Name: a novel surgical approach for intratracheal administration of bioactive agents in a fetal mouse model
Uploaded: 2012-10-31T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model at JoVE.com

MC ve AVDP Flanders Bilim ve Teknoloji (IWT-Vlaanderen) aracılığıyla Yenilik Geliştirme Enstitüsü hibe tarafından desteklenen doktora öğrencisinin vardır. JT UZ Leuven bir part-time Klinik Araştırma Bursu (Koor) tutar. DV KU Leuven, DBOF/10/062 bir hibe ile desteklenen doktora üyesidir. MMdC Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento (CNPq) ve Erasmus Mundus bir hibe ile desteklenen doktora üyesidir. Araştırma Avrupa Komisyonu hibe DIMI (LSHB-CT-2005-512146) tarafından ve KU Leuven in vivo Moleküler Görüntüleme Araştırma grubu (İmir) In tarafından IWT-Vlaanderen tarafından finanse edildi. Biz rAAV vektör üretimi için plazmid AAV6.2 ambalaj onların tür hediye James M. Wilson tarafından kurulan UPenn Vektör Çekirdek kabul etmek istiyorum.

1. İstenilen Gebelik Sahne Edinme Mice Çiftleşme Zaman arkadaşı hamile NMRI fareler yüzden ameliyat sırasında hamile 18 gün (E18) (toplam gebelik E19.5) olduğunu. Ameliyat öncesi ve sonrası normal oda sıcaklığında su ve chow ücretsiz erişim ile normal gündüz de filtre üst kafesleri yerleştirilmiştir. 2. Fetal intratrakeal (BT) Enjeksiyon (Şekil 1) <ol><li> İlk olarak 1.5 L / dak O 2 karışımı içinde% 1.5 ile izofluran anest...

