GL261) is recognized as an in vivo model system that recapitulates many of the features of human glioblastoma multiforme (GBM). The ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

Dépistage du mélanome Modificateurs l&#39;aide d&#39;un modèle de tumeur Zebrafish Autochtone

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

Live Imaging of Drug Responses in the Tumor Microenvironment in Mouse Models of Breast Cancer

Vivez l&#39;imagerie des réponses de drogues dans le microenvironnement des tumeurs dans les modèles murins de cancer du sein

The tumor microenvironment plays a pivotal role in tumor initiation, progression, metastasis, and the response to anti-cancer therapies. Three-dimensional ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel haute résolution<em&gt; In vivo</em&gt; Technique d&#39;imagerie pour étudier la réponse dynamique des structures intracrâniennes à la croissance tumorale et de thérapeutique

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

In vivo 19 F IRM pour le suivi cellulaire

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Creating Anatomically Accurate and Reproducible Intracranial Xenografts of Human Brain Tumors

Création anatomique précise et reproductible intracrânienne xénogreffes de tumeurs cérébrales humaines

Orthotopic tumor models are currently the best way to study the characteristics of a tumor type, with and without intervention, in the context of a live ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

Télémétrie intra-utérine mesurer souris contractile pression<em&gt; In Vivo</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...