Name: comprehensive profiling of dopamine regulation in substantia nigra and ventral tegmental area
Uploaded: 2012-08-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area at JoVE.com

מימון עבור עבודה זו, וכפי שצוטט 2,10, נקבע, בין השאר, על ידי פרסים מחקר להעניק MF סלווטורה של הפדרציה האמריקאית לחקר הזיקנה, אדוארד פ &#39;סטיילס אמון הקרן ביו קרן המחקר של מערב לואיזיאנה, וכדי BS פרואט מן אחוות אייק Muslow Predoctoral, LSU למדעי הבריאות מרכז, Shreveport.

1. בתור <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> על מצע של קרח רטוב, לצנן המוח מכרסם מטריקס (סעיפים העטרה הפרדה 1 מ&quot;מ זה מזה), צלחת פטרי המכילה 5 סכיני גילוח, ו # 11 אזמל. בכלי נפרד, במקום הנקרא 2 גודל מ&quot;ל צינורות microfuge אל קרח יבש. </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> החוקר ...

<ol>
	<li>Trevitt, J. T., Carlson, B. B., Nowend, K., Salamone, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Substantia+nigra+pars+reticulate+is+a+highly+potent+site+of+action+for+the+behavioral+effects+of+the+D1+antagonist+SCH23390+in+rat.">Substantia nigra pars reticulate is a highly potent site of action for the behavioral effects of the D1 antagonist SCH23390 in rat.</a> Psychopharmacology. 156, 32-41 (2001).</li><li>Salvatore, M. F., Pruett, B. S., Spann, S. L., Dempsey, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aging+reveals+a+role+for+nigral+tyrosine+hydroxylase+ser31+phosphorylation+in+locomotor+activity+generation.">Aging reveals a role for nigral tyrosine hydroxylase ser31 phosphorylation in locomotor activity generation.</a> PLoS ONE. 4, e8466 (2009).</li><li>Rossato, J. L., Bevilaqua, L. R. M., Izquierdo, I., Medina, J. H., Cammarota, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dopamine+controls+persistence+of+long-term+memory+storage.">Dopamine controls persistence of long-term memory storage.</a> Science. 325, 1017-1020 (2009).</li><li>Keller, C. M., Salvatore, M. F., Pruett, B. S., Guerdin, G. F., Goeders, N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biphasic+dopamine+regulation+in+mesoaccumbens+pathway+in+response+to+non-contigent+binge+and+escalating+methamphetamine+regimens+in+the+Wistar+rat.">Biphasic dopamine regulation in mesoaccumbens pathway in response to non-contigent binge and escalating methamphetamine regimens in the Wistar rat.</a> Psychopharmacology. 215, 513-526 (2011).</li><li>Lu, L., Dempsey, J., Liu, S. Y., Bossert, J. M., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+infusion+of+brain-derived+neurotrophic+factor+into+the+ventral+tegmental+area+induces+long-lasting+potentiation+of+cocaine+seeking+after+withdrawal.">A single infusion of brain-derived neurotrophic factor into the ventral tegmental area induces long-lasting potentiation of cocaine seeking after withdrawal.</a> J. Neurosci. 24, 1604-1611 (2004).</li><li>Hoffer, B. J., Hoffman, A., Bowenkamp, K., Huettl, P., Hudson, J., Martin, D., Lin, L. F., Gerhardt, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glial+cell+line-derived+neurotrophic+factor+reverses+toxin-induced+injury+to+midbrain+dopaminergic+neurons+in+vivo.">Glial cell line-derived neurotrophic factor reverses toxin-induced injury to midbrain dopaminergic neurons in vivo.</a> Neurosci. Lett. 182, 107-111 (1994).</li><li>Salvatore, M. F., Zhang, J. L., Large, D. M., Wilson, P. E., Gash, C. R., Thomas, T. C., Haycock, J. W., Bing, G., Stanford, J. A., Gash, D. M., Gerhardt, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Striatal+GDNF+administration+increases+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+in+the+rat+striatum+and+substantia+nigra.">Striatal GDNF administration increases tyrosine hydroxylase phosphorylation in the rat striatum and substantia nigra.