Name: reverse genetics mediated recovery of infectious murine norovirus
Uploaded: 2012-06-24T14:00:00
Duration: 13 min 48 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Reverse Genetics Mediated Recovery of Infectious Murine Norovirus at JoVE.com

وقد تم تمويل هذا البحث من قبل الزمالة ويلكوم تراست التي منحت لكبار Goodfellow إيان، وماري كوري البينية الأوروبية زمالة (FP7 مجلس البحوث الأوروبي) التي منحت لأرياس ارماندو. نود أن نشكر ايو كونغ تشيونغ، الدكتور روباي ريبيكا والدكتور الدباغ مايك لمنحنا الإذن لاستخدام هذه اجيلنت bioanalyser والمساعدة في تشغيل عينات من الحمض النووي الريبي.

<ol>
	<li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outbreaks+of+gastroenteritis+associated+with+noroviruses+on+cruise+ships--United+States.">Outbreaks of gastroenteritis associated with noroviruses on cruise ships--United States.</a> MMWR Morb. Mortal. Wkly. Rep. 51, 1112-1115 (2002).</li><li>Lopman, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+and+cost+of+nosocomial+gastroenteritis,+Avon,+England,+2002-2003.">Epidemiology and cost of nosocomial gastroenteritis, Avon, England, 2002-2003.</a> Emerg. Infect. Dis. 10, 2002-2003 (2004).</li><li>Duizer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+efforts+to+cultivate+noroviruses.">Laboratory efforts to cultivate noroviruses.</a> J. Gen. Virol. 85, 79-87 (2004).</li><li>Karst, S. M., Wobus, C. E., Lay, M., Davidson, J., Virgin, H. W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=STAT1-dependent+innate+immunity+to+a+Norwalk-like+virus.">STAT1-dependent innate immunity to a Norwalk-like virus.</a> Science. 299, 1575-1575 (2003).</li><li>Wobus, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Replication+of+Norovirus+in+cell+culture+reveals+a+tropism+for+dendritic+cells+and+macrophages.">Replication of Norovirus in cell culture reveals a tropism for dendritic cells and macrophages.</a> PLoS Biol. 2, e432 (2004).</li><li>Bok, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+norovirus+replication+by+morpholino+oligomers+targeting+the+5'-end+of+the+genome.">Inhibition of norovirus replication by morpholino oligomers targeting the 5'-end of the genome.</a> Virology. 380, 328-337 (2008).</li><li>Kim, Y., Thapa, M., Hua, D. H., Chang, K. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biodegradable+nanogels+for+oral+delivery+of+interferon+for+norovirus+infection.">Biodegradable nanogels for oral delivery of interferon for norovirus infection.</a> Antiviral Res. 89, 165-173 (2011).</li><li>McFadden, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Norovirus+Regulation+of+the+Innate+Immune+Response+and+Apoptosis+Occurs+via+the+Product+of+the+Alternative+Open+Reading+Frame+4.">Norovirus Regulation of the Innate Immune Response and Apoptosis Occurs via the Product of the Alternative Open Reading Frame 4.</a> PLoS Pathog. 7, e1002413 (2011).</li><li>Kormelink, R., van Poelwijk, F., Peters, D., Goldbach, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-viral+heterogeneous+sequences+at+the+5'+ends+of+tomato+spotted+wilt+virus+mRNAs.">Non-viral heterogeneous sequences at the 5' ends of tomato spotted wilt virus mRNAs.</a> J. Gen. Virol. 73, 2125-2128 (1992).</li><li>Shuman, S., Hurwitz, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+of+mRNA+capping+by+vaccinia+virus+guanylyltransferase:+characterization+of+an+enzyme--guanylate+intermediate.">Mechanism of mRNA capping by vaccinia virus guanylyltransferase: characterization of an enzyme--guanylate intermediate.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 78, 187-191 (1981).