<ol>
	<li>Willson, D. F., Notter, R. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+future+of+exogenous+surfactant+therapy.">The future of exogenous surfactant therapy.</a> Respir. Care. 56, 1369-1388 (2011).</li><li>Abdel-Latif, M. E., Osborn, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intratracheal+Clara+cell+secretory+protein+(CCSP)+administration+in+preterm+infants+with+or+at+risk+of+respiratory+distress+syndrome.">Intratracheal Clara cell secretory protein (CCSP) administration in preterm infants with or at risk of respiratory distress syndrome.</a> Cochrane Database Syst. Rev. CD008308, (2011).</li><li>Thebaud, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+endothelial+growth+factor+gene+therapy+increases+survival,+promotes+lung+angiogenesis,+and+prevents+alveolar+damage+in+hyperoxia-induced+lung+injury:+evidence+that+angiogenesis+participates+in+alveolarization.">Vascular endothelial growth factor gene therapy increases survival, promotes lung angiogenesis, and prevents alveolar damage in hyperoxia-induced lung injury: evidence that angiogenesis participates in alveolarization.</a> Circulation. 112, 2477-2486 (2005).</li><li>Griesenbach, U., Alton, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+to+the+lung:+lessons+learned+from+more+than+2+decades+of+CF+gene+therapy.">Gene transfer to the lung: lessons learned from more than 2 decades of CF gene therapy.</a> Adv. Drug Deliv. Rev. 61, 128-139 (2009).</li><li>Aneja, M. K., Rudolph, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+of+surfactant+protein+B+deficiency.">Gene therapy of surfactant protein B deficiency.</a> Curr. Opin. Mol. Ther. 8, 432-438 (2006).</li><li>Flotte, T. R., Mueller, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+therapy+for+alpha-1+antitrypsin+deficiency.">Gene therapy for alpha-1 antitrypsin deficiency.</a> Hum. Mol. Genet. 20, R87-R92 (2011).</li><li>Roybal, J. L., Santore, M. T., Flake, A. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+and+genetic+therapies+for+the+fetus.">Stem cell and genetic therapies for the fetus.</a> Semin Fetal Neonatal Med. 15, 46-51 (2010).</li><li>Peebles, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Widespread+and+efficient+marker+gene+expression+in+the+airway+epithelia+of+fetal+sheep+after+minimally+invasive+tracheal+application+of+recombinant+adenovirus+in+utero.">Widespread and efficient marker gene expression in the airway epithelia of fetal sheep after minimally invasive tracheal application of recombinant adenovirus in utero.</a> Gene Ther. 11, 70-708 (2004).</li><li>Deprest, J., Gratacos, E., Nicolaides, K. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetoscopic+tracheal+occlusion+(FETO)+for+severe+congenital+diaphragmatic+hernia:+evolution+of+a+technique+and+preliminary+results.">Fetoscopic tracheal occlusion (FETO) for severe congenital diaphragmatic hernia: evolution of a technique and preliminary results.</a> Ultrasound Obstet. Gynecol. 24, 121-126 (2004).</li><li>Buckley, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intra-amniotic+delivery+of+CFTR-expressing+adenovirus+does+not+reverse+cystic+fibrosis+phenotype+in+inbred+CFTR-knockout+mice.">Intra-amniotic delivery of CFTR-expressing adenovirus does not reverse cystic fibrosis phenotype in inbred CFTR-knockout mice.</a> Mol. Ther. 16, 819-824 (2008).</li><li>Davies, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenovirus-mediated+in+utero+expression+of+CFTR+does+not+improve+survival+of+CFTR+knockout+mice.">Adenovirus-mediated in utero expression of CFTR does not improve survival of CFTR knockout mice.</a> Mol. Ther. 16, 812-818 (2008).</li><li>Mitchell, M., Jerebtsova, M., Batshaw, M. L., Newman, K., Ye, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+gene+transfer+to+mouse+fetuses+with+recombinant+adenovirus+and+adeno-associated+virus+(AAV)+vectors.">Long-term gene transfer to mouse fetuses with recombinant adenovirus and adeno-associated virus (AAV) vectors.</a> Gene Ther. 7, 1986-1992 (2000).</li><li>Henriques-Coelho, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeted+gene+transfer+to+fetal+rat+lung+interstitium+by+ultrasound-guided+intrapulmonary+injection.">Targeted gene transfer to fetal rat lung interstitium by ultrasound-guided intrapulmonary injection.</a> Mol. Ther. 15, 340-347 (2007).</li><li>Toelen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+gene+transfer+with+lentiviral+vectors:+long-term+in+vivo+follow-up+evaluation+in+a+rat+model.">Fetal gene transfer with lentiviral vectors: long-term in vivo follow-up evaluation in a rat model.</a> Am J Obstet Gynecol. 196, e1-e6 (2007).</li><li>Waddington, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+transgene+expression+by+administration+of+a+lentivirus-based+vector+to+the+fetal+circulation+of+immuno-competent+mice.">Long-term transgene expression by administration of a lentivirus-based vector to the fetal circulation of immuno-competent mice.</a> Gene Ther. 10, 1234-1240 (2003).</li><li>Waddington, S. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+phenotypic+correction+of+hemophilia+B+in+immunocompetent+mice+by+prenatal+gene+therapy.">Permanent phenotypic correction of hemophilia B in immunocompetent mice by prenatal gene therapy.</a> Blood. 104, 2714-2721 (2004).</li><li>Senoo, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adenovirus-mediated+in+utero+gene+transfer+in+mice+and+guinea+pigs:+tissue+distribution+of+recombinant+adenovirus+determined+by+quantitative+TaqMan-polymerase+chain+reaction+assay.">Adenovirus-mediated in utero gene transfer in mice and guinea pigs: tissue distribution of recombinant adenovirus determined by quantitative TaqMan-polymerase chain reaction assay.</a> Mol. Genet. Metab. 69, 269-276 (2000).</li><li>Carlon, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+gene+transfer+into+the+mouse+lung+by+fetal+intratracheal+injection+of+rAAV2/6.2.">Efficient gene transfer into the mouse lung by fetal intratracheal injection of rAAV2/6.2.</a> Mol. Ther. 18, 2130-2138 (2010).</li><li>Schmiedl, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lipopolysaccharide-induced+injury+is+more+pronounced+in+fetal+transgenic+ErbB4-deleted+lungs.">Lipopolysaccharide-induced injury is more pronounced in fetal transgenic ErbB4-deleted lungs.</a> Am. J. Physiol. Lung Cell Mol Physiol. 301, L490-L499 (2011).</li><li>Buckley, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+adenovirus-mediated+airway+transduction+in+fetal+mice.">Factors influencing adenovirus-mediated airway transduction in fetal mice.</a> Mol. Ther. 12, 484-492 (2005).</li></ol>

