Name: human neuroendocrine tumor cell lines as a three-dimensional model for the study of human neuroendocrine tumor therapy
Uploaded: 2012-08-14T13:00:00
Duration: 12 min 4 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy at JoVE.com

نشكر بإخلاص الدكتور تشن ون جين للحصول على المساعدة لها مع برنامج MATLAB ومعهد السرطان من منشأة جديدة التشريح المرضي جيرسي ومرفق المجهري. كما نشكر المراجعين لتعليقاتهم واقتراحاتهم. وتدعم هذه الدراسة من قبل رايموند وبيفرلي ساكلر مؤسسة البحوث.

<ol>
	<li>Taal, B. G., Visser, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+neuroendocrine+tumours.">Epidemiology of neuroendocrine tumours.</a> Neuroendocrinology. 80, 3-7 (2004).</li><li>Lee, G. Y., Kenny, P. A., Lee, E. H., Bissell, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+culture+models+of+normal+and+malignant+breast+epithelial+cells.">Three-dimensional culture models of normal and malignant breast epithelial cells.</a> Nat. Methods. 4, 359-365 (2007).</li><li>Friedrich, J., Seidel, C., Ebner, R., Kunz-Schughart, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spheroid-based+drug+screen:+considerations+and+practical+approach.">Spheroid-based drug screen: considerations and practical approach.</a> Nat. Protocol. 4, 309-324 (2009).</li><li>Chan, T. F., Vese, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Active+contours+without+edges.">Active contours without edges.</a> IEEE Trans Image Process. 10, 266-277 (2001).</li><li>Olert, J., Wiedorn, K. H., Goldmann, T., K&#252;hl, H., Mehraein, Y., Scherthan, H., Niketeghad, F., Vollmer, E., M&#252;ller, A. M., M&#252;ller-Navia, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HOPE++Fixation:+A+Novel+Fixing+Method+and+Paraffin-embedding+Technique+for+Human+Soft+Tissues.">HOPE Fixation: A Novel Fixing Method and Paraffin-embedding Technique for Human Soft Tissues.</a> Pathology-Research and Practice. 197, 823-826 (2001).</li><li>Baradari, V., Huether, A., H&#246;pfner, M., Schuppan, D., Scher&#252;bl, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antiproliferative+and+proapoptotic+effects+of+histone+deacetylase+inhibitors+on+gastrointestinal+neuroendocrine+tumor+cells.">Antiproliferative and proapoptotic effects of histone deacetylase inhibitors on gastrointestinal neuroendocrine tumor cells.</a> Endocr. Relat. Cancer. 13, 1237-1250 (2006).</li><li>Foty, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Simple+Hanging+Drop+Cell+Culture+Protocol+for+Generation+of+3D+Spheroids.">A Simple Hanging Drop Cell Culture Protocol for Generation of 3D Spheroids.</a> J. Vis. Exp. (51), e2720 (2011).</li><li>Shaw, K. R., Wrobel, C. N., Brugge, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+three-dimensional+basement+membrane+cultures+to+model+oncogene-induced+changes+in+mammary+epithelial+morphogenesis.">Use of three-dimensional basement membrane cultures to model oncogene-induced changes in mammary epithelial morphogenesis.</a> J. Mammary Gland Biol. Neoplasia. 9, 297-310 (2004).</li><li>Ivascu, A., Kubbies, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+generation+of+single-tumor+spheroids+for+high-throughput+cell+function+and+toxicity+analysis.">Rapid generation of single-tumor spheroids for high-throughput cell function and toxicity analysis.</a> J. Biomol. Screen. 11, 922-932 (2006).</li><li>Napolitano, A. P., Chai, P., Dean, D. M., Morgan, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamics+of+the+Self-Assembly+of+Complex+Cellular+Aggregates+on+Micromolded+Nonadhesive+Hydrogels.">Dynamics of the Self-Assembly of Complex Cellular Aggregates on Micromolded Nonadhesive Hydrogels.</a> Tissue Engineering. 13, 2087-2094 (2007).</li><li>do Amaral, J. B., Rezende-Teixeira, P., Freitas, V. M., Machado-Santelli, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MCF-7+cells+as+a+three-dimensional+model+for+the+study+of+human+breast+cancer.">MCF-7 cells as a three-dimensional model for the study of human breast cancer.</a> Tissue Eng. Part C Methods. 17, 1097-1107 (2011).</li><li>Hirschhaeuser, F., Menne, H., Dittfeld, C., West, J., Mueller-Klieser, W., Kunz-Schughart, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+tumor+spheroids:+An+underestimated+tool+is+catching+up+again.">Multicellular tumor spheroids: An underestimated tool is catching up again.</a> Journal of Biotechnology. 148, 3-15 (2010).</li></ol>

الإعلان عن أي تضارب في المصالح.

