Name: stereotactic intracranial implantation and in vivo bioluminescent imaging of tumor xenografts in a mouse model system of glioblastoma multiforme
Uploaded: 2012-09-25T11:00:00
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Wir sind dankbar, dass Dr. Andrew Hollander, Sara Davis, Lee Shuman, Tim Jenkins, und Dr. Xiangsheng Xu für ihre fachkundige Unterstützung. Wir erkennen die Unterstützung von Dr. Ann Kennedy. BCB wurde auf der Strahlenbiologie Training Grant C5T32CA009677 unterstützt. JFD wurde auf der Burroughs Wellcome Career Award for Medical Wissenschaftler (1006792) unterstützt. JLB wurde auf der Supers Zuschuss (5 R25 CA140116-03) unterstützt. Wir möchten Dr. Steve Hahn, deren Ermutigung und Unterstützung hat dazu beigetragen, dass unsere Forschung möglich anzuerkennen. Wir möchten auch die University of Pennsylvania Nano-Bio-Interface Center (NBIC) und Dr. Dennis Discher für Ermutigung und hilfreiche Kommentare. Wir erkennen die Small Animal Imaging Facility (SAIF) an der University of Pennsylvania für die Nutzung ihrer MRI und optische / Biolumineszenz Core Facilities. Diese Techniken wurden im Rahmen von Projekten, die von den National Institutes of Health (RC1 CA145075 und K08 unterstützt wurden entwickelt NS076548-01).

A. Pre-Operative Tumor Cell Preparation <ol><li> Transduzieren U251 Glioblastom multiforme Zellen mit einem lentiviralen Expressionsvektor (pGreenFire, System Biosciences), um stabil exprimieren, das Glühwürmchen-Luciferase-Gen. </li><li> Diese Zellen wurden in 10 ml komplettem Dulbeccos Modifikation von Eagle-Medium (DMEM), welches aus DMEM besteht, ergänzt mit 10% fötalem Kälberserum, 1% Penicillin-Streptomycin und 1% nicht-essentielle Aminosäuren in einem T75 Zellkulturflasche Inkubieren bei 5% C0 2</sub...

<ol>
	<li>Stupp, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma.">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> N. Engl. J. Med. 352, 987-996 (2005).</li><li>Jacobs, V. L., Valdes, P. A., Hickey, W. F., De Leo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+review+of+in+vivo+GBM+rodent+models:+emphasis+on+the+CNS-1+tumour+model.">Current review of in vivo GBM rodent models: emphasis on the CNS-1 tumour model.</a> ASN Neuro. 3, e00063 (2011).</li><li>Shelton, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+pre-clinical+in+vivo+mouse+model+for+malignant+brain+tumor+growth+and+invasion.">A novel pre-clinical in vivo mouse model for malignant brain tumor growth and invasion.</a> J. Neurooncol. 99, 165-176 (2010).</li><li>Brehar, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+xenograft+glioblastoma+implants+in+nude+mice+brain.">The development of xenograft glioblastoma implants in nude mice brain.</a> J. Med. Life. 1, 275-286 (2008).</li><li>Ozawa, T., James, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+Intracranial+Brain+Tumor+Xenografts+With+Subsequent+Analysis+of+Tumor+Growth+and+Response+to+Therapy+using+Bioluminescence+Imaging.">Establishing Intracranial Brain Tumor Xenografts With Subsequent Analysis of Tumor Growth and Response to Therapy using Bioluminescence Imaging.</a> J. Vis. Exp. (41), e1986 (2010).</li><li>Radaelli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistopathological+and+neuroimaging+characterization+of+murine+orthotopic+xenograft+models+of+glioblastoma+multiforme+recapitulating+the+most+salient+features+of+human+disease.">Immunohistopathological and neuroimaging characterization of murine orthotopic xenograft models of glioblastoma multiforme recapitulating the most salient features of human disease.</a> Histol. Histopathol. 24, 879-891 (2009).</li><li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+the+efficacy+of+drug-loaded+nanocarriers+against+brain+tumors+by+targeted+radiation+therapy.">Enhancing the efficacy of drug-loaded nanocarriers against brain tumors by targeted radiation therapy.</a> , (2012).</li><li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+method+for+reproducible+and+accurate+image-guided+stereotactic+cranial+irradiation+of+brain+tumors+using+the+Small+Animal+Radiation+Research+Platform+(SARRP).">An integrated method for reproducible and accurate image-guided stereotactic cranial irradiation of brain tumors using the Small Animal Radiation Research Platform (SARRP).</a> Transl. Oncol. , (2012).</li><li>Park, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroPET/CT+imaging+of+an+orthotopic+model+of+human+glioblastoma+multiforme+and+evaluation+of+pulsed+low-dose+irradiation.">MicroPET/CT imaging of an orthotopic model of human glioblastoma multiforme and evaluation of pulsed low-dose irradiation.</a> Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 80, 885-892 (2011).</li><li>Szentirmai, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+bioluminescence+imaging+of+luciferase+expressing+intracranial+U87+xenografts:+correlation+with+magnetic+resonance+imaging+determined+tumor+volume+and+longitudinal+use+in+assessing+tumor+growth+and+antiangiogenic+treatment+effect.">Noninvasive bioluminescence imaging of luciferase expressing intracranial U87 xenografts: correlation with magnetic resonance imaging determined tumor volume and longitudinal use in assessing tumor growth and antiangiogenic treatment effect.</a> Neurosurgery. 58, 365-372 (2006).</li><li>Dinca, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+monitoring+of+intracranial+glioblastoma+xenograft:+response+to+primary+and+salvage+temozolomide+therapy.">Bioluminescence monitoring of intracranial glioblastoma xenograft: response to primary and salvage temozolomide therapy.</a> J. Neurosurg. 107, 610-616 (2007).</li></ol>

