Name: modeling colitis-associated cancer with azoxymethane (aom) and dextran sulfate sodium (dss)
Uploaded: 2012-09-11T13:00:00
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Ce travail a été financé en partie par DK089016 et L30 RR030244 (MAC), CA153036 (AS) et P30-DK52574 (pour le Core Washington University digestif recherche sur les maladies). ACI a un Howard Hughes Medical Institute médicale Fellow formation à la recherche.

1. L&#39;induction du cancer colite associée <ol><li> Mettez de côté des cages de sexe et appariés par l&#39;âge 6-8 souris semaines d&#39;âge à être utilisées pour les groupes expérimentaux et de contrôle. Les souris peuvent être étiquetées individuellement avec des marques ou des clips d&#39;oreille queue. </li><li> Au jour 0, le poids de base d&#39;enregistrement et d&#39;injecter par voie intrapéritonéale chaque souris (IP) de 10 mg / kg de solution OMA de travail (1 mg / ml dans une solution salin...

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	<li>Ekbom, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ulcerative+colitis+and+colorectal+cancer.+A+population-based+study.">Ulcerative colitis and colorectal cancer. A population-based study.</a> N. Engl. J. Med. 323, 1228-1233 (1990).</li><li>Terzic, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+and+colon+cancer.">Inflammation and colon cancer.</a> Gastroenterology. 138, 2101-2114 (2010).</li><li>Ullman, T. A., Itzkowitz, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intestinal+inflammation+and+cancer.">Intestinal inflammation and cancer.</a> Gastroenterology. 140, 1807-1816 (2011).</li><li>Okayasu, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysplasia+and+carcinoma+development+in+a+repeated+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis+model.">Dysplasia and carcinoma development in a repeated dextran sulfate sodium-induced colitis model.</a> J. Gastroenterol. Hepatol. 17, 1078-1083 (2002).</li><li>Kanneganti, M., Mino-Kenudson, M., Mizoguchi, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+colitis-associated+carcinogenesis.">Animal models of colitis-associated carcinogenesis.</a> J. Biomed. Biotechnol. 342637, (2011).</li><li>Neufert, C., Becker, C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+inducible+mouse+model+of+colon+carcinogenesis+for+the+analysis+of+sporadic+and+inflammation-driven+tumor+progression.">An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression.</a> Nat. Protoc. 2, 1998-2004 (2007).</li><li>Tanaka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+inflammation-related+mouse+colon+carcinogenesis+model+induced+by+azoxymethane+and+dextran+sodium+sulfate.">A novel inflammation-related mouse colon carcinogenesis model induced by azoxymethane and dextran sodium sulfate.</a> Cancer Sci. 94, 965-973 (2003).</li><li>De Robertis, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+AOM/DSS+murine+model+for+the+study+of+colon+carcinogenesis:+From+pathways+to+diagnosis+and+therapy+studies.">The AOM/DSS murine model for the study of colon carcinogenesis: From pathways to diagnosis and therapy studies.</a> J. Carcinog. 10, 9 (2011).</li><li>Wirtz, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemically+induced+mouse+models+of+intestinal+inflammation.">Chemically induced mouse models of intestinal inflammation.</a> Nat. Protoc. 2, 541-546 (2007).</li><li>Cooper, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinicopathologic+study+of+dextran+sulfate+sodium+experimental+murine+colitis.">Clinicopathologic study of dextran sulfate sodium experimental murine colitis.</a> Lab Invest. 69, 238-249 (1993).</li><li>Becker, C., Fantini, M. C., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+resolution+colonoscopy+in+live+mice.">High resolution colonoscopy in live mice.</a> Nat. Protoc. 1, 2900-2904 (2006).