Name: heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression
Uploaded: 2012-08-28T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression at JoVE.com

تم إجراء هذا البحث في كلية كيك للطب في جامعة كاليفورنيا، الولايات المتحدة الأمريكية، وجامعة كوليدج في لندن، المملكة المتحدة. ويتم تمويل KL من المعهد الوطني للمنحة الصحة 5 U19 CA148112-02. وقد تم تمويل BG المشروع من خلال منحة من المؤسسة الخيرية الاستئناف عشية الأورام النسائية (UK). وبعض هذه الأعمال التي اضطلعت في UCLH / UCL تمويل جزئي من وزارة الصحة بحوث الطبية الحيوية NIHR نظام التمويل المركز.

يوضح الشكل (1) لمحة عامة عن سير العمل هو موضح أدناه. 1. عزل الخلايا الليفية المبيض عادي وتمديد فترة الحياة في المختبر بواسطة Overexpression من الوحدة الفرعية الحفاز للعميم الإنزيم hTERT <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-al...

<ol>
	<li>Jelovac, D., Armstrong, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+the+diagnosis+and+treatment+of+ovarian+cancer.">Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer.</a> CA Cancer J. Clin. , (2011).</li><li>Office for National Statistics. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cancer Statistics registrations: registrations of cancer diagnosed in 2008. , (2011).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Santos, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+type+and+substage+predict+survival+in+stage+I+and+II+ovarian+carcinoma:+insights+and+implications.">Tumor type and substage predict survival in stage I and II ovarian carcinoma: insights and implications.</a> Gynecol. Oncol. 116, 50-56 (2010).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Boyd, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+carcinoma+subtypes+are+different+diseases:+implications+for+biomarker+studies.">Ovarian carcinoma subtypes are different diseases: implications for biomarker studies.</a> PLoS Med. 5, e232 (2008).</li><li>Smith, L. H., Morris, C. R., Yasmeen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer:+can+we+make+the+clinical+diagnosis+earlier.">Ovarian cancer: can we make the clinical diagnosis earlier.</a> Cancer. 104, 1398-1407 (2005).</li><li>Aviv, A., Hunt, S. C., Lin, J., Cao, X., Kimura, M., Blackburn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impartial+comparative+analysis+of+measurement+of+leukocyte+telomere+length/DNA+content+by+Southern+blots+and+qPCR.">Impartial comparative analysis of measurement of leukocyte telomere length/DNA content by Southern blots and qPCR.</a> Nucleic Acids Res. 39, e134 (2011).</li><li>Kim, N. W., Wu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+quantification+and+characterization+of+telomerase+activity+by+the+telomeric+repeat+amplification+protocol+(TRAP.">Advances in quantification and characterization of telomerase activity by the telomeric repeat amplification protocol (TRAP.</a> Nucleic Acids Res. 25, 2595-2597 (1997).</li><li>Lawrenson, K., Grun, B., Benjamin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+fibroblasts+promote+neoplastic+transformation+of+partially+transformed+ovarian+epithelial+cells+in+a+three-dimensional+model+of+early+stage+ovarian+cancer.">Senescent fibroblasts promote neoplastic transformation of partially transformed ovarian epithelial cells in a three-dimensional model of early stage ovarian cancer.</a> Neoplasia. 12, 317-325 (2010).</li><li>Lawrenson, K., Benjamin, E., Turmaine, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+three-dimensional+modelling+of+human+ovarian+surface+epithelial+cells.">In vitro three-dimensional modelling of human ovarian surface epithelial cells.</a> Cell Prolif. 42, 385-393 (2009).</li><li>Lawrenson, K., Sproul, D., Grun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+genetic+and+clinical+heterogeneity+in+epithelial+ovarian+cancers.">Modelling genetic and clinical heterogeneity in epithelial ovarian cancers.</a> Carcinogenesis. 32, 1540-1549 (2011).</li><li>Grun, B., Benjamin, E., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+in+vitro+cell+biology+models+of+ovarian+and+endometrial+cancer.">Three-dimensional in vitro cell biology models of ovarian and endometrial cancer.</a> Cell Prolif. 42, 219-228 (2009).</li><li>Zietarska, M., Maugard, C. M., Filali-Mouhim, A., Alam-Fahmy, M., Tonin, P. N., Provencher, D. M., Mes-Masson, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+description+of+a+3D+in+vitro+model+for+the+study+of+epithelial+ovarian+cancer+(EOC.">Molecular description of a 3D in vitro model for the study of epithelial ovarian cancer (EOC.</a> Mol. Carcinog. 46, 872-885 (2007).</li><li>Shield, K., Ackland, M. L., Ahmed, N., Rice, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+spheroids+in+ovarian+cancer+metastases:+Biology+and+pathology.">Multicellular spheroids in ovarian cancer metastases: Biology and pathology.</a> Gynecol Oncol. 113, 143-148 (2009).</li><li>Dafou, D., Grun, B., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcell-mediated+chromosome+transfer+identifies+EPB41L3+as+a+functional+suppressor+of+epithelial+ovarian+cancers.">Microcell-mediated chromosome transfer identifies EPB41L3 as a functional suppressor of epithelial ovarian cancers.</a> Neoplasia. 12, 579-589 (2010).</li><li>Levanon, K., Crum, C., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+pathogenesis+of+serous+ovarian+cancer+and+its+clinical+impact.">New insights into the pathogenesis of serous ovarian cancer and its clinical impact.</a> J. Clin. Oncol. 26, 5284-5293 (2008).</li><li>Kurman, R. J., Shih, I. e. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+and+extraovarian+origin+of+epithelial+ovarian+cancer--shifting+the+paradigm.">Molecular pathogenesis and extraovarian origin of epithelial ovarian cancer--shifting the paradigm.</a> Hum. Pathol. 42, 918-931 (2011).</li></ol>

