Name: heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression
Uploaded: 2012-08-28T13:00:00
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この研究は、医学のケック学校、米国カリフォルニア大学、ロンドン大学、英国で行われました。 KLは健康助成5 U19 CA148112-02の国立研究所によって資金を供給される。 BGはイヴアピール婦人科腫瘍学のチャリティー（英国）からのプロジェクトの助成金によって賄われていた。 UCLH / UCLで引き受け、この作品の一部は、部分的に健康のNIHR生物医学研究センターの資金調達スキームの部門から資金提供された。

図1は、後述のワークフローの概要を示している。 1。正常な卵巣線維芽細胞および hTERTホロ酵素の触媒サブユニットの過剰発現による in vitro での寿命の延長の単離<ol><li>卵巣組織は知識のある患者の同意及び治験審査委員会（米国機関向け）の承認を得て収集することができる。正常な卵巣組織を両側卵管卵巣摘除術と腹式子宮...

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	<li>Jelovac, D., Armstrong, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+the+diagnosis+and+treatment+of+ovarian+cancer.">Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer.</a> CA Cancer J. Clin. , (2011).</li><li>Office for National Statistics. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cancer Statistics registrations: registrations of cancer diagnosed in 2008. , (2011).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Santos, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+type+and+substage+predict+survival+in+stage+I+and+II+ovarian+carcinoma:+insights+and+implications.">Tumor type and substage predict survival in stage I and II ovarian carcinoma: insights and implications.</a> Gynecol. Oncol. 116, 50-56 (2010).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Boyd, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+carcinoma+subtypes+are+different+diseases:+implications+for+biomarker+studies.">Ovarian carcinoma subtypes are different diseases: implications for biomarker studies.</a> PLoS Med. 5, e232 (2008).</li><li>Smith, L. H., Morris, C. R., Yasmeen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer:+can+we+make+the+clinical+diagnosis+earlier.">Ovarian cancer: can we make the clinical diagnosis earlier.</a> Cancer. 104, 1398-1407 (2005).</li><li>Aviv, A., Hunt, S. C., Lin, J., Cao, X., Kimura, M., Blackburn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impartial+comparative+analysis+of+measurement+of+leukocyte+telomere+length/DNA+content+by+Southern+blots+and+qPCR.">Impartial comparative analysis of measurement of leukocyte telomere length/DNA content by Southern blots and qPCR.</a> Nucleic Acids Res. 39, e134 (2011).</li><li>Kim, N. W., Wu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+quantification+and+characterization+of+telomerase+activity+by+the+telomeric+repeat+amplification+protocol+(TRAP.">Advances in quantification and characterization of telomerase activity by the telomeric repeat amplification protocol (TRAP.</a> Nucleic Acids Res. 25, 2595-2597 (1997).</li><li>Lawrenson, K., Grun, B., Benjamin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+fibroblasts+promote+neoplastic+transformation+of+partially+transformed+ovarian+epithelial+cells+in+a+three-dimensional+model+of+early+stage+ovarian+cancer.">Senescent fibroblasts promote neoplastic transformation of partially transformed ovarian epithelial cells in a three-dimensional model of early stage ovarian cancer.</a> Neoplasia. 12, 317-325 (2010).</li><li>Lawrenson, K., Benjamin, E., Turmaine, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+three-dimensional+modelling+of+human+ovarian+surface+epithelial+cells.">In vitro three-dimensional modelling of human ovarian surface epithelial cells.</a> Cell Prolif. 42, 385-393 (2009).</li><li>Lawrenson, K., Sproul, D., Grun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+genetic+and+clinical+heterogeneity+in+epithelial+ovarian+cancers.">Modelling genetic and clinical heterogeneity in epithelial ovarian cancers.</a> Carcinogenesis. 32, 1540-1549 (2011).</li><li>Grun, B., Benjamin, E., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+in+vitro+cell+biology+models+of+ovarian+and+endometrial+cancer.">Three-dimensional in vitro cell biology models of ovarian and endometrial cancer.</a> Cell Prolif. 42, 219-228 (2009).</li><li>Zietarska, M., Maugard, C. M., Filali-Mouhim, A., Alam-Fahmy, M., Tonin, P. N., Provencher, D. M., Mes-Masson, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+description+of+a+3D+in+vitro+model+for+the+study+of+epithelial+ovarian+cancer+(EOC.">Molecular description of a 3D in vitro model for the study of epithelial ovarian cancer (EOC.</a> Mol. Carcinog. 46, 872-885 (2007).</li><li>Shield, K., Ackland, M. L., Ahmed, N., Rice, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+spheroids+in+ovarian+cancer+metastases:+Biology+and+pathology.">Multicellular spheroids in ovarian cancer metastases: Biology and pathology.</a> Gynecol Oncol. 113, 143-148 (2009).</li><li>Dafou, D., Grun, B., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcell-mediated+chromosome+transfer+identifies+EPB41L3+as+a+functional+suppressor+of+epithelial+ovarian+cancers.">Microcell-mediated chromosome transfer identifies EPB41L3 as a functional suppressor of epithelial ovarian cancers.</a> Neoplasia. 12, 579-589 (2010).</li><li>Levanon, K., Crum, C., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+pathogenesis+of+serous+ovarian+cancer+and+its+clinical+impact.">New insights into the pathogenesis of serous ovarian cancer and its clinical impact.</a> J. Clin. Oncol. 26, 5284-5293 (2008).</li><li>Kurman, R. J., Shih, I. e. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+and+extraovarian+origin+of+epithelial+ovarian+cancer--shifting+the+paradigm.">Molecular pathogenesis and extraovarian origin of epithelial ovarian cancer--shifting the paradigm.</a> Hum. Pathol. 42, 918-931 (2011).</li></ol>

