Name: heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression
Uploaded: 2012-08-28T13:00:00
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इस शोध चिकित्सा के उबकना स्कूल, कैलिफोर्निया, संयुक्त राज्य अमेरिका के विश्वविद्यालय, और यूनिवर्सिटी कॉलेज लंदन, ब्रिटेन में प्रदर्शन किया था. के.एल. स्वास्थ्य अनुदान 5 CA148112 U19-02 के राष्ट्रीय संस्थान द्वारा वित्त पोषित है. बीजी ईव अपील स्त्रीरोगों ऑन्कोलॉजी दान (यूके) से एक परियोजना अनुदान द्वारा वित्त पोषित किया गया था. इस UCLH / UCL पर किए गए काम से कुछ आंशिक रूप से स्वास्थ्य NIHR बायोमेडिकल रिसर्च सेंटर धन योजना विभाग से धन था.

चित्रा 1 नीचे वर्णित कार्यप्रवाह की एक सिंहावलोकन दिखाता है. 1. सामान्य डिम्बग्रंथि Fibroblasts और इन विट्रो उम्र में विस्तार की hTERT Holoenzyme कैटालिटिक सबयूनिट की Overexpression द्वारा अलगाव <ol><li> ?...

<ol>
	<li>Jelovac, D., Armstrong, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+the+diagnosis+and+treatment+of+ovarian+cancer.">Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer.</a> CA Cancer J. Clin. , (2011).</li><li>Office for National Statistics. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cancer Statistics registrations: registrations of cancer diagnosed in 2008. , (2011).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Santos, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+type+and+substage+predict+survival+in+stage+I+and+II+ovarian+carcinoma:+insights+and+implications.">Tumor type and substage predict survival in stage I and II ovarian carcinoma: insights and implications.</a> Gynecol. Oncol. 116, 50-56 (2010).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Boyd, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+carcinoma+subtypes+are+different+diseases:+implications+for+biomarker+studies.">Ovarian carcinoma subtypes are different diseases: implications for biomarker studies.</a> PLoS Med. 5, e232 (2008).</li><li>Smith, L. H., Morris, C. R., Yasmeen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer:+can+we+make+the+clinical+diagnosis+earlier.">Ovarian cancer: can we make the clinical diagnosis earlier.</a> Cancer. 104, 1398-1407 (2005).</li><li>Aviv, A., Hunt, S. C., Lin, J., Cao, X., Kimura, M., Blackburn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impartial+comparative+analysis+of+measurement+of+leukocyte+telomere+length/DNA+content+by+Southern+blots+and+qPCR.">Impartial comparative analysis of measurement of leukocyte telomere length/DNA content by Southern blots and qPCR.</a> Nucleic Acids Res. 39, e134 (2011).</li><li>Kim, N. W., Wu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+quantification+and+characterization+of+telomerase+activity+by+the+telomeric+repeat+amplification+protocol+(TRAP.">Advances in quantification and characterization of telomerase activity by the telomeric repeat amplification protocol (TRAP.</a> Nucleic Acids Res. 25, 2595-2597 (1997).</li><li>Lawrenson, K., Grun, B., Benjamin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+fibroblasts+promote+neoplastic+transformation+of+partially+transformed+ovarian+epithelial+cells+in+a+three-dimensional+model+of+early+stage+ovarian+cancer.">Senescent fibroblasts promote neoplastic transformation of partially transformed ovarian epithelial cells in a three-dimensional model of early stage ovarian cancer.</a> Neoplasia. 12, 317-325 (2010).</li><li>Lawrenson, K., Benjamin, E., Turmaine, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+three-dimensional+modelling+of+human+ovarian+surface+epithelial+cells.">In vitro three-dimensional modelling of human ovarian surface epithelial cells.</a> Cell Prolif. 42, 385-393 (2009).</li><li>Lawrenson, K., Sproul, D., Grun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+genetic+and+clinical+heterogeneity+in+epithelial+ovarian+cancers.">Modelling genetic and clinical heterogeneity in epithelial ovarian cancers.</a> Carcinogenesis. 32, 1540-1549 (2011).</li><li>Grun, B., Benjamin, E., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+in+vitro+cell+biology+models+of+ovarian+and+endometrial+cancer.">Three-dimensional in vitro cell biology models of ovarian and endometrial cancer.</a> Cell Prolif. 42, 219-228 (2009).</li><li>Zietarska, M., Maugard, C. M., Filali-Mouhim, A., Alam-Fahmy, M., Tonin, P. N., Provencher, D. M., Mes-Masson, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+description+of+a+3D+in+vitro+model+for+the+study+of+epithelial+ovarian+cancer+(EOC.">Molecular description of a 3D in vitro model for the study of epithelial ovarian cancer (EOC.</a> Mol. Carcinog. 46, 872-885 (2007).</li><li>Shield, K., Ackland, M. L., Ahmed, N., Rice, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+spheroids+in+ovarian+cancer+metastases:+Biology+and+pathology.">Multicellular spheroids in ovarian cancer metastases: Biology and pathology.</a> Gynecol Oncol. 113, 143-148 (2009).</li><li>Dafou, D., Grun, B., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcell-mediated+chromosome+transfer+identifies+EPB41L3+as+a+functional+suppressor+of+epithelial+ovarian+cancers.">Microcell-mediated chromosome transfer identifies EPB41L3 as a functional suppressor of epithelial ovarian cancers.</a> Neoplasia. 12, 579-589 (2010).</li><li>Levanon, K., Crum, C., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+pathogenesis+of+serous+ovarian+cancer+and+its+clinical+impact.">New insights into the pathogenesis of serous ovarian cancer and its clinical impact.</a> J. Clin. Oncol. 26, 5284-5293 (2008).</li><li>Kurman, R. J., Shih, I. e. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+and+extraovarian+origin+of+epithelial+ovarian+cancer--shifting+the+paradigm.">Molecular pathogenesis and extraovarian origin of epithelial ovarian cancer--shifting the paradigm.</a> Hum. Pathol. 42, 918-931 (2011).</li></ol>