</li><li>Becker, C., Fantini, M. C., Wirtz, S., Nikolaev, A., Kiesslich, R., Lehr, H. A., Galle, P. R., Neurath, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+imaging+of+colitis+and+colon+cancer+development+in+mice+using+high+resolution+chromoendoscopy.">In vivo imaging of colitis and colon cancer development in mice using high resolution chromoendoscopy.</a> Gut. 54, 950-954 (2005).</li><li>Shaker, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epimorphin+deletion+protects+mice+from+inflammation-induced+colon+carcinogenesis+and+alters+stem+cell+niche+myofibroblast+secretion.">Epimorphin deletion protects mice from inflammation-induced colon carcinogenesis and alters stem cell niche myofibroblast secretion.</a> J. Clin. Invest. 120, 2081-2093 (2010).</li><li>Boivin, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathology+of+mouse+models+of+intestinal+cancer:+consensus+report+and+recommendations.">Pathology of mouse models of intestinal cancer: consensus report and recommendations.</a> Gastroenterology. 124, 762-777 (2003).</li><li>Cooper, H. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dysplasia+and+cancer+in+the+dextran+sulfate+sodium+mouse+colitis+model.+Relevance+to+colitis-associated+neoplasia+in+the+human:+a+study+of+histopathology,+B-catenin+and+p53+expression+and+the+role+of+inflammation.">Dysplasia and cancer in the dextran sulfate sodium mouse colitis model. Relevance to colitis-associated neoplasia in the human: a study of histopathology, B-catenin and p53 expression and the role of inflammation.</a> Carcinogenesis. 21, 757-768 (2000).</li><li>Yoshida, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+forkhead+box+M1+transcription+factor+contributes+to+the+development+and+growth+of+mouse+colorectal+cancer.">The forkhead box M1 transcription factor contributes to the development and growth of mouse colorectal cancer.</a> Gastroenterology. 132, 1420-1431 (2007).</li><li>Suzuki, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+differences+in+the+susceptibility+to+azoxymethane+and+dextran+sodium+sulfate-induced+colon+carcinogenesis+in+mice.">Strain differences in the susceptibility to azoxymethane and dextran sodium sulfate-induced colon carcinogenesis in mice.</a> Carcinogenesis. 27, 162-169 (2006).</li><li>Mahler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+susceptibility+of+inbred+mouse+strains+to+dextran+sulfate+sodium-induced+colitis.">Differential susceptibility of inbred mouse strains to dextran sulfate sodium-induced colitis.</a> Am. J. Physiol. 274, 544-551 (1998).</li><li>Nambiar, P. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preliminary+analysis+of+azoxymethane+induced+colon+tumors+in+inbred+mice+commonly+used+as+transgenic/knockout+progenitors.">Preliminary analysis of azoxymethane induced colon tumors in inbred mice commonly used as transgenic/knockout progenitors.</a> Int. J. Oncol. 22, 145-150 (2003).</li><li>Tanaka, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colorectal+carcinogenesis:+Review+of+human+and+experimental+animal+studies.">Colorectal carcinogenesis: Review of human and experimental animal studies.</a> J Carcinog. 8, (2009).</li><li>Ciorba, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+IDO-1+by+immunostimulatory+DNA+limits+severity+of+experimental+colitis.">Induction of IDO-1 by immunostimulatory DNA limits severity of experimental colitis.</a> J. Immunol. 184, 3907-3916 (2010).</li><li>Kerr, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dextran+sodium+sulfate+inhibition+of+real-time+polymerase+chain+reaction+amplification:+A+poly-A+purification+solution.">Dextran sodium sulfate inhibition of real-time polymerase chain reaction amplification: A poly-A purification solution.</a> Inflamm. Bowel Dis. 18, 344-348 (2012).</li><li>Tang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=is+required+for+resection-induced+changes+in+apoptosis,+proliferation,+and+members+of+the+extrinsic+cell+death+pathways.">is required for resection-induced changes in apoptosis, proliferation, and members of the extrinsic cell death pathways.</a> Gastroenterology. 126, 220-230 (2004).</li></ol>

