Name: models of bone metastasis
Uploaded: 2012-09-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Models of Bone Metastasis at JoVE.com

De auteurs erkennen de volgende financieringsbronnen: P01CA040035 (FE / JAS) en VA Career Development Award (JAS).

1. Cel Onderhoud <ol><li> Veel botten uitgezaaide subklonen van MDA-MB-231 zijn gedefinieerd met variabele neiging tot bot kolonisatie en groei. Voor onze experimenten gebruiken kloon afgeleid van de GFP-gemerkte MDA-MB-231 ontwikkeld UTHSCA 2. Deze specifieke sub-kloon vormen zichtbaar osteolytische botlaesies ongeveer 3 weken na inoculatie met opoffering na 4 weken. </li><li> Handhaven cellen in DMEM met 10% FBS en 0,1 mg / ml penicilline-streptomycine bij 37 ° C in 5-8% CO 2 7. </l...

<ol>
	<li>Sterling, J. A., Edwards, J. R., Martin, T. J., Mundy, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+the+biology+of+bone+metastasis:+how+the+skeleton+affects+tumor+behavior.">Advances in the biology of bone metastasis: how the skeleton affects tumor behavior.</a> Bone. 48, 6-15 (2011).</li><li>Yoneda, T., Sasaki, A., Mundy, G. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteolytic+bone+metastasis+in+breast+cancer.">Osteolytic bone metastasis in breast cancer.</a> Breast Cancer Res. Treat. 32, 73-84 (1994).</li><li>Johnson, R. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TGF-beta+promotion+of+Gli2-induced+expression+of+parathyroid+hormone-related+protein,+an+important+osteolytic+factor+in+bone+metastasis,+is+independent+of+canonical+Hedgehog+signaling.">TGF-beta promotion of Gli2-induced expression of parathyroid hormone-related protein, an important osteolytic factor in bone metastasis, is independent of canonical Hedgehog signaling.</a> Cancer Res. 71, 822-831 (2011).</li><li>Li, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Loss+of+TGF-beta+Responsiveness+in+Prostate+Stromal+Cells+Alters+Chemokine+Levels+and+Facilitates+the+Development+of+Mixed+Osteoblastic/Osteolytic+Bone+Lesions.">Loss of TGF-beta Responsiveness in Prostate Stromal Cells Alters Chemokine Levels and Facilitates the Development of Mixed Osteoblastic/Osteolytic Bone Lesions.</a> Mol. Cancer Res. , (2012).</li><li>Yoneda, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actions+of+bisphosphonate+on+bone+metastasis+in+animal+models+of+breast+carcinoma.">Actions of bisphosphonate on bone metastasis in animal models of breast carcinoma.</a> Cancer. 88, 2979-2988 (2000).</li><li>Rose, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoactivin+promotes+breast+cancer+metastasis+to+bone.">Osteoactivin promotes breast cancer metastasis to bone.</a> Mol. Cancer Res. 5, 1001-1014 (2007).</li><li>Sterling, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+hedgehog+signaling+molecule+Gli2+induces+parathyroid+hormone-related+peptide+expression+and+osteolysis+in+metastatic+human+breast+cancer+cells.">The hedgehog signaling molecule Gli2 induces parathyroid hormone-related peptide expression and osteolysis in metastatic human breast cancer cells.</a> Cancer Res. 66, 7548-7553 (2006).</li><li>Lu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VCAM-1+promotes+osteolytic+expansion+of+indolent+bone+micrometastasis+of+breast+cancer+by+engaging+alpha4beta1-positive+osteoclast+progenitors.">VCAM-1 promotes osteolytic expansion of indolent bone micrometastasis of breast cancer by engaging alpha4beta1-positive osteoclast progenitors.</a> Cancer Cell. 20, 701-714 (2011).</li><li>Oyajobi, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+myeloma+in+skeleton+of+mice+by+whole-body+optical+fluorescence+imaging.">Detection of myeloma in skeleton of mice by whole-body optical fluorescence imaging.</a> Mol. Cancer Ther. 6, 1701-1708 (2007).</li><li>Johnson, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Longitudinal+live+animal+micro-CT+allows+for+quantitative+analysis+of+tumor-induced+bone+destruction.">Longitudinal live animal micro-CT allows for quantitative analysis of tumor-induced bone destruction.</a> Bone. 48, 141-151 (2011).</li><li>Sterling, J., Johnson, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Imaging Techniques for the Detection and Examination of Breast Cancer Metastasis to Bone. 46, (2011).</li><li>Steinbauer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=GFP-transfected+tumor+cells+are+useful+in+examining+early+metastasis+in+vivo,+but+immune+reaction+precludes+long-term+tumor+development+studies+in+immunocompetent+mice.">GFP-transfected tumor cells are useful in examining early metastasis in vivo, but immune reaction precludes long-term tumor development studies in immunocompetent mice.</a> Clin. Exp. Metastasis. 20, 135-141 (2003).</li><li>Oyajobi, B. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual+effects+of+macrophage+inflammatory+protein-1alpha+on+osteolysis+and+tumor+burden+in+the+murine+5TGM1+model+of+myeloma+bone+disease.">Dual effects of macrophage inflammatory protein-1alpha on osteolysis and tumor burden in the murine 5TGM1 model of myeloma bone disease.</a> Blood. 102, 311-319 (2003).</li></ol>