</a> J. Neurochem. 90, 245-254 (2004).</li><li>Lu, L., Wang, X., Wu, P., Xu, C., Zhao, M., Morales, M., Harvey, B. K., Hoffer, B. J., Shaham, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+ventral+tegmental+area+glial+cell-line+derived+neurotrophic+factor+in+incubation+of+cocaine+craving.">Role of ventral tegmental area glial cell-line derived neurotrophic factor in incubation of cocaine craving.</a> Biol. Psychiatry. 66, 137-145 (2009).</li><li>Lavicky, J., Dunn, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corticotropin-releasing+factor+stimulates+catecholamine+release+in+hypothalamus+and+prefrontal+cortex+in+freely+moving+rats+as+assessed+by+microdialysis.">Corticotropin-releasing factor stimulates catecholamine release in hypothalamus and prefrontal cortex in freely moving rats as assessed by microdialysis.</a> J. Neurochem. 60, 602-612 (1993).</li><li>Salvatore, M. F., Pruett, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dichotomy+of+tyrosine+hydroxylase+and+dopamine+regulation+between+somatodendritic+and+terminal+field+areas+of+nigrostriatal+and+mesoaccumbens+pathways.">Dichotomy of tyrosine hydroxylase and dopamine regulation between somatodendritic and terminal field areas of nigrostriatal and mesoaccumbens pathways.</a> PLoS ONE. 7, e29867 (2012).</li><li>Salvatore, M. F., Garcia-Espana, A., Goldstein, M., Deutch, A. Y., Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stoichiometry+of+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+in+the+nigrostriatal+and+mesolimbic+systems+in+vivo:+Effects+of+acute+haloperidol+and+related+compounds.">Stoichiometry of tyrosine hydroxylase phosphorylation in the nigrostriatal and mesolimbic systems in vivo: Effects of acute haloperidol and related compounds.</a> J. Neurochem. 75, 225-232 (2000).</li><li>Salvatore, M. F., Waymire, J. C., Haycock, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Depolarization-stimulated+catecholamine+biosynthesis:+involvement+of+protein+kinases+and+tyrosine+hydroxylase+phosphorylation+sites+in+situ.">Depolarization-stimulated catecholamine biosynthesis: involvement of protein kinases and tyrosine hydroxylase phosphorylation sites in situ.</a> J. Neurochem. 79, 349-360 (2001).</li><li>Haycock, J. W., Lew, J. Y., Garcia-Espana, A., Lee, K. Y., Harada, K., Meller, E., Goldstein, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+serine-19+phosphorylation+in+regulating+tyrosine+hydroxylase+studied+with+site-+and+phosphospecific+antibodies+and+site-directed+mutagenesis.">Role of serine-19 phosphorylation in regulating tyrosine hydroxylase studied with site- and phosphospecific antibodies and site-directed mutagenesis.</a> J. Neurochem. 71, 1670-1675 (1998).</li><li>Lindgren, N., Xu, Z. Q., Linskog, M., Herrera-Marschitz, M., Goiny, M., Haycock, J. W., Goldstein, M., Hokfelt, T., Fisone, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+tyrosine+hydroxylase+activity+and+phosphorylation+at+ser19+and+ser40+via+activation+of+glutamate+NMDA+receptors+in+rat+striatum.">Regulation of tyrosine hydroxylase activity and phosphorylation at ser19 and ser40 via activation of glutamate NMDA receptors in rat striatum.</a> J. Neurochem. 74, 2470-2477 (2000).</li></ol>

כפי שמתואר באיור 1, השיטות שפורטו לעיל צריך להניב readouts רבים של דופאמין ויסות שלה חלבונים ה, DAT, ו VMAT2 ממדגם אחד או SN VTA לקבל חולדה או עכבר. שוב, היתרונות של ביצוע זה הן כי פרוטוקול החוקר יכול להשיג readouts מבצעית המותאמות של כמה דופמין מוסדר in vivo תחת הפרדיגמה כמעט כל ניסי...

