Name: synthetic spider silk production on a laboratory scale
Uploaded: 2012-07-18T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthetic Spider Silk Production on a Laboratory Scale at JoVE.com

Detta arbete stöddes av NSF RUI Grants MCB-0950372 och DMR-1105310 titeln &quot;Molecular Characterization of Black Silks änka, maskin-och beteende Spider Lim Silks,&quot; respektive.

<img alt="Figur 11" src="/files/ftp_upload/4191/4191fig1overview.jpg" /> Grafisk översikt: Biomimicry av spinningsprocess Biomimicry av den naturliga spindelnät produktionskedja. En rutt för att tillverka syntetisk silk Denna bild visar den stora ampullate körteln från den gyllene klot vävaren, Nephila clavipes, och de komponenter som används för natursilke produktion (vit text). Svansregionen syntetiserar stora mängder silkesprotein som trans...

<ol>
	<li>Gosline, J. M., Guerette, P. A., Ortlepp, C. S., Savage, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mechanical+design+of+spider+silks:+from+fibroin+sequence+to+mechanical+function.">The mechanical design of spider silks: from fibroin sequence to mechanical function.</a> J. Exp. Biol. 202, 3295-3303 (1999).</li><li>Foelix, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology of spiders. , (1996).</li><li>Vollrath, F., Knight, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liquid+crystalline+spinning+of+spider+silk.">Liquid crystalline spinning of spider silk.</a> Nature. 410, 541-548 (2001).</li><li>Spiess, K., Lammel, A., Scheibel, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recombinant+spider+silk+proteins+for+applications+in+biomaterials.">Recombinant spider silk proteins for applications in biomaterials.</a> Macromol. Biosci. 10, 998-1007 (2010).</li><li>Stark, M., Grip, S., Rising, A., Hedhammar, M., Engstrom, W., Hjalm, G., Johansson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macroscopic+fibers+self-assembled+from+recombinant+miniature+spider+silk+proteins.">Macroscopic fibers self-assembled from recombinant miniature spider silk proteins.</a> Biomacromolecules. 8, 1695-1701 (2007).</li><li>Lazaris, A., Huang, Y., Zhou, J. F., Duguay, F., Chretien, N., Welsh, E. A., Soares, J. W., Karatzas, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+Silk+Fibers+Spun+from+Soluble+Recombinant+Silk+Produced+in+Mammalian+Cells.">Spider Silk Fibers Spun from Soluble Recombinant Silk Produced in Mammalian Cells.</a> Science. 295, 472-476 (2002).</li><li>Teule, F., Cooper, A. R., Furin, W. A., Bittencourt, D., Rech, E. L., Brooks, A., Lewis, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+protocol+for+the+production+of+recombinant+spider+silk-like+proteins+for+artificial+fiber+spinning.">A protocol for the production of recombinant spider silk-like proteins for artificial fiber spinning.</a> Nat. Protoc. 4, 341-355 (2009).</li><li>Gnesa, E., Hsia, Y., Yarger, J. L., Weber, W., Lin-Cereghino, J., Lin-Cereghino, G., Tang, S., Agari, K., Vierra, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conserved+C-Terminal+Domain+of+Spider+Tubuliform+Spidroin+1+Contributes+to+Extensibility+in+Synthetic+Fibers.">Conserved C-Terminal Domain of Spider Tubuliform Spidroin 1 Contributes to Extensibility in Synthetic Fibers.</a> Biomacromolecules. , (2011).</li><li>Hayashi, C. Y., Shipley, N. H., Lewis, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypotheses+that+correlate+the+sequence,+structure,+and+mechanical+properties+of+spider+silk+proteins.">Hypotheses that correlate the sequence, structure, and mechanical properties of spider silk proteins.</a> Int. J. Biol. Macromol. 24, 271-275 (1999).</li><li>Xu, M., Lewis, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+a+protein+superfiber:+Spider+Dragline+Silk.">Structure of a protein superfiber: Spider Dragline Silk.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. 87, 7120-7124 (1990).</li><li>Hayashi, C. Y., Blackledge, T. A., Lewis, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+and+mechanical+characterization+of+aciniform+silk:+uniformity+of+iterated+sequence+modules+in+a+novel+member+of+the+spider+silk+fibroin+gene+family.">Molecular and mechanical characterization of aciniform silk: uniformity of iterated sequence modules in a novel member of the spider silk fibroin gene family.