Name: orthotopic liver transplantation in rats
Uploaded: 2012-07-01T14:00:00
Duration: 18 min 25 s
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중부 표준시는 스위스 국립 과학 재단 (점수 부여 3232230-126233)에 의해 지원되었다. 연구는 Artères 재단 Astellas 재단 유럽과 Boninchi 재단에 의해 지원되었다.

1. 기증자 운영 <ol><li> 200 무게 수컷 쥐 ± 원추 마스크에서 isoflurane과 20g 마취 (유도 3 %, 수술 중 2 %, 1 L / 분, 공기 흐름, FiO2 70 %). </li><li> 대형 중앙 분리대와 가로 개복술을 수행하고 양쪽 상복부의 혈관을 부식. </li><li> 낫 모양의의 인대를 절단하고, suprehepatic 대정 맥에서 왼쪽 횡격막 정맥을 분리. 마지막으로, 두 7-0 실크 ligatures 사이의 횡격막 정맥을 나눕니다. </li><li> 왼쪽 삼각형과 gastro - 간장 인대를 절단. </li><li> 7-0 ligatures (응고가 올바른 대안이다) 사이 hepato - 식도 인대와 동맥을 나누십시오. </li><li> 왼쪽 신장 정맥으로 다운 infrahepatic 대정 맥을 분리. 주변 조직에서 오른쪽 신장 정맥을 분리하고 각각의 근위 및 말초 끝을에서 10-0와 7-0 묶인 사이 나눕니다. </li><li> 7-0 ligatur 간의 권리 suprarenal 정맥을 나누기부드러운 견인하에 절단하여 후부 인대에서 ES와 무료 간. </li><li> gastrosplenic 정맥 격리하고 각각의 근위 및 말초 끝에, 10-0와 7-0 묶인 사이에 그것을 나눕니다. </li><li> 7-0 관계 사이의 적당한 간장 동맥을 나누십시오. </li><li> duodeno - 췌장 정맥 격리하고 10-0과 근위 및 말초 끝에 7-0 봉합사, 각각 사이 나뉩니다. </li><li> 간장 hilum에서 1cm 거리에 작은 절개를 연습하여 일반적인 담즙 덕트에 22G, 3.5 밀리미터 스텐 트를 삽입합니다. 7-0 끈있는 위치에 스텐 트를 고정합니다. </li><li> 음경의 등 부분의 정맥을 통해 정상적인 염분의 1 ML로 희석 헤파린의 10 UI를, 주사. </li><li> 21G 바늘로 베나 포르을 (까지 가능한 hilum에서) Cannulate 부드럽게 감기 닮은 락트 산 (또는 다른 보존 솔루션) 20 ML로 간을 플러시. 동시에, 적절한 outfl 수 있도록 신장 정맥 아래 대정 맥을 절단오우. 간 감기 관류는 하나 이분 사이에 지속한다. </li><li> duodeno - 췌장 정맥 아래 베나 포르 잘라. </li><li> 스텐 트 주위의 묶인에 distally 덕트 일반적인 담즙을 잘라요. </li><li> infrahepatic 대정 맥의 절개를 완료합니다. </li><li> 피임기구에 suprahepatic 대정 맥 탈지 잘라 간장을 제거하십시오. </li><li> 감기 닮은 락트 산으로 가득차과 얼음 패드에 분지 누워 분지로 간을를 놓습니다. </li></ol> 2. 그라 프트 준비 <ol><li> 그 커프스에 베나 포르를 넣고 intima을 폭로 가장자리 주위 혈관을 뒤집다. 7-0 봉합사로 즉석에서 everted 세그먼트를 고정합니다. </li><li> infrahepatic 대정 맥에서 동일한 작업을 반복합니다. </li><li> infrahepatic 대정 맥의 근위 부분에서 마이크로 클램프 (4-6 밀리미터 길이)를 놓습니다. 이 작업은 포털 reperfusion 후 혈액 손실을 방지합니다. </li><li> 간장을 뒤집 두 prolene 8-0 봉합을 삽입외부에서 내부로 suprahepatic 대정 맥의 반대 측면 가장자리에서. </li><li> 0-4에 냉장고에 이식편을 (닮은 락트 산 용액으로 포장되어) 저장 ° C. </li></ol> 3. 받는 동작 <ol><li> 200 무게 수컷 쥐 ± 원추 마스크에서 isoflurane과 20g 마취 (유도 3 %, 수술 중 2 %, 1 L / 분, 공기 흐름, FiO2 70 %)과 따뜻한 패드 계속. 