प्रारंभिक अवस्था उपकला डिम्बग्रंथि के कैंसर (EOC) के जीव विज्ञान खराब समझा जाता है. शायद कई वर्षों के लिए इस क्षेत्र में मुख्य बाधाओं में से एक रोग के ऊतक विशिष्ट मूल और EOC विकास में microenvironment की भूमिका के महत्?...

<table border="1"><tbody><tr><td> अभिकर्मक </td><td> प्रदायक </td><td> सूचीपत्र संख्या </td></tr><tr><td> PolyHEMA, सेल संस्कृति के लिए उपयुक्त </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> P3932 </td></tr><tr><td> आण्विक जीव विज्ञान ग्रेड इथेनॉल </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> E7023 </td></tr><tr><td> सेल संस्कृति के लिए बाँझ पानी </td><td> VWR </td><td> 12001-356 </td></tr><tr><td> MCDB105 </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> M6395 </td></tr><tr><td> 199 मध्यम </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> M2154 </td></tr><tr><td> Hyclone भ्रूण गोजातीय सीरम </td><td> थर्मो वैज्ञानिक </td><td> SH30088.03 </td></tr><tr> &lt;td&gt; Gentamicin </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> G1397 </td></tr><tr><td> Amphotericin बी </td><td> सिग्मा Aldrich </td><td> A2942 </td></tr><tr><td> pBABE hygro-hTERT </td><td> Addgene </td><td> 1773 </td></tr><tr><td> पीबीएस </td><td> VWR </td><td> 12001-766 </td></tr><tr><td> 0.25% trypsin - EDTA </td><td> Invitrogen </td><td> 25200-072 </td></tr><tr><td> सेल झरनी (40 या 70 सुक्ष्ममापी) </td><td> VWR </td><td> 21008-949 21008-952 </td></tr><tr><td> विरोधी fibroblast सतह प्रोटीन एंटीबॉडी, क्लोन 1B10 </td><td> सिग्मा </td><td> F4771 </td></tr><tr><td> विरोधी अखिल cytokeratin प्रतिरक्षी (C11) </td><td> सांता क्रुज़ </td><td> सुप्रीम कोर्ट-8018 </td></tr><tr><td> Polybrene (hexadimethrine ब्रोमाइड) </td><td> सिग्मा </td><td> 107689 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG टेलोमिरेज पीसीआर एलिसा PLUS </td><td> Roche </td><td> 12013789001 </td></tr><tr><td> Telomere लंबाई परख TeloTAGGG </td><td> Roche </td><td> 12209136001 </td></tr></tbody></table> तालिका 1. अभिकर्मकों और उपकरण इस अध्ययन में करने के लिए भेजा.

heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression

उपकला डिम्बग्रंथि के कैंसर (EOCs) पश्चिमी समाजों में स्त्रीरोगों दुष्टता से मौत का प्रमुख कारण हैं. शल्य चिकित्सा उपचार और बेहतर प्लेटिनम आधारित chemotherapies में प्रगति के बावजूद, वहाँ EOC जीवित रहने की दरों में थोड़ा सुधार चार से अधिक दशकों 1,2 के लिए किया गया है. मंच Whilst मैं ट्यूमर 5 वर्ष जीवित रहने की दर है&gt; 85%, चरण III / चतुर्थ रोग के लिए जीवित रहने की दर 40% है. इस प्रकार, EOC के लिए मृत्यु की उच्च दर काफी अगर ट्यूमर पहले, अधिक treatable, 3-5 चरणों में पाया गया की कमी हुई सकता है. वर्तमान में, प्रारंभिक चरण रोग के विकास के आणविक आनुवंशिक और जैविक आधार खराब समझा जाता है. विशेष रूप से, छोटे ट्यूमर दीक्षा के दौरान microenvironment की भूमिका के बारे में जाना जाता है, लेकिन EOCs (जैसे उम्र और समता) के लिए जोखिम कारकों ज्ञात सुझाव है कि microenvironment EOCs के प्रारंभिक उत्पत्ति में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है. इसलिए हम तीन आयामी heterotypic मॉडल विकसितदोनों सामान्य और प्रारंभिक चरण डिम्बग्रंथि के कैंसर के अंडाशय के. अंडाशय के लिए सामान्य, हम सह सुसंस्कृत सामान्य डिम्बग्रंथि सतह उपकला (IOSE) और सामान्य stromal (INOF) fibroblast कोशिकाओं, मानव टेलोमिरेज (hTERT) holoenzyme संस्कृति में इन कोशिकाओं की उम्र बढ़ाने के उत्प्रेरक सबयूनिट के retrovrial पारगमन द्वारा अमर. डिम्बग्रंथि उपकला कोशिका परिवर्तन, IOSE कोशिकाओं में CMYC ओंकोजीन की overexpression फिर, INOF कोशिकाओं के साथ सह सुसंस्कृत के प्रारंभिक चरणों मॉडल. इन heterotypic मॉडल परिवर्तन और उपकला कोशिकाओं के आक्रमण पर उम्र बढ़ने और senescence के प्रभाव की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया. यहाँ हम इन तीन आयामी मॉडल के विकास में methodological कदम का वर्णन है, इन तरीकों सामान्य अंडाशय और डिम्बग्रंथि के कैंसर के ऊतकों के विकास के लिए विशिष्ट नहीं हैं, और अन्य प्रकार के ऊतक का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है जहां stromal और उपकला सेल बातचीत एक मौलिक हैं ऊतक रखरखाव और di पहलूsease विकास.

