Name: a galvanotaxis assay for analysis of neural precursor cell migration kinetics in an externally applied direct current electric field
Uploaded: 2012-10-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Galvanotaxis Assay for Analysis of Neural Precursor Cell Migration Kinetics in an Externally Applied Direct Current Electric Field at JoVE.com

Эта работа финансируется за счет естественных наук и инженерного исследовательского совета Канады (грант № 249669 и № 482986), а также сердца и инсульта Фонда Канады (грант № 485508). Авторы благодарят Юсеф Эль-Хайек и д-р Ван Ци за их помощь в разработке экспериментальных протоколов.

Все процедуры, связанные с животными обращения были одобрены Университета Торонто комитета по Уходу за животными в соответствии с руководящими принципами институциональной (протокол №. 20009387). Следующие методы должны быть выполнены с использованием стерильных инструментов и методов,...

<ol>
	<li>Borgens, R. B., Shi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uncoupling+histogenesis+from+morphogenesis+in+the+vertebrate+embryo+by+collapse+of+the+transneural+tube+potential.">Uncoupling histogenesis from morphogenesis in the vertebrate embryo by collapse of the transneural tube potential.</a> Dev. Dyn. 203, 456-467 (1995).</li><li>Song, B., Zhao, M., Forrester, J. V., McCaig, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrical+cues+regulate+the+orientation+and+frequency+of+cell+division+and+the+rate+of+wound+healing+in+vivo.">Electrical cues regulate the orientation and frequency of cell division and the rate of wound healing in vivo.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 99, 13577-13582 (2002).</li><li>Song, B., Zhao, M., Forrester, J., McCaig, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nerve+regeneration+and+wound+healing+are+stimulated+and+directed+by+an+endogenous+electrical+field+in+vivo.">Nerve regeneration and wound healing are stimulated and directed by an endogenous electrical field in vivo.</a> Journal of Cell Science. 117, 4681-4690 (2004).</li><li>Reynolds, B. A., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+neurons+and+astrocytes+from+isolated+cells+of+the+adult+mammalian+central+nervous+system.">Generation of neurons and astrocytes from isolated cells of the adult mammalian central nervous system.</a> Science. 255, 1707-1710 (1992).</li><li>Reynolds, B. A., Weiss, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clonal+and+population+analyses+demonstrate+that+an+EGF-responsive+mammalian+embryonic+CNS+precursor+is+a+stem+cell.">Clonal and population analyses demonstrate that an EGF-responsive mammalian embryonic CNS precursor is a stem cell.</a> Dev. Biol. 175, 1-13 (1996).</li><li>Chiasson, B. J., Tropepe, V., Morshead, C. M., vander Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+mammalian+forebrain+ependymal+and+subependymal+cells+demonstrate+proliferative+potential,+but+only+subependymal+cells+have+neural+stem+cell+characteristics.">Adult mammalian forebrain ependymal and subependymal cells demonstrate proliferative potential, but only subependymal cells have neural stem cell characteristics.</a> J. Neurosci. 19, 4462-4471 (1999).</li><li>Erickson, C. A., Nuccitelli, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+fibroblast+motility+and+orientation+can+be+influenced+by+physiological+electric+fields.">Embryonic fibroblast motility and orientation can be influenced by physiological electric fields.</a> J. Cell Biol. 98, 296-307 (1984).</li><li>Zhao, M., Agius-Fernandez, A., Forrester, J. V., McCaig, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orientation+and+directed+migration+of+cultured+corneal+epithelial+cells+in+small+electric+fields+are+serum+dependent.">Orientation and directed migration of cultured corneal epithelial cells in small electric fields are serum dependent.</a> J. Cell Sci. 109, 1405-1414 (1996).</li><li>Li, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct-Current+Electrical+Field+Guides+Neuronal+Stem/Progenitor+Cell+Migration.">Direct-Current Electrical Field Guides Neuronal Stem/Progenitor Cell Migration.