Name: viral tracing of genetically defined neural circuitry
Uploaded: 2012-10-17T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Viral Tracing of Genetically Defined Neural Circuitry at JoVE.com

ברצוננו להודות שון וילן לסיוע בהצלת ריאנטים VSV רקומביננטי, וDidem גוז וריאן Chrenek לסיוע טכני. עבודה זו נתמכה על ידי HHMI (CLC), ו# NS068012-01 (KTB).

1. ביצוע וירוס מcDNA: שחזור של VSV מcDNA באמצעות vaccinia-T7 מערכה 10 <ol style=";text-align:right;direction:rtl"><li style=";text-align:right;direction:rtl"> יום לפני ניסוי אחד, לפצל BsrT7 תאים לתוך צלחת 60 מ&quot;מימ המכילה DMEM + 10% FBS. תאי 2E6 זרעים למאכל. BsrT7 תאים נגזרים מBHK21 או כליות אוגר תינוק, תאים. </li><li style=";text-align:right;directi...

<ol>
	<li>Wickersham, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+restriction+of+transsynaptic+tracing+from+single,+genetically+targeted+neurons.">Monosynaptic restriction of transsynaptic tracing from single, genetically targeted neurons.</a> Neuron. 53, 639-647 (2007).</li><li>Marshel, J. H., Mori, T., Nielsen, K. J., Callaway, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+single+neuronal+networks+for+gene+expression+and+cell+labeling+in+vivo.">Targeting single neuronal networks for gene expression and cell labeling in vivo.</a> Neuron. 67, 562-574 (2010).</li><li>Wall, N. R., Wickersham, I. R., Cetin, A., De La Parra, M., Callaway, E. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+circuit+tracing+in+vivo+through+Cre-dependent+targeting+and+complementation+of+modified+rabies+virus.">Monosynaptic circuit tracing in vivo through Cre-dependent targeting and complementation of modified rabies virus.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 107, 21848-21853 (2010).</li><li>Wickersham, I. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+restriction+of+transsynaptic+tracing+from+single,+genetically+targeted+neurons.">Monosynaptic restriction of transsynaptic tracing from single, genetically targeted neurons.</a> Neuron. 53, 639-647 (2007).</li><li>Yonehara, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spatially+asymmetric+reorganization+of+inhibition+establishes+a+motion-sensitive+circuit.">Spatially asymmetric reorganization of inhibition establishes a motion-sensitive circuit.</a> Nature. 469, 407-410 (2011).</li><li>Stepien, A. E., Tripodi, M., Arber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monosynaptic+rabies+virus+reveals+premotor+network+organization+and+synaptic+specificity+of+cholinergic+partition+cells.">Monosynaptic rabies virus reveals premotor network organization and synaptic specificity of cholinergic partition cells.</a> Neuron. 68, 456-472 (2010).</li><li>Beier, K. T., Samson, M. E. S., Matsuda, T., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+expression+of+the+TVA+receptor+allows+clonal+analysis+of+descendents+from+Cre-expressing+progenitor+cells.">Conditional expression of the TVA receptor allows clonal analysis of descendents from Cre-expressing progenitor cells.</a> Dev. Biol. 353, 309-320 (2011).</li><li>Seidler, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Cre-loxP-based+mouse+model+for+conditional+somatic+gene+expression+and+knockdown+in+vivo+by+using+avian+retroviral+vectors.">A Cre-loxP-based mouse model for conditional somatic gene expression and knockdown in vivo by using avian retroviral vectors.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 10137-10142 (2008).</li><li>Beier, K. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anterograde+or+retrograde+transsynaptic+labeling+of+CNS+neurons+with+vesicular+stomatitis+virus+vectors.">Anterograde or retrograde transsynaptic labeling of CNS neurons with vesicular stomatitis virus vectors.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108, 15414-15419 (2011).</li><li>Whelan, S. P., Ball, L. A., Barr, J. N., Wertz, G. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+recovery+of+infectious+vesicular+stomatitis+virus+entirely+from+cDNA+clones.">Efficient recovery of infectious vesicular stomatitis virus entirely from cDNA clones.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 92, 8388-8392 (1995).</li><li>Fuerst, T. R., Niles, E. G., Studier, F. W., Moss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eukaryotic+Transient-Expression+System+Based+on+Recombinant+Vaccinia+Virus+That+Synthesizes+Bacteriophage+T7+RNA+Polymerase.">Eukaryotic Transient-Expression System Based on Recombinant Vaccinia Virus That Synthesizes Bacteriophage T7 RNA Polymerase.</a> PNAS. 83, 8122-8126 (1986).</li><li>Young, J. A., Bates, P., Varmus, H. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+a+chicken+gene+that+confers+susceptibility+to+infection+by+subgroup+A+avian+leukosis+and+sarcoma+viruses.">Isolation of a chicken gene that confers susceptibility to infection by subgroup A avian leukosis and sarcoma viruses.</a> J. Virol. 67, 1811-1816 (1993).</li><li>Madisen, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+robust+and+high-throughput+Cre+reporting+and+characterization+system+for+the+whole+mouse+brain.">A robust and high-throughput Cre reporting and characterization system for the whole mouse brain.</a> Nat Neurosci. 13, 133-140 (2010).</li><li>Franklin, K., Paxinos, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. , (1997).</li><li>van den Pol, A. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Viral+strategies+for+studying+the+brain,+including+a+replication-restricted+self-amplifying+delta-G+vesicular+stomatis+virus+that+rapidly+expresses+transgenes+in+brain+and+can+generate+a+multicolor+golgi-like+expression.">Viral strategies for studying the brain, including a replication-restricted self-amplifying delta-G vesicular stomatis virus that rapidly expresses transgenes in brain and can generate a multicolor golgi-like expression.</a> J. Comp. Neurol. 516, 456-481 (2009).</li></ol>