وقد أثبتت لنا طريقة بسيطة وموثوق بها، وقابلة للتكرار لتشكيل كروي 3D المتعددة الخلايا من خلايا ورم الغدد الصم العصبية باستخدام الاغاروز المغلفة 24-جيدا لوحات. نجاح هذه التقنية هي القدرة على الحصول على كروي واحد مع حجم وشكل موحد متجانس من قبل 6 أيام بدءا من عدد محدد من الخلايا. الخطوة الأساسية هي تحريض البطيء للوحة مع الخلايا الصافية للساعة الأولى بعد 16-24 تصفيح. هذه الطريقة يمكن أن تنطبق أيضا على الإنسانية المشتركة خلية سرطان الثدي خط MCF-7، الإنسان خلية غدية خط القولون HT-29، الإنسان الرئة ذي الخلية غير الصغيرة سرطان خط خلية H1299 والبشرية الخلية الجنينية الكلى خط كلوة الجنين البشري-293. فإنها يمكن أن تشكل جميع الأجسام الشبه الكروية 3D موحد والاتفاق على شاشة العقاقير العلاجية (لا تظهر البيانات). على الرغم من أن يتم الإبلاغ عن العديد من الطرق في توليد الأجسام الشبه الكروية 3D، وذكرت 7-10 الأسلوب هنا لا يحتاج لوحات المتخصصة أو الكواشف وبسيط وبالتالي وفعالة من حيث التكلفة. لدينا demonstrat بيانات غير منشورةه أن الأجسام الشبه الكروية 3D NET نمت على الاغاروز تحاكي في ورم الجسم الحي طعم أجنبي NET هندسيا وجزيئيا، بالمقارنة مع خلايا أحادي الطبقة 2D. هذا يشبه ما تم الإبلاغ عن الأجسام الشبه الكروية 3D مصنوعة من الإنسان الأخرى على خطوط الخلايا السرطانية. 11،12 والحد من نموذج خلية ثقافة 3D هو أنه لا يمكن أن تحل تماما محل اختبار فعالية في الجسم الحي من أية عقاقير أو علاجات العلاجية بسبب والأجسام الشبه الكروية 3D مثل الأورام اوعائي، الذي يختلف عن ورم في الجسم الحي في هذا الجانب. ومع ذلك، فإن هذه الطريقة تساعد على ردم الهوة وتقييم العقاقير العلاجية من NET في المختبر لفي الجسم الحي في بعض الجوانب. تلطيخ المناعي على الأجسام الشبه الكروية المتعددة الخلايا من الصعب جدا على أداء الواجب لحجم كبير وهندسة الأجسام الشبه الكروية في 3D العائمة والحد من المجهر متحد البؤر. نحن هنا لتوضيح طريقة لمعالجة التضمين HistoGel لالبارافينالتضمين، والسماح تلطيخ المناعى من الشرائح مقطوع التسلسلي لل3D الأجسام الشبه الكروية. الى جانب ذلك، لدينا برنامج MATLAB عرف نموا يساعد بدقة وبتكاثر تقدير حجم الأجسام الشبه الكروية، ورصد فعالية الدواء بكفاءة، ويمكن إدراجها في شاشة عالية الإنتاجية في مجال تطوير الأدوية للمرضى NET.

<table border="1" style=";text-align:right;direction:rtl"><tbody><tr><td> اسم </td><td> شركة </td><td> فهرس العدد </td><td> تعليقات </td></tr><tr><td> DMEM/F12 وسائل الإعلام </td><td> Gibco </td><td> 10565-018 </td><td></td></tr><tr><td> TrypLE </td><td> Gibco </td><td> 12604 </td><td></td></tr><tr><td> 24-جيدا لوحات </td><td> صقر </td><td> 353047 </td><td></td></tr><tr><td> 70 مصفاة ملي الخلية </td><td> فيشر العلمية </td><td> 22363548 </td><td></td></tr><tr><td> معقم ختم الشريط </td><td> نونك </td><td> 236366 </td><td></td></tr><tr><td> Trichostatin A </td><td> سيغما </td><td> T8552 </td><td></td></tr><tr><td> شاكر المداري </td><td> فيشر العلمية </td><td> 11-402-12 </td><td></td></tr></tbody></table>

human neuroendocrine tumor cell lines as a three-dimensional model for the study of human neuroendocrine tumor therapy

