Name: engineering skeletal muscle tissues from murine myoblast progenitor cells and application of electrical stimulation
Uploaded: 2013-03-19T12:00:00
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저자는 배양 그림 2에 표시되는 조직을위한 Yabin 우 감사 할 사진이 바트 반 Overbeeke로 촬영되었다. 작품은 재정적 SenterNovem, 교부금 ISO 42022에 의해 지원되었다.

1. 손쥐 Myoblast의 전구 세포 또는 C2C12 세포의 문화 <ol><li> 처음 Shefer 및 동료 (10)에 의해 출판하고 나중에 콜린스 외. 11 Boonen 외. 12 적응 프로토콜에 따라 세포를 분리 및 액체 질소에 이것들을 저장합니다. 이 마우스, 예를 들어 C57Bl / 6이 필요합니다. 다른 방법은 예를 들어 리 Y 외하여 시각화 실험의 저널에 출판하는 방법, 다른 실험실에...

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	<li>Langelaan, M. L. P., Boonen, K. J. M., Polak, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Meet+the+new+meat:+tissue+engineered+skeletal+muscle.">Meet the new meat: tissue engineered skeletal muscle.</a> Trends Food Sci. Tech. 21 (2), 59-66 (2010).</li><li>Shansky, J., Chromiak, J., Tatto, M., Vandenburgh, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simplified+method+for+tissue+engineering+skeletal+muscle+organoids+in+vitro.">A simplified method for tissue engineering skeletal muscle organoids in vitro.</a> In Vitro Cell Dev. Biol. Animal. 33 (9), 659-661 (1997).</li><li>Vandenburgh, H., Del Tatto, M., Shansky, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-engineered+skeletal+muscle+organoids+for+reversible+gene+therapy.">Tissue-engineered skeletal muscle organoids for reversible gene therapy.</a> Hum. Gene Ther. 7 (17), 2195-2200 (1996).</li><li>Yaffe, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retention+of+differentiation+potentialities+during+prolonged+cultivation+of+myogenic+cells.">Retention of differentiation potentialities during prolonged cultivation of myogenic cells.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 61 (2), 477-483 (1968).</li><li>Rando, T. A., Blau, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Primary+mouse+myoblast+purification,+characterization,+and+transplantation+for+cell-mediated+gene+therapy.">Primary mouse myoblast purification, characterization, and transplantation for cell-mediated gene therapy.</a> J. Cell Biol. 125 (6), 1275-1287 (1994).</li><li>Koning, M., Werker, P. M. N., vander Schaft, D. W. J., Bank, R. A., Harmsen, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MicroRNA-1+and+MicroRNA-206+Improve+Differentiation+Potential+of+Human+Satellite+Cells:+A+Novel+Approach+for+Tissue+Engineering+of+Skeletal+Muscle.">MicroRNA-1 and MicroRNA-206 Improve Differentiation Potential of Human Satellite Cells: A Novel Approach for Tissue Engineering of Skeletal Muscle.</a> Tissue Eng. Part A. , (2011).</li><li>Darabi, R., Pan, W., Bosnakovski, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+myogenic+engraftment+from+mouse+iPS+cells.">Functional myogenic engraftment from mouse iPS cells.</a> Stem Cell Rev. 7 (4), 948-957 (2011).</li><li>Langelaan, M. L. P., Boonen, K. J. M., Rosaria-Chak, K. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advanced+maturation+by+electrical+stimulation:+Differences+in+response+between+C2C12+and+primary+muscle+progenitor+cells.">Advanced maturation by electrical stimulation: Differences in response between C2C12 and primary muscle progenitor cells.</a> J. Tissue Eng. Regen. Med. 5 (7), 529-539 (2011).</li><li>van der Schaft, D., van Spreeuwel, A. C., van Assen, H. C., Baaijens, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanoregulation+of+vascularization+in+aligned+tissue+engineered+muscle;+a+role+for+VEGF.">Mechanoregulation of vascularization in aligned tissue engineered muscle; a role for VEGF.