Kritik adımlar <ul><li> Onlar yavru bol sayıda (ortalama DKBKS 14.4 ± 1.8, kendi veri) çünkü biz çalışmayı seçti fare zorlanma NMRI fareler, iyi müdahaleler tahammül ve iyi maternal özelliklere sahip. </li><li> Sadece travma olmaksızın neredeyse imkansızdır aksi konumlandırılması, fetal başın değil omuz maruz istediğiniz gibi rahim duvarı ve fetal membranlar yoluyla çantanızda dize yerleştirilmesi kritik bir adımdır. </li><li> Fetal başın optimal pozisyonu büyük kan damarlarının (ş...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> NMRI fareler </td><td> Janvier, Le Genest St Isle, Fransa </td><td></td><td></td></tr><tr><td> İzofluran </td><td> Isoba, Intervet / Schering-Plough Hayvan Sağlığı, Milton Keynes, UK </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Prolen 6-0 </td><td> Ethicon, Groot Bijgaarden, Belçika </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Vicryl 5-0 </td><td> Ethicon, Groot Bijgaarden, Belçika </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 50 ul Hamilton Cam Şırınga, Model 1710,5 TLLX SYR </td><td> Hamilton, Reno, NV, ABD </td><td> 5495-20 </td><td></td></tr><tr><td> 30G keskin iğne </td><td> Hamilton, Reno, NV, ABD </td><td> 7762-03 </td><td></td></tr><tr><td> % 2 xylocaine </td><td> AstraZeneca, Zoetermeer, Hollanda </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

a novel surgical approach for intratracheal administration of bioactive agents in a fetal mouse model

Hücrelerin, genlerin veya farmakolojik ajanların Prenatal pulmoner teslimat genetik ve kazanılmış hastalıklar çeşitli yeni tedavi stratejileri için temel sağlayabilir. Apart kısa vadeli gen ekspresyonu veya farmakolojik girişimlerle tedavi edici etkileri elde etmek için yeterlidir teslim gen, çeşitli kalıtsal olmayan perinatal durumlar, uzun vadeli ifade şartı ile doğuştan veya kalıtsal bozukluklar, bu gelecekteki potansiyel endikasyon olarak kabul edilmektedir yaklaşım tarzı. Kısa süreli terapi doğum öncesi uygulama için aday neonatal hastalıklar solunum distres sendromu, 1,2 ya da neonatal akciğer 3 hiperoksik yaralanmasına neden olan yüzey aktif protein B geçici neonatal eksikliği olabilir. Kalıcı tedavi düzeltme Aday hastalıkları Kistik Fibrozis (CF) 4, sürfaktan eksiklikleri 5 ve α1-antitripsin eksikliği 6 genetik varyantları vardır. &lt;p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Genellikle, doğum öncesi gen tedavisinin önemli bir avantaj böylece bireysel onarılamaz hasar görmemesi hastada klinik öncesi ya da erken gelişimi terapötik müdahale başlatmak için yeteneğidir. Cenin içine daha verimli bir gen ya da kök hücre transferine izin verebilir yetişkin organlarının ile karşılaştırıldığında, ek olarak, fetal organlar artan bir hücre proliferasyon oranına sahiptir. Ayrıca, doğum halinde uterus gen bireyin bağışıklık sisteminin tamamen olgun olmadığında gerçekleşir. Bu nedenle, doğru bir sürümü ile fonksiyonel olmayan ya da eksik protein heterolog hücreleri veya takviyesi transplantasyonu son zamanlarda hücresel ve genetik hem de tedavilerin 7 ile durum kanıtlanmıştır hücre, vektör veya transgen ürün, bağışıklık hassasiyete neden olmamalıdır . Bu çalışmada, biz doğrudan bir fare m fetal trakeaya hedef potansiyeli incelenmiştirodel. Bu yöntem, tavşan, koyun 8, ve hatta klinik ortamda 9&#39;daki gibi daha büyük hayvan modellerinde kullanımda, ancak bir fare modelinde, daha önce yapılmamıştır tarihe sahiptir. CF gibi genetik hastalıklar için fetal gen tedavisinin potansiyel öğrenim görürken, fare modeli, çünkü farklı transgenik fare suşları, iyi belgelenmiş embriyogenez ve fetal gelişim, daha az sıkı geniş kullanılabilirliği proof-of-concept bir ilk olarak çok yararlıdır etik düzenlemeler, kısa gebelik ve büyük çöp boyutu. Farklı erişim yolları intra-amniyotik enjeksiyon 10-12, yolk kesesi damarlarının 15,16 veya umbilikal ven 17 içine (ultrason kılavuzluğunda) intrapulmoner enjeksiyon 13,14 ve intravenöz dahil fetal kemirgen akciğer hedef tarif edilmiştir. Bizim yeni bir cerrahi prosedür doğrudan sağlayan fetal fare trakea içine seçim ajan enjekte araştırmacılar sağlarmevcut tekniklerin 18 göre solunum yollarında daha verimli bir şekilde teslim için.