Studies van tumor-geïnduceerde botziekte berusten op verschillende diermodellen waarvan de twee meest gebruikte zijn intracardiale en intratibial inentingen. In veel gevallen intracardiale is de beste optie voor het bestuderen van metastasen in het bot, maar het geeft niet het volledige metastatische proces, en dus uiervet pad of andere orthotope injecties moet idealiter worden gebruikt in de richting van dat doel. Tumorcellen niet gemakkelijk uitzaaien van de primaire locatie in de meeste studies met menselijke cellen...

<table border="1"><tbody><tr><td> Naam van het reagens </td><td> Vennootschap </td><td> Catalogusnummer </td></tr><tr><td> MDA-MB-231 menselijke borstkankercellen </td><td> Oorspronkelijk ATCC-Intern gekloneerd en geselecteerd </td><td></td></tr><tr><td> DMEM </td><td> GIBCO </td><td> 11885 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> Mediatech Inc </td><td> 21-040-CV </td></tr><tr><td> FBS </td><td> Atlas Biologische </td><td> F-0050a </td></tr><tr><td> Trypsine </td><td> GIBCO </td><td> 15400 </td></tr><tr><td> Faxitron </td><td> Faxitron </td><td></td></tr><tr><td> Meester </td><td> CRi </td><td></td></tr><tr><td> μCT scanner </td><td> Scanco </td><td></td></tr><tr><td> Naakt athymische muizen </td><td> Harlan </td><td> Fox nu - / - </td></tr><tr><td> Insulinespuiten (300 ul, 28,5 g) </td><td> Becton Dickinson </td><td> 309300 </td></tr><tr><td> IVIS </td><td> Caliper </td><td></td></tr><tr><td> Bestraalde knaagdierendieet </td><td> Teklad </td><td> 2920x </td></tr></tbody></table>

models of bone metastasis

Botmetastasen schering en inslag in verscheidene maligniteiten, met inbegrip van borst, prostaat en long. Eenmaal in bot, tumoren zijn verantwoordelijk voor aanzienlijke morbiditeit en mortaliteit 1. Aldus bestaat er een grote behoefte om de moleculaire mechanismen die de inrichting, groei en activiteit van tumoren in het bot begrijpen. Verschillende in vivo modellen zijn opgericht om deze gebeurtenissen te bestuderen en elk heeft specifieke voordelen en beperkingen. De meest gebruikte model gebruikt intracardiale inoculatie van tumorcellen aan de arteriële bloedtoevoer athymische (naakt) BalbC muizen. Deze procedure kan worden toegepast op vele verschillende types tumoren (zoals PC-3 prostaatkanker, longcarcinoom en muis uiervet pad tumoren), maar in dit manuscript richten we ons op de borstkankermodel, MDA-MB-231. In dit model gebruiken we een zeer bot-selectieve kloon, oorspronkelijk afgeleid in de groep Dr Mundy&#39;s in San Antonio 2, dat hals inmiddels getransfecteerd voor GFP expressie en opnieuw gekloneerd door onze groep 3. Deze kloon is een bot uitgezaaide variant met een hoog osteotropism en zeer weinig metastasen in longen, lever of bijnieren. Terwijl intracardiale injecties worden meestal gebruikt voor onderzoek naar bot metastase 2, in bepaalde gevallen intratibial 4 of uiervet pad injecties zijn meer geschikt. Intracardiale injecties worden meestal uitgevoerd met menselijke tumorcellen met als doel de controle latere stadia van metastase, specifiek het vermogen van kankercellen om arresteren in botten, overleven, prolifereren en tumoren die zich ontwikkelen tot kanker geïnduceerde botziekte stellen. Intratibial injecties worden uitgevoerd als de nadruk op de relatie tussen kankercellen en bot na een tumor is uitgezaaid naar het bot, die ruwweg correleert met gevestigde gemetastaseerde botziekte. Geen van deze modellen recapituleert vroege stappen in het metastatische proces vóór embolie en vermeldingvan tumorcellen in de circulatie. Voor het controleren van de primaire tumorgroei of metastase van de primaire locatie aan het bot, dan uiervet pad inentingen zijn meestal de voorkeur, maar zeer weinig tumorcellijnen zal consequent aan het bot uitzaaien van de primaire site, met 4T1 bot-preferentiële klonen, een muis borstklier carcinoom, de uitzondering 5,6. Dit manuscript gegevens inoculatie procedures en hoogtepunten belangrijkste stappen in na inoculatie analyses. Specifiek omvat celkweek, tumorcel inoculatie procedures voor intracardiale en intratibial inentingen alsmede beknopte informatie over wekelijks gecontroleerd door x-ray, fluorescentie en histomorfometrische analyse.

