Name: stereotactic intracranial implantation and in vivo bioluminescent imaging of tumor xenografts in a mouse model system of glioblastoma multiforme
Uploaded: 2012-09-25T11:00:00
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우리는 박사 앤드류 홀랜더, 사라 데이비스, 리 Shuman, 팀 젠킨스와 전문가 도움 박사 Xiangsheng 슈에 감사하고 있습니다. 우리는 박사 앤 케네디의 지원을 인정합니다. BCB는 방사선 생물학 교육 기금 C5T32CA009677에서 지원되었습니다. JFD는 의료 과학자 (1006792)에 대한 버로우즈 웰컴 경력 상에 지원되었다. JLB은 슈퍼 히어로 부여 (5 R25 CA140116-03)에서 지원되었습니다. 우리는 그의 격려와 지원을 우리의 연구가 가능하게 도움이되었습니다 박사 스티브 돼야 해 한이을 인정하고 싶습니다. 우리는 또한 격려와 도움이 의견 펜실베니아 나노 바이오 인터페이스 센터 (NBIC) 및 박사 데니스 Discher 대학을 감사드립니다. 우리는 자신의 MRI 및 광학 / Bioluminescence 핵심 시설 사용을 위해 펜실베니아 대학에서 소형 동물 이미징 시설 (사이프)을 인정합니다. 이 기술은 국립 보건원 (RC1 CA145075 및 K08 NS076548 -에 의해 지원 된 프로젝트의 일환으로 개발01).

A. 사전 수술 종양 세포 준비 <ol><li> lentiviral 발현 벡터 (pGreenFire, 시스템 Biosciences)와 Transduce U251 glioblastoma multiforme의 전지는 안정적 반딧불의 루시 페라 제 유전자를 표현합니다. </li><li> 이러한 세포 10 % 소 태아 혈청, 1 % 페니실린 - 스트렙토 마이신과에 잠복기가 T75 조직 배양 플라스크에 1퍼센트 불필요한 아미노산을 보충 DMEM으로 구성 이글 배지 (DMEM)의 전체 Dulbecco의 수정의 10 ML에서 재배 된 5%...

<ol>
	<li>Stupp, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma.">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> N. Engl. J. Med. 352, 987-996 (2005).</li><li>Jacobs, V. L., Valdes, P. A., Hickey, W. F., De Leo, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+review+of+in+vivo+GBM+rodent+models:+emphasis+on+the+CNS-1+tumour+model.">Current review of in vivo GBM rodent models: emphasis on the CNS-1 tumour model.</a> ASN Neuro. 3, e00063 (2011).</li><li>Shelton, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+pre-clinical+in+vivo+mouse+model+for+malignant+brain+tumor+growth+and+invasion.">A novel pre-clinical in vivo mouse model for malignant brain tumor growth and invasion.</a> J. Neurooncol. 99, 165-176 (2010).</li><li>Brehar, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+xenograft+glioblastoma+implants+in+nude+mice+brain.">The development of xenograft glioblastoma implants in nude mice brain.</a> J. Med. Life. 1, 275-286 (2008).</li><li>Ozawa, T., James, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+Intracranial+Brain+Tumor+Xenografts+With+Subsequent+Analysis+of+Tumor+Growth+and+Response+to+Therapy+using+Bioluminescence+Imaging.">Establishing Intracranial Brain Tumor Xenografts With Subsequent Analysis of Tumor Growth and Response to Therapy using Bioluminescence Imaging.</a> J. Vis. Exp. (41), e1986 (2010).</li><li>Radaelli, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunohistopathological+and+neuroimaging+characterization+of+murine+orthotopic+xenograft+models+of+glioblastoma+multiforme+recapitulating+the+most+salient+features+of+human+disease.">Immunohistopathological and neuroimaging characterization of murine orthotopic xenograft models of glioblastoma multiforme recapitulating the most salient features of human disease.</a> Histol. Histopathol. 24, 879-891 (2009).</li><li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+the+efficacy+of+drug-loaded+nanocarriers+against+brain+tumors+by+targeted+radiation+therapy.">Enhancing the efficacy of drug-loaded nanocarriers against brain tumors by targeted radiation therapy.</a> , (2012).</li><li>Baumann, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+integrated+method+for+reproducible+and+accurate+image-guided+stereotactic+cranial+irradiation+of+brain+tumors+using+the+Small+Animal+Radiation+Research+Platform+(SARRP).">An integrated method for reproducible and accurate image-guided stereotactic cranial irradiation of brain tumors using the Small Animal Radiation Research Platform (SARRP).</a> Transl. Oncol. , (2012).</li><li>Park, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroPET/CT+imaging+of+an+orthotopic+model+of+human+glioblastoma+multiforme+and+evaluation+of+pulsed+low-dose+irradiation.">MicroPET/CT imaging of an orthotopic model of human glioblastoma multiforme and evaluation of pulsed low-dose irradiation.</a> Int. J. Radiat. Oncol. Biol. Phys. 80, 885-892 (2011).</li><li>Szentirmai, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Noninvasive+bioluminescence+imaging+of+luciferase+expressing+intracranial+U87+xenografts:+correlation+with+magnetic+resonance+imaging+determined+tumor+volume+and+longitudinal+use+in+assessing+tumor+growth+and+antiangiogenic+treatment+effect.">Noninvasive bioluminescence imaging of luciferase expressing intracranial U87 xenografts: correlation with magnetic resonance imaging determined tumor volume and longitudinal use in assessing tumor growth and antiangiogenic treatment effect.</a> Neurosurgery. 58, 365-372 (2006).</li><li>Dinca, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioluminescence+monitoring+of+intracranial+glioblastoma+xenograft:+response+to+primary+and+salvage+temozolomide+therapy.">Bioluminescence monitoring of intracranial glioblastoma xenograft: response to primary and salvage temozolomide therapy.</a> J. Neurosurg. 107, 610-616 (2007).</li></ol>