HPLC המערכת: המערכת הבסיסית כוללת משאבה LC10-ADvp HPLC Shimadzu, ווטרס 717 Wisp אוטומטית מדגם ההזרקה, 250 X 4.4 מ&quot;מ 5 מיקרון Spherosorb ODS-1 טור C18 הפוך שלבים (ווטרס), מספר מערכות Bioanalytical (BAS) TL12 זכוכית כפולה אלקטרודות פחמן, שני באס LC4B גלאי אלקטרו, וכמה ווטרס העצמת 2 על איסוף מידע מערכת אינטגרציה. עמודה נשמר 30-45 מעלות צלזיוס (BAS דוד LC22A עמודה). בשלב הנייד הוא 0.1 סודיום פוספט M (pH 3.0), 0.1 mM EDTA, 0.2-0.4 mM 1-אוקטן חומצה sulfonic (איסטמן קודאק-), ו אצטוניטריל 0.35% (V / V), מסונן באמצעות מסנן 0.45 מיקרון. קצב הזרימה הוא של 1.2 מ&quot;ל / דקה. ארבע קבוצות ליטר בשלב ניידים מותאמים הפרדות על ידי התאמת ה-pH, חומצה אוקטן sulfonic וטמפרטורה העמודה. בשלב ניידים ממוחזרים, והוא מטוהר ברציפות עם גז הליום להסיר החמצן המומס. מיחזור שלב סלולריהכרחי כמעט כדי לשמור על רזולוציה טובה למשך זמן סביר. בשלב הנייד חיי מדף נשמר באמצעות בורר זרימת (בשליטת אינטגרטור) להסיט לבזבז דקות 1 2-7 של כל סיבוב. האלקטרודות מתוחזקים על פוטנציאל של כ 0.78 ו 0.95V לגבי האלקטרודה Ag/AgC1 התייחסות. האלקטרודה על פוטנציאל גבוה יותר משמש אך ורק לקביעת טריפטופן (ורמת פנימי NMDA). הפוטנציאל 0.78 V מספק אות מעולה יחס רעש כדי לאתר את monoamines ותרכובות, למעט טריפטופן. Chromatograms מאוחסנים על הכונן הקשיח של תחנת העבודה העצמת, ומעובד לאחר מכן והנתונים מועברים ישירות לתוך גיליון אלקטרוני של Excel לצורך חישוב כמויות מטבוליט ו אוסף של נתונים קבוצתיים. משאבת: Shimadzu LC-10AD נייד: זרימה BAS קרוס. הפחמן מזוגגות עובד האלקטרודה על 0.780 ו 0.950 פוטנציאל V. גלאי: BAS LC-4B פעל במצב ערוץ כפול. נתונים ACQ. מערכת: ווטרס העצמת Pro 2. מזרק: Wisp ווטרס 717 טור: ווטרס Spherosorb ODS-1, 5 החלקיקים מיקרומטר, 4.4 מ&quot;מ X 250 מ&quot;מ. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> שם מגיב </td><td> חברה </td><td> מספר קטלוגי </td></tr><tr><td> Dodecyl נתרן סולפט (SDS) </td><td> - JT בייקר </td><td> 4095-02 </td></tr><tr><td> מאגר Trizma </td><td> סיגמא </td><td> T1503-1 ק&quot;ג </td></tr><tr><td> Trizma HCl </td><td> סיגמא </td><td> T3253-1 ק&quot;ג </td></tr><tr><td> גליצרול </td><td> סיגמא </td><td> G8773-500 מ&quot;ל </td></tr><tr><td> PVP-40 </td><td> סיגמא </td><td> PVP40-1 ק&quot;ג </td></tr><tr><td> dPBS </td><td> Gibco </td><td> 21600-069 </td></tr><tr><td> Tween20 </td><td> סיגמא </td><td> P1379-500 מ&quot;ל </td></tr><tr><td> גליצין </td><td> סיגמא </td><td> G8898-1 ק&quot;ג</td></tr><tr><td> Ponceau S </td><td> Fluka </td><td> 81460 </td></tr><tr><td> Bromophenol כחול </td><td> סיגמא </td><td> B8026-5G </td></tr><tr><td> Dithiothreitol </td><td> סיגמא </td><td> D-9163 </td></tr><tr><td> חלבון רגיל 2 מ&quot;ג BSA </td><td> סיגמא </td><td> P5619-25VL </td></tr><tr><td> פירס Assay BCA חלבון מגיב </td><td> תרמו פישר סיינטיפיק </td><td> 23223 </td></tr><tr><td> Precision פלוס רגיל חלבון </td><td> ביו רד </td><td> 161-0373 </td></tr><tr><td> [125I], חלבונים, פעילות ספציפית </td><td> פרקין אלמר, </td><td></td></tr></tbody></table> טבלה 2. חומרים כימיים ספציפיים. <table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> ריאגנטים </td><td> נוסחאות </td></tr><tr><td> 10% SDS </td><td> 10 גרם SDS, 100 מ&quot;ל DI H 2 0 </td></tr><tr><td> 1% SDS (pH עד 8.2) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 10 מ&quot;ל10% SDS </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 60.5 