</a> Stem Cells. 26, 2193-2200 (2008).</li><li>Song, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+direct+current+electric+fields+to+cells+and+tissues+in+vitro+and+modulation+of+wound+electric+field+in+vivo.">Application of direct current electric fields to cells and tissues in vitro and modulation of wound electric field in vivo.</a> Nat. Protoc. 2, 1479-1489 (2007).</li><li>Huang, C. -. W., Cheng, J. -. Y., Yen, M. -. H., Young, T. -. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrotaxis+of+lung+cancer+cells+in+a+multiple-electric-field+chip.">Electrotaxis of lung cancer cells in a multiple-electric-field chip.</a> Biosen Bioelectron. 24, 3510-3516 (2009).</li><li>SATO, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Input-output+relationship+in+galvanotactic+response+of+Dictyostelium+cells.">Input-output relationship in galvanotactic response of Dictyostelium cells.</a> Biosystems. 88, 261-272 (2007).</li><li>Meng, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PI3K+mediated+electrotaxis+of+embryonic+and+adult+neural+progenitor+cells+in+the+presence+of+growth+factors.">PI3K mediated electrotaxis of embryonic and adult neural progenitor cells in the presence of growth factors.</a> Exp. Neurol. 227, 210-217 (2011).</li><li>Zhao, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+lipids,+EGF+receptors,+and+intracellular+signals+colocalize+and+are+polarized+in+epithelial+cells+moving+directionally+in+a+physiological+electric+field.">Membrane lipids, EGF receptors, and intracellular signals colocalize and are polarized in epithelial cells moving directionally in a physiological electric field.</a> The FASEB Journal. , (2002).</li><li>Fang, K., Ionides, E., Oster, G., Nuccitelli, R., Isseroff, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidermal+growth+factor+receptor+relocalization+and+kinase+activity+are+necessary+for+directional+migration+of+keratinocytes+in+DC+electric+fields.">Epidermal growth factor receptor relocalization and kinase activity are necessary for directional migration of keratinocytes in DC electric fields.</a> J. Cell Sci. 112, 1967-1976 (1999).</li><li>McCaig, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlling+Cell+Behavior+Electrically:+Current+Views+and+Future+Potential.">Controlling Cell Behavior Electrically: Current Views and Future Potential.</a> Physiol. Rev. 85, 943-978 (2005).</li><li>Morshead, C. M., Benveniste, P., Iscove, N. N., vander Kooy, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hematopoietic+competence+is+a+rare+property+of+neural+stem+cells+that+may+depend+on+genetic+and+epigenetic+alterations.">Hematopoietic competence is a rare property of neural stem cells that may depend on genetic and epigenetic alterations.</a> Nat. Med. 8, 268-273 (2002).</li><li>Babona-Pilipos, R., Droujinine, I. A., Popovic, M. R., Morshead, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+Subependymal+Neural+Precursors,+but+Not+Differentiated+Cells,+Undergo+Rapid+Cathodal+Migration+in+the+Presence+of+Direct+Current+Electric+Fields.">Adult Subependymal Neural Precursors, but Not Differentiated Cells, Undergo Rapid Cathodal Migration in the Presence of Direct Current Electric Fields.</a> PLoS ONE. 6, e23808 (2011).</li><li>Deuschl, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Randomized+Trial+of+Deep-Brain+Stimulation+for+Parkinson's+Disease.">A Randomized Trial of Deep-Brain Stimulation for Parkinson's Disease.</a> N. Engl. J. Med. 355, 896-908 (2006).</li><li>Stone, S. S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulation+of+Entorhinal+Cortex+Promotes+Adult+Neurogenesis+and+Facilitates+Spatial+Memory.">Stimulation of Entorhinal Cortex Promotes Adult Neurogenesis and Facilitates Spatial Memory.</a> J. Neurosci. 31, 13469-13484 (2011).</li></ol>

Этот протокол был адаптирован из устоявшихся методов предыдущих исследованиях 7-9. Galvanotactic камеры могут быть построены с использованием различных методов, в том числе строительство отдельного стекла хорошо для удержания клетки посева, или с помощью CO 2 лазерной абляции для ?...