Le traitement des souris avec l&#39;OMA et le DSS rapidement et efficacement des modèles humaine colite associée au cancer. Hypothèses concernant les facteurs héréditaires contribuent à la colite cancers associés peut être facilement étudiée sur des souris génétiquement modifiées. 13, 16 variante, l&#39;effet des cibles pharmacologiques dans la colite associée à un cancer peut être étudiée en utilisant des souris sauvages. Bien que ce modèle est très apprécié...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nom du réactif </td><td> Entreprise </td><td> Numéro de catalogue </td><td> Commentaires </td></tr><tr><td> Les souris C57BL/6J </td><td> Jackson Laboratory </td><td> 000664 </td><td></td></tr><tr><td> Azoxyméthane (AOM) </td><td> Sigma Aldrich </td><td> A5486-100MG </td><td> Solution mère: diluée à 10 mg / ml dans de l&#39;eau distillée pour être conservés à -20 ° C, de 0,5 à 1 ml d&#39;aliquotes. Solution de travail: Diluer stock à 1 mg / ml dans isotonique (0,9%) une solution saline </td></tr><tr><td> Sodium Sulfate de Dextran (DSS) </td><td> Conseil TdB </td><td> DB001 </td><td> MW 40 kDa (36-50 kDa préparations provenant d&#39;autres sources sont acceptables; Le même sort doit être utilisé pour une expérience unique) 6 </td></tr><tr><td> Coloviewsystème miniendoscopic </td><td> Karl Storz </td><td> Multiple </td><td> Voir Becker et al. Pour une explication détaillée de l&#39;équipement et l&#39;installation 11. </td></tr><tr><td> PPT rapide FilterMax 500 ml Bouteille-filtre, 0,22 um PSE </td><td> Midwest Scientific </td><td> TP99500 </td><td> Tout filtre type de tissus culture est acceptable </td></tr><tr><td> Alcool éthylique 200 Proof / ASC USP </td><td> Pharmaco-AAPER (ou autre) </td><td> 11ACS200 </td><td> Diluer à 70% dans de l&#39;eau distillée </td></tr><tr><td> Isoflurane, USP </td><td> Alimentation Butler santé animale </td><td> 4029405 </td><td> Placez la souris dans un bocal de verre avec de la gaze ou un chiffon trempé dans de petites anesthésie </td></tr><tr><td> 18G aiguille droite Gavage </td><td> Braintree scientifique </td><td> N-008 </td><td></td></tr><tr><td> Phosphate Buffered Saline (PBS) </td><td> SigmaAldrich </td><td> P5493 </td><td> Diluer jusqu&#39;à 1X (0,01 M) dans de l&#39;eau distillée </td></tr><tr><td> Plateau froid (Tissue Tek II Cold Plate) </td><td> Fisher Scientific </td><td> NC9491941 </td><td> Conserver à -20 ° C </td></tr><tr><td> ImageJ Software </td><td> NIH (téléchargement gratuit) </td><td></td><td> <a href="http://rsbweb.nih.gov/ij/" target="_blank">http://rsbweb.nih.gov/ij/</a> </td></tr><tr><td> Le formaldéhyde (37%) </td><td> Fisher Scientific </td><td> F79-500 </td><td> Diluer à 10% dans du PBS </td></tr><tr><td> BD Bacto Agar </td><td> Fisher Scientific </td><td> DF0140-01-0 </td><td> Réchaud utiliser pour créer une solution à 2% dans de l&#39;eau distillée </td></tr><tr><td> Pince à pansements oculaires Miltex </td><td> MedPlus Inc </td><td> 18-780 </td><td></td></tr><tr><td> Ciseaux oculaires Miltex </td><td> MedPlus Inc </td><td> 18-1430 </td> &lt;td&gt; Points courbes éviter d&#39;endommager lors de l&#39;ouverture du côlon. </td></tr><tr><td> Bleu Alcian 8GX (poudre) </td><td> Sigma Aldrich </td><td> A5268 </td><td> Ajouter 1 g de poudre pour 100 ml d&#39;acide acétique à 3% (3 ml d&#39;acide acétique glacial + 97 ml d&#39;eau distillée) </td></tr><tr><td> Tuberculine de 1 ml seringue avec joint x 26 G 3/8 po aiguille de biseau intradermique </td><td> BD </td><td> 305946 </td><td> Pour l&#39;injection d&#39;AOM </td></tr></tbody></table>

modeling colitis-associated cancer with azoxymethane (aom) and dextran sulfate sodium (dss)