ما زال يجهل الكثير عن بيولوجيا في مرحلة مبكرة سرطان المبيض الظهاري (EOC). ربما كان واحدا من العقبات الرئيسية في هذا المجال لسنوات عديدة وعدم فهم أصول الأنسجة محددة لهذا المرض، وأهمية دور المكروية في التنمية EOC. على مدى السنوات القليلة الماضية، وأصبح من الواضح أن EOC هو مر...

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> كاشف </td><td> مزود </td><td> كتالوج رقم </td></tr><tr><td> PolyHEMA، ومناسبة لزراعة الخلايا </td><td> سيغما الدريتش </td><td> P3932 </td></tr><tr><td> الجزيئية علم الأحياء الصف الايثانول </td><td> سيغما الدريتش </td><td> E7023 </td></tr><tr><td> العقيمة المياه لزراعة الخلايا </td><td> VWR </td><td> 12001-356 </td></tr><tr><td> MCDB105 </td><td> سيغما الدريتش </td><td> M6395 </td></tr><tr><td> متوسطة 199 </td><td> سيغما الدريتش </td><td> M2154 </td></tr><tr><td> Hyclone مصل بقري جنيني </td><td> الحرارية العلمية </td><td> SH30088.03 </td></tr><tr> &lt;TD&gt; جنتاميسين </td><td> سيغما الدريتش </td><td> G1397 </td></tr><tr><td> الأمفوتريسين B </td><td> سيغما الدريتش </td><td> A2942 </td></tr><tr><td> pBABE-الرطوبة-hTERT </td><td> Addgene </td><td> 1773 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> VWR </td><td> 12001-766 </td></tr><tr><td> 0.25٪ التربسين EDTA- </td><td> إينفيتروجن </td><td> 25200-072 </td></tr><tr><td> الخلية مصفاة (40 أو 70 ميكرون) </td><td> VWR </td><td> 21008-949 21008-952 </td></tr><tr><td> الأجسام المضادة الخلايا الليفية المضادة للبروتين السطح، استنساخ 1B10 </td><td> سيجما </td><td> F4771 </td></tr><tr><td> المضادة للعموم cytokeratin الأجسام المضادة (C11) </td><td> سانتا كروز </td><td> SC-8018 </td></tr><tr><td> Polybrene (hexadimethrine الميثيل) </td><td> سيجما </td><td> 107689 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG تيلوميراز PCR ELISA PLUS </td><td> روش </td><td> 12013789001 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG التيلومير الفحص طول </td><td> روش </td><td> 12209136001 </td></tr></tbody></table> يشار الجدول 1. الكواشف والمعدات لفي هذه الدراسة.

heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression

سرطان المبيض الظهاري (EOCs) هي السبب الرئيسي للوفاة من أمراض النساء الأورام الخبيثة في المجتمعات الغربية. على الرغم من التقدم في العلاجات الجراحية وتحسين الكيميائي البلاتيني، كان هناك تحسن طفيف في معدلات البقاء على قيد الحياة لEOC 1،2 أكثر من أربعة عقود. في حين المرحلة الأولى الأورام لديها معدلات البقاء لمدة 5 سنوات&gt; 85٪، ومعدلات البقاء على قيد الحياة لمرحلة III / IV المرض هي &lt;40٪. وبالتالي، يمكن أن ارتفاع معدلات وفيات EOC انخفضت بشكل ملحوظ إذا تم الكشف عن الأورام في وقت سابق، مراحل، أكثر قابلية للعلاج 3-5. في الوقت الحاضر، ما زال يجهل الأساس الجزيئي الوراثية والبيولوجية في وقت مبكر من مرحلة تطور المرض. وبشكل أكثر تحديدا، لا يعرف إلا القليل عن دور المكروية خلال بدء الورم، ولكن عوامل الخطر المعروفة لEOCs (مثل العمر والتكافؤ) تشير إلى أن المكروية يلعب دورا رئيسيا في نشأة الأولى من EOCs. لذلك قمنا بتطوير نماذج ثلاثية الأبعاد غيرويمن المبيض كل من الطبيعي في وقت مبكر وسرطان المبيض المرحلة. لالمبيض الطبيعي، شاركنا في سطح المبيض الطبيعي مثقف الظهارية (IOSE) والخلايا الليفية اللحمية العادي (INOF) الخلايا، الذي خلده تنبيغ retrovrial من الوحيدات الحفاز لعميم الإنزيم تيلوميراز الإنسان (hTERT) لتمديد عمر هذه الخلايا في الثقافة. في تصميم نموذج المراحل الأولى من التحول المبيض الخلايا الظهارية، overexpression من الجين الورمي CMYC في الخلايا IOSE، ومرة أخرى شارك في تربيتها مع خلايا INOF. واستخدمت هذه النماذج غيروي للتحقيق في آثار الشيخوخة والشيخوخة على التحول وغزو الخلايا الظهارية. نحن هنا وصف الخطوات المنهجية في تطوير هذه نموذج ثلاثي الأبعاد، وهذه المنهجيات ليست محددة لتنمية المبيض الطبيعي والأنسجة سرطان المبيض، ويمكن استخدامها لدراسة أنواع الأنسجة الأخرى حيث التفاعلات الخلية اللحمية والظهارية هي الأساسية جانب من جوانب صيانة الأنسجة وديsease التنمية.

Watch this Scientific Journal Video about Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression at JoVE.com

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

وصفنا لإنشاء منهجيات<em&gt; في المختبر</em&gt; غيروي نماذج ثلاثية الأبعاد تتألف من الخلايا الليفية المبيض والمبيض الطبيعي سطح خلايا سرطان المبيض أو الظهارية. نناقش استخدام هذه النماذج لدراسة التفاعلات اللحمية-الظهارية التي تحدث أثناء تطور سرطان المبيض.

غيروي ثلاثي الأبعاد<em&gt; في المختبر</em&gt; نمذجة التفاعلات اللحمية-طلائي سرطان المبيض خلال بدء والتقدم

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression

نماذج مامي لتصوير الخلايا الحية 4D من ورم: التفاعلات المكروية أن التقدم تأثير الخبيثة

We have developed 3D coculture models, which we term MAME (mammary architecture and microenvironment engineering), and used them for live-cell imaging in ...

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

في الفحص المختبري التخليص الظهارية النماذج أن الخطوات في وقت مبكر من الإنبثاث سرطان المبيض

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

نموذج مثلي إضاءة الحيوية من سرطان البنكرياس التقدم

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

A Three-dimensional Tissue Culture Model to Study Primary Human Bone Marrow and its Malignancies

ثقافة الأنسجة نموذج ثلاثي الأبعاد لدراسة الابتدائية نخاع العظم الإنسان والأورام الخبيثة في

Tissue culture has been an invaluable tool to study many aspects of cell function, from normal development to disease. Conventional cell culture methods ...

Three Dimensional Cultures: A Tool To Study Normal Acinar Architecture vs. Malignant Transformation Of Breast Cells

ثلاثة الثقافات الأبعاد: أداة لدراسة الهندسة المعمارية عادي عنيبية مقابل التحول السرطاني للخلايا الثدي

Invasive breast carcinomas are a group of malignant epithelial tumors characterized by the invasion of adjacent tissues and propensity to metastasize. The ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

الكمي لسرطان الثدي الغزو خلية باستخدام ثلاثي الأبعاد (3D) نموذج

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

In vitro Enrichment of Ovarian Cancer Tumor-initiating Cells

In vitro Enrichment of Ovarian Cancer Tumor-initiating Cells

في التخصيب في المختبر من خلايا سرطان المبيض-الشروع ورم

Evidence suggests that small subpopulations of tumor cells maintain a unique self-renewing and differentiation capacity and may be responsible for tumor ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

ثلاثي الأبعاد (3D) ورم الجسم الشبه الكروي الغزو الفحص

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Modeling the Early Steps of Ovarian Cancer Dissemination in an Organotypic Culture of the Human Peritoneal Cavity

نمذجة خطوات المبكر عن سرطان المبيض نشر في الثقافة عضوي النمط من البريتوني تجويف الإنسان

The pattern of ovarian cancer metastasis is markedly different from that of most other epithelial tumors, because it rarely spreads hematogenously. ...

Modeling Chemotherapy Resistant Leukemia In Vitro

Modeling Chemotherapy Resistant Leukemia In Vitro

النمذجة العلاج الكيميائي اللوكيميا المقاومة<em&gt; في المختبر</em

It is well established that the bone marrow microenvironment provides a unique site of sanctuary for hematopoietic diseases that both initiate and ...