<table border="1"><tbody><tr><td height="44"> Название пункта </td><td> Компания </td><td> Номер в каталоге </td><td> Комментарии </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Нейронные изоляции клеток-предшественников </td></tr><tr><td> 2М NaCl </td><td> Сигма </td><td> S5886 </td><td> 11,688 г растворяют в 100 мл дН 2 O </td></tr><tr><td> 1M KCl </td><td> Сигма </td><td> P5405 </td><td> 7,456 г растворяют в 100 мл дН 2 O </td></tr><tr><td> 1M MgCl 2 </td><td> Сигма </td><td> M2393 </td><td> 20,33 г растворяют в 100 мл дН 2 O </td></tr><tr><td> 155 мм NaHCO 3 </td><td> Сигма </td><td> S5761 </td><td> 1,302 г растворяют в 100 мл дН 2 O </td></tr><tr><td> Глюкоза 0,5 м </td><td> Сигма </td><td> G6152 </td><td> 9,01 г растворяют в 100мл дН 2 O </td></tr><tr><td> 108 мм CaCl 2 </td><td> Сигма </td><td> C7902 </td><td> 1,59 г растворяют в 100 мл дН 2 O </td></tr><tr><td> Пенициллин-стрептомицин </td><td> Gibco </td><td> 15070 </td><td></td></tr><tr><td> Бычьего трипсина поджелудочной железы </td><td> Сигма </td><td> T1005 </td><td></td></tr><tr><td> Овцы яички гиалуронидаза </td><td> Сигма </td><td> H6254 </td><td></td></tr><tr><td> Кинуреновой кислоты </td><td> Сигма </td><td> K3375 </td><td></td></tr><tr><td> Овомукоида ингибитора трипсина </td><td> Worthington </td><td> LS003086 </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> Invitrogen </td><td> 12100046 </td><td></td></tr><tr><td> F12 </td><td> Invitrogen </td><td> 21700075 </td><td></td></tr><tr><td> 30% глюкозы </td><td> Сигма </td><td> G6152 </td><td></td></tr><tr><td> 7,5% NaHCO 3 </td><td> Сигма </td><td> S5761 </td><td></td></tr><tr><td> 1M HEPES </td><td> Сигма </td><td> H3375 </td><td> 23,83 г растворяют в 100 мл дН 2 O </td></tr><tr><td> L-глютамин </td><td> Gibco </td><td> 25030 </td><td></td></tr><tr><td> EGF </td><td> Invitrogen </td><td> PMG8041 </td><td> Развести в 1 мл смеси гормонов и аликвоту в 20 мкл единиц. </td></tr><tr><td> FGF </td><td> Invitrogen </td><td> PHG0226 </td><td> Развести в 0,5 мл смеси гормонов и аликвоту в 20 мкл единиц. </td></tr><tr><td> Гепарин </td><td> Сигма </td><td> H3149 </td><td></td></tr><tr><td> Apo-трансферрин </td><td> R &amp; D Systems </td><td> 3188-AT </td><td> 0,1 г растворяют в 4 мл дН 2 0 </td></tr><tr><td> Путресцин </td><td> Сигма </td><td> P7505 </td><td> Растворить 9,61 мг в Apo-трансферрин такLution </td></tr><tr><td> Инсулин </td><td> Сигма </td><td> I5500 </td><td> Растворите 25 мг в 0,5 мл 0,1 N HCl и добавляют к 3,5 мл дН 2 0 </td></tr><tr><td> Селен </td><td> Сигма </td><td> S9133 </td><td></td></tr><tr><td> Прогестерон </td><td> Сигма </td><td> P6149 </td><td></td></tr><tr><td> Стандартные инструменты Dissection </td><td> Средства изобразительных наук </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Препарирование микроскопом </td><td> Zeiss </td><td> Stemi 2000 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Гальванотаксис палаты подготовка </td></tr><tr><td> Площадь слайды стеклом </td><td> VWR </td><td> 16004 </td><td></td></tr><tr><td> 6N соляной кислоты </td><td> VWR </td><td> BDH3204-1 </td><td></td></tr><tr><td> Высокая смазки вакуумного </td><td> Dow Corning </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 60 мм чашки Петри </td><td> Fisher Scientific </td><td> 0875713A </td><td></td></tr><tr><td> Поли-L-лизин </td><td> Сигма </td><td> P4707 </td><td></td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> BD Biosciences </td><td> 354234 </td><td> Оттепель и аликвоты в 150 мкл единиц </td></tr><tr><td> FBS </td><td> Invitrogen </td><td> 10082139 </td><td> Только использовать, если вызывая NPC дифференциации, в противном случае использовать SFM + средствах массовой информации EFH культуры, как указано выше </td></tr><tr><td> Подсчет микроскопом </td><td> Олимп </td><td> CKX41 </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Живая клетка Time-Lapse изображений </td></tr><tr><td> Серебряный провод </td><td> Alfa Aesar </td><td> 11434 </td><td></td></tr><tr><td> UltraPure Агароза </td><td> Invitrogen </td><td> 15510-027 </td><td></td></tr><tr><td> Тепло Inactivated FBS </td><td> Сигма </td><td> 16140071 </td><td></td></tr><tr><td> ПВХ труб </td><td> Fisher Scientific </td><td> 80000006 </td><td> 3/32 &quot;ID