מ&quot;ג Trizma מאגר </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 37.22 מ&quot;ג EDTA </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 90 מ&quot;ל DI H 2 0 </li></ol></td></tr><tr><td> נחושת סולפט II פתרון </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1 גרם II נחושת גופרתית </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 25 מ&quot;ל DI H 2 0 </li></ol></td></tr><tr><td> לדוגמה 3X מאגר </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trizma מאגר 2.27 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> SDS 6 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Dithiothreitol 0.463 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גליצרול 30 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Bromophenol כחול 10 מ&quot;ג </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DIH 2 0 (בתחילה להוסיף מעל ריאגנטים ל 40 מ&quot;ל של H 2 0 גליל מדורג, ואז מוסיפים H 2 0 עד נפח מגיע ל 100 מ&quot;ל) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> HCl (להוסיף לפי הצורך להגיע pH של 6.85) </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> להקפיא את הפתרון ב -50 צינורות 2.0 מ&quot;ל. </li></ol> (עושה 100 מ&quot;ל): נפח מאגר לדוגמה 3X צריך = ½ נפח SDS שימוש במדגם. </td></tr><tr><td> 1X לדוגמא הצפת </td><td> לדלל את מאגר לדוגמה 3X למאגר 1X באמצעות מדגם DI H 2 0 </td></tr><tr><td> 10X<html> הפעלת מאגר (גורם 4 ל &#39;) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trizma מאגר 121.1 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גליצין 577 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> SDS 40 גרם </li></ol></td></tr><tr><td> מאגר העברה 10X: (עושה 4 ל &#39;) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> גליצין 360 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Trizma בסיס 96 גרם </li></ol></td></tr><tr><td> Ponceau </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Ponceau ס &#39;0.5 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> חומצה אצטית 5 מ&quot;ל </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> DI H 2 0 95 מ&quot;ל </li></ol></td></tr><tr><td> 0.2% HCl פתרון </td><td> 5.2 מ&quot;ל HCl ב 500 מ&quot;ל של DI H 2 0 </td></tr><tr><td> PVP-T20 חסימת Soln. (גורם 4 ל &#39;) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> PVP-40 40 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> dPBS 38.2 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Tween20 2 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Thimerisol 0.4 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> 1M Tris pH 7.6 (60.6 גרם טריס HCl + 13.9 גרם טריס בסיס 500 מ&quot;ל DI H 2 0) - 50 מ&quot;ל </li></ol></td></tr><tr><td> מאגר כתם 10X (גורם 4 ל &#39;) </td><td><ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> Tween 20 20 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טריס בסיס 14 גרם </li><li style=";text-align:right;direction:rtl"> טריס HCl 61 גרם </li></ol></td></tr></tbody></table>&quot;ontent&gt; לוח 3. חלבון Assay והנוסחאות והסתיר המערב. סטנדרטים hydroxylase טירוזין: מכויל על זירחון חלבונים ו ה סטנדרטים המשמשים במעבדה זו נגזרות PC12 תמציות סלולריים, אשר נותחו על תכולת החלבון וה stoichiometries זרחון על תקני ה מכויל בעבר כי בסופו של דבר, שמקורם במעבדה של ד&quot;ר ג&#39;ון הייקוק 11 .