Watch this Scientific Journal Video about A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model at JoVE.com

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

Biz fare fetüs olarak biyoaktif ajanların intratrakeal yönetimi için yeni bir cerrahi yaklaşım geliştirdi. Teslimat güzergahı sık kullanılan intra-amniyotik enjeksiyon dışında fetal fare akciğerlere hedefleme daha verimlidir. Bu işlem, bir fare modeli tarif edilmemiştir tarihe sahiptir.

Bir Fetal Fare Modelinde Biyoaktif Ajan intratrakeal Yönetimi İçin Yeni Bir Cerrahi Yaklaşım

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Fetal Alkol Pozlama bir Zebra balığı Modelinde teratojenik değişiklikler değerlendirilmesi

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

A Mouse Tumor Model of Surgical Stress to Explore the Mechanisms of Postoperative Immunosuppression and Evaluate Novel Perioperative Immunotherapies

Ameliyat sonrası Immunosupressjon&#39;un ve Mekanizmaları keşfedin ve Roman Perioperatif İmmünoterapiler Değerlendirmesinde Cerrahi Stres Fare Tümör Modeli

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Scarless Yara Repair Fare Fetal Cilt Modeli

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

The Mouse Round-window Approach for Ototoxic Agent Delivery: A Rapid and Reliable Technique for Inducing Cochlear Cell Degeneration

Koklear Hücre Dejenerasyonu Inducing için hızlı ve Güvenilir Teknik: Ototoksik Ajan Teslimat için Fare Yuvarlak pencere Yaklaşımı

Investigators have utilized a wide array of animal models and investigative techniques to study the mammalian auditory system. Much of the basic research ...

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

Arteriovenöz Fistül Yetersizliğinin A Novel Fare Modeli: Detay Cerrahi Prosedür

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

A Novel Approach for the Administration of Medications and Fluids in Emergency Scenarios and Settings

Acil Senaryoları ve Ayarlar İlaçlar ve Sıvılar İdaresi Yeni Bir Yaklaşım

The available routes of administration commonly used for medications and fluids in the acute care setting are generally limited to oral, intravenous, or ...

Use of a Central Venous Line for Fluids, Drugs and Nutrient Administration in a Mouse Model of Critical Illness

Kritik Hastalık Fare Modeli Sıvılar, Uyuşturucu ve Besin İdaresi için Santral Venöz Hattı Kullanımı

This protocol describes a centrally catheterized mouse model of prolonged critical illness. We combine the cecal ligation and puncture method to induce ...

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

Kardiyopulmoner baypas gerektirmeyen bir fare modeli: yeni bir yaklaşım

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Orthotopic fare modeli bir roman manyetik anastomoz teknik Suprahepatic Vena kava imar için kullanılarak karaciğer nakli

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...