х 5/32&quot; OD </td></tr><tr><td> Отбеливатель </td><td> Clorox </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 10 мл шприца </td><td> BD </td><td> 309604 </td><td></td></tr><tr><td> 18 иглы </td><td> BD </td><td> 305195 </td><td></td></tr><tr><td> Dremel сверло </td><td> Dremel </td><td> Модель 750 </td><td></td></tr><tr><td> Инвертированный микроскоп оснащен увлажненной, инкубационных камеры </td><td> Zeiss </td><td> Axiovert-200M </td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> Рецепты <table border="1"><tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объем </td></tr><tr><td> 2М NaCl </td><td> 6,2 мл </td></tr><tr><td>1M KCl </td><td> 0,5 мл </td></tr><tr><td> 1M MgCl 2 </td><td> 0,32 мл </td></tr><tr><td> 155 NaHCO 3 </td><td> 16,9 мл </td></tr><tr><td> Глюкоза 1M </td><td> 1 мл </td></tr><tr><td> 108 мм CaCl 2 </td><td> 0,09256 мл </td></tr><tr><td> Пенициллин-стрептомицин </td><td> 1 мл </td></tr><tr><td> Автоклавного воды </td><td> 74 мл </td></tr></tbody></table> Искусственные спинномозговой жидкости <table border="1"><tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объема или массы </td></tr><tr><td> Искусственные спинномозговой жидкости </td><td> 30 мл </td></tr><tr><td> Бычьего трипсина поджелудочной железы </td><td> 40 мг </td></tr><tr><td> Овцы яички гиалуронидаза </td><td> 22,8 мг </td></tr><tr><td> Кинуреновой кислоты </td><td> 5 мг </td></tr></tbody></table> &lt;сильная&gt; раствор трипсина <table border="1"><tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объема или массы </td></tr><tr><td> SFM </td><td> 15 мл </td></tr><tr><td> Овомукоида ингибитора трипсина </td><td> 10 мг </td></tr></tbody></table> Ингибитор трипсина решение <table border="1"><tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объем </td></tr><tr><td> Автоклавного воды </td><td> 37 мл </td></tr><tr><td> 10X DMEM/F12 </td><td> 10 мл </td></tr><tr><td> 30% глюкозы </td><td> 2 мл </td></tr><tr><td> 7,5% NaHCO 3 </td><td> 1,5 мл </td></tr><tr><td> 1M HEPES </td><td> 0,5 мл </td></tr><tr><td> Трансферрин, Путресцин решения </td><td> 4 мл </td></tr><tr><td> 25 мг раствора инсулина </td><td> 4 мл </td></tr><tr><td> Селен </td><td> 100-му, Л </td></tr><tr><td> Прогестерон </td><td> 100 мкл </td></tr></tbody></table> Гормон Mix (100 мл общем, хранить при -20 ° C) <table border="1"><tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объем </td></tr><tr><td> Автоклавного воды </td><td> 37,5 мл </td></tr><tr><td> 10X DMEM/F12 (3:1) </td><td> 5 мл </td></tr><tr><td> 30% глюкозы </td><td> 1 мл </td></tr><tr><td> 7,5% NaHCO 3 </td><td> 0,75 мл </td></tr><tr><td> 1M HEPES </td><td> 0,25 мл </td></tr><tr><td> Гормон смеси </td><td> 5 мл </td></tr><tr><td> L-глютамин </td><td> 0,5 мл </td></tr><tr><td> Пенициллин-стрептомицин </td><td> 0,5 мл </td></tr></tbody></table> Сыворотка Free Media EFH-SFM: добавьте 10 мкл EGF, 10 мкл FGF, и 3,66 мкл гепарина FBS-SFM: добавить 0,5 мл FBS <taBLE границы = &quot;1&quot;&gt; <tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объем </td></tr><tr><td> Matrigel </td><td> 150 мкл </td></tr><tr><td> SFM </td><td> 3,6 мл </td></tr></tbody></table> Matrigel Решение Matrigel аликвоты должны быть помещены в коробки льда и позволила таять медленно, в течение 4-5 часов с образованием вязкой жидкости перед смешиванием с УЛ. Это позволит обеспечить формирование ровным слоем Matrigel подложки. Если не оттаяла медленно, в результате подложка будет содержать сгустки Matrigel, возможно, препятствующие миграции клеток. <table border="1"><tbody><tr><td> Пункт </td><td> Объема или массы </td></tr><tr><td> UltraPure Агароза </td><td> 300 мг в 10 мл DDH 2 0 </td></tr><tr><td> SFM Инактивированной нагреванием FBS </td><td> 8 мл 2 мл </td></tr></tbody></table> MatrigelРешение Смешайте 8 мл SFM с 2 мл инактивированной нагреванием FBS в 15 мл трубки сокола. Mix агарозы с 10 мл DDH 2 0 в колбу, и тепло в микроволновой печи в течение 30 секунд в 10-сек интервалах, обеспечивая, чтобы удалить раствор из микроволновой печи после каждого 10-секундный интервал и тщательно перемешайте. После заключительного 10-секундный период микроволновой печи, перемешать раствор агарозы с SFM / FBS решения и хранят в 57 ° С водяной бане. </td></tr></tbody></table>