Die Methode der stereotaktischen Implantation von Krebszellen bei Mäusen in diesem Papier beschrieben reproduzierbar erzeugt Tumoren, die vernünftigerweise zu rekapitulieren die infiltrative und schnelle Wachstum Muster der klinischen Glioblastoma multiforme 2, 6-8. Diese Technik eignet sich besonders für Experimente Stratifizierung Mäusen gleichmäßig auf verschiedenen Behandlungsgruppen, wo reproduzierbare Tumoren von vergleichbarer Größe und biologischen Eigenschaften und in bestimmten anatomischen ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Beschreibung </td><td> Lieferant </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Kommentare </td></tr><tr><td> Digitale Just for Maus Stereotaktische Instrument </td><td> Stoelting </td><td> 51730D </td><td> Stereotaktische Plattform für Maus-Implantation </td></tr><tr><td> Ketamin / Xylazin </td><td></td><td></td><td> Injizierbare Anästhesie </td></tr><tr><td> Puralube Vet Salbe (Augenheilkunde) </td><td> Amazon.com </td><td></td><td> Zum Trocknen der Maus in die Augen zu verhindern </td></tr><tr><td> Bohren Halter für die stereotaktische Plattform </td><td> Stoelting </td><td> 51681 </td><td></td></tr><tr><td> Mikromotor Bohrmaschine </td><td> Stoelting </td><td> 51449 </td><td> Zum Bohren durch den Schädel </td></tr><tr><td> 0,45 mm Hartmetall Bohrer </td><td> Stoelting </td><td> 514551 </td><td></td></tr><tr><td> Sterile Wattestäbchen </td><td> Fisher Scientific </td><td> 23-400-100 </td><td></td></tr><tr><td> Glasperle trocken Sterilisator (Germinator 500) </td><td> Braintree Scientific </td><td> GER-5287 </td><td> Auf Metall chirurgische Instrumente zu sterilisieren </td></tr><tr><td> Maus Rektalsonde </td><td> Braintree Scientific </td><td> RET-3-ISO </td><td> Kompatibel mit dem Temperaturregler </td></tr><tr><td> Temperaturregler (TCAT-2DF) </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 727561 </td><td> Temperaturregler auf tierische die Temperatur während der Operation zu erhalten </td></tr><tr><td> Kleine Heizplatte </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 727617 </td><td> Für den Einsatz mit Temperaturregler auf Maus während der Operation zu wärmen. Die Heizplatte passt unter der Maus auf den stereotaktischen Plattform. </td></tr><tr><td> Einmalskalpelle </td><td> BD Bard-Parker </td><td> 2015-11 </td><td> Nr. 10 Skalpell </td></tr><tr><td> 10 Mikroliterspritze </td><td> Hamilton </td><td> 7635-01 </td><td> Zur Injektion von Tumorzellen </td></tr><tr><td> 30-Gauge-Nadeln, 1 &quot;lang, mit Kegelkuppe </td><td> Hamilton </td><td> Verschiedene </td><td> Müssen kompatibel sein mit dem 10 &amp;mgr; l-Spritze </td></tr><tr><td> Nanomite Programmierbare Spritzenpumpe </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 704507 </td><td> Digitale motorisierte Spritze Injektor zur stereotaktischen Gerät </td></tr><tr><td> Cellulose sterilen chirurgischen Speer Schwämmen </td><td> Ultracell </td><td> 40410 </td><td> Um das OP-Feld trocknen </td></tr><tr><td> Knochenwachs </td><td> Ethicon </td><td> W31 </td><td> Um das Bohrloch abzudichten </td></tr><tr><td> Tissumend II synthetischen resorbierbaren Gewebekleber </td><td> Veterinary Products Laboratories </td><td> 3002931 </td><td> Um den Einschnitt abzudichten </td></tr><tr><td> Hot Wasserpumpe mit Erwärmung pad </td><td> Gaymar </td><td> TP-650 </td><td> Wärmt Mäuse in postoperativen Phase </td></tr><tr><td> IVIS Lumina II </td><td> Caliper Life Science </td><td></td><td> Bioluminescent Imager </td></tr><tr><td> D-Luciferin Kaliumsalz </td><td> Gold Biotechnologie </td><td> LUCK-1 </td><td> Luciferin für Biolumineszenz Bildgebung </td></tr></tbody></table>