이 글에 설명 된 쥐 암 세포의 stereotactic 주입의 방법은 reproducibly 합리적으로 임상 glioblastoma multiforme 2, 6-8의 infiltrative 및 빠른 성장 패턴을 요점을 되풀이 종양을 생성합니다. 이 기술은 특히 비교 크기와 생물학적 특성 및 특정 해부학 위치에서 재현 종양 바람직 다른 치료 그룹에 균등하게 쥐를 stratifying 실험에 잘 적합합니다. 우리가 설명하는 기술을 사용하여 종양 세포의 Stereotactic 주?...

<table border="1"><tbody><tr><td> 기술 </td><td> 공급 업체 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 </td></tr><tr><td> 그냥 마우스 Stereotaxic 악기를위한 디지털 </td><td> Stoelting </td><td> 51730D </td><td> 마우스 주입을위한 Stereotactic 플랫폼 </td></tr><tr><td> 케타민 / xylazine </td><td></td><td></td><td> Injectable 마취 </td></tr><tr><td> Puralube 용사의 연고 (안과) </td><td> Amazon.com </td><td></td><td> 마우스의 눈 건조를 방지하려면 </td></tr><tr><td> stereotactic 플랫폼 홀더를 드릴 </td><td> Stoelting </td><td> 51,681 </td><td></td></tr><tr><td> Micromotor 전기 드릴 </td><td> Stoelting </td><td> 51,449 </td><td> 두개골을 통해 드릴을위한 </td></tr><tr><td> 0.45 mm 초경 드릴 비트 </td><td> Stoelting </td><td> 514551 </td><td></td></tr><tr><td> 멸균 면봉 </td><td> 피셔 과학 </td><td> 23-400-100 </td><td></td></tr><tr><td> 유리 구슬 건조 살균기 (Germinator 500) </td><td> Braintree 과학 </td><td> GER-5287 </td><td> 금속 수술기구를 소독하기 </td></tr><tr><td> 마우스 직장 프로브 </td><td> Braintree 과학 </td><td> RET-3-ISO </td><td> 온도 컨트롤러와 호환 </td></tr><tr><td> 온도 컨트롤러 (TCAT-2DF) </td><td> 하버드 장치 </td><td> 727561 </td><td> 수술하는 동안 동물의 온도를 유지하기 위해 온도 컨트롤러 </td></tr><tr><td> 소형 가열 플레이트 </td><td> 하버드 장치 </td><td> 727617 </td><td> 수술하는 동안 마우스를 따뜻하게 온도 컨트롤러와 함께 사용. 가열 플레이트는 stereotaxic 플랫폼에서 마우스 아래에 맞출 수 있습니다. </td></tr><tr><td> 일회용 메스 </td><td> BD 음유 시인 - 파커 </td><td> 2015-11 </td><td> # 10 메스 </td></tr><tr><td> 10 마이크로 리터 주사기 </td><td> 해밀턴 </td><td> 7635-01 </td><td> 종양 세포의 주입을 위해 </td></tr><tr><td> 평면 포인트 1 &quot;길이 30 게이지 바늘, </td><td> 해밀턴 </td><td> 여러 </td><td> 10 μl 주사기와 호환되어야 함 </td></tr><tr><td> 프로그램 주사기 펌프를 Nanomite </td><td> 하버드 장치 </td><td> 704507 </td><td> stereotaxic 장치에 대한 디지털 전동 주사기 주사기 </td></tr><tr><td> 셀룰로오스 무균 수술 창 스폰지 </td><td> Ultracell </td><td> 40,410 </td><td> 수술 필드를 건조하려면 </td></tr><tr><td> 뼈 왁스 </td><td> Ethicon </td><td> W31 </td><td> 버 구멍을 밀봉하는 방법 </td></tr><tr><td> Tissumend II 합성 흡수성 조직 접착제 </td><td> 수의학 제품 연구소 </td><td> 3002931 </td><td> 절개를 밀봉하는 방법 </td></tr><tr><td> 온난화 패드와 온수 펌프 </td><td> Gayma연구 </td><td> TP-650 </td><td> 수술 기간에 온도가 올라 마우스 </td></tr><tr><td> IVIS Lumina II </td><td> 캘리퍼스 생명 과학 </td><td></td><td> 발광 생물 영상 </td></tr><tr><td> D-Luciferin의 칼륨 소금 </td><td> 골드 생명 공학 </td><td> 빕니다-1 </td><td> 발광 생물 이미징에 대한 Luciferin </td></tr></tbody></table>

stereotactic intracranial implantation and in vivo bioluminescent imaging of tumor xenografts in a mouse model system of glioblastoma multiforme

