Name: a novel surgical approach for intratracheal administration of bioactive agents in a fetal mouse model
Uploaded: 2012-10-31T13:00:00
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MC und avdp sind Doktoranden durch Zuschüsse aus dem Institut zur Förderung von Innovation durch Wissenschaft und Technologie in Flandern (IWT-Vlaanderen) unterstützt. JT hat einen Teilzeit Clinical Research Fellowship (KOOR) von UZ Leuven. DV ist ein Doktorand durch einen Zuschuss von der KU Leuven, DBOF/10/062 unterstützt. MMDC ist ein Doktorand durch einen Zuschuss aus Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento (CNPq) und Erasmus Mundus unterstützt. Forschung wurde von IWT-Vlaanderen finanziert, die von der EG-Finanzhilfe DIMI (LSHB-CT-2005 bis 512.146) und durch die In-vivo Molecular Imaging Research Gruppe (IMIR) von der KU Leuven. Wir würden gerne die UPenn Vector Core von James M. Wilson für ihre freundliche Gabe des AAV6.2 Verpackungen Plasmid für rAAV-Vektor Produktion gegründet anerkennen.

Ein. Mating von Mäusen auf gewünschte Schwangerschaft Stufe zu erhalten Es paaren schwangeren NMRI-Mäuse, so dass sie 18 Tage (E18) schwangeren (insgesamt Gestation E19.5) zum Zeitpunkt der Operation sind. Vor und nach der Operation werden sie in Filteraufsatz Käfigen bei normaler Raumtemperatur und normalem Tageslicht mit freiem Zugang zu Wasser und Futter untergebracht. 2. Fetal intratracheale (IT) Injection (Abbildung 1) <ol><li> Zunächst den schwangeren ...

<ol>
	<li>Willson, D. F., Notter, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+future+of+exogenous+surfactant+therapy.">The future of exogenous surfactant therapy.</a> Respir. Care. 56, 1369-1388 (2011).</li><li>Abdel-Latif, M. E., Osborn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratracheal+Clara+cell+secretory+protein+(CCSP)+administration+in+preterm+infants+with+or+at+risk+of+respiratory+distress+syndrome.">Intratracheal Clara cell secretory protein (CCSP) administration in preterm infants with or at risk of respiratory distress syndrome.</a> Cochrane Database Syst. Rev. 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Kritische Schritte <ul><li> Die Maus Sorte haben wir entschieden, mit zu arbeiten ist NMRI Mäuse, weil sie eine reiche Zahl an Jungtieren (durchschnittliche Wurfgröße 14,4 ± 1,8, eigene Daten), tolerieren Eingriffe gut und haben gute mütterliche Eigenschaften. </li><li> Platzieren des Tabaksbeutelnaht durch die Gebärmutterwand und den fetalen Membranen ist ein kritischer Schritt, wie Sie wollen nur die fetalen Kopfes und nicht die Schultern aussetzen, sonst Neupositionierung ist es fast unmöglich, ohne Trauma. <...

<table border="1"><tbody><tr><td> Name des Reagenzes </td><td> Firma </td><td> Katalog-Nummer </td><td> Kommentare (optional) </td></tr><tr><td> NMRI-Mäuse </td><td> Janvier, Le Genest St Isle, Frankreich </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Isofluran </td><td> Isoba, Intervet / Schering-Plough Animal Health, Milton Keynes, UK </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolene 6-0 </td><td> Ethicon, Groot Bijgaarden, Belgien </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 5-0 </td><td> Ethicon, Groot Bijgaarden, Belgien </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 50 ul Hamilton Glass Spritze, Modell 1710,5 TLLX SYR </td><td> Hamilton, Reno, NV, USA </td><td> 5495-20 </td><td></td></tr><tr><td> 30G spitzen Nadel </td><td> Hamilton, Reno, NV, USA </td><td> 7762-03 </td><td></td></tr><tr><td> 2% Xylocain </td><td> AstraZeneca, Zoetermeer, Niederlande </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a novel surgical approach for intratracheal administration of bioactive agents in a fetal mouse model