</li><li>Jang, S. K., Pestova, T. V., Hellen, C. U., Witherell, G. W., Wimmer, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cap-independent+translation+of+picornavirus+RNAs:+structure+and+function+of+the+internal+ribosomal+entry+site.">Cap-independent translation of picornavirus RNAs: structure and function of the internal ribosomal entry site.</a> Enzyme. 44, 292-309 (1990).</li><li>Chaudhry, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Caliciviruses+differ+in+their+functional+requirements+for+eIF4F+components.">Caliciviruses differ in their functional requirements for eIF4F components.</a> J. Biol. Chem. 281, 25315-25325 (2006).</li><li>Goodfellow, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calicivirus+translation+initiation+requires+an+interaction+between+VPg+and+eIF+4.">Calicivirus translation initiation requires an interaction between VPg and eIF 4.</a> E. EMBO Rep. 6, 968-972 (2005).</li><li>Herbert, T. P., Brierley, I., Brown, T. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+a+protein+linked+to+the+genomic+and+subgenomic+mRNAs+of+feline+calicivirus+and+its+role+in+translation.">Identification of a protein linked to the genomic and subgenomic mRNAs of feline calicivirus and its role in translation.</a> J. Gen. Virol. 78 ( Pt5 ), 1033-1040 (1997).</li><li>Chaudhry, Y., Skinner, M. A., Goodfellow, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+genetically+defined+murine+norovirus+in+tissue+culture+by+using+a+fowlpox+virus+expressing+T7+RNA+polymerase.">Recovery of genetically defined murine norovirus in tissue culture by using a fowlpox virus expressing T7 RNA polymerase.</a> J. Gen. Virol. 88, 2091-20100 (2007).</li><li>Ward, V. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+infectious+murine+norovirus+using+pol+II-driven+expression+of+full-length+cDNA.">Recovery of infectious murine norovirus using pol II-driven expression of full-length cDNA.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 104, 11050-11055 (2007).</li><li>Yunus, M. A., Chung, L. M., Chaudhry, Y., Bailey, D., Goodfellow, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+an+optimized+RNA-based+murine+norovirus+reverse+genetics+system.">Development of an optimized RNA-based murine norovirus reverse genetics system.</a> J. Virol. Methods. 169, 112-118 (2010).</li><li>Arias, A., Perales, C., Escarmis, C., Domingo, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Deletion+mutants+of+VPg+reveal+new+cytopathology+determinants+in+a+picornavirus.">Deletion mutants of VPg reveal new cytopathology determinants in a picornavirus.</a> PLoS One. 5, e10735 (2010).</li><li>Werf, S. v. a. n. d. e. r., Bradley, J., Wimmer, E., Studier, F. W., Dunn, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synthesis+of+infectious+poliovirus+RNA+by+purified+T7+RNA+polymerase.">Synthesis of infectious poliovirus RNA by purified T7 RNA polymerase.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 83, 2330-2334 (1986).</li><li>Bailey, D., Thackray, L. B., Goodfellow, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+amino+acid+substitution+in+the+murine+norovirus+capsid+protein+is+sufficient+for+attenuation+in+vivo.">A single amino acid substitution in the murine norovirus capsid protein is sufficient for attenuation in vivo.</a> J. Virol. 82, 7725-7728 (2008).</li><li>Bailey, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+analysis+of+RNA+structures+present+at+the+3'+extremity+of+the+murine+norovirus+genome:+the+variable+polypyrimidine+tract+plays+a+role+in+viral+virulence.">Functional analysis of RNA structures present at the 3' extremity of the murine norovirus genome: the variable polypyrimidine tract plays a role in viral virulence.</a> J. Virol. 84, 2859-2870 (2010).</li></ol>