Watch this Scientific Journal Video about Models of Bone Metastasis at JoVE.com

Models of Bone Metastasis

Diermodellen worden vaak gebruikt om uitzaaiing studeren bot. In dit protocol beschrijven we twee gebruikelijke methoden van tumorinoculatie voor bot metastase studies en beschrijf kort enkele van de analyses gebruikt om toezicht te houden en te kwantificeren deze modellen.

Modellen van bot metastase

Bone metastases are a common occurrence in several malignancies, including breast, prostate, and lung. Once established in bone, tumors are responsible ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Metastasis Assay

Experimentele Metastase Assay

Metastasis is the leading cause of death in cancer patients.  To understand the mechanism of metastasis, an experimental metastasis assay was established ...

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

In vitro Mesothelial Clearance Assay that Models the Early Steps of Ovarian Cancer Metastasis

In vitro Mesothelial Ontruiming Assay dat de modellen van de vroege stappen van eierstokkanker Metastase

Ovarian cancer is the fifth leading cause of cancer related deaths in the United States1. Despite a positive initial response to therapies, 70 to 90 ...

Multi-modal Imaging of Angiogenesis in a Nude Rat Model of Breast Cancer Bone Metastasis Using Magnetic Resonance Imaging, Volumetric Computed Tomography and Ultrasound

Multi-modale beeldvorming van angiogenese in een Naakt ratmodel van borstkanker botmetastase Met behulp van Magnetic Resonance Imaging, Volumetrische computertomografie en Echografie

Angiogenesis is an essential feature of cancer growth and metastasis formation. In bone metastasis, angiogenic factors are pivotal for tumor cell ...

Pre-clinical Evaluation of Tyrosine Kinase Inhibitors for Treatment of Acute Leukemia

Pre-klinische evaluatie van tyrosinekinaseremmers voor de behandeling van acute leukemie

Receptor tyrosine kinases have been implicated in the development and progression of many cancers, including both leukemia and solid tumors, and are ...

An Orthotopic Murine Model of Human Prostate Cancer Metastasis

Een orthotope muizenmodel van menselijke prostaatkankercellen Metastasis

Our laboratory has developed a novel orthotopic implantation model of  human prostate cancer (PCa). As PCa death is not due to the primary tumor, but  ...

Adjustable Stiffness, External Fixator for the Rat Femur Osteotomy and Segmental Bone Defect Models

Verstelbare stijfheid, externe Fixator voor de Rat femur osteotomie en segmentele botdefecten Modellen

The mechanical environment around the healing of broken bone is very important as it determines the way the fracture will heal. Over the past decade there ...

High-frequency Ultrasound Imaging of Mouse Cervical Lymph Nodes

Hoge-frequentie Ultrasound Imaging van de muis cervicale lymfeklieren

High-frequency ultrasound (HFUS) is widely employed as a non-invasive method for imaging internal anatomic structures in experimental small animal ...

A "Patient-Like" Orthotopic Syngeneic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma Metastasis

Een &quot;Patiënt-Like&quot; Orthotope Syngene Mouse Model van Hepatocellular carcinoom metastase

The majority of cancer-related deaths are caused by the metastasis of the cancer rather than the primary tumor itself. Yet, the underlying mechanisms of ...

Quantitation of Intra-peritoneal Ovarian Cancer Metastasis

Kwantificering van Intra-peritoneale eierstokkanker Metastase

Epithelial ovarian cancer (EOC) is the leading cause of death from gynecologic malignancy in the United States.  Mortality is due to diagnosis of 75% of ...

Evaluation of Lung Metastasis in Mouse Mammary Tumor Models by Quantitative Real-time PCR

Evaluatie van longmetastase in muizenborsttumorvirus Modellen van kwantitatieve real-time PCR

Metastatic disease is the spread of malignant tumor cells from the primary cancer site to a distant organ and is the primary cause of cancer associated ...