Name: comprehensive profiling of dopamine regulation in substantia nigra and ventral tegmental area
Uploaded: 2012-08-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area at JoVE.com

وقدمت التمويل اللازم لهذا العمل، واستشهد بها 2،10، في جزء منها عن طريق البحث الجوائز منحة لسالفاتوري MF من الاتحاد الأمريكي لبحوث الشيخوخة، وعين إدوارد السلالم الصندوق الاستئماني ومؤسسة البحوث الطبية الحيوية من ولاية لويزيانا الشمالية الغربية، وBS بروت من زمالة Muslow آيك Predoctoral، LSU مركز علوم الصحة، شريفيبورت.

1. تشريح <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> على سرير من الثلج الرطب، والبرد مصفوفة المخ القوارض (الأقسام الاكليلية فصل 1 ملم بعيدا)، وطبق بتري تحتوي على 5 شفرات الحلاقة، ومشرط رقم 11. في وعاء منفصل، وصفت مكان 2 أنابيب microfuge مل حجم إلى الثلج الجاف. </li><li style=";tex...

<ol>
	<li>Trevitt, J. T., Carlson, B. B., Nowend, K., Salamone, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Substantia+nigra+pars+reticulate+is+a+highly+potent+site+of+action+for+the+behavioral+effects+of+the+D1+antagonist+SCH23390+in+rat.">Substantia nigra pars reticulate is a highly potent site of action for the behavioral effects of the D1 antagonist SCH23390 in rat.</a> Psychopharmacology. 156, 32-41 (2001).</li><li>Salvatore, M. F., Pruett, B. S., Spann, S. L., Dempsey, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+reveals+a+role+for+nigral+tyrosine+hydroxylase+ser31+phosphorylation+in+locomotor+activity+generation.">Aging reveals a role for nigral tyrosine hydroxylase ser31 phosphorylation in locomotor activity generation.</a> PLoS ONE. 4, e8466 (2009).</li><li>Rossato, J. L., Bevilaqua, L. R. M., Izquierdo, I., Medina, J. H., Cammarota, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopamine+controls+persistence+of+long-term+memory+storage.">Dopamine controls persistence of long-term memory storage.</a> Science. 325, 1017-1020 (2009).</li><li>Keller, C. M., Salvatore, M. F., Pruett, B. S., Guerdin, G. F., Goeders, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biphasic+dopamine+regulation+in+mesoaccumbens+pathway+in+response+to+non-contigent+binge+and+escalating+methamphetamine+regimens+in+the+Wistar+rat.">Biphasic dopamine regulation in mesoaccumbens pathway in response to non-contigent binge and escalating methamphetamine regimens in the Wistar rat.</a> Psychopharmacology. 215, 513-526 (2011).</li><li>Lu, L., Dempsey, J., Liu, S. Y., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+infusion+of+brain-derived+neurotrophic+factor+into+the+ventral+tegmental+area+induces+long-lasting+potentiation+of+cocaine+seeking+after+withdrawal.">A single infusion of brain-derived neurotrophic factor into the ventral tegmental area induces long-lasting potentiation of cocaine seeking after withdrawal.</a> J. Neurosci. 24, 1604-1611 (2004).</li><li>Hoffer, B. J., Hoffman, A., Bowenkamp, K., Huettl, P., Hudson, J., Martin, D., Lin, L. F., Gerhardt, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+reverses+toxin-induced+injury+to+midbrain+dopaminergic+neurons+in+vivo.">Glial cell line-derived neurotrophic factor reverses toxin-induced injury to midbrain dopaminergic neurons in vivo.</a> Neurosci. Lett. 182, 107-111 (1994).</li><li>Salvatore, M. F., Zhang, J. L., Large, D. M., Wilson, P. E., Gash, C. R., Thomas, T. C., Haycock, J. W., Bing, G., Stanford, J. A., Gash, D. M., Gerhardt, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Striatal+GDNF+administration+increases+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+in+the+rat+striatum+and+substantia+nigra.">Striatal GDNF administration increases tyrosine hydroxylase phosphorylation in the rat striatum and substantia nigra.