ليس لدينا ما يكشف.

هنا قد بينت أننا مختلفين النهج الوراثية العكسية التي تسمح للانتعاش من MNV المعدية في زراعة الخلايا. كلا النهجين على نحو فعال تجاوز الشرط المطلق للربط تساهمي من VPG إلى نهاية 5 &#39;من الجينوم الفيروسي RNA عن طريق توليد النصوص MNV المغطاة التي يتم التعرف عليها بعد ذلك من قبل ريبوسوم الخلوية. في النسخ المختبر يليه السد إنزيمي هو أكثر كفاءة في انتعاش MNV المعدية من النسخ من البلازميدات المعدية في الخلايا معربا عن T7 بوليميريز الحمض النووي الريبي، والتي يمكن أن توج على محاضر من الانزيمات FPV متوجا. titres فيروس تعافى مع هذه النظم الهندسة الوراثية المعكوسة هي مماثلة لتلك التي حصلت عليها ترنسفكأيشن من الحمض النووي الريبي VPG المرتبطة الفيروسية تنقيته من مزارع الخلايا المصابة 17 (الشكل 5). وترنسفكأيشن من الحمض النووي الريبي MNV توج في الخلايا Raw264.7 متساهل يجعل 1 عيار الفيروس فقط 1-سجل أقل من التجارب التي تنطوي على transfectioن من الحمض النووي الريبي من مجموع الخلايا المصابة التي تحتوي على فيروسات VPG المرتبطة الحمض النووي الريبي (الشكل 5). هذا الواقع يشجع على اجراء مزيد من التحقيقات لتحديد ما إذا كان بالإضافة إلى ذلك من جزيء VPG إلى نهاية 5 &#39;من النصوص التي تولدها هذه النظم يمكن أن يؤدي إلى زيادة غلة فيروس والتي قد تكشف عن الجوانب الفنية الكامنة وراء MNV العدوى في الخلايا المرتبطة VPG. ومع ذلك، فإننا نعتبر هذا نظام الوراثة العكسية باعتبارها واحدة ذات كفاءة عالية مقارنة للفيروسات الحمض النووي الريبي عكس غيرها من النظم المستخدمة حاليا في علم الوراثة الذي في الحمض النووي الريبي المختبر المحولة يسمح للانتعاش من titres فقط 10-100 في أقل من التهابات حقيقية مع virions 19 و 20. وعموما، فإن المنهجيات الحالية تشكل خطوة كبيرة إلى الأمام في مجال البيولوجيا الجزيئية ونوروفيروس توفر لنا الأدوات اللازمة للتحقيق في الأدوار الوظيفية للبروتينات وحفظها الزخارف في الحمض النووي الريبي الجينوم نوروفيروس. وقد تم بالفعل هذه المناهج جنبا إلى جنب مع جurrent الفأر نموذج المتاحة، وأظهرت أن MNV تعافى من [كدنا] المعدية هي قادرة على أن تسبب عدوى قاتلة من&gt; 80٪ STAT1 / - الفئران في أقل من 10 أيام 4 و 21. الاستفادة من هذا النظام انتشلنا قابلة للحياة المسوخ نوروفيروس الفئران من البروتين قفيصة والمسالك polypyrimidine المشاركة في ملزم من العوامل المضيف مختلفة (PTB وPCBP) التي تعرض الظواهر الموهن إلى حد ما في الجسم الحي 21 و 22. وبالإضافة إلى ذلك، لقد أثبتنا في الآونة الأخيرة أن الفيروسات التي تفتقر إلى القدرة على التعبير عن هذا البروتين VF1 من ORF4 بكفاءة تكرار في ثقافة الخلية ولكن مرة أخرى قد خفضت الفوعة في الفئران فيما يتعلق MNV WT 8. هذه الدراسات تشجيع لنا لتصميم إصدارات الموهن من noroviruses الإنسان على أساس دراسات MNV التي يمكن أن يتم التحقيق في مثل اللقاحات المرشحة المحتملة.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> حل ليثيوم كلوريد هطول الأمطار </td><td> Ambion </td><td> AM9480 </td></tr><tr><td> الحمض النووي الريبي تخزين حل </td><td> Ambion </td><td> AM7000 </td></tr><tr><td> MEGAscript T7 النصي </td><td> Ambion </td><td> AM1333 </td></tr><tr><td> ScriptCap m7G السد النظام </td><td> التكنولوجيات الحيوية Epicentre </td><td> SCCE0610 </td></tr><tr><td> نيون ترنسفكأيشن نظام </td><td> إينفيتروجن </td><td> MPK5000 </td></tr><tr><td> نيون عدة ترنسفكأيشن نظام </td><td> إينفيتروجن </td><td> MPK1025 </td></tr><tr><td> OPTI-MEM أنا </td><td> إينفيتروجن </td><td> 31985070 </td></tr><tr><td> الكاشف Lipofectamine ترنسفكأيشن 2000 </td><td> إينفيتروجن </td><td> 11668-027 </td></tr><tr><td> اجيلنت RNA 600 نانو عدة </td><td> اجيلنت </td><td> 5067-1511 </td></tr><tr><td> اجيلنت 2100 ثنائيةoanalyzer </td><td> اجيلنت </td><td> G2939AA </td></tr><tr><td> Illustra GFX PCR الحمض النووي وتنقية جل كيت باند </td><td> جنرال إلكتريك للرعاية الصحية </td><td> 28-9034-70 </td></tr><tr><td> RiboMAX كبير إنتاج الحمض النووي الريبي مقياس النظام-T7 </td><td> Promega </td><td> P1300 </td></tr></tbody></table>