שימוש בוירוסים כדי ללמוד מעגלים עצביים הוא שיטת תפוקה גבוהה יחסית של ניתוח נוירונים מקושרים. עם זאת, שהניב גם virions RABV VSV ואינו טריוויאלי. למרות שהפרוטוקול מפורט לעיל להצלת וירוס מcDNA מסופק, זה עדיין אירוע הסתברות נמוכה. הרמות של כל אחד מN, P, ופלסמידים L צריכות להיות מותאמ...

<table border="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Reagent</td>
			<td>Company</td>
			<td>Catalogue number</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Tissue Culture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Baby Hamster Kidney (BSRT7) cells</td>
			<td>available upon request</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vaccinia (vTF7-3)</td>
			<td>available upon request</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pN, pP, pl plasmids</td>
			<td>available upon request</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Calcium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>C1016</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Magnesium Chloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M8266</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEK 293T cells</td>
			<td>Open Biosystems</td>
			<td>HCL4517</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>60 mm TC-Treated Culture Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430166</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>75 cm2 Rectangular Canted Neck Cell Culture Flask with Vent Cap</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430641</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Media : DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>12491-015</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 M HEPES pH 7.4</td>
			<td>Gibo</td>
			<td>15630-080</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS: Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10437-028</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PKS</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>15140-163</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lipofectamine 2,000 Transfection Reagent</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>11668-019</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe: 5 ml Luer-Lock syringe</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>Z248010-1PAK</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe Filters</td>
			<td>Nalgene</td>
			<td>190-2520</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PEI: High Potency Linear PEI</td>
			<td>Polysciences</td>
			<td>23966</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Viral Centrifugation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Corning 150 ml Tube Top Vacuum Filter System, 0.45 &mu;m Pore</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430314</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thinwall, Ultra-Clear, 38.5 ml, 25 x 89 mm ultracentrifuge tubes</td>
			<td>Beckman-Coulter</td>
			<td>344058</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultracentrifuge</td>
			<td>Beckman-Coulter</td>
			<td>optima XL-80K</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SW28 Ultracentrifuge rotor</td>
			<td>Beckman-Coulter</td>
			<td>342207</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Mouse Injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Capillary micropipets</td>
			<td>Drummond</td>
			<td>5-000-2005</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereotax</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>SR-5M</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>Narishige</td>
			<td>SM-15</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ump injector</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>Sys-Micro4</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Four channel microcontroller</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>UMP3</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>M.TXB Bench Motor with C.EMX-1 Dial Control, 115 Volt</td>
			<td>Foredom</td>
			<td>M.TXB-EM</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>H.10 Handpiece, Quick Change</td>
			<td>Foredom</td>
			<td>H.10</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Step Drill, 0.5 mm</td>
			<td>Foredom</td>
			<td>A-58005P</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microelectrode holder</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>MEH2S</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>995-2949</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>4015809TV</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>1118217</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1 ml syringe</td>
			<td>Becton-Dickinson</td>
			<td>309628</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30 gauge injection needle</td>
			<td>Becton-Dickinson</td>
			<td>305106</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protective Ophthalmic Ointment</td>
			<td>Doctors Foster and Smith</td>
			<td>9N-014748</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>493511</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>PVP1</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Surgery and Dissection tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91402-12</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Standard Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11000-12</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>11255-20</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>15000-00</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel handle</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10003-12</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blades</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>10015-00</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sutures</td>
			<td>Robbins Instruments</td>
			<td>20.SK640</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Dissection and antibody staining</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>paraformaldehyde</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6148</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P4417</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triton X-100</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T9284</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey Serum</td>
			<td>Jackson Immunoresearch</td>
			<td>017-000-121</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Antibodies</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antibodies</td>
			<td>millipore</td>
			<td>AB144P</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anti-gfp</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab13970</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-chicken Dylight 488</td>
			<td>Jackson immunoresearch</td>
			<td>703-545-155</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Donkey anti-chicken Alexa Fluor 647</td>
			<td>Jackson immunoresearch</td>
			<td>705-605-147</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DAPI</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>D1306</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>&nbsp;</td>
			<td>Tissue mounting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Superfrost plus microscope slides</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>12-550-100</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cover glass 22 x 22, 0 thickness</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72198-10</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silicone elastomer</td>
			<td>Rogers Corp</td>
			<td>HT-6220</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Clear nail polish</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72180</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prolong Gold antifade reagent</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P36930</td>
			<td>&nbsp;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

