Name: depletion and reconstitution of macrophages in mice
Uploaded: 2012-08-01T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Depletion and Reconstitution of Macrophages in Mice at JoVE.com

وأيد هذا العمل من قبل &#39;غرانت في المعونة للبحوث&#39; من كرون والتهاب القولون مؤسسة من كندا إلى LMS، الذي تدعمه الجمعية الكندية لأمراض الجهاز الهضمي / الجمعية الكندية لأبحاث الصحة / كرون والتهاب القولون مؤسسة جائزة كندا محقق جديد.

1. أوزون الضامة باستخدام Clodronate المحتوية على الليبوزومات <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> يتم تخزين الليبوزومات في درجة مئوية 4 قبل ساعتين من الحقن، وإزالة clodronate المحتوية على الليبوزومات، الليبوزومات PBS المحتوية على، أو برنامج تلفزيوني العقيمة (حقن ا...

<ol>
	<li>Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+activation+of+macrophages.">Alternative activation of macrophages.</a> Nat. Rev. Immunol. 3, 23-35 (2003).</li><li>Rescigno, M., Lopatin, U., Chieppa, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+among+dendritic+cells,+macrophages,+and+epithelial+cells+in+the+gut:+implications+for+immune+tolerance.">Interactions among dendritic cells, macrophages, and epithelial cells in the gut: implications for immune tolerance.</a> Curr. Opin. Immunol. 20, 669-675 (2008).</li><li>Heinsbroek, S. E., Gordon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+macrophages+in+inflammatory+bowel+diseases.">The role of macrophages in inflammatory bowel diseases.</a> Expert Rev. Mol. Med. 11, e14 (2009).</li><li>Collins, S. M., Piche, T., Rampal, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+putative+role+of+inflammation+in+the+irritable+bowel+syndrome.">The putative role of inflammation in the irritable bowel syndrome.</a> Gut. 49, 743-745 (2001).</li><li>Maeda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Colon+cancer-derived+factors+activate+NF-kappaB+in+myeloid+cells+via+TLR2+to+link+inflammation+and+tumorigenesis.">Colon cancer-derived factors activate NF-kappaB in myeloid cells via TLR2 to link inflammation and tumorigenesis.</a> Mol. Med. Report. 4, 1083-1088 (2011).</li><li>van Rooijen, N., van Kesteren-Hendrikx, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clodronate+liposomes:+perspectives+in+research+and+therapeutics.">Clodronate liposomes: perspectives in research and therapeutics.</a> J. Liposome Res. 12, 81-94 (2002).</li><li>Hunter, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro-derived+alternatively+activated+macrophages+reduce+colonic+inflammation+in+mice.">In vitro-derived alternatively activated macrophages reduce colonic inflammation in mice.</a> Gastroenterology. 138, 1395-1405 (2010).</li><li>Weisser, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SHIP-deficient,+alternatively+activated+macrophages+protect+mice+during+DSS-induced+colitis.">SHIP-deficient, alternatively activated macrophages protect mice during DSS-induced colitis.</a> J. Leukoc. Biol. 90, 483-492 (2011).</li><li>Qualls, J. E., Kaplan, A. M., van Rooijen, N., Cohen, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suppression+of+experimental+colitis+by+intestinal+mononuclear+phagocytes.">Suppression of experimental colitis by intestinal mononuclear phagocytes.</a> J. Leukoc. Biol. 80, 802-815 (2006).</li><li>Van Rooijen, N., Sanders, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposome+mediated+depletion+of+macrophages:+mechanism+of+action,+preparation+of+liposomes+and+applications.">Liposome mediated depletion of macrophages: mechanism of action, preparation of liposomes and applications.</a> J. Immunol. Methods. 174, 83-93 (1994).</li><li>Smith, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Infection+with+a+helminth+parasite+prevents+experimental+colitis+via+a+macrophage-mediated+mechanism.">Infection with a helminth parasite prevents experimental colitis via a macrophage-mediated mechanism.</a> J. Immunol. 178, 4557-4566 (2007).</li><li>van Rooijen, N., Hendrikx, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liposomes+for+specific+depletion+of+macrophages+from+organs+and+tissues.">Liposomes for specific depletion of macrophages from organs and tissues.</a> Methods Mol. Biol. 605, 189-203 (2010).</li><li>Kataoka, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+roles+of+vitreal+macrophages+and+circulating+leukocytes+in+retinal+neovascularization.">The roles of vitreal macrophages and circulating leukocytes in retinal neovascularization.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 52, 1431-1438 (2011).</li><li>Weisser, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+activation+of+macrophages+by+IL-4+requires+SHIP+degradation.">Alternative activation of macrophages by IL-4 requires SHIP degradation.</a> Eur. J. Immunol. 41, 1742-1753 (2011).</li><li>Cailhier, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+macrophage+ablation+demonstrates+that+resident+macrophages+initiate+acute+peritoneal+inflammation.">Conditional macrophage ablation demonstrates that resident macrophages initiate acute peritoneal inflammation.</a> J. Immunol. 174, 2336-2342 (2005).</li></ol>