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Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

हम स्थापित करने के लिए तरीके का वर्णन<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; Heterotypic तीन आयामी डिम्बग्रंथि fibroblasts और सामान्य डिम्बग्रंथि सतह या डिम्बग्रंथि के कैंसर उपकला कोशिकाओं शामिल मॉडल. हम इन मॉडलों का उपयोग करने के stromal उपकला बातचीत है कि डिम्बग्रंथि के कैंसर के विकास के दौरान होने का अध्ययन करने पर चर्चा की.

तीन आयामी heterotypic<em&gt; इन विट्रो में</em&gt; Stromal उपकला सहभागिता के डिम्बग्रंथि कैंसर दीक्षा और प्रगति के दौरान मॉडलिंग

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

MAME Models for 4D Live-cell Imaging of Tumor: Microenvironment Interactions that Impact Malignant Progression

MAME 4D ट्यूमर लाइव सेल इमेजिंग के लिए मॉडल: Microenvironment सहभागिता कि प्रभाव घातक प्रगति

We have developed 3D coculture models, which we term MAME (mammary architecture and microenvironment engineering), and used them for live-cell imaging in ...

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

इन विट्रो mesothelial क्लीयरेंस परख कि डिम्बग्रंथि के कैंसर मेटास्टेसिस के प्रारंभिक चरण मॉडल

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

अग्नाशय के कैंसर प्रगति की bioluminescent Orthotopic के लिए मॉडल

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

A Three-dimensional Tissue Culture Model to Study Primary Human Bone Marrow and its Malignancies

प्राथमिक मानव अस्थि मज्जा और उसके Malignancies अध्ययन के लिए एक तीन आयामी ऊतक संस्कृति मॉडल

Tissue culture has been an invaluable tool to study many aspects of cell function, from normal development to disease. Conventional cell culture methods ...

Three Dimensional Cultures: A Tool To Study Normal Acinar Architecture vs. Malignant Transformation Of Breast Cells

तीन आयामी संस्कृति: स्तन कोशिकाओं की घातक परिवर्तन बनाम सामान्य कोष्ठकी संरचना का अध्ययन करने के लिए एक उपकरण

Invasive breast carcinomas are a group of malignant epithelial tumors characterized by the invasion of adjacent tissues and propensity to metastasize. The ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

एक तीन आयामी (3 डी) मॉडल का उपयोग कर स्तन कैंसर कोशिका invasiveness की मात्रा

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

In vitro Enrichment of Ovarian Cancer Tumor-initiating Cells

In vitro Enrichment of Ovarian Cancer Tumor-initiating Cells

डिम्बग्रंथि के कैंसर के ट्यूमर शुरुआत कोशिकाओं की इन विट्रो संवर्धन में

Evidence suggests that small subpopulations of tumor cells maintain a unique self-renewing and differentiation capacity and may be responsible for tumor ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

तीन आयामी (3 डी) ट्यूमर उपगोल आक्रमण परख

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Modeling the Early Steps of Ovarian Cancer Dissemination in an Organotypic Culture of the Human Peritoneal Cavity

मानव peritoneal गुहा की एक Organotypic संस्कृति में डिम्बग्रंथि के कैंसर के प्रसार के प्रारंभिक चरणों मॉडलिंग

The pattern of ovarian cancer metastasis is markedly different from that of most other epithelial tumors, because it rarely spreads hematogenously. ...

Modeling Chemotherapy Resistant Leukemia In Vitro

Modeling Chemotherapy Resistant Leukemia In Vitro

मॉडलिंग कीमोथेरेपी प्रतिरोधी लेकिमिया<em&gt; इन विट्रो</em

It is well established that the bone marrow microenvironment provides a unique site of sanctuary for hematopoietic diseases that both initiate and ...