viral tracing of genetically defined neural circuitry

שיטות קלסיות לחקר מעגלים עצביים הן תפוקה נמוכה למדי. וירוסי Transsynaptic, במיוחד pseudorabies (PRV) ונגיף כלבת (RABV), ולאחרונה שלפוחי וירוס stomatitis (VSV), ללימוד מעגלים, יותר ויותר פופולריים. שיטות תפוקה גבוהות אלה להשתמש וירוסים שמשדרים בין הנוירונים בשני כיווני אנטרוגרדית או מדרדר. לאחרונה, RABV שונה לאיתור מדרדר monosynaptic פותח. (איור 1 א). בשיטה זו, גליקופרוטאין הגן (G) נמחק מהגנום הנגיפי, והצטייד במצרכים רק בנוירונים ממוקדים. הספציפיות זיהום מושגת על ידי החלפת G chimeric, מורכב מהתחום התאי של ASLV-גליקופרוטאין ותחום cytoplasmic של RABV-G (/ RG), לנורמלי 1 RABV-G. G chimeric זה במיוחד מדביק תאים המבטאים את הקולטן TVA 1. גן קידוד TVA יכול היה דelivered על ידי שיטות שונות 2-8. בעקבות זיהום RABV-G של נוירון TVA מבטא, RABV יכול לשדר לנוירונים אחרים, הקשורות בsynaptically כיוון מדרדר ידי הטבע של G שלו אשר היה השותף נמסר-עם קולט TVA. טכניקה זו מתייגת מספר רב יחסי של תשומות (5-10%) 2 על סוג תא מוגדר, מתן דגימה של כל תשומות על סוג תא תנע מוגדר. אנחנו שונים לאחרונה בטכניקה זו כדי להשתמש VSV כ9 נותב transsynaptic. VSV יש מספר יתרונות, כולל המהירות של ביטוי גנים. כאן אנחנו פירוט מערכת איתור נגיפית חדשה באמצעות VSV השימושי לחקור microcircuitry עם רזולוציה מוגברת. בעוד אסטרטגיות המקוריות שפורסמו על ידי Wickersham et al. 4 ו אייר et al. תיוג 9 היתר של כל הנוירונים שמשליכים על נגוע, תחילה TVA-להביע תאים, כאן VSV תוכנן לשידור רק לטלביזיהתאים המבטאים-(האיור 1B). וירוס pseudotyped הראשון עם RABV-G להתיר זיהום של מורד הנוירונים של נוירונים המבטאים TVA-. לאחר הדבקת האוכלוסייה ראשונה זה של תאים, הווירוס יכול להדביק תאים שוחרר TVA מבטא בלבד. בגלל ההתפשטות הנגיפית transsynaptic מוגבלת לתאים המבטאים TVA-, נוכחות של העדר קישוריות מסוגי תאים מוגדרים ניתן לחקור ברזולוציה גבוהה. תרשים זרימה ניסיונית של ניסויים אלה מוצג באיור 2. כאן אנו מציגים מודל מעגל, שכיוון של-הסלקטיביות ברשתית העכבר. אנו בודקים את הקישוריות של תאי התפרצות כוכבי amacrine (צקים) לתאי הגנגליון ברשתית (RGCs).