</a> Tissue Eng. Part A. , (2011).</li><li>Shefer, G., Wleklinski-Lee, M., Yablonka-Reuveni, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Skeletal+muscle+satellite+cells+can+spontaneously+enter+an+alternative+mesenchymal+pathway.">Skeletal muscle satellite cells can spontaneously enter an alternative mesenchymal pathway.</a> J. Cell. Sci. 117 (Pt. 22), 5393-5404 (2004).</li><li>Collins, C. A., Olsen, I., Zammit, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell+function,+self-renewal,+and+behavioral+heterogeneity+of+cells+from+the+adult+muscle+satellite+cell+niche.">Stem cell function, self-renewal, and behavioral heterogeneity of cells from the adult muscle satellite cell niche.</a> Cell. 122 (2), 289-301 (2005).</li><li>Boonen, K. J. M., Rosaria-Chak, K. Y., Baaijens, F. P. T., van der Schaft, D. W. J., Post, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essential+environmental+cues+from+the+satellite+cell+niche:+optimizing+proliferation+and+differentiation.">Essential environmental cues from the satellite cell niche: optimizing proliferation and differentiation.</a> Am. J. Physiol. Cell Physiol. 296 (6), C1338-C1345 (2009).</li><li>Li, Y., Pan, H., Huard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolating+Stem+Cells+from+Soft+Musculoskeletal+Tissues.">Isolating Stem Cells from Soft Musculoskeletal Tissues.</a> J. Vis. Exp. (41), e2011 (2010).</li><li>Boonen, K. J. M., Langelaan, M. L. P., Polak, R. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+a+combined+mechanical+stimulation+protocol:+Value+for+skeletal+muscle+tissue+engineering.">Effects of a combined mechanical stimulation protocol: Value for skeletal muscle tissue engineering.</a> J. Biomech. 43 (8), 1514-1521 (2010).</li><li>Gawlitta, D., Boonen, K. J. M., Oomens, C. W. J., Baaijens, F. P. T., Bouten, C. V. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+serum-free+culture+conditions+on+skeletal+muscle+differentiation+in+a+tissue-engineered+model.">The influence of serum-free culture conditions on skeletal muscle differentiation in a tissue-engineered model.</a> Tissue Eng. Part A. 14 (1), 161-171 (2008).</li><li>Koning, M., van Luijn, M., van der Schaft, D. W. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skeletal+muscle+formation+and+engraftment+In+vivo+is+independent+of+preconditioning+In+vitro+with+HUVEC.">Human skeletal muscle formation and engraftment In vivo is independent of preconditioning In vitro with HUVEC.</a> , (2013).</li><li>Levenberg, S., Rouwkema, J., Macdonald, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Engineering+vascularized+skeletal+muscle+tissue.">Engineering vascularized skeletal muscle tissue.</a> Nat. Biotechnol. 23 (7), 879-884 (2005).</li><li>Koffler, J., Kaufman-Francis, K., Yulia, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+vascular+organization+enhances+functional+integration+of+engineered+skeletal+muscle+grafts.">Improved vascular organization enhances functional integration of engineered skeletal muscle grafts.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 108 (36), 14789-14794 (2011).</li></ol>

근육 조직의 공학 재생 의학의 약물 검사에 대한 질병 모델 등과 고기 생산을위한 사용하기위한 잠재력이 있습니다. 그러나 이러한 응용 프로그램에 대한 요구 사항은 다양합니다. 콜라겐은 세포 정렬이 가능하기 때문에 이전의 2D 연구 12 결정 myoblast의 전구 세포는 지하 막 파생 된 단백질의 존재를 필요로하기 때문에 우리는 콜라겐과 matrigel의 조합과 협력하기로 결정했습니다. 또한, 섬...