comprehensive profiling of dopamine regulation in substantia nigra and ventral tegmental area

דופמין הוא מוליך עצבי למד במרץ מערכת העצבים המרכזית. אכן, את מעורבותה בפעילות של תנועה ותגמול הקשור להתנהגות טיפחה חמישה עשורים החקירה לעניין הליקויים מולקולריים הקשורים תקנה דופמין. רוב אלה שאלות של רגולציה הדופמין במוח המיקוד על הבסיס המולקולרי של ויסות שלה את שדה באזורים מסוף המסלולים nigrostriatal ו mesoaccumbens, הסטריאטום ו הנסמך הגרעין. יתרה מכך, מחקרים אלה התמקדו בניתוח תוכן רקמות דופמין נורמליזציה עם משקל רק רקמות רטוב. חקירת החלבונים המווסתים דופמין, כגון hydroxylase החלבון טירוזין (ה &#39;), זירחון TH, טרנספורטר דופאמין (DAT), ו טרנספורטר אוקסידאז שלפוחי 2 (VMAT2) חלבון לעתים קרובות אינם כוללים ניתוח של תוכן רקמות הדופמין מדגם זהה. היכולת לנתח את תוכן הן רקמות דופאמין חלבונים המסדירים שלה (כולל פוסט traשינויים nslational) לא רק נותן כוח אינהרנטי לפרש את הקשר של דופמין עם רמת חלבון והתפקוד של TH, DAT, או VMAT2, אלא גם מרחיב את הכלכלה המדגם. זה מיתרגם עלות פחות, ובכל זאת מייצרת תובנות תקנה המולקולרי של הדופמין הפרדיגמה כמעט כל בחירה של החוקרים. אנו מתמקדים בניתוח של המוח התיכון. למרות SN ו VTA מוזנחים בדרך כלל רוב המחקרים תקנה דופמין, גרעינים אלה גזור בקלות עם הפרקטיקה. Readout מקיפה של תוכן רקמות TH דופאמין, DAT, או VMAT2 ניתן לבצע. שם הוא המתפתחת ספרות על ההשפעה של תפקוד הדופאמין SN ו VTA על ההתנהגות, ועל הפרעות וחדירות חיצוניות של חומרים חיצוניים או תהליכי מחלה החלים בהם 1-5. יתר על כן, תרכובות כגון גורמי גדילה יש השפעה עמוקה על חלבונים דופאמין דופאמין מווסת במידה יחסית רבה יותר SN או VTA <sup&gt; 6-8. לכן, שיטה זו מוצג לעיון למעבדות אשר רוצים להרחיב את השאלות שלהם על כמה טיפולים ספציפיים לווסת התנהגות ורגולציה דופמין. הנה, שיטת רב שלבי מוצג על ניתוח תוכן רקמות דופמין, רמות החלבון של TH, DAT, או VMAT2 ו זרחון TH מ nigra substantia ו VTA מן המוח התיכון מכרסם. ניתוח של זירחון TH יכולה להניב תובנות משמעותיות לתוך לא רק כיצד הפעילות TH מוסדר, אלא גם את מפלי איתות מושפע בגרעין somatodendritic פרדיגמה נתונה. אנו מדגימים את הטכניקה לנתיחה כדי לבודד אותם גרעינים 2 ו עיבוד דגימת רקמה גזור שמייצר פרופיל חושף מנגנונים מולקולריים תקנה דופמין in vivo, ספציפיות עבור כל גרעינים (איור 1).

Watch this Scientific Journal Video about Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area at JoVE.com

Comprehensive Profiling of Dopamine Regulation in Substantia Nigra and Ventral Tegmental Area

דופאמין הוא מוסדר בבירור בגרעין המוח התיכון, אשר מכילים תאים הגופות דנדריטים של נוירונים דופאמין. כאן נתאר את הגישה לנתיחה ו מדגם הטיפול על מנת למקסם את התוצאות, ולכן מסקנות ותובנות, על ויסות הדופמין בגרעין המוח התיכון של nigra substantia (SN) ואזור tegmental הגחוני (VTA) במכרסמים.

פרופיל מקיף של הסדרת substantia nigra הדופמין ואזור Tegmental הגחון

Dopamine is a vigorously studied neurotransmitter in the CNS. Indeed, its involvement in locomotor activity and reward-related behaviour has fostered five ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Single Cell Measurement of Dopamine Release with Simultaneous Voltage-clamp and Amperometry

מדידת תא בודדה של שחרור דופמין במתח-clamp וAmperometry סימולטני

After its release into the synaptic cleft, dopamine exerts its biological properties via its pre- and post-synaptic targets1. The dopamine signal is ...