</a> J. Neurochem. 90, 245-254 (2004).</li><li>Lu, L., Wang, X., Wu, P., Xu, C., Zhao, M., Morales, M., Harvey, B. K., Hoffer, B. J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+ventral+tegmental+area+glial+cell-line+derived+neurotrophic+factor+in+incubation+of+cocaine+craving.">Role of ventral tegmental area glial cell-line derived neurotrophic factor in incubation of cocaine craving.</a> Biol. Psychiatry. 66, 137-145 (2009).</li><li>Lavicky, J., Dunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corticotropin-releasing+factor+stimulates+catecholamine+release+in+hypothalamus+and+prefrontal+cortex+in+freely+moving+rats+as+assessed+by+microdialysis.">Corticotropin-releasing factor stimulates catecholamine release in hypothalamus and prefrontal cortex in freely moving rats as assessed by microdialysis.</a> J. Neurochem. 60, 602-612 (1993).</li><li>Salvatore, M. F., Pruett, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dichotomy+of+tyrosine+hydroxylase+and+dopamine+regulation+between+somatodendritic+and+terminal+field+areas+of+nigrostriatal+and+mesoaccumbens+pathways.">Dichotomy of tyrosine hydroxylase and dopamine regulation between somatodendritic and terminal field areas of nigrostriatal and mesoaccumbens pathways.</a> PLoS ONE. 7, e29867 (2012).</li><li>Salvatore, M. F., Garcia-Espana, A., Goldstein, M., Deutch, A. Y., Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stoichiometry+of+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+in+the+nigrostriatal+and+mesolimbic+systems+in+vivo:+Effects+of+acute+haloperidol+and+related+compounds.">Stoichiometry of tyrosine hydroxylase phosphorylation in the nigrostriatal and mesolimbic systems in vivo: Effects of acute haloperidol and related compounds.</a> J. Neurochem. 75, 225-232 (2000).</li><li>Salvatore, M. F., Waymire, J. C., Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depolarization-stimulated+catecholamine+biosynthesis:+involvement+of+protein+kinases+and+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+sites+in+situ.">Depolarization-stimulated catecholamine biosynthesis: involvement of protein kinases and tyrosine hydroxylase phosphorylation sites in situ.</a> J. Neurochem. 79, 349-360 (2001).</li><li>Haycock, J. W., Lew, J. Y., Garcia-Espana, A., Lee, K. Y., Harada, K., Meller, E., Goldstein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+serine-19+phosphorylation+in+regulating+tyrosine+hydroxylase+studied+with+site-+and+phosphospecific+antibodies+and+site-directed+mutagenesis.">Role of serine-19 phosphorylation in regulating tyrosine hydroxylase studied with site- and phosphospecific antibodies and site-directed mutagenesis.</a> J. Neurochem. 71, 1670-1675 (1998).</li><li>Lindgren, N., Xu, Z. Q., Linskog, M., Herrera-Marschitz, M., Goiny, M., Haycock, J. W., Goldstein, M., Hokfelt, T., Fisone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+tyrosine+hydroxylase+activity+and+phosphorylation+at+ser19+and+ser40+via+activation+of+glutamate+NMDA+receptors+in+rat+striatum.">Regulation of tyrosine hydroxylase activity and phosphorylation at ser19 and ser40 via activation of glutamate NMDA receptors in rat striatum.</a> J. Neurochem. 74, 2470-2477 (2000).</li></ol>

كما هو مبين في الشكل رقم 1، وينبغي أن الأساليب المفصلة أعلاه تعطي قراءات متعددة من الدوبامين وTH لها البروتينات التي تنظم، DAT، وVMAT2 من عينة واحدة من التعطيل أو VTA تم الحصول عليها من الفئران أو الماوس. مرة أخرى، وفوائد تنفيذ هذا البروتوكول، أن المحقق يمكن الحصول على قراء?...