참고,받는 사람 및 기​​증자 가중치는 (± 40g)와 일치해야합니다. </li><li> subcutaneously 정상적인 생리의 10 ML과 개복술 전 piperacillin / tazobactam 근육내의 0.03 g을 주입. </li><li> 중간선 검의 뜻 음모 개복술을 수행합니다. </li><li> 더 나은 간장을 폭로하기 위해 자동 고정 집게로 칼 모양의 과정을 뒤집을. </li><li> 앞부분은 인대를 잘라 두 개의 7-0 관계 사이의 왼쪽 횡격막 정맥을 나눕니다. </li><li> 7-0 ligatures (coagulatio 사이 hepato - 식도 인대와 동맥을 나누기N)은 유효한 대안입니다. 동영상 (기증자 작업과 동일)에 표시되지 않습니다. </li><li> 오른쪽 콩팥 정맥으로 infrahepatic 대정 맥을 아래로 분리. </li><li> 7-0 ligatures 부드러운 견인하에 절단하여 후부 인대에서 무료 간장 ((기증자 작업과 동일) 동영상에 표시되지 않음) 간의 권리 suprarenal 정맥 나누십시오. </li><li> 단지 자사의 사업부 아래 일반적인 담즙 덕트 주변 7-0 봉합사를 놓습니다. 아래 mm 다른 끈 하나를 넣고 사이에 했네요. </li><li> hilum에 간장 동맥을 격리하며 7-0 ligatures 사이 나눕니다. </li><li> 부드럽게 왼쪽 및 오른쪽 포털 가지를 구분합니다. 일반 간장 동맥이나 gastro-지라 정맥을 손상하지 않도록주의하십시오. </li><li> cranially 오른쪽 신장 정맥으로 대정 맥 주위 caval 반지를 놓습니다. 그렇다면 네 추기경 9-0 봉합을 배치하여 고리에 선박 벽을 확보. </li><li> 베나 포르에서 포털 반지와 동일한 작업을 반복합니다. </li&gt; <li> 음경의 등 부분의 정맥을 통해 정상적인 염분의 1 ML로 희석 헤파린의 10 UI를, 주사. </li><li> 0.25 %의 마취 및 100 %의 FiO2를 설정합니다. </li><li> 단지 오른쪽 신장 정맥 위에 infrahepatic 대정 맥을 고정 후 바로 gastro-지라 정맥 위에 베나 포르 클램프. 마지막으로 대정 맥이 다이어프램 최소한 2mm를 반드시 기재해야되는 suprahepatic 클램프. </li><li> 실질 조직에 suprahepatic 대정 맥에 가까이 잘라. </li><li> 왼쪽과 오른쪽 포털 가지를 잘라 사이에 심장을 나눕니다. </li><li> 이전 위치 봉합 중 하나를 절개하지 않도록주의를 기울이고, 실질 조직에 infrahepatic 대정 맥에 가까이 잘라. 간을 제거하고 복강에 이식을 배치. </li><li> 이식편의 suprahepatic 베나의 정맥과받는 사람 사이의 엔드 - 투 - 엔드 교합 (anastomosis)을 수행합니다. 왼쪽에서 오른쪽으로 후부 벽 실행 봉합사로 시작한 다음 오른쪽에서 르의 앞부분은 벽에 진행피트는 끝을 단단히 전에 내부 루멘의 관대한 내리는 것을 허용하기 위해 마지막까지 앞부분은 봉합사에 힘 빼고. </li><li> 포털 링 핸들에 approximator의 꼬리 지점을 삽입, 다음 슬롯에 위치를 찾는 포털 끝단으로 approximator의 두개골 지점의 슬릿으로 그라 프트의 베나 포르를 삽입합니다. </li><li> 정상 식염수에받는 사람의 베나 포르를 플러시하는 동안 approximator을 닫고 끝단이 혈관에 삽입할 수 있습니다. 7-0 원주 타이와의 즉석 주변받는 사람의 베나 포르를 고정합니다. </li><li> approximator를 제거합니다. 순서 suprahepatic 대정 맥과 베나 포르에 클램프를 엽니다 포털 흐름은 지금 내로 데려오됩니다. </li><li> 추가 - 미세 가위로 9-0 ligatures 절삭하여 포털 고리를 제거합니다. </li><li> caval 링 핸들에 approximator의 꼬리 지점을 삽입, 다음 두개의 슬릿에 그라 프트의 infrahepatic 대정 맥을 삽입<html> 슬롯에 위치를 찾는 caval 끝단과 approximator의 지점. </li><li> 정상 식염수에받는 사람의 infrahepatic 대정 맥을 플러시하는 동안 approximator을 닫고 끝단이 혈관에 삽입할 수 있습니다. 7-0 원주 타이와의 즉석 주변받는 사람의 대정 맥을 고정합니다. </li><li> approximator를 제거합니다. 