</a> Mol. Biol. Evol. 21, 1950-1959 (2004).</li><li>Lazaris, A., Arcidiacono, S., Huang, Y., Zhou, J. F., Duguay, F., Chretien, N., Welsh, E. A., Soares, J. W., Karatzas, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+silk+fibers+spun+from+soluble+recombinant+silk+produced+in+mammalian+cells.">Spider silk fibers spun from soluble recombinant silk produced in mammalian cells.</a> Science. 295, 472-476 (2002).</li><li>Arcidiacono, S., Mello, C., Kaplan, D., Cheley, S., Bayley, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Purification+and+characterization+of+recombinant+spider+silk+expressed+in+Escherichia+coli.">Purification and characterization of recombinant spider silk expressed in Escherichia coli.</a> Appl. Microbiol. Biotechnol. 49, 31-38 (1998).</li><li>Menassa, R., Zhu, H., Karatzas, C. N., Lazaris, A., Richman, A., Brandle, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+dragline+silk+proteins+in+transgenic+tobacco+leaves:+accumulation+and+field+production.">Spider dragline silk proteins in transgenic tobacco leaves: accumulation and field production.</a> Plant Biotechnology Journal. 2, 431-438 (2004).</li><li>Scheller, J., Guhrs, K. H., Grosse, F., Conrad, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+spider+silk+proteins+in+tobacco+and+potato.">Production of spider silk proteins in tobacco and potato.</a> Nat. Biotechnol. 19, 573-577 (2001).</li><li>An, B., Hinman, M. B., Holland, G. P., Yarger, J. L., Lewis, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+beta-sheets+formation+in+synthetic+spider+silk+fibers+by+aqueous+post-spin+stretching.">Inducing beta-sheets formation in synthetic spider silk fibers by aqueous post-spin stretching.</a> Biomacromolecules. 12, 2375-2381 (2011).</li><li>Elices, M., Guinea, G. V., Plaza, G. R., Karatzas, C., Riekel, C., Agullo-Rueda, F., Daza, R., Perez-Rigueiro, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Bioinspired Fibers Follow the Track of Natural Spider Silk. Macromolecules. 44, 1166-1176 (2011).</li><li>Scheller, J., Guhrs, K. H., Grosse, F., Conrad, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+of+spider+silk+proteins+in+tobacco+and+potato.">Production of spider silk proteins in tobacco and potato.</a> Nature Biotechnology. 19, (2001).</li><li>Kojic, N., Kojic, M., Gudlavalleti, S., McKinley, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solvent+removal+during+synthetic+and+Nephila+fiber+spinning.">Solvent removal during synthetic and Nephila fiber spinning.</a> Biomacromolecules. 5, 1698-1707 (2004).</li><li>Jeffery, F., La Mattina, C., Tuton-Blasingame, T., Hsia, Y., Gnesa, E., Zhao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microdissection+of+Black+Widow+Spider+Silk-producing+Glands.">Microdissection of Black Widow Spider Silk-producing Glands.</a> J. Vis. Exp. (47), e2382 (2011).</li><li>Blasingame, E., Tuton-Blasingame, T., Larkin, L., Falick, A. M., Zhao, L., Fong, J., Vaidyanathan, V., Visperas, A., Geurts, P., Hu, X., La Mattina, C., Vierra, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pyriform+spidroin+1,+a+novel+member+of+the+silk+gene+family+that+anchors+dragline+silk+fibers+in+attachment+discs+of+the+black+widow+spider,+Latrodectus+hesperus.">Pyriform spidroin 1, a novel member of the silk gene family that anchors dragline silk fibers in attachment discs of the black widow spider, Latrodectus hesperus.</a> J. Biol. Chem. 284, 29097-29108 (2009).</li><li>La Mattina, C., Reza, R., Hu, X., Falick, A. M., Vasanthavada, K., McNary, S., Yee, R., Vierra, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+minor+ampullate+silk+proteins+are+constituents+of+prey+wrapping+silk+in+the+cob+weaver+Latrodectus+hesperus.">Spider minor ampullate silk proteins are constituents of prey wrapping silk in the cob weaver Latrodectus hesperus.</a> Biochemistry. 47, 4692-4700 (2008).</li><li>Hsia, Y., Gnesa, E., Jeffery, F., Tang, S., Vierra, C., Cuppoletti, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spider+Silk+Composites+and+Applications.">Spider Silk Composites and Applications.</a> Metal, Ceramic and Polymeric Composites for Various Uses. 2, 303-324 (2011).</li></ol>