HPLC النظام: النظام الأساسي يتكون من مضخة شيمادزو HPLC LC10-ADvp، وهي مياه WISP 717 التلقائي محقن العينة، ويحتوي على 250 X 4.4 ملم 5 ميكرون Spherosorb المواد المستنفدة للأوزون-1-C18 عكس مرحلة العمود (المياه)، وأنظمة Bioanalytical (BAS) TL12 زجاجي مزدوج قطب كهربائي الكربون، واثنين من أجهزة الكشف عن BAS LC4B الكهروكيميائية، والمياه 1 2 تمكين جمع البيانات ونظام التكامل. يتم الحفاظ على عمود في 30-45 درجة مئوية (BAS سخان عمود LC22A). الطور المتحرك هو 0.1 فوسفات الصوديوم M (درجة الحموضة 3.0)، 0.1 ملي EDTA، 0،2-0،4 ملي 1-أوكتان حمض السلفونيك (ايستمان كوداك-)، والأسيتونيتريل 0.35٪ (V / V) وتصفيتها من خلال مرشح 0.45 ميكرون. معدل التدفق من 1.2 مل / دقيقة. هي الأمثل أربع دفعات لتر من الطور المتحرك للفصل عن طريق ضبط درجة الحموضة، أوكتان حمض السلفونيك ودرجة حرارة العمود. يتم إعادة تدويرها في المرحلة المتنقلة، ويتم إزالة بشكل مستمر مع غاز الهيليوم لإزالة الأكسجين الذائب. إعادة التدوير من الطور المتحركهو تقريبا من الضروري للحفاظ على قرار جيد لفترة معقولة من الزمن. يتم الحفاظ على الطور المتحرك العمر الافتراضي باستخدام مفتاح تدفق (التي يسيطر عليها تكامل) لتحويل النفايات إلى أول 2-7 دقيقة من كل تشغيل. تتم المحافظة على الأقطاب في إمكانات 0.78 تقريبا و0.95V فيما يتعلق الإلكترود المرجعي Ag/AgC1. يستخدم الكهربائي في ارتفاع محتمل على وجه الحصر لتحديد التربتوفان (ومعيار داخلي NMDA). إمكانات V 0.78 يوفر إشارة إلى أعلى نسبة الضوضاء للكشف عن أمينات أحادية والمركبات، وغيرها من التربتوفان. يتم تخزين المخططات الاستشرابية على القرص الثابت من محطة العمل تمكين، ومعالجتها في وقت لاحق، ونقل البيانات مباشرة إلى جدول بيانات Excel لحساب كميات المستقلب وتجميع البيانات المجموعة. مضخة: شيمادزو LC-10AD الخلية: BAS الصليب التدفق. كربون زجاجي كهربائي يعمل على 0.780 و 0.950 V المحتملة. كشف: BAS LC-4B تعمل في وضع قناة مزدوجة. بيانات ACQ. النظام: مياه تمكين برو 2. حاقن: مياه WISP 717 العمود: مياه Spherosorb المواد المستنفدة للأوزون 1 و 5 ميكرومتر الجسيمات، 4.4 مم X 250 مم. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم كاشف </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td></tr><tr><td> كبريتات الصوديوم دوديسيل (SDS) </td><td> - JT بيكر </td><td> 4095-02 </td></tr><tr><td> Trizma قاعدة </td><td> سيغما </td><td> T1503-1KG </td></tr><tr><td> Trizma حمض الهيدروكلوريك </td><td> سيغما </td><td> T3253-1KG </td></tr><tr><td> الغليسيرول </td><td> سيغما </td><td> G8773-500 مل </td></tr><tr><td> PVP-40 </td><td> سيغما </td><td> PVP40-1KG </td></tr><tr><td> dPBS </td><td> Gibco </td><td> 21600-069 </td></tr><tr><td> Tween20 </td><td> سيغما </td><td> P1379-500 مل </td></tr><tr><td> جليكاين </td><td> سيغما </td><td> G8898-1KG</td></tr><tr><td> الشقائقية S </td><td> Fluka </td><td> 81460 </td></tr><tr><td> زرقة البروموفينول </td><td> سيغما </td><td> B8026-5G </td></tr><tr><td> Dithiothreitol </td><td> سيغما </td><td> D-9163 </td></tr><tr><td> بروتين ستاندرد 2 ملغ BSA </td><td> سيغما </td><td> P5619-25VL </td></tr><tr><td> بيرس فحص البروتين BCA الكاشف A </td><td> الحرارية فيشر العلمية </td><td> 23223 </td></tr><tr><td> الدقة بالاضافة الى معيار البروتين </td><td> راد الحيوي </td><td> 161-0373 </td></tr><tr><td> [125I]-البروتين، نشاط معين </td><td> بيركن، إلمر </td><td></td></tr></tbody></table> الجدول 2. الكواشف محددة. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> الكواشف </td><td> الصيغ </td></tr><tr><td> 10٪ SDS </td><td> 10 ز SDS، 100 مل DI H 2 0 </td></tr><tr><td> 1 SDS٪ (الرقم الهيدروجيني إلى 8.2) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10 مل10٪ SDS </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 60.5 ملغ Trizma قاعدة </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 37،22 ملغم EDTA </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 90 مل DI H 2 0 </li></ol></td></tr><tr><td> الحل الثاني كبريتات النحاس </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1 غرام كبريتات النحاس II </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 25 مل DI H 2 0 </li></ol></td></tr><tr><td> 3X عينة الواق </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trizma قاعدة 2،27 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> SDS 6 غرام </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dithiothreitol 0،463 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الجلسرين 30 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> زرقة البروموفينول 10 ملغ </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DIH 2 0 (إضافة في البداية أعلاه الكواشف إلى 40 مل من H 2 0 في الاسطوانة، ثم تضاف H 2 0 حتى تصل إلى حجم 100 مل) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حمض الهيدروكلوريك (إضافة حسب الحاجة للوصول إلى درجة الحموضة من 6.85) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تجميد حل في 50 مل من أنابيب 2.0. </li></ol> (يجعل 100 مل): حجم الاحتياطي من عينة 3X حاجة = ½ حجم SDS المستخدمة في العينة. </td></tr><tr><td> 1X عينة الواق </td><td> تمييع 3X الواق عينة وصولا الى عازلة عينة 1X باستخدام DI H 2 0 </td></tr><tr><td> 10X<html> تشغيل المخزن المؤقت (يجعل 4 L) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trizma قاعدة 121،1 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جليكاين 577 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> SDS 40 جم </li></ol></td></tr><tr><td> 10X عازلة لنقل: (يجعل 4 L) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> جليكاين 360 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trizma قاعدة 96 ز </li></ol></td></tr><tr><td> الشقائقية </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> الشقائقية S. 0.5 غرام </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> حامض الخليك 5 مل </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DI H 2 0 95 مل </li></ol></td></tr><tr><td> 0.2٪ حمض الهيدروكلوريك الحل </td><td> 5.2 مل من حمض الهيدروكلوريك في 500ml من H DI 2 0 </td></tr><tr><td> PVP-T20 حجب Soln. (يجعل 4 L) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> PVP-40 40 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> dPBS 38،2 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Tween20 2 غرام </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Thimerisol 0.4 غرام </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1M تريس درجة الحموضة 7.6 (60.6 غرام تريس حمض الهيدروكلوريك + 13.9 قاعدة تريس غ في 500 مل DI H 2 0) - 50 مل </li></ol></td></tr><tr><td> 10X الاحتياطي لطخة (يجعل 4 L) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> توين 20 20 ز </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تريس قاعدة 14 غرام </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> تريس حمض الهيدروكلوريك 61 ز </li></ol></td></tr></tbody></table>ontent &quot;فحص البروتين&gt; الجدول رقم 3. والغربية صيغ التنشيف. معايير هيدروكسيلاز التيروزين: وتستمد معايرة TH البروتين والفسفرة المعايير المستخدمة من قبل هذا المختبر من مقتطفات خلية PC12، والتي تم تحليلها لمحتوى البروتين عشر وstoichiometries الفسفرة ضد المعايير TH معايرة سابقا التي نشأت في نهاية المطاف من المختبر الدكتور جون هايكوك 11 .