الضامة هي الخلايا البلعمية أن تلعب دورا هاما في الجهاز المناعي. فهي مسؤولة عن الشروع في استجابة جهاز المناعة الفطرية وتوجيه استجابة المناعة المكتسب. عادة، يتم تنشيط الضامة تفعيلها كلاسيكي بواسطة IFNγ أو LPS، وهي المسؤولة عن القضاء على مسببات الأمراض وتصاعد استجابة الت...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> Clodronate المحتوية على الليبوزومات </td><td> <a href="http://Clodronateliposomes.org" target="_blank">Clodronateliposomes.org</a> </td><td></td></tr><tr><td> PBS المحتوية على الليبوزومات </td><td> <a href="http://Clodronateliposomes.org" target="_blank">Clodronateliposomes.org</a> </td><td></td></tr><tr><td> معقم PBS pH7.4 </td><td> إينفيتروجن </td><td> 14190 </td></tr><tr><td> IMDM </td><td> إينفيتروجن </td><td> 12440 </td></tr><tr><td> الجنين العجل المصل (FCS) </td><td> إينفيتروجن </td><td> 12483 </td></tr><tr><td> حمض الخليك </td><td> BDH Aristar </td><td> BDH3092-500MLP </td></tr><tr><td> Monothioglycerol (MTG) </td><td> سيغما </td><td> 96-275 </td></tr><tr><td> Recombinant الفئران MCSF </td><td> Stemcell تقنيات </td><td> 02951 </td></tr><tr><td> المؤتلف الفئران المعدلة وراثيا-CSF </td><td> Stemcell تقنيات </td><td> 02935 </td></tr><tr><td> المؤتلف الفئران IL-3 </td><td> Stemcell تقنيات </td><td> 02903 </td></tr><tr><td> المؤتلف الفئران IFNγ </td><td> Stemcell تقنيات </td><td> 02746 </td></tr><tr><td> المؤتلف IL-4 الفئران </td><td> Stemcell تقنيات </td><td> 02714 </td></tr><tr><td> خلية التفكك الواق </td><td> إينفيتروجن </td><td> 13150-016 </td></tr><tr><td> الفئران anti-F4/80 جسم </td><td> عبد Serotec </td><td> MCA497GA </td></tr><tr><td> الماوس المضادة للجسم ArgI </td><td> مختبرات دينار بحريني تنبيغ </td><td> 610708 </td></tr></tbody></table> الجدول رقم 1. الكواشف المحددة المستخدمة في هذا البروتوكول.

depletion and reconstitution of macrophages in mice

الضامة لاعبين حاسما في استجابة المناعة الفطرية إلى التحدي المعدية أو الإصابة، الشروع في استجابة جهاز المناعة الفطرية وتوجيه استجابة المناعة المكتسب. ويمكن أن يؤدي إلى خلل وظيفي بلعم عدم القدرة على القيام باستجابة مناسبة المناعة، وعلى هذا النحو، قد تورطت في عمليات أمراض كثيرة، من بينها امراض التهابات الامعاء. عرض الظواهر الضامة الاستقطاب التي تنقسم الى فئتين. الضامة تفعيلها كلاسيكي، تفعيلها من خلال التحفيز مع IFNγ أو LPS، تلعب دورا أساسيا في الاستجابة للتحدي البكتيرية في حين الضامة تفعيلها بدلا من ذلك، يمكنهم من IL-4 أو IL-13، والمشاركة في حطام مسح وإعادة عرض الأنسجة وقد تورطت في القرار مرحلة من التهاب. خلال استجابة التهابية في الجسم الحي، وجدت الضامة وسط خليط معقد من التسلل الى الخلايا المناعية وربما المشاركة من قبل مما أدى إلى تفاقم أو resolvinز التهاب. لتحديد دور الضامة في الموقع في نموذج حيواني كامل، من الضروري دراسة تأثير استنزاف الضامة من البيئة المعقدة. لطرح الأسئلة حول دور النمط الظاهري البلاعم في الموقع، ويمكن أن تستمد الضامة الاستقطاب تعريف ظاهريا المجراة سابقا، من aspirates نخاع العظم، وأضاف إلى الفئران، مع أو من دون استنفاد قبل الضامة. في بروتوكول المقدمة هنا clodronate المحتوية على الليبوزومات، مقابل الضوابط PBS حقن، واستخدمت في استنزاف الضامة القولون خلال كبريتات الصوديوم ديكستران (DSS) الناجم عن التهاب القولون في الفئران. وبالإضافة إلى ذلك، وقد استمدت الضامة الاستقطاب المجراة سابقا وتحويلها إلى الفئران عن طريق الحقن في الوريد. والتحذير من هذا النهج هو أن الليبوزومات clodronate المحتوية على استنزاف جميع البالعات المهنية، بما في ذلك كل الخلايا الجذعية والضامة ذلك لضمان تأثير لوحظ من قبل نضوب هو بلعم محددة، وإعادة تشكيل سالنمط الظاهري و عن طريق التحويل بالتبني الضامة هو ضروري. ويمكن أيضا النظامية نضوب البلاعم في الفئران يمكن تحقيقه من قبل الفئران backcrossing على خلفية CD11b-DTR، وهي طريقة ممتازة متكاملة. ميزة clodronate المحتوية على نضوب الحويصلية بوساطة هو أنه لا يتطلب من الوقت والنفقات المشتركة في الفئران backcrossing ويمكن استخدامه في الفئران بغض النظر عن خلفية من الفئران (C57BL / 6، BALB / ج، أو خلفية مختلطة ).