Syntetiska fibrer spunna av denna metod är mekaniskt på samma storleksordning jämfört med den naturliga fibrer. Genom att minska mängden mänskliga fel genom mekanisering av buffring och efter spin processer rita, den experimentella variationen mellan prover är mer kontrollerad och kraftigt reducerad. Vår metodik ger möjlighet att undersöka de mekaniska egenskaperna hos andra fibrer som är spunna från rekombinanta proteiner som kodas från cDNA andra medlemmar av spider genfamilj....

Spider silk har extraordinära mekaniska egenskaper som anges utför flera konstgjorda material, inklusive höghållfast stål, Kevlar och nylon. 1 Spindlar spinner minst 6-7 olika fibertyper som visar olika mekaniska egenskaper, var utformade med varierande mängder av draghållfasthet och utbyggbarhet för att utföra specifika biologiska uppgifter. 2 Forskare snabbt vidare med användningen av spindel silke som nästa generations biomaterial på grund av deras utmärkta mekaniska egenskaper, biokompatibilitet och deras icke-toxiska och grön-materiell natur. 3,4 grund av kannibalistiska och giftig art spindeldjur, skörd spindel silke genom jordbruk är inte en praktisk strategi för att möta de krav som är nödvändiga för industriell skala tillverkning. Därför har forskare visat att produktionen av rekombinanta silke proteiner i transgena organismer i kombination med in vitro-spinning av syntetiska fibrer från dense-renade proteiner. 5-8 Redovisning av full längd rekombinanta proteiner spindeltråd har varit tekniskt svårt med tanke på de inneboende egenskaperna hos sina gensekvenser, som omfattar deras mycket repetitiv karaktär och fysiska längd (&gt; ​​15 kb), GC-rikt innehåll och partiska alanin och glycin kodonanvändning. 9-11 Hittills har de flesta laboratorier fokuserat på att uttrycka trunkerade former av de stora proteinerna ampullate siden MaSp1 eller MaSp2 med partiella cDNA-sekvenser eller syntetiska gener. 12-15 Spinning syntetiskt spindel silke är en utmanande process som kräver mästerskap och kunskap inom flera vetenskapliga discipliner, och krångligheter i spinning processen har inte helt avslöjas för allmänheten genom video representation. Faktum är att endast en handfull laboratorier över hela världen har kompetens att uttrycka spindeltråd cDNA, rena silkesproteiner, snurra syntetiska fibrer och utföra post-spin drag, och sedan slutligen testa sina biomaterial egenskaper. 8,16,17 Olika metoder för spinning syntetiska fibrer har omfattat vått och torrt spinning samt electrospinning metoder 16,18,19 Alla förfaranden har ett mål gemensamt -. Utveckling av ett protokoll som producerar syntetiska spindeltråd med mekaniska egenskaper som konkurrerande naturliga ämnen för storskaliga kommersiella tillverkningsförfaranden. Här beskriver vi proceduren för att skapa konstgjorda spider sidentyger i laboratorieskala med en våtspinning metod. I förhållande till andra spinning metoder har våtspinning gett de mest konsekventa resultaten för fiber analys. Redogör vi för detta förfarande börjar med expression av de rekombinanta silkesproteiner i bakterier, följt av deras rening, och sedan beskriva de olika stegen protein förberedelse för spinning, inklusive en post-spin drag metod som tillämpas på &quot;as-spunna&quot; fibrer som ger trådar med materialegenskaper som närmar sig kvaliteten av naturliga spindel silke. Vår methodology är utformad för att efterlikna den naturliga snurrande processen siden fibrer och den drar starkt på vår expertis arkitektur och funktion silk-producerande körtlar från klot-och Cob-vävning spindlar. 20-22 Dessutom avslutar vi med de nödvändiga steg för att bestämma de väsentliga egenskaperna hos syntetfibrer med användning av en tensometer att plotta spännings-töjningskurvor, som tillåter forskare att beräkna den slutliga hållfasthet, ultimat töjning och seghet av fibrer. Sist men av betydande värde, kan de spinning, buffra, och rita apparater vara hemma-byggd med kommersiellt tillgängliga delar, snarare än att köpa kostsamma anpassad utrustning.