Les personnes atteintes de la maladie inflammatoire de l&#39;intestin (MICI) comme la maladie de Crohn (MC) ou de rectocolite hémorragique (RCH) sont à risque accru de développer un cancer colorectal (CCR) sur les individus en bonne santé. Ce risque est proportionnel à la durée et l&#39;étendue de la maladie, avec une incidence cumulée atteint 30% chez les personnes ayant de longue date UC avec atteinte colique généralisée. 1 dysplasie colique au cours des MICI et de la colite associée cancer (CAC) sont censés se développer en raison des cycles répétés de lésions des cellules épithéliales et la réparation alors que ces cellules sont baignées dans un milieu de cytokine inflammatoire chronique. 2 Tout cancers spontanés et de la colite associée à partager la qualité des adénocarcinomes étant, la séquence des événements moléculaires qui sous-tendent l&#39;on croit être différent. 3 Ce distinction affirme la nécessité pour les modèles animaux spécifiques du CAC. Plusieurs modèles de souris existent actuellement pour l&#39;étude de la CAC. Dextran sulfate sodium (DSS), un agent avec des effets toxiques directs sur l&#39;épithélium du côlon, peut être administré dans l&#39;eau potable à des souris dans des cycles multiples pour créer un état inflammatoire chronique. Avec une durée suffisante, certains de ces souris seront développent des tumeurs. 4 Le développement de la tumeur est accélérée dans ce modèle s&#39;il est administré dans un cadre pro-cancérigènes. Ceux-ci incluent des souris porteuses de mutations génétiques dans les voies de la tumorigenèse (APC, p53, Msh2), ainsi que des souris prétraitées avec des agents génotoxiques (azoxyméthane [OMA], le 1,2-diméthylhydrazine [DMH]) 5. La combinaison de la DSS avec AOM en tant que modèle de la colite associée cancer a gagné en popularité pour sa reproductibilité, la puissance, des prix bas, et la facilité d&#39;utilisation. Même si elles ont un mécanisme commun, AOM a été trouvé pour être plus puissant et stable en solution que DMH. Alors que le développement de tumeurs dans d&#39;autres modèles nécessite généralement plusieurs mois, les souris injectées avec AOM et ensuite traité avec DSS développer des tumeurs adéquates dans uns peu que 7-10 semaines. 6, 7 Enfin, l&#39;OMA et le DSS peut être administré à des souris de n&#39;importe quel fond génétique (knock out, transgéniques, etc) sans croisement d&#39;une souche oncogène spécifique. Ici, nous démontrons un protocole pour l&#39;inflammation axée sur la tumorigenèse du côlon chez des souris en utilisant une seule injection d&#39;AOM suivie de trois cycles de sept jours de DSS sur une période de 10 semaines. Ce modèle induit des tumeurs avec des modifications histologiques et moléculaires ressemblant étroitement à celles qui se produisent chez l&#39;homme CAC et fournit un modèle très précieux pour l&#39;étude de l&#39;oncogenèse et la chimioprévention dans cette maladie 8.

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Modeling Colitis-Associated Cancer with Azoxymethane AOM and Dextran Sulfate Sodium DSS

Nous démontrons un protocole dans lequel l&#39;administration de l&#39;agent génotoxique azoxyméthane (AOM), suivie de trois cycles de sodium pro-inflammatoire du sulfate de dextran (DSS) rapidement et génère constamment des tumeurs du côlon chez des souris présentant des similitudes morphologiques et moléculaires à celles observées dans la colite humaine associée à un cancer.

Modélisation colite cancer associé avec azoxyméthane (OMA) et de sodium Sulfate de Dextran (DSS)

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Research

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