reverse genetics mediated recovery of infectious murine norovirus

noroviruses الإنسان هي المسؤولة عن معظم حالات التهاب المعدة والأمعاء البشرية (GE) في جميع أنحاء العالم، وهي مشكلة متكررة في البيئات التي لا يمكن فيها وثيقة من شخص إلى شخص الاتصال يمكن تجنبها 1 و 2. خلال السنوات القليلة الماضية تم الإبلاغ عن حدوث زيادة في معدل انتشار المرض في المستشفيات، مما تسبب في اضطرابات كبيرة في قدرتها التشغيلية، فضلا عن خسائر اقتصادية كبيرة. وقد اقتصرت على تحديد نهج جديد للفيروسات نظرا لعدم قدرة noroviruses الإنسان لإكمال عدوى الإنتاجية في زراعة الخلايا 3. وقد فتحت ويمكن عزل مؤخرا من نوروفيروس الفئران (MNV)، ترتبط ارتباطا وثيقا نوروفيروس الإنسان (4) ولكن الذي نشر في الخلايا 5 آفاقا جديدة للتحقيق في هذه الممرضة 6 و 7. النتائج تكرار MNV في تركيب جديد الجينومية بالمعنى الإيجابي وsubgenomic جزيئات الحمض النووي الريبي، وهذه الأخيرة والتي تتطابق مع ثي مشاركةالثالث من الجينوم الفيروسي (الشكل 1). MNV يحتوي على أربعة أنواع مختلفة من إطارات القراءة المفتوحة (ORFs)، والتي تحتل معظم ORF1 من الجينوم وبترميز 7 غير الهيكلية البروتينات (NS1-7) أفرج عنه من تمهيدا polyprotein. وترد ORF2 وORF3 داخل المنطقة RNA subgenomic وترميز البروتينات قفيصة (VP1 وVP2، على التوالي) (الشكل 1). مؤخرا، حددنا أن ORF4 إضافية تداخل ORF2 لكن في إطار قراءة مختلفة وظيفية وتشفير لعامل الفوعة المترجمة الميتوكوندريا (VF1) 8. النسخ المتماثل للشعور إيجابي فيروسات الحمض النووي الريبي، بما في ذلك noroviruses، يحدث في السيتوبلازم مما أدى إلى توليف جينوم الحمض النووي الريبي جديدة لم يسبق لهم اللعب. لتشجيع ترجمة الفيروسية والفيروسات استغلال الاستراتيجيات المختلفة التي تهدف إلى توظيف تصنيع البروتين الخلوي آلية 9-11. ومن المثير للاهتمام، هو الدافع ترجمة نوروفيروس من VPG البروتين الفيروسي التمهيدي متعددة الوظائفمرتبطة تساهميا إلى نهاية 5 &#39;من كلا RNAs والجينومية وsubgenomic 12-14. هذه الآلية المتطورة للترجمة من المرجح أن يكون عاملا رئيسيا في كفاءة محدودة من الانتعاش الفيروسية بواسطة التقليدية نهج الوراثة العكسية. نحن هنا نورد استراتيجيتين مختلفتين استنادا إلى جيل من الفئران 1-نوروفيروس (المشار إليها باسم MNV طيه) محاضر توج في نهاية 5 &#39;. إحدى الطرق ينطوي على حد سواء في تركيب المختبر، ووضع حد أعلى من الحمض النووي الريبي الفيروسي، في حين أن النهج الثاني ينطوي على نسخ من MNV [كدنا] في الخلايا معربا عن T7 بوليميريز الحمض النووي الريبي. وقد وفرت من توافر هذه الأنظمة الوراثة العكسية لدراسة MNV ونموذج الحيوان الصغير قدرة غير مسبوقة لشرح دور تسلسلات فيروسية في تكرار والمرضية 15-17.