comprehensive profiling of dopamine regulation in substantia nigra and ventral tegmental area

الدوبامين هو ناقل عصبي درس بقوة في الجهاز العصبي المركزي. في الواقع، قد عزز مشاركتها في النشاط الحركي والسلوك المتصل بالإثابة، خمسة عقود من التحقيق في أوجه القصور الجزيئية المرتبطة مع تنظيم الدوبامين. غالبية هذه التحقيقات من تنظيم الدوبامين في الدماغ التركيز على الأساس الجزيئي لائحته في مناطق ميدان المحطة من المسارات السوداوي وmesoaccumbens؛ المخطط والمتكئة نواة. وعلاوة على ذلك، وركزت هذه الدراسات على تحليل محتوى الأنسجة الدوبامين مع التطبيع فقط لوزن النسيج الرطب. التحقيق من البروتينات التي تنظم الدوبامين، مثل هيدروكسيلاز التيروزين (TH) بروتين، الفسفرة TH، نقل الدوبامين (DAT)، ونقل مونوامين حويصلي 2 (VMAT2) بروتين في كثير من الأحيان لا تشمل تحليل محتوى الأنسجة الدوبامين في نفس العينة. القدرة على تحليل محتوى كل من الأنسجة الدوبامين والبروتينات التي تنظم فيها (بما في ذلك في مرحلة ما بعد هيئة تنظيم الاتصالاتتعديلات nslational) لا يعطي سوى القوة الكامنة في تفسير العلاقة بين دوبامين مع مستوى البروتين وظيفة TH، DAT، أو VMAT2، بل يمتد أيضا اقتصاد عينة. وهذا يترجم إلى أقل التكاليف، وحتى الآن تنتج نظرة ثاقبة لتنظيم الجزيئي للدوبامين في نموذج تقريبا أي خيار من المحققين. ونحن نركز على التحليلات في المخ الأوسط. على الرغم من أن تهمل عادة SN وVTA في معظم الدراسات من تنظيم الدوبامين، وتشريح هذه النوى بسهولة مع الممارسة. ويمكن إجراء قراءات شاملة لمحتوى الأنسجة الدوبامين وTH، DAT، أو VMAT2. هناك ازدهار الأدب عن تأثير وظيفة الدوبامين في التعطيل وVTA على السلوك، والإصطدامات من المواد الخارجية أو عمليات المرض فيها 1-5. وعلاوة على ذلك، ومركبات مثل عوامل النمو يكون لها تأثير عميق على البروتينات الدوبامين والدوبامين التنظيم، إلى حد أكبر نسبيا في التعطيل أو VTA <sup&gt; 6-8. لذلك، يتم تقديم هذه المنهجية لتكون مرجعا للمختبرات التي ترغب في توسيع نطاق تحقيقاتها حول كيفية علاجات محددة تعدل السلوك وتنظيم الدوبامين. هنا، ويقدم وسيلة متعددة الخطوات لتحليل محتوى الأنسجة الدوبامين، ومستويات بروتين من TH، DAT، أو VMAT2، والفسفرة TH من المادة السوداء وVTA من المخ الأوسط القوارض. ويمكن تحليل الفسفرة TH تسفر عن رؤى كبيرة ليس فقط في كيفية تنظيم نشاط عشر، ولكن أيضا في أجهزة الطرد المركزي مما يشير المتضررين في نوى somatodendritic في نموذج معين. وسوف نوضح تقنية تشريح للفصل بين هذه النوى اثنين وتجهيز عينة من الأنسجة التي تنتج تشريح لمحة كشف الآليات الجزيئية لتنظيم الدوبامين في الجسم الحي، محددة لكل نواة (الشكل 1).

Watch this Scientific Journal Video about Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area at JoVE.com

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

وينظم بوضوح الدوبامين في نواة الدماغ المتوسط، والتي تحتوي على خلية وهيئات والتشعبات من الخلايا العصبية المنتجة للدوبامين. نحن هنا وصفا لنهج ونموذج تشريح مناولة إلى تحقيق أقصى قدر من النتائج، وبالتالي استنتاجات ورؤى، بشأن تنظيم الدوبامين في الدماغ المتوسط ​​نواة من المادة السوداء (SN) ومنطقة الجوفية السقيفية (VTA) لدى القوارض.