Watch this Scientific Journal Video about Depletion and Reconstitution of Macrophages in Mice at JoVE.com

Depletion and Reconstitution of Macrophages in Mice

الضامة تلعب دورا محوريا في التوازن وعلم الأمراض في العديد من الأنسجة. بروتوكول المقدمة هنا يصف أساليب لاستنزاف الضامة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt;، اشتقاق الضامة الاستقطاب من aspirates نخاع العظم، ونقل adoptively الضامة في الفئران. هذه التقنيات تسمح بتحديد الدور الذي لعب الضامة الاستقطاب في الصحة والمرض.

نضوب وإعادة إعماره الضامة في الفئران

Macrophages are critical players in the innate  immune response to infectious challenge or injury, initiating the innate immune  response and directing ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Depletion of Specific Cell Populations by Complement Depletion

نضوب بالسكان خلية معينة من قبل استنفاد تكملة

The purification of immune cell populations is often required in order to study their unique functions.  In particular, molecular approaches such as ...

Study of Phagolysosome Biogenesis in Live Macrophages

دراسة يحلول يبلوعي النشوء الأحيائي في الضامة لايف

Phagocytic cells play a major role in the innate immune system by removing and eliminating invading microorganisms in their phagosomes. Phagosome ...

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

Use of Shigella flexneri to Study Autophagy-Cytoskeleton Interactions

استخدام<em&gt; الشيجلا الفلكسنرية</em&gt; لدراسة التفاعلات الالتهام الذاتي الهيكل الخلوي

Shigella flexneri is an intracellular pathogen that can escape from phagosomes to reach the cytosol, and polymerize the host actin cytoskeleton to promote ...

Proteomic Profiling of Macrophages by 2D Electrophoresis

البروتين من التنميط الضامة التي كتبها 2D الكهربائي

The goal of the two-dimensional (2D) electrophoresis protocol described here is to show how to analyse the phenotype of human cultured macrophages. The ...

Macrophage Cholesterol Depletion and Its Effect on the Phagocytosis of Cryptococcus neoformans

Macrophage Cholesterol Depletion and Its Effect on the Phagocytosis of Cryptococcus neoformans

بلعم الكولسترول استنفاد وتأثيره على البلعمة من<em&gt; المستخفية المورمة</em

Cryptococcosis is a life-threatening infection caused by pathogenic fungi of the genus Cryptococcus. Infection occurs upon inhalation of spores, which are ...

Quantification of Cytosolic vs. Vacuolar Salmonella in Primary Macrophages by Differential Permeabilization

Quantification of Cytosolic vs. Vacuolar Salmonella in Primary Macrophages by Differential Permeabilization

الكمي عصاري خلوي مقابل رغوي<em&gt; السالمونيلا</em&gt; في الضامة الابتدائية التي كتبها التفاضلية Permeabilization

Intracellular bacterial pathogens can replicate in the cytosol or in specialized pathogen-containing vacuoles (PCVs). To reach the cytosol, bacteria like ...

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

Isolation of Salmonella typhimurium-containing Phagosomes from Macrophages

عزل السالمونيلا تيفيموريوم-التي تحتوي على فاجوسوميس من الضامة

Salmonella typhimurium is a facultative intracellular bacterium that causes gastroenteritis in humans. After invasion of the lamina propria, S. ...

Isolation and In Vitro Culture of Murine and Human Alveolar Macrophages

Isolation and In Vitro Culture of Murine and Human Alveolar Macrophages

العزلة والثقافة في المختبر من البلاعم السنخية مورين والبشرية

Alveolar macrophages are terminally differentiated, lung-resident macrophages of prenatal origin. Alveolar macrophages are unique in their long life and ...

Flow Cytometric Measurement Of ROS Production In Macrophages In Response To Fc&#947;R Cross-linking

Flow Cytometric Measurement Of ROS Production In Macrophages In Response To FcÃƒÅ½Ã‚Â³R Cross-linking

تدفق سيتوميتريك قياس الإنتاج روس في الضامة ردا على FcγR العابرة للربط

The oxidative or respiratory burst is used to describe the rapid consumption of oxygen and generation of reactive oxygen species (ROS) by phagocytes in ...

Quantification of Monocyte Chemotactic Activity In Vivo and Characterization of Blood Monocyte Derived Macrophages

تحديد كمية النشاط الكيميائي للخلايا الأحادية في الجسم الحي وتوصيف الضامة المشتقة من خلايا الدم

Tissue homeostasis and repair are critically dependent on the recruitment of monocyte-derived macrophages. Both under- and over-recruitment of ...