In ovo Expression of MicroRNA in Ventral Chick Midbrain

In ovo Expression of MicroRNA in Ventral Chick Midbrain

בביטוי אוב של microRNA בגחון צ&#39;יק מוח התיכון

Non-coding RNAs are additional players in regulating gene expression. Targeted in ovo electroporation of specific areas provides a unique tool for spatial ...

Environmental Modulations of the Number of Midbrain Dopamine Neurons in Adult Mice

אפנון סביבתי של מספר המוח התיכון דופמין נוירונים בעכברים בוגרים

Long-lasting changes in the brain or &#8216;brain plasticity&#8217; underlie adaptive behavior and brain repair following disease or injury. Furthermore, ...

Laser Capture Microdissection - A Demonstration of the Isolation of Individual Dopamine Neurons and the Entire Ventral Tegmental Area

Microdissection לכידת לייזר - הפגנה של הבידוד של פרט דופמין נוירונים ופינת הגחון tegmental השלם

Laser capture microdissection (LCM) is used to isolate a concentrated population of individual cells or precise anatomical regions of tissue from tissue ...

Live Imaging of Nicotine Induced Calcium Signaling and Neurotransmitter Release Along Ventral Hippocampal Axons

הדמיה חיה של איתות הניקוטין מושרה סידן והשחרור הנוירוטרנסמיטר לאורך האקסונים בהיפוקמפוס הגחון

Sustained enhancement of axonal signaling and increased neurotransmitter release by the activation of pre-synaptic nicotinic acetylcholine receptors ...

Assessment of Dopaminergic Homeostasis in Mice by Use of High-performance Liquid Chromatography Analysis and Synaptosomal Dopamine Uptake

הערכה של דופאמין הומאוסטזיס בעכברים באמצעות ניתוח ביצועים גבוהים כרומטוגרפיה נוזלית, דופמין Synaptosomal ספיגת

Dopamine (DA) is a modulatory neurotransmitter controlling motor activity, reward processes and cognitive function. Impairment of dopaminergic (DAergic) ...

Stereological Estimation of Dopaminergic Neuron Number in the Mouse Substantia Nigra Using the Optical Fractionator and Standard Microscopy Equipment

הערכה stereological של דופאמין נוירון במספר העכבר הסובסטנציה ניגרה באמצעות מיקרוסקופ רגיל ציוד אופטי Fractionator

In pre-clinical Parkinson&#39;s disease research, analysis of the nigrostriatal tract, including quantification of dopaminergic neuron loss within the ...

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

Identification of Dopamine D1-Alpha Receptor Within Rodent Nucleus Accumbens by an Innovative RNA In Situ Detection Technology

זיהוי של דופמין קולטן D1-אלפא בתוך מכרסמים גרעין האקומבנס על ידי טכנולוגיה חדשנית RNA בחיי עיר זיהוי

In the central nervous system, the D1-alpha subtype receptor (Drd1&#945;) is the most abundant dopamine (DA) receptor, which plays a vital role in ...

Comprehensive Autopsy Program for Individuals with Multiple Sclerosis

שלאחר המוות תוכנית מקיפה עבור אנשים עם טרשת נפוצה

We describe a rapid tissue donation program for individuals with multiple sclerosis (MS) that requires scientists and technicians to be on-call 24/7, 365 ...

Combined Infusion and Stimulation with Fast-Scan Cyclic Voltammetry (CIS-FSCV) to Assess Ventral Tegmental Area Receptor Regulation of Phasic Dopamine

Combined Infusion and Stimulation with Fast-Scan Cyclic Voltammetry CIS-FSCV to Assess Ventral Tegmental Area Receptor Regulation of Phasic Dopamine

עירוי וגירוי משולבים עם וולטמטריה מחזורית סריקה מהירה (CIS-FSCV) כדי להעריך ויסות קולטן אזור טגמנטלי גחוני של דופמין פאזי

Phasic dopamine (DA) release from the ventral tegmental area (VTA) to the nucleus accumbens plays a pivotal role in reward processing and reinforcement ...