早期上皮性卵巣癌の生物学（EOC）は、あまり理解されていない。おそらく、長年にわたってこの分野の主要な障害の1つは、組織特異的疾患の起源とEOC開発における微小環境の役割の重要性の理解の欠如であった。過去数年間、EOCがおそらく異なるサブタイプの異なる細胞起源を持つ複数の異なるhistophathologicalサブタイプを持つ異質な疾患であることが明らかになってきています。たとえば、...

<table border="1"><tbody><tr><td> 試薬 </td><td> サプライヤー </td><td> カタログ番号 </td></tr><tr><td>細胞培養に適したポリHEMA、 </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> P3932 </td></tr><tr><td>分子生物学グレードのエタノール</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> E7023 </td></tr><tr><td>細胞培養用の滅菌水</td><td> VWR </td><td> 12001-356 </td></tr><tr><td> MCDB105 </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> M6395 </td></tr><tr><td>培地199 </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> M2154 </td></tr><tr><td>ハイクローンウシ胎児血清</td><td>サーモサイエンティフィック</td><td> SH30088.03 </td></tr><tr> &lt;TD&gt;ゲンタマイシン</td><td>シグマアルドリッチ</td><td> G1397 </td></tr><tr><td>アムホテリシンB </td><td>シグマアルドリッチ</td><td> A2942 </td></tr><tr><td> pBABE-湿気のhTERTの</td><td> Addgene </td><td> 1773 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> VWR </td><td> 12001-766 </td></tr><tr><td> 0.25％トリプシン-EDTA </td><td>インビトロジェン</td><td> 25200-072 </td></tr><tr><td>セルストレーナー（40または70μm）を</td><td> VWR </td><td> 21008-949 21008-952 </td></tr><tr><td>抗線維芽細胞表面タンパク質抗体、クローン1B10 </td><td>シグマ</td><td> F4771 </td></tr><tr><td>抗パンサイトケラチン抗体（C11） </td><td>サンタクルス</td><td> SC-8018 </td></tr><tr><td>ポリブレン（ヘキサジメトリンブロマイド） </td><td>シグマ</td><td> 107689 </td></tr><tr><td> TeloTAGGGテロメラーゼPCR ELISA PLUS </td><td>ロッシュ</td><td> 12013789001 </td></tr><tr><td>テロメア長AssayをTeloTAGGG </td><td>ロッシュ</td><td> 12209136001 </td></tr></tbody></table> 表1試薬および器具は、この研究に言及。

heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression

上皮性卵巣癌（EOCs）は、西洋社会における婦人科悪性腫瘍による死亡の主要な原因となっています。外科的治療と改善プラチナベースの化学療法の進歩にもかかわらず、40年以上1,2のEOC生存率にほとんど改善がみられた。私の腫瘍は5年生存率&gt; 85％を持って上演しながら、ステージIII / IV疾患の生存率は&lt;40％である。腫瘍は以前より治療可能な、3から5までの段階で検出された場合、このようにして、EOCの死亡率の高さを大幅に低減することができた。現時点では、早期の疾患発達の分子遺伝学的および生物学的根拠はあまり理解されています。具体的には、少しは、腫瘍の開始時の微小環境の役割についてはほとんど知られていない、しかしEOCs（ 例えば年齢、パリティ）の既知の危険因子には、微小環境がEOCsの初期発生に重要な役割を果たしていることを示唆している。そこで我々は、3次元異機種を開発正常な卵巣の両方と早期卵巣癌の。文化の中で、これらの細胞の寿命を延ばすために、ヒトテロメラーゼホロ酵素の触媒サブユニット酵素（hTERT）のretrovrial形質導入により不死化正常な卵巣のために、我々は、共培養した正常な卵巣表面の上皮（IOSE）と通常の間質線維芽細胞（INOF）細胞。卵巣上皮細胞形質転換、細胞内IOSE CMYC癌遺伝子の過剰発現は、再びINOF細胞と共培養の初期段階をモデル化する。これらの異型のモデルは、上皮細胞の形質転換および浸潤に対する加齢と老化の効果を調査するために使用された。ここでは、これらの3次元モデルの開発に方法論的な手順を説明し、これらの方法論は、正常な卵巣や卵巣癌組織の発達に固有のものではなく、間質と上皮細胞の相互作用が基本である場合、他の組織型を研究するために使用することができる組織の保守及びジの側面sea​​se開発。

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Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

我々は、確立するための方法論を記述する<em&gt; in vitroで</em&gt;卵巣線維芽細胞と正常卵巣表面または卵巣癌上皮細胞を含む異型3次元モデル。我々は、卵巣癌の開発中に発生する間質上皮の相互作用を研究するために、これらのモデルの使用について説明します。

三次元異<em&gt; in vitroで</em卵巣がんの発生と進行中に間質相互作用の上皮&gt;モデリング

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

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