순서대로 이식과받는 사람의 infrahepatic 대정 맥에 microclamps를 엽니다 정맥의 흐름은 지금 내로 데려오됩니다. </li><li> 받는 사람의 일반적인 담즙 덕트의 부분 절개를 수행, 머리를 향해 부드러운 견인을 적용하고, 이전에 그라 프트의 담즙 덕트에 삽입 스텐 트의 자유로운 면을 넣습니다. 원주 7-0 동점으로 스텐 트를 고정합니다. </li><li> 5-0 봉합과 레이어에 의해 동물을 닫습니다. 잠에서 깸에서 무료로 물과 음식을 허용합니다. </li><li> 지역 기관 프로토콜에 따라 효과적인 진통제를 관리할 수 있습니다. 24 H의 최소 기간을 권장합니다. </li></ol>참고 _content &quot;&gt; : 실험 설계 (동맥이 쥐의 간 이식 후 장기 생존을 위해 필요하지 않습니다)에 의해 필요할 때 엔드 - 투 - 엔드 간장 동맥 교합 (anastomosis)이, 수행할 수 있습니다. 4. 대표 결과 설명한 기법이 성공적으로 약 10 훈련 수술 후 저희 팀에 의해 장악 수 있습니다. 그것은 짧은 연수 기간 후 36 연속 루이스 - 투 - 루이스와 다크 Agouti - 투 - 루이스의 transplantations의 100 %, 장기 (&gt; 21일) 생존 (syngeneic 간 이식받는 사람의 수가 12 이상 생명을 유지했습니다 허용 지금 개월). 그리고 중간 알라닌의 transaminase (ALT) - 84 U / L (92.7 51.7) : 172.5 U / L (127.5-240.2) 포스트 syngeneic 이식 1 일 간기능 검사 중간 aspartate의 transaminase (대서양 표준시)를 보여주었다. 평균 anhepatic 단계는 (베나 포르에서 재 관류 그라 프트로 클램핑) 14 살 ± suprahepatic 대정 맥 문합되는 가장 긴 단계에서 2 분, (들 실행uture) 시간 9 ± 2 분. 급속 링커 시스템은 베나 포르에서 1.55 mm - 보어 수갑과 대정 맥에 2.40 mm - 보어 수갑 (200 ± 20g의 무게 수신자)의 위치를​​ 허용했다. 반대로 우리가 Kamada의 기법을 사용하여 이식하려 할 때, 그들은 각각 1.40 mm와 2.16의 밀리 (변형 및 무게에 대해 일치하는 쥐)를 초과할 수 없습니다. 그림 7에 나타난 바와 같이, 빠른 링커 링은 가까이 - 투 - 생리학 hemodynamic 결과에 결과 최소 캘리퍼스와 길이 낭비를있게 스트레칭 최적에받는 사람의 혈관을 유지하도록 설계되었습니다. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 반지 대책. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="그림 2" /> 그림 2. Microclamps 대책. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3. 빠른 링커 키트. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="그림 4" /> 그림 4. 빠른 링커 무장. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="그림 5" /> 그림 5. 빠른 링커 마감했다. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="그림 6" /> 그림 6. SHVC 클램프. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="그림 7" /> 그림 7. 클래식 대 빠른 링커 지원 커프스 - 망상 형성의 혈류 역학. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="그림 8" /> 그림 8. 기증자와 수신자의 피부 준비 및 절개.