Watch this Scientific Journal Video about Reverse Genetics Mediated Recovery of Infectious Murine Norovirus at JoVE.com

Reverse Genetics Mediated Recovery of Infectious Murine Norovirus

Noroviruses هي أحد الأسباب الرئيسية لالتهاب المعدة والأمعاء بعد التقنيات الجزيئية لتوصيف هذه لا تزال جديدة نسبيا. نحن هنا نورد مختلفين عكس نهج الوراثة لاستعادة كفاءة نوروفيروس الفئران (MNV)، العضو الوحيد من هذا جنس والتي يمكن نشرها في ثقافة الخلية.

علم الوراثة العكسية الاسترداد بوساطة من نوروفيروس الفئران المعدية

Human noroviruses are responsible for most cases of human gastroenteritis (GE) worldwide and are recurrent problem in environments where close ...

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Using Reverse Genetics to Manipulate the NSs Gene of the Rift Valley Fever Virus MP-12 Strain to Improve Vaccine Safety and Efficacy

باستخدام علم الوراثة العكسية للتلاعب الجيني NSS لفيروس حمى الوادي المتصدع MP - 12 سلالة لتحسين سلامة وفعالية اللقاحات

Rift Valley fever virus (RVFV), which causes hemorrhagic fever, neurological disorders or blindness in humans, and a high rate abortion and fetal ...

Plaque Assay for Murine Norovirus

الفحص وحة لنوروفيروس الفئران

Murine norovirus (MNV) is the only member of the Norovirus genus that efficiently grows in tissue culture 1, 2. Cell lysis and cytopathic effect (CPE) are ...

Isolating And Immunostaining Lymphocytes and Dendritic Cells from Murine Peyer's Patches

عزل والخلايا اللمفاوية المناعية والخلايا الجذعية من الفئران باير لالرقع

Peyer's  patches (PPs) are integral components of the gut-associated lymphoid tissues  (GALT) and play a central role in intestinal immunosurveillance and ...

VIGS-Mediated Forward Genetics Screening for Identification of Genes Involved in Nonhost Resistance


	Nonhost disease resistance of plants against bacterial pathogens is controlled by complex defense pathways. Understanding this mechanism is important ...

Organoids as Model for Infectious Diseases: Culture of Human and Murine Stomach Organoids and Microinjection of Helicobacter Pylori

Organoids كنموذج للأمراض المعدية: ثقافة الإنسان وOrganoids المعدة الفئران وهيليكوباكتر بيلوري Microinjection من

Recently infection biologists have employed stem cell derived cultures to answer the need for new and better models to study host-pathogen interactions. ...

Isolation and Flow Cytometric Characterization of Murine Small Intestinal Lymphocytes

العزلة وتدفق Cytometric توصيف الفئران الصغيرة المعوية اللمفاويات

The intestines &#8212; which contain the largest number of immune cells of any organ in the body &#8212; are constantly exposed to foreign antigens, both ...

A Method to Assess Fc-mediated Effector Functions Induced by Influenza Hemagglutinin Specific Antibodies

أسلوب لتقييم وظائف المستجيب Fc بوساطة الناجم عن الإنفلونزا هيماغلوتينين أجسام مضادة محددة

Antibodies play a crucial role in coupling the innate and adaptive immune responses against viral pathogens through their antigen binding domains and ...

Isolating Lymphocytes from the Mouse Small Intestinal Immune System

عزل الخلايا الليمفاوية من الماوس صغيرة المعوية المناعي

The intestinal immune system plays an essential role in maintaining the barrier function of the gastrointestinal tract by generating tolerant responses to ...

Preparation of Murine Submandibular Salivary Gland for Upright Intravital Microscopy

إعداد موريني الغدة اللعابية اللهاة تستقيم مجهرية إينترافيتال

The submandibular salivary gland (SMG) is one of the three major salivary glands, and is of interest for many different fields of biological research, ...

Isolation of Single Intracellular Bacterial Communities Generated from a Murine Model of Urinary Tract Infection for Downstream Single-cell Analysis

عزل واحد المجتمعات البكتيرية داخل الخلايا التي تم إنشاؤها من نموذج موريني لعدوى المسالك البولية لتحليل خلية واحدة أسفل المجرى

In this article, we outline a procedure used to isolate individual intracellular bacterial communities from a mouse that has been experimentally infected ...