a galvanotaxis assay for analysis of neural precursor cell migration kinetics in an externally applied direct current electric field

Открытие нервных стволовых и клеток-предшественников (в совокупности называемые нейронные клетки-предшественники) (НПС) во взрослом мозге млекопитающих привело к телу исследований, направленных на использование мультипотентных и пролиферативных свойств этих клеток для развития neuroregenerative стратегии. Важным шагом для успеха такой стратегии является мобилизация NPCs к поражению сайта после экзогенной трансплантации или для усиления ответа эндогенных предшественников, которые находятся в перивентрикулярной области ЦНС. Соответственно, она имеет важное значение для понимания механизмов, которые способствуют, направлять и повышения NPC миграции. Наша работа сосредоточена на использовании постоянного тока электрических полей (dcEFs) оказывать содействие и прямое миграции НИП - явление, известное как гальванотаксиса. Эндогенные физиологической электрического поля действовал в качестве критических сигналов для миграции клеток во время нормального развития и заживления ран. Фармакологические нарушениятранс-нервной трубки потенциал в аксолотля эмбрионов вызывает тяжелые пороки развития 1. В контексте заживления ран, скорость ремонта ранения роговицы напрямую связана с величиной эпителиальных потенциал рану, которая возникает после травмы, как показано с помощью фармакологических повышение или нарушение этого dcEF 2-3. Мы показали, что взрослые subependymal NPCs пройти быструю и направлены катодная миграции в пробирке при воздействии извне dcEF. В этом протоколе описываются методы нашей лаборатории для создания простых и эффективных гальванотаксиса анализа высокого разрешения, долгосрочное наблюдение направлено перемещение тела клетки (миграции) на одном-клеточном уровне. Этот анализ был бы подходящим для исследования механизмов, которые регулируют dcEF трансдукции в клеточную подвижность за счет использования трансгенных мышах или, коротко интерферирующих РНК, или специфических агонистов рецептора / антагонистов.