Glioblastoma multiforme의 (GBM)은 수술 절제술, 수술 방사선 요법 및 화학 요법 temozolomide 하나를 구성하는 표준 트라이 양상 치료에도 불구하고 인간 만 14.6 개월 평균 생존과 고급 차 뇌 암입니다. 새로운 치료 방법이 명확하게 삶의 환자의 생존과 품질을 개선하기 위해 필요합니다. 보다 효과적인 치료 전략의 개발은 인간의 질병을 요점을 되풀이 아직 종양의 성장과 치료 반응을 모니터링하기 위해 일련의 이미지를 허용 GBM의 동물 모델에 의해 도왔됩니다. 이 논문에서, 우리는 GBM 2의 주요 임상 기능을 요점을 되풀이 종양 xenografts의 결과로 누드 마우스의 뇌에 생체 이미지 형성 GBM 암 세포의 정확한 stereotactic 주입을위한 우리의 기술을 설명합니다. 이 방법은 재현 아르 종양을 산출하고 순차적 내부를 모니터링하는 생체 발광 생물 이미징에서 허용하는 동시에 정확한 해부학 위치에 자리 잡고 있습니다두개골 이종 이식의 성장과 치료 3-5에 대응. 이 방법은 낮은 perioperative 병적 상태와 사망률과 동물하여 잘 용납입니다.

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Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

우리는 누드 마우스 및 이후 일련의 뇌에 인간 glioblastoma multiforme의 세포의 정확한, stereotactic 주입을위한 통합 방법을 설명<em&gt; 생체 내</em&gt; 이미징의 성장과 결과 xenografts의 치료에 대한 반응을 모니터링합니다.

Stereotactic Intracranial 주입 및<em&gt; 생체에</emGlioblastoma의 Multiforme의 마우스 모델 시스템에서 종양 Xenografts의&gt; 발광 생물 이미징

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Multi-photon Imaging of Tumor Cell Invasion in an Orthotopic Mouse Model of Oral Squamous Cell Carcinoma

구강 편평 세포 암종의 Orthotopic 마우스 모델에서 종양 세포 침략의 다중 광자 이미징

Loco-regional invasion of head and neck cancer is linked to metastatic risk and presents a difficult challenge in designing and implementing patient ...

연구

의학

In vivo Bioluminescence Imaging of Tumor Hypoxia Dynamics of Breast Cancer Brain Metastasis in a Mouse Model

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유방암 뇌 전이의 종양 Hypoxia 역학 생체내의 Bioluminescence 이미징에서는 마우스 모델에서

It is well recognized that tumor hypoxia plays an important role in promoting malignant progression and affecting therapeutic response negatively. There ...

In vivo Dual Substrate Bioluminescent Imaging

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생체 듀얼 기판 발광 생물 이미징에

Our understanding of how and when breast cancer cells transit from established primary tumors to metastatic sites has increased at an exceptional rate ...

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

이후 3D로 Intracranial 주입 VIVO에서</emMurine Gliomas의> 발광 생물 이미징

The mouse glioma 261 (GL261) is recognized as an in vivo model system that recapitulates many of the features of human glioblastoma multiforme (GBM). The ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

Zebrafish Autochthonous 종양 모델을 사용하여 흑종 조절을위한 검사

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

Live Imaging of Drug Responses in the Tumor Microenvironment in Mouse Models of Breast Cancer

유방암의 마우스 모델에서 종양 Microenvironment에 약물 응답의 영상을 라​​이브

The tumor microenvironment plays a pivotal role in tumor initiation, progression, metastasis, and the response to anti-cancer therapies. Three-dimensional ...

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

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소설 고해상도<em&gt; 생체 내</em종양의 성장과 치료학에 두개 내 구조물의 동적 응답을 공부하기&gt; 이미징 기술

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

In vivo 19F MRI for Cell Tracking

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세포 추적을위한 생체 19 F MRI에서

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Creating Anatomically Accurate and Reproducible Intracranial Xenografts of Human Brain Tumors

만들기 해부학 적으로 정확하고 인간의 두뇌 종양의 재현 두개 내 이종 이식

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Intrauterine Telemetry to Measure Mouse Contractile Pressure In Vivo

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자궁 원격 측정은 마우스 수축 압력을 측정하는<em&gt; 생체</em

A complex integration of molecular and electrical signals is needed to transform a quiescent uterus into a contractile organ at the end of pregnancy. ...