Pränatalen pulmonalen Verabreichung von Zellen, Gene oder pharmakologische Mittel könnte die Grundlage für neue therapeutische Strategien für eine Vielzahl von genetischen und erworbenen Erkrankungen. Abgesehen von angeborenen oder ererbten Abnormalitäten mit der Anforderung für eine langfristige Expression des Gens geliefert, mehrere nicht-ererbte Kindstod, wo kurzfristige Genexpression oder pharmakologische Intervention ist ausreichend, um therapeutische Wirkungen zu erzielen, werden als potentielle zukünftigen Indikationen für diese berücksichtigt Ein solcher Ansatz. Kandidaten Krankheiten, für die Anwendung von kurzfristigen frühe Behandlung konnte die transiente neonatalen Mangel an Surfactant Protein B Bewirken Atemnotsyndroms bei Neugeborenen oder 1,2 hyperoxischen Verletzungen des neonatalen Lunge 3 sein. Candidate Krankheiten, für dauerhafte therapeutische Korrektur sind Cystic Fibrosis (CF) 4, genetische Varianten von Tensid Defizite 5 und α1-Antitrypsin-Mangel 6. &lt;p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Im Allgemeinen ist ein wichtiger Vorteil der pränatalen Gentherapie die Fähigkeit zur therapeutischen Intervention früh in der Entwicklung beginnen, auf oder sogar vor der klinischen Manifestation des Patienten und verhindert so irreparable Schäden für den Einzelnen. Darüber hinaus haben fötalen Organen eine erhöhte Zellteilungsrate um erwachsenen Organen, die eine effizientere Gen oder Stammzelle Transfer in den Fötus ermöglichen kann verglichen. Darüber hinaus wird in utero Gentransfer durchgeführt werden, wenn die Person das Immunsystem nicht vollständig ausgereift. Daher sollte die Transplantation von Zellen oder heterologe Supplementierung eines nicht-funktionellen oder abwesend Protein mit einer korrekten Version nicht verursachen Immunsystem Sensibilisierung gegenüber der Zelle, Vektor oder Transgen Produkt, das kürzlich hat sich der Fall sein mit sowohl zelluläre und Gentherapien 7 . In der vorliegenden Studie untersuchten wir das Potenzial, das direkt auf den fetalen Luftröhre in einem Maus-modell. Diese Vorgehensweise ist in den Einsatz in größeren Tiermodelle wie Kaninchen und Schafe 8, und auch in einer klinischen Umgebung 9, sondern muss vorher nicht Date in einem Maus-Modell durchgeführt. Bei der Untersuchung des Potenzials der fetalen Gentherapie für genetische Erkrankungen wie CF, ist der Maus-Modell sehr nützlich als erste Proof-of-concept wegen der breiten Verfügbarkeit der verschiedenen transgenen Maus-Stämme, die gut dokumentiert Embryogenese und fetale Entwicklung, weniger strenge ethische Vorschriften, kurz Schwangerschaft und die große Wurfgröße. Verschiedene Zugangswege beschrieben worden, um die fetale Nager Lungenkrebs gezielt, einschließlich intra-Fruchtwasser Injektion 10-12, (Ultraschall-geführte) intrapulmonalen Injektion 13,14 und intravenöser Verabreichung in den Dottersack Schiffen 15,16 oder Nabelschnur 17. Unsere neuartige chirurgische Verfahren ermöglicht es Forschern, die Mittel der Wahl direkt in den fötalen Maus Luftröhre, die ermöglicht injizierenfür eine effizientere Abgabe an die Atemwege als existierende Techniken 18.

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A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

Wir entwickelten eine neuartige chirurgische Ansatz für intratracheale Verabreichung von Wirkstoffen in die Maus Fötus. Die Transportroute ist effizienter bei der Ausrichtung der fetalen Mauslungen als der üblicherweise verwendete intra-Fruchtwasser Injektion. Dieses Verfahren hat sich nicht in einem Mausmodell wurden bisher beschrieben.

A Novel Surgical Ansatz intratracheale Verabreichung von Wirkstoffen in einem Fetal Mouse Model

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Die Beurteilung Teratogene Änderungen in einem Zebrafisch-Modell der Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Forschung

Medizin

A Mouse Tumor Model of Surgical Stress to Explore the Mechanisms of Postoperative Immunosuppression and Evaluate Novel Perioperative Immunotherapies

Ein Maus-Tumormodell der operativen Belastung zu Entdecken Sie die Mechanismen der postoperative Immunsuppression und Bewerten Novel Perioperative Immuntherapien

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Eine Maus fetalen Hautmodell von Scarless Wound Repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

The Mouse Round-window Approach for Ototoxic Agent Delivery: A Rapid and Reliable Technique for Inducing Cochlear Cell Degeneration

Die Maus Round-Fenster-Ansatz für Ototoxische Agent-Lieferung: eine schnelle und zuverlässige Technik zur Induktion Cochlear Zelldegeneration

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research ...

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

A Novel Mausmodell der arteriovenöse Fistel Ausfall: Der chirurgische Eingriff im Detail

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Chirurgische Ansatz für Arteria cerebri media Occlusion und Reperfusion fokaler zerebraler Ischämie bei Mäusen

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

A Novel Approach for the Administration of Medications and Fluids in Emergency Scenarios and Settings

Ein neuer Ansatz für die Verabreichung von Medikamenten und Flüssigkeiten in Notfallszenarien und Einstellungen

The available routes of administration commonly used for medications and fluids in the acute care setting are generally limited to oral, intravenous, or ...

Use of a Central Venous Line for Fluids, Drugs and Nutrient Administration in a Mouse Model of Critical Illness

Die Verwendung eines zentralen Venenkatheter für Flüssigkeiten, Drugs und Nährstoffverwaltung in einem Maus-Modell der Critical Illness

This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce ...

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

Kardiopulmonalen Bypass in einem Mausmodell: ein neuer Ansatz

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Einem Rattenmodell der orthotopen Lebertransplantation mit einer neuartigen magnetischen Anastomose-Technik für Suprahepatic Vena Cava Wiederaufbau

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...