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reagens / utrustning </td><td> Företaget </td><td> Katalognummer </td><td> Kommentarer </td></tr><tr><td> pBAD / TOPO ThioFusion Expression Kit </td><td> Invitrogen </td><td> K370-01 </td><td></td></tr><tr><td> FastBreak lyseringsreagens, 10x </td><td> Promega </td><td> V857C </td><td></td></tr><tr><td> Ni-NTA-Agaros </td><td> Qiagen </td><td> 30.210 </td><td> Innehåller instruktioner för buffertar </td></tr><tr><td> ProteoSilver Silver Stain Kit </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> PROTSIL1-1KT </td><td></td></tr><tr><td> Freezone Lyophilizer </td><td> Labconco </td><td> 7960041 </td><td> Freezone 12Plus </td></tr><tr><td> Hexafluorisopropanol (HFIP) </td><td> Sigma-Aldrich </td><td> 52.512 </td><td></td></tr><tr><td> Spruta </TD&gt; <td> Hamilton </td><td> 7657-01 </td><td> 250 | il </td></tr><tr><td> Nål </td><td> Hamilton </td><td> 7780-01 </td><td> 26S Mätare, Blunt slutet avtagbar kanyl </td></tr><tr><td> Sprutpump </td><td> Harvard Apparatus </td><td> 702.208 </td><td> 11Plus </td></tr><tr><td> Digital Skjutmått </td><td> Carrera </td><td> CP5906 </td><td> 0-150 mm intervall </td></tr><tr><td> Rostfritt stål pincett </td><td> World Precision Instruments </td><td> 501.764 </td><td> Mini Dumont # M5S </td></tr><tr><td> Motor </td><td> Naturen Mill </td><td> 7090529 </td><td> 12VDC, 2 varvtal </td></tr><tr><td> Linjärt manöverdon </td><td> Warner Electric </td><td> 01-D024-0050-A06-LP-IP65 </td><td> 24VDC, 6 tum sortiment </td></tr><tr><td> Dissektionsmikroskop </td><td> Leica Microsystems </td><td> Leica MZ16 </td><td></td></tr><tr><td> Digital MicroscOPE kamera </td><td> Leica Microsystems </td><td> DFC320 </td><td> Programvara: Leica Application Suite v2.8.1 </td></tr><tr><td> Vannas sax </td><td> World Precision Instruments </td><td> 500.260 </td><td></td></tr><tr><td> Microtensometer </td><td> Aurora Scientific </td><td> 310c </td><td> 5N Dual-Mode System </td></tr></tbody></table>

synthetic spider silk production on a laboratory scale

As society progresses and resources become scarcer, it is becoming increasingly important to cultivate new technologies that engineer next generation biomaterials with high performance properties. The development of these new structural materials must be rapid, cost-efficient and involve processing methodologies and products that are environmentally friendly and sustainable. Spiders spin a multitude of different fiber types with diverse mechanical properties, offering a rich source of next generation engineering materials for biomimicry that rival the best manmade and natural materials. Since the collection of large quantities of natural spider silk is impractical, synthetic silk production has the ability to provide scientists with access to an unlimited supply of threads. Therefore, if the spinning process can be streamlined and perfected, artificial spider fibers have the potential use for a broad range of applications ranging from body armor, surgical sutures, ropes and cables, tires, strings for musical instruments, and composites for aviation and aerospace technology. In order to advance the synthetic silk production process and to yield fibers that display low variance in their material properties from spin to spin, we developed a wet-spinning protocol that integrates expression of recombinant spider silk proteins in bacteria, purification and concentration of the proteins, followed by fiber extrusion and a mechanical post-spin treatment. This is the first visual representation that reveals a step-by-step process to spin and analyze artificial silk fibers on a laboratory scale. It also provides details to minimize the introduction of variability among fibers spun from the same spinning dope. Collectively, these methods will propel the process of artificial silk production, leading to higher quality fibers that surpass natural spider silks.