أورام الغدد الصم العصبية (شبكات) هي أورام نادرة، مع حدوث اثنين من كل 100 شخص، 000 في السنة، وتبلغ نسبتهم 0.5٪ من جميع الأورام الخبيثة الإنسان. 1 أخرى من عملية جراحية للأقلية من المرضى الذين يعانون من مرض محلي، هل هناك القليل أو لا فائدة من البقاء على قيد الحياة العلاج المنهجي. ولذلك، فإن هناك حاجة ماسة إلى فهم أفضل للبيولوجيا الشباك، وعلى وجه الخصوص تحديد أهداف علاجية جديدة للمرضى المصابين بأورام الغدد الصم العصبية nonresectable أو النقيلي. 3D ثقافة الخلية أصبحت وسيلة شعبية لفحص المخدرات نظرا لأهميتها في نمذجة في الجسم الحي منظمة نسيج الورم والمكروية. 2،3 والأجسام الشبه الكروية 3D المتعددة الخلايا يمكن أن توفر معلومات قيمة في الوقت المناسب تماما وأقل تكلفة من الانتقال مباشرة من 2D خلية التجارب الثقافة الحيوانية (الفئران) نماذج. لتسهيل اكتشاف علاجات جديدة لبات NETients، طورنا في المختبر نموذج 3D الأجسام الشبه الكروية المتعددة الخلايا باستخدام خطوط الخلايا البشرية NET. ومطلي الخلايا NET في صفيحة غير لاصقة 24-جيدا الاغاروز المغلفة وحضنت تحت الظروف الفسيولوجية (5٪ CO 2، و 37 درجة مئوية) مع الإثارة بطيئة جدا ل16-24 ساعة بعد الطلاء. هذه الخلايا تشكل الأجسام الشبه الكروية المتعددة الخلايا ابتداء من اليوم ال 3 أو 4 الثالثة. والأجسام الشبه الكروية تصبح أكثر كروية من يوم 6 الجاري، وعند هذه النقطة يتم البدء في العلاج بالعقاقير. ويتم رصد مدى فعالية العلاج بالعقاقير على الأجسام الشبه الكروية NET على أساس الشكل، والشكل الظاهري وحجم الأجسام الشبه الكروية مع المجهر ضوء مرحلة التباين. ويقدر حجم الأجسام الشبه الكروية تلقائيا باستخدام برنامج MATLAB عرف نموا على أساس خوارزمية كفاف نشط. علاوة على ذلك، علينا أن نبرهن طريقة بسيطة لمعالجة التضمين HistoGel على هذه الأجسام الشبه الكروية 3D، والسماح باستخدام معيار تقنيات النسيجية والمناعية. <pالطبقة = &quot;jove_content&quot;&gt; وهذا هو أول تقرير عن توليد الأجسام الشبه الكروية 3D باستخدام خطوط الخلايا NET لدراسة تأثير العقاقير العلاجية. لقد قمنا أيضا الأنسجة على هذه الأجسام الشبه الكروية 3D، وعرض مثال على تأثير دواء واحد على النمو والانتشار في الأجسام الشبه الكروية NET. نتائجنا تدعم أن الأجسام الشبه الكروية NET هي قيمة لمزيد من الدراسات في علم الأحياء NET وتطوير الأدوية.

Watch this Scientific Journal Video about Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy at JoVE.com

Human Neuroendocrine Tumor Cell Lines as a Three-Dimensional Model for the Study of Human Neuroendocrine Tumor Therapy

نقدم بسيطة منصة تراكب الاغاروز أن تنمو الأجسام الشبه الكروية المتعددة الخلايا 3D باستخدام الهرموني العصبي خطوط الخلايا السرطانية. هذا الأسلوب يوفر وسيلة مريحة للغاية لدراسة تأثير العقاقير العلاجية على خلايا ورم الغدد الصم العصبية. ويمكن أن يساعد أيضا لنا إقامة الإنسان الأجسام الشبه الكروية ورم الغدد الصم العصبية لعلاج السرطان.