stereotactic intracranial implantation and in vivo bioluminescent imaging of tumor xenografts in a mouse model system of glioblastoma multiforme

Glioblastoma multiforme (GBM) ist ein hochwertiges primären bösartigen Hirntumors mit einer medianen Überlebenszeit von nur 14,6 Monate bei Menschen trotz Standard Tri-Modalität Behandlung, bestehend aus chirurgischen Resektion, postoperative Strahlentherapie und Temozolomid-Chemotherapie ein. Neue therapeutische Ansätze sind klar notwendig, um das Überleben der Patienten und die Lebensqualität zu verbessern. Die Entwicklung wirksamer Behandlungsstrategien würde Tiermodellen GBM, die menschliche Krankheiten zu rekapitulieren erlaubt noch serielle Bildgebung Tumorwachstum und Ansprechen auf die Behandlung zu überwachen unterstützt werden. In diesem Papier beschreiben wir unsere Technik zur präzisen stereotaktischen Implantation von bio-bebilderbare GBM Krebszellen in das Gehirn von Nacktmäusen was Tumorxenotransplantaten die wichtigsten klinischen Merkmale der GBM 2 rekapitulieren. Diese Methode führt zu Tumoren, die reproduzierbar sind und in präzise anatomische Standorten während es in vivo Biolumineszenz Bildgebung seriell zu überwachen intrakranialen Xenotransplantat Wachstum und ansprechend auf Behandlungen 3-5. Diese Methode wird auch von den Tieren mit niedrigem perioperative Morbidität und Mortalität gut vertragen.

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Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Wir beschreiben eine integrierte Methode für die präzise, ​​stereotaktische Implantation von humanen Glioblastom multiforme Zellen in den Gehirnen von Nacktmäusen und anschließende serielle<em&gt; In vivo</em&gt; Bildgebung zu überwachen und Wachstum Ansprechen auf die Behandlung der resultierenden Xenotransplantate.

Stereotaktische Intrakranielle Implantation und<em&gt; In vivo</em&gt; Bioluminescent Imaging der Tumorxenotransplantaten in einem Maus-Modell-System des Glioblastoma multiforme

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

Multi-Photonen-Imaging der Tumorzellinvasion in einem orthotopen Mausmodell des oralen Plattenepithelkarzinoms

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

Forschung

Medizin

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

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It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

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Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate ...

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

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Intrakranielle Implantation mit anschließender 3D In Vivo Bioluminescent Imaging von Murine Gliome

The mouse glioma 261 (GL261) is recognized as an in vivo model system that recapitulates many of the features of human glioblastoma multiforme (GBM). The ...

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Live Imaging of Drug Responses in the Tumor Microenvironment in Mouse Models of Breast Cancer

Live-Imaging of Drug Responses in der Tumor-Mikroumgebung in Mausmodellen von Brustkrebs

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A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel Hochauflösende<em&gt; In vivo</em&gt; Bildtechnik, um die Dynamik der intrakranielle Strukturen zu Tumorwachstum und Therapeutics Studieren

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

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In-vivo-19 F-MRT für die Zellverfolgung

In vivo 19F MRI allows quantitative cell tracking without the use of ionizing radiation. It is a noninvasive technique that can be applied to humans. ...

Creating Anatomically Accurate and Reproducible Intracranial Xenografts of Human Brain Tumors

Erstellen Anatomisch genaue und reproduzierbare intrakranielle Xenografts der Menschen Hirntumoren

Orthotopic tumor models are currently the best way to study the characteristics of a tumor type, with and without intervention, in the context of a live ...

Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

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Intrauterine Telemetrie zur Maus Kontraktionsdruck messen<em&gt; In-vivo-</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...