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관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.

현재 쥐의 간 이식 모델은 쉽게 설치 할 수 있습니다. 우리의 경험에서 몇 가지 키 포인트는 죽음의 위험을 (≤ 20 %) 최소화하는 데 도움이됩니다. reperfusion에서 처음 세 시간 이내에 발생하는 조기 사망은, 클램핑 긴 포털의 결과로서, 주로 대장 경색으로 인해 수 있습니다. 그것은 따라서 15 분 이상적인 제한 (20 분 여전히 허용) 이내 anhepatic 위상을 유지하는 것이 좋습니다. 중앙 공기 색전증은 또한 갑작스런 사망의 원인이 될 수 있으며, 그것은 이전 문합 모든 혈관을 내리려고 의무이다. 수술 후 첫날 세 사이에 발생하는 죽음은 흔히 간경화 혹은 대정 맥의 혈전증에 의한 있습니다. 하나는 따라서 기증자의 explantation (우리가 약 60 초는 20 ML로 플러시) 전에 플러시하는 적극적인 이식을 피하고 적절한 차가운 보존 (0-4 ° C 닮은 락트 산 솔루션으로 완전한 침수)을 보장해야합니다. 혈전증의 위험intima의 조작을 최소​​화하고 무결성을 보존해서 감소 할 수 있습니다. 우리는 수술 후 anticoagulation의 사용을 권장하지 않습니다. 수술 후 하루 네 아홉 간의 사망자는 종종 박테리아 cholangitis 7 관련이 있습니다. 우리의 경험, 개복술은 일반적인 담즙 덕트 감염의 위험을 최소화하기 위해 충분한 전에 주어진 piperacilline / tazobactam (0.03 g)의 단일 복용을 바탕으로. 죽음 일 10시 드문 행사입니다. 그러나 동맥 흐름의 부재로 인해, 일부 담즙 덕트 문제는 cholastasis 8 볼 수 있습니다. 조사의 필요에 따라 arterialization은 9 간주됩니다. 노트, 최대 24 시간까지 감기 국소 빈혈 시간이 허용 열로 간주 할 수 있습니다. 급속 링커 시스템은 원래 세 커프스 버튼 anastomoses (아주 짧은 anhepatic 위상)으로 간 이식을 수행하도록 설계되었습니다. 그러나 세 즉석 테chnique는 suprahepatic 대정 맥 (SHVC) 커프스를위한 아주 작은 캘리퍼스의 사용을 필요로하고 널리 인해 간 유출 문제 11-14의 위험에 접수되지 않았습니다. 따라서 10 분 정도 단축 따뜻한 국소 빈혈 시간이 필요한 경우에만 빠른 링커 지원 세 커프스 기법을 선호. 대부분의 연구에서 그러나 주입 단계가 15-18분까지 두 즉석 기법, 그리고 더 많은 생리적 SHVC 배수를 사용할 수 있도록 허용합니다. 이 비디오 신문에 나타난 바와 같이, 우리는 정기적만을 주입의 두 번째 부분에서 빠른 링커 시스템을 사용합니다. 몇 가지 여분의 수술 시간이 빠른 링커 핸들을 배치하는 데 필요한 반면, 프로 시저의이 부분은 최소한의 위험과 연관된 쉽게 수갑 삽입에 중요한 anhepatic 위상 감사의 단축을 허용하고 있습니다. 급속 링커 시스템의 다른 장점은 더 그래프트 -받는 선박 정렬하고 더 나은 hemodynamic 결과와 넓은 수갑의 사용에 비해앞에서 설명한 기법 (Kamada 외 의해 설명도 포함 해서요.) 6 (그림 7).

<table border="1"><tbody><tr><td> 도구 / 시약 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 N. </td><td> 논평 </td></tr><tr><td> 포털 커프스 </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> 또는 <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">스미스 - medical.com</a> </td><td> 코일 01-96-1729 800/100/420 </td><td> 내경 : 1.55mm 월 : 0.30mm 길이 : 350 mm </td></tr><tr><td> Infrahepatic 대 정맥을 재는 완 </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> 또는 <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">스미스 - medical.com</a> </td><td> 코일 01-96-1733 800/100/540 </td><td> 내경 : 2.40mm 월 : 0.30mm <br/&gt; 길이 : 3.5 mm </td></tr><tr><td> 일반적인 담즙 덕트 스텐 트 </td><td> 일반적인 22G venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7-0 실크 넥타이 </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 스트레이트 마이크로 포셉 </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-및-T</a>. NET </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> 곡선 마이크로 포셉 </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">의 - 및 - t.net</a> </td><td> FRS-15-RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> 해부 바늘 홀더 </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">의 - 및 - t.net</a> </td><td> B-15-8.2 </td><td></td></tr><tr><td> 문합 바늘 홀더 </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 클램프 </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 X 1mm </td></tr><tr><td> 마이크로 클램프의 작은 주걱 </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> Suprahepatic 대 정맥 클램프 </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> 퀵 - 링커 링 </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> 수정 메스 블레이드 </td></tr><tr><td> 퀵 - 링커 approximator </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04-275 </td><td> 수정일 Kocher의 forcep </td></tr></tbody></table>

orthotopic liver transplantation in rats

간 이식 분야의 임상 진행은 크게 동물 모델 1,2에 의해 지원되었습니다. Kamada 외 3.에 의해 1979 년 최초의 orthotopic 쥐의 간 이식의 출간 이후,이 모델은 다양한 제안된 대안 기법 4 불구하고 금을 표준 남아있다. 그럼에도 불구하고, 자사의 광범위한 사용은 그 가파른 학습 곡선 5로 제한됩니다. 이 비디오 논문에서 우리는 Kamada의 두 즉석 기법의 간단하고 쉬운 구축 개정을 보여줍니다. suprahepatic 대정 맥 문합가 실행 봉합으로 수동으로 수행되며, 베나 포르와 infrahepatic 대정 맥의 anastomoses는 빠른 링커 커프스 시스템 6 활용하여 수행됩니다. 급속 링커 키트를 제조하는 것은 별도의 비디오 용지에 표시됩니다.

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