الإنسان الخلية السرطانية الهرموني العصبي خطوط بمثابة نموذج ثلاثي الأبعاد لدراسة الإنسان علاج ورم الغدد الصم العصبية

Neuroendocrine tumors (NETs) are rare tumors, with an incidence of two per 100,&#x200A;000 individuals per year, and they account for 0.5% of all human ...

Research

JoVE Journal

Medicine

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

A Novel High-resolution In vivo Imaging Technique to Study the Dynamic Response of Intracranial Structures to Tumor Growth and Therapeutics

رواية عالية الدقة<em&gt; في الجسم الحي</em&gt; تقنية التصوير لدراسة الاستجابة الديناميكية للمنشآت داخل القحف لنمو الورم والتداوي

We have successfully integrated previously established Intracranial window (ICW) technology 1-4 with intravital 2-photon confocal microscopy to develop a ...

A Three-dimensional Tissue Culture Model to Study Primary Human Bone Marrow and its Malignancies

ثقافة الأنسجة نموذج ثلاثي الأبعاد لدراسة الابتدائية نخاع العظم الإنسان والأورام الخبيثة في

Tissue culture has been an invaluable tool to study many aspects of cell function, from normal development to disease. Conventional cell culture methods ...

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

Excitotoxic Stimulation of Brain Microslices as an In vitro Model of Stroke

excitotoxic المواد تحفيز الدماغ باعتبارها Microslices<em&gt; في المختبر</em&gt; نموذج من السكتة الدماغية

Examining molecular mechanisms involved in neuropathological conditions, such as ischemic stroke, can be difficult when using whole animal systems. As ...

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional (3D) Model

Quantification of Breast Cancer Cell Invasiveness Using a Three-dimensional 3D Model

الكمي لسرطان الثدي الغزو خلية باستخدام ثلاثي الأبعاد (3D) نموذج

It is now well known that the cellular and tissue microenvironment are critical regulators influencing tumor initiation and progression. Moreover, the ...

Three-dimensional Co-culture Model for Tumor-stromal Interaction

ثلاثي الأبعاد نموذج المشارك الثقافة ل-ورم انسجة التفاعل

Cancer progression (initiation, growth, invasion and metastasis) occurs through interactions between malignant cells and the surrounding tumor stromal ...

Evaluation of Tumor-infiltrating Leukocyte Subsets in a Subcutaneous Tumor Model

تقييم-التسلل ورم خلايا الدم البيضاء مجموعات فرعية في ورم تحت الجلد نموذج

Specialized immune cells that infiltrate the tumor microenvironment regulate the growth and survival of neoplasia.&#160; Malignant cells must elude or ...

Establishment of a Human Multiple Myeloma Xenograft Model in the Chicken to Study Tumor Growth, Invasion and Angiogenesis

إنشاء طعم أجنبي نموذج المايلوما المتعددة الإنسان في الدجاج لدراسة نمو الورم والغزو والأوعية الدموية

Multiple myeloma (MM), a malignant plasma cell disease, remains incurable and novel drugs are required to improve the prognosis of patients. Due to the ...

Three-Dimensional (3D) Tumor Spheroid Invasion Assay

Three-Dimensional 3D Tumor Spheroid Invasion Assay

ثلاثي الأبعاد (3D) ورم الجسم الشبه الكروي الغزو الفحص

Invasion of surrounding normal tissues is generally considered to be a key hallmark of malignant (as opposed to benign) tumors. For some cancers in ...

Dynamic Lung Tumor Tracking for Stereotactic Ablative Body Radiation Therapy

ديناميكية الرئة تتبع ورم لالمجسم صيغة الجر الجسم العلاج الإشعاعي

Physicians considering stereotactic ablative body radiation therapy (SBRT) for the treatment of extracranial cancer targets must be aware of the sizeable ...

A Human Glioblastoma Organotypic Slice Culture Model for Study of Tumor Cell Migration and Patient-specific Effects of Anti-Invasive Drugs

A غليوبلاستوما الإنسان أورغانوتيبيك نموذج شريحة شريحة لدراسة هجرة الخلايا السرطانية والآثار الخاصة بالمريض من الأدوية المضادة للغزو

Glioblastoma (GBM) continues to carry an extremely poor clinical prognosis despite surgical, chemotherapeutic, and radiation therapy. Progressive tumor ...