<table border="1"><tbody><tr><td> 시약의 이름 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 번호 </td><td> 코멘트 (선택 사항) </td></tr><tr><td> Matrigel - 성장 인자가 감소 </td><td> Beckton 및 디킨슨 </td><td></td><td></td></tr><tr><td> DMEM (높은 혈당) * </td><td> Gibco </td><td> 42,430 </td><td></td></tr><tr><td> 고급 DMEM </td><td> Gibco </td><td> 12,491 </td><td></td></tr><tr><td> 말 혈청 </td><td> Gibco </td><td> 65050-122 </td><td></td></tr><tr><td> 태아 소 혈청 </td><td> Greiner </td><td> 758075 </td><td></td></tr><tr><td> 0.45와 0.22 μm 주사기 필터 * </td><td> Whatmann (Schleicher와 Scheull) </td><td> 10462100 </td><td></td></tr><tr><td> L-글루타민 </td><td> Gibco </td><td> 25030024 </td><td></td></tr><tR&gt; <td> 페니실린 / 스트렙토 마이신 </td><td> Gibco </td><td> 10378016 </td><td></td></tr><tr><td> Amphotericin </td><td> Gibco </td><td> 15290-018 </td><td></td></tr><tr><td> 문화 플라스틱 </td><td> Greiner </td><td></td><td> 문화 플라스크와 피펫을 포함 </td></tr><tr><td> 칙의 배아 추출물 </td><td> 미국 생물 </td><td> C3999 </td><td></td></tr><tr><td> 파스퇴르 피펫 * </td><td> Hilgenberg </td><td></td><td> 면, 오픈 팁 L과 수축이있는 파스퇴르 (Pasteur) 피펫, : 0,9의 팁 직경 230mm - 1,1 mm </td></tr><tr><td> 파스퇴르 피펫 * </td><td> Hilgenberg </td><td></td><td> 면, 오픈 팁 L과 수축이있는 파스퇴르 (Pasteur) 피펫, : 1,4의 팁 직경 230mm - 1,6 mm </td></tr><tr><td> 파스퇴르 피펫 </td><td> VWR </td><td> 612-1702 </td><td></td></tr><tr><td> Collagenase 유형 I* </td><td> 시그마 </td><td> C0130-16 </td><td></td></tr><tr><td> 40 μm 셀 스트레이너 * </td><td> BD 팔콘 </td><td> 352340 </td><td></td></tr><tr><td> 19G 바늘 </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 엘라스토머 </td><td> 다우 코닝 기업 </td><td> 3097358-1004 </td><td> Silastic MDX 4-4210 # </td></tr><tr><td> 에이전트 치료 </td><td> 다우 코닝 기업 </td><td></td><td> Silastic MDX 4-4210 # </td></tr><tr><td> 벨크로 </td><td> 일반 상점 </td><td></td><td> 당신은 정기적으로 상점에서이을 구입하실 수 있습니다 만 부드러운면을 사용하여 </td></tr><tr><td> 콜라겐 유형 I, 쥐 꼬리 </td><td> BD Biosciences </td><td> 3544236 </td><td></td></tr><tr><td> C-페이스 EP 문화 맥박 조정 장치 </td><td> Ionoptix </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 전기 자극을위한 6도 문화 요리 </td><td> 왜냐면kton 디킨슨 - 매 </td><td> BD 팔콘 # 353846 </td><td></td></tr><tr><td> C-접시 배양 접시 전극 </td><td> Ionoptix </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> * 세포의 분리 (포인트 1.1) 필요한 # 함께 한 키트에 </td></tr></tbody></table>

engineering skeletal muscle tissues from murine myoblast progenitor cells and application of electrical stimulation