شامل التنميط من لائحة الدوبامين في المادة السوداء والمنطقة الجوفية السقيفية

Dopamine is a vigorously studied neurotransmitter in the CNS. Indeed, its involvement in locomotor activity and reward-related behaviour has fostered five ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Single Cell Measurement of Dopamine Release with Simultaneous Voltage-clamp and Amperometry

واحدة من خلية قياس إفراز الدوبامين في وقت واحد مع المشبك الجهد وAmperometry

After its release into the synaptic cleft, dopamine exerts its biological properties via its pre- and post-synaptic targets1. The dopamine signal is ...

In ovo Expression of MicroRNA in Ventral Chick Midbrain

In ovo Expression of MicroRNA in Ventral Chick Midbrain

في التعبير البيضة من الرنا الميكروي في بطني الدماغ المتوسط ​​الفرخ

Non-coding RNAs are additional players in regulating gene expression. Targeted in ovo electroporation of specific areas provides a unique tool for spatial ...

Environmental Modulations of the Number of Midbrain Dopamine Neurons in Adult Mice

التحويرات البيئية لعدد من الدماغ المتوسط ​​الدوبامين العصبية في الفئران الكبار

Long-lasting changes in the brain or &#8216;brain plasticity&#8217; underlie adaptive behavior and brain repair following disease or injury. Furthermore, ...

Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the Isolation of Individual Dopamine Neurons and the Entire Ventral Tegmental Area

الليزر التقاط تسليخ مجهري - تظاهرة لعزل الخلايا العصبية الدوبامين الفردية ومنطقة بطني السقيفية بكل

Laser capture microdissection (LCM) is used to isolate a concentrated population of individual cells or precise anatomical regions of tissue from tissue ...

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons

تصوير لايف من النيكوتين المستحثة اشارة الكالسيوم وناقل عصبي الإصدار جنبا إلى جنب بطني الحصين المحاوير

Sustained enhancement of axonal signaling and increased neurotransmitter release by the activation of pre-synaptic nicotinic acetylcholine receptors ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

تقييم التوازن تتميز في الفئران باستخدام التحليل اللوني السائل عالي الأداء وامتصاص الدوبامين سينابتوسومال

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...

Stereological Estimation of Dopaminergic Neuron Number in the Mouse Substantia Nigra Using the Optical Fractionator and Standard Microscopy Equipment

ستيريولوجيكال تقدير عدد الخلايا العصبية تتميز في أسود الدماغ الماوس باستخدام فراكتيوناتور الضوئية ومعدات مجهرية القياسية

In pre-clinical Parkinson&#39;s disease research, analysis of the nigrostriatal tract, including quantification of dopaminergic neuron loss within the ...

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

تحديد مستقبلات الدوبامين D1-ألفا داخل Accumbens نواة القوارض بالحمض النووي الريبي مبتكرة في الموقع تكنولوجيا الكشف عن

In the central nervous system, the D1-alpha subtype receptor (Drd1&#945;) is the most abundant dopamine (DA) receptor, which plays a vital role in ...

Comprehensive Autopsy Program for Individuals with Multiple Sclerosis

برنامج التشريح الشامل للأفراد الذين يعانون من التصلب المتعدد

We describe a rapid tissue donation program for individuals with multiple sclerosis (MS) that requires scientists and technicians to be on-call 24/7, 365 ...

Combined Infusion and Stimulation with Fast-Scan Cyclic Voltammetry (CIS-FSCV) to Assess Ventral Tegmental Area Receptor Regulation of Phasic Dopamine

Combined Infusion and Stimulation with Fast-Scan Cyclic Voltammetry CIS-FSCV to Assess Ventral Tegmental Area Receptor Regulation of Phasic Dopamine

ضخ جنبا إلى جنب والتحفيز مع المسح السريع قياس فولتامتري الحلقي (CIS-FSCV) لتقييم تنظيم مستقبلات منطقة تيغمنتال البطنية من الدوبامين التدريجي

Phasic dopamine (DA) release from the ventral tegmental area (VTA) to the nucleus accumbens plays a pivotal role in reward processing and reinforcement ...