Кинематический анализ показывает, что в присутствии 250 мВ / мм dcEF, недифференцированные НПС проявляют высокую направлена ​​и быстрая гальванотаксиса к катоду (рис. 5А, фильм 1). В отсутствие dcEF, случайные движения клеток наблюдается (рис. 5Б, фильм 2). При этом напряженнос...

Watch this Scientific Journal Video about A Galvanotaxis Assay for Analysis of Neural Precursor Cell Migration Kinetics in an Externally Applied Direct Current Electric Field at JoVE.com

A Galvanotaxis Assay for Analysis of Neural Precursor Cell Migration Kinetics in an Externally Applied Direct Current Electric Field

В этом протоколе мы покажем, как для создания пользовательских камер, что позволяет применять постоянный ток электрического поля для включения покадровой визуализации мозга взрослого человека, полученных нейронных перемещение клеток-предшественников во время гальванотаксиса.

Гальванотаксис пробирного анализа нейронных клеток-предшественников Кинетика миграции извне постоянного тока электрическое поле

The discovery of neural stem and progenitor  cells (collectively termed neural precursor cells) (NPCs) in the adult  mammalian brain has led to a body of ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neural-Colony Forming Cell Assay: An Assay To Discriminate Bona Fide Neural Stem Cells from Neural Progenitor Cells

Neural-колония Формирование анализа клеточной: Пробирной различать Добросовестный нервные стволовые клетки из нервных клеток-предшественников

The neurosphere assay (NSA) is one of the most frequently used methods to isolate, expand and also calculate the frequency of neural stem cells (NSCs). ...

Electrode Positioning and Montage in Transcranial Direct Current Stimulation

Позиционирование электродов и монтаж в Транскраниальная постоянного тока стимуляции

Transcranial direct current stimulation (tDCS) is a technique that has been intensively investigated in the past decade as this method offers a ...

Analysis of Trunk Neural Crest Cell Migration using a Modified Zigmond Chamber Assay

Анализ Магистральные нейронной клеточной миграции Crest с использованием модифицированного Zigmond пробирной палаты

Neural crest cells (NCCs) are a transient population of cells present in vertebrate development that emigrate from the dorsal neural tube (NT) after ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

Воспроизводимые мыши седалищного нерва и Давка Последующие оценки регенерации полного анализа горы мышц

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Analysis of Neural Crest Migration and Differentiation by Cross-species Transplantation

Анализ нейронной миграции Крест и дифференциация по межвидовой трансплантации

Avian embryos provide a unique platform for studying many vertebrate developmental processes, due to the easy access of the embryos within the egg. ...

The Neuroblast Assay: An Assay for the Generation and Enrichment of Neuronal Progenitor Cells from Differentiating Neural Stem Cell Progeny Using Flow Cytometry

Нейробластов Анализ: Анализ для создания и обогащения нейронов клетки-предшественники из Дифференцируя нейронных потомков стволовых клеток методом проточной цитометрии

Neural stem cells (NSCs) can be isolated and expanded in large-scale, using the neurosphere assay and differentiated into the three major cell types of ...

Isolation and Culture of Neural Crest Cells from Embryonic Murine Neural Tube

Выделение и культуры клеток нервного гребня из эмбриональных мышей нервной трубки

The embryonic neural crest (NC) is a multipotent progenitor population that originates at the dorsal aspect of the neural tube, undergoes an epithelial to ...

A Quantitative Cell Migration Assay for Murine Enteric Neural Progenitors

Количественный Анализ сотового мигрантах мышиных кишечных нейронных прародителей

Neural crest cells (NCC) are a transient and multipotent cell population that originates from the dorsal neural tube and migrates extensively throughout ...

Long-term Behavioral Tracking of Freely Swimming Weakly Electric Fish

Долгосрочный Поведенческая Отслеживание свободно плавающих слабо электрических рыб

Long-term behavioral tracking can capture and quantify natural animal behaviors, including those occurring infrequently. Behaviors such as exploration and ...

Remotely Supervised Transcranial Direct Current Stimulation: An Update on Safety and Tolerability

Удаленно контролируемых транскраниальной прямые текущие стимуляции: Обновленная информация о безопасности и переносимости

The remotely supervised tDCS (RS-tDCS) protocol enables participation from home through guided and monitored self-administration of tDCS treatment while ...