Watch this Scientific Journal Video about Synthetic Spider Silk Production on a Laboratory Scale at JoVE.com

Synthetic Spider Silk Production on a Laboratory Scale

Trots de enastående mekaniska och biokemiska egenskaper hos spindel siden, kan detta material inte tas ut i stora mängder med konventionella medel. Här beskriver vi en effektiv strategi för att snurra regenatfibrer spindeltråd, vilket är en viktig process för utredarna studerar spindeltråd produktion och deras användning som nästa generations biomaterial.

Syntetisk Spider Silk Production i laboratorieskala

As society progresses and resources become scarcer, it is becoming increasingly important to cultivate new technologies that engineer next generation ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High Throughput MicroRNA Profiling: Optimized Multiplex qRT-PCR at Nanoliter Scale on the Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCs

Hög genomströmning MikroRNA Profilering: Optimerad Multiplex QRT-PCR vid metod i nanoliter Skala på Fluidigm Dynamic ArrayTM IFCS

The broad involvement of miRNAs in critical processes underlying development, tissue homoeostasis and disease has led to a surging interest among the ...

Engineering Adherent Bacteria by Creating a Single Synthetic Curli Operon

Engineering Vidhäftande bakterier genom att skapa en enda syntetisk Curli Operon

The  method described here consists in redesigning E. coli adherence properties by assembling the minimum number of  curli genes under the control of a ...

Air Filter Devices Including Nonwoven Meshes of Electrospun Recombinant Spider Silk Proteins

Luftfilter enheter inklusive Nonwoven maskor Electrospun rekombinanta proteiner spindelsilke

Based on the natural sequence of Araneus diadematus Fibroin 4 (ADF4), the recombinant spider silk protein eADF4(C16) has been engineered. This highly ...

Designing Silk-silk Protein Alloy Materials for Biomedical Applications

Designa Silk-silkesprotein Alloy Material för biomedicinska tillämpningar

Fibrous proteins display different sequences and structures that have been used for various applications in biomedical fields such as biosensors, ...

Production and Targeting of Monovalent Quantum Dots

Produktion och inriktning av Monovalent Quantum Dots

The multivalent nature of commercial quantum dots (QDs) and the difficulties associated with producing monovalent dots have limited their applications in ...

Cloning and Large-Scale Production of High-Capacity Adenoviral Vectors Based on the Human Adenovirus Type 5

Kloning och storskalig produktion av hög kapacitet Adenovirusvektorer Baserat på den mänskliga adenovirus typ 5

High-capacity adenoviral vectors (HCAdV) devoid of all viral coding sequences represent one of the most advanced gene delivery vectors due to their high ...

Engineered 3D Silk-collagen-based Model of Polarized Neural Tissue

Engineered 3D Silk-kollagenbaserad modell av polariserat Neural Tissue

Despite huge efforts to decipher the anatomy, composition and function of the brain, it remains the least understood organ of the human body. To gain a ...

Manufacture and Drug Delivery Applications of Silk Nanoparticles

Tillverkning och Drug Delivery Tillämpningar av Silk Nanopartiklar

Silk is a promising biopolymer for biomedical and pharmaceutical applications due to its outstanding mechanical properties, biocompatibility and ...

Power Input Measurements in Stirred Bioreactors at Laboratory Scale

Power Input mätningar i rörs bioreaktorer på laboratorieskala

The power input in stirred bioreactors is an important scaling-up parameter and can be measured through the torque that acts on the impeller shaft during ...

Material Formation of Recombinant Spider Silks through Aqueous Solvation using Heat and Pressure

Material bildning av rekombinant Spider Silks genom vattenhaltiga Solvation med hjälp av värme och tryck

Many spiders produce seven types of silks. Six of the silks are fiber in form when produced by the spiders. These fibers are not water soluble. In order ...