Watch this Scientific Journal Video about Viral Tracing of Genetically Defined Neural Circuitry at JoVE.com

Viral Tracing of Genetically Defined Neural Circuitry

שיטה של ​​התחקות נוירונים הקשורים synaptically מתוארת. אנו משתמשים סגוליים TVA של תא במעלה זרם כדי לבחון אם אוכלוסיית תא של עניין מקבלת קלט סינפטי מסוגי תאים מוגדרים מבחינה גנטית.

איתור נגיפי של מעגלים עצביים מוגדרים גנטי

Classical methods for studying neuronal circuits are fairly low throughput. Transsynaptic viruses, particularly the pseudorabies (PRV) and rabies virus ...

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Physiological, Morphological and Neurochemical Characterization of Neurons Modulated by Movement

אפיון פיזיולוגיים, מורפולוגי והעצבית של נוירונים מווסתת על ידי תנועת

The role of individual neurons and their function in neuronal circuits is fundamental to understanding the neuronal mechanisms of sensory and motor ...

Reproducible Mouse Sciatic Nerve Crush and Subsequent Assessment of Regeneration by Whole Mount Muscle Analysis

עכבר לשחזור Sciatic עצב קראש והערכה לאחר ההתחדשות של ניתוח הר שלם שריר

Regeneration in the peripheral nervous system (PNS) is widely studied both for its relevance to human disease and to understand the robust regenerative ...

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

Expansion of Embryonic and Adult Neural Stem Cells by In Utero Electroporation or Viral Stereotaxic Injection

התרחבות של תאי גזע עצביים עובריים ומבוגרים על ידי<em&gt; ברחם</em&gt; Electroporation או הזרקת Stereotaxic ויראלי

Somatic stem cells can divide to generate additional stem cells (expansion) or more differentiated cell types (differentiation), which is fundamental for ...

Selective Tracing of Auditory Fibers in the Avian Embryonic Vestibulocochlear Nerve

איתור סלקטיבי של סיבי עצב שמיעה בVestibulocochlear העוברי העופות

The embryonic chick is a widely used model for the study of peripheral and central ganglion cell projections. In the auditory system, selective labeling ...

Modeling Astrocytoma Pathogenesis In Vitro and In Vivo Using Cortical Astrocytes or Neural Stem Cells from Conditional, Genetically Engineered Mice

Modeling Astrocytoma Pathogenesis In Vitro and In Vivo Using Cortical Astrocytes or Neural Stem Cells from Conditional, Genetically Engineered Mice

דוגמנות אסטרוציטומה פתוגנזה<em&gt; במבחנה</em&gt; ו<em&gt; בVivo</em&gt; שימוש בקליפת מוח האסטרוציטים או בתאי גזע עצביים מעכברים מותנים, מהונדסים גנטי

Current astrocytoma models are limited in their ability to define the roles of oncogenic mutations in specific brain cell types during disease ...

A Lateralized Odor Learning Model in Neonatal Rats for Dissecting Neural Circuitry Underpinning Memory Formation

מודל הלמידה Lateralized ריח חולדות ילודים לביתור גיבוש עצבי מעגל בבסיס זיכרון

Rat pups during a critical postnatal period (&#8804; 10 days) readily form a preference for an odor that is associated with stimuli mimicking maternal ...

Conditional Genetic Transsynaptic Tracing in the Embryonic Mouse Brain

מותנה הגנטי Transsynaptic איתור במוח העכבר עוברי

Anatomical path tracing is of pivotal importance to decipher the relationship between brain and behavior. Unraveling the formation of neural circuits ...

Laser-guided Neuronal Tracing In Brain Explants

Explants מוח מונחי לייזר עצבי איתור ב

We present a technique which combines an in vitro tracer injection protocol, which uses a series of electrical and pressure pulses to increase dye uptake ...

Single-cell RNA-Seq of Defined Subsets of Retinal Ganglion Cells

יחיד תא RNA-Seq של קבוצות מוגדרות של תאים גנגליון רשתית

The discovery of cell type-specific markers can provide insight into cellular function and the origins of cellular heterogeneity. With a recent push for ...

Time-dependent Increase in the Network Response to the Stimulation of Neuronal Cell Cultures on Micro-electrode Arrays

זמן תלויי תגובת הרשת בתגובה לגירוי של תרבויות תאים עצביים על מערכי מיקרו-אלקטרודה

Micro-electrode arrays (MEAs) can be used to investigate drug toxicity, design paradigms for next-generation personalized medicine, and study network ...