설계 근육 조직은 재생 의료 및 육류 대체 1로 압력 궤양을 공부하는 예를 체외에서 질병 모델로 사용하기위한 조직의 생산을 포함하는 여러 가지 목적으로 사용 할 수 있습니다. 첫 번째보고 3D 근육 구조는 몇 년 전에 만든 분야의 개척자 Vandenburgh 및 동료 2,3 아르되었습니다. 근육 조직 공학에서 만든 발전 생화학 요인, 줄기 세포 및 전구 세포에 대한 지식의 광대 한 이득의 결과뿐만 아니라하지만, 물리적 요인이 세포 행동 제어에 필수적인 역할을하는 연구자들에 의해 얻은 통찰력의 특정 기반에 있고 조직 개발. 첨단 엔지니어링 근육은 현재 셀 인구 히드로 겔 구조로 구성되어 구성합니다. 우리가 실험실에서이 일반적으로 C2C12, 미 손쥐 뒷다리 근육에서 분리 손쥐 myoblast의 전구 세포, 또는 손쥐 myoblast 세포 라인으로 구성콜라겐 / Matrigel의 혼합물로 xed 두 개의 고정 지점 사이의 도금, 근육 인대를 모방. 다른 세포는,뿐 아니라 L6 쥐 myoblasts 4, 신생아 근육 유래 전구 세포 5, 그러한 인간의 6도 유도 만능 줄기 세포 (IPS 세포) 7과 같은 다른 종에서 성인 근육 조직에서 파생 된 세포와 같은 예를 들어 다른 세포 라인을 고려 될 수있다 . 셀 수축성은 구조 8,9와 문화 약 1 주일 후에 근육 전구 세포의 분화의 긴 축을 따라 세포의 정렬을 발생합니다. 또한, 전기 자극의 응용 프로그램이 어느 정도 8로 차별화 과정을 향상시킬 수 있습니다. 때문에 그 제한된 크기 (8 X 2 X 0.5 mm)의 전체 조직은 예 생존, 분화 및 세포 정렬을 모니터링 할 공 촛점 현미경을 사용하여 분석 할 수 있습니다. 특정 응용 프로그램에 enginee에 대한 요구 사항을 따라붉은 근육 조직은 경우에 따라 다릅니다, 다른 종에 고기 대체 번역이 필요한 역할을하는 동안 재생 의료에 대한 예를 들어 사용, 조직 크기와 vascularization의 최대 크기 조절이 필요합니다.

최종 제품은 그림 3에 표시된 근육 구조 될 것입니다. 조직의 크기는 길이 약 8mm, 폭 2mm와 두께 0.5 mm 될 것입니다. 차별화 동안 전기 자극은 마이 오신 중쇄 isoforms의 표현을 변경되지만, 차별화 매체 (8)에 의해 유도로 크게 차별화 프로세스를 개선하지 않지만, 전기 자극은 근육의 기능을 확인하기 위해 절차의 끝 부분에 적용 할 수 왜냐하면 완전히 개발 sarcomeres와 근육이 전기 펄스에...

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Engineering Skeletal Muscle Tissues from Murine Myoblast Progenitor Cells and Application of Electrical Stimulation

설계 근육 조직은 질병 모델로 또한 고기에 대한 대체 소스로, 재생 의료에 큰 가능성이 있습니다. 여기 마우스 myoblast의 전구 세포, 및 전기 펄스에 의해 자극에서이 경우에, 근육 구조의 기술에 대해 설명합니다.

전기 자극의 손쥐 Myoblast의 전구 세포 및 응용에서 공학 골격근 조직도

Engineered muscle tissues can be used for several different purposes, which include the production of tissues for use as a disease model in vitro, e.g. to ...

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Fabrication of Micro-tissues using Modules of Collagen Gel Containing Cells

콜라겐의 모듈을 사용하여 미세 조직의 제조가 포함 세포를 젤

This protocol describes the fabrication of a type of micro-tissues called modules.  The module approach generates uniform, scalable and vascularized ...

연구

생체공학

Engineering Fibrin-based Tissue Constructs from Myofibroblasts and Application of Constraints and Strain to Induce Cell and Collagen Reorganization

엔지니어링 섬유소 기반 조직의 면역 조직 및 제약 조건의 적용에서 생성하고 세포와 콜라겐 (재) 조직을 유도하는 스트레인

Collagen content and organization in developing collagenous tissues can be influenced by local tissue strains and tissue constraint. Tissue engineers aim ...

Electrospun Fibrous Scaffolds of Poly(glycerol-dodecanedioate) for Engineering Neural Tissues From Mouse Embryonic Stem Cells

Electrospun Fibrous Scaffolds of Polyglycerol-dodecanedioate for Engineering Neural Tissues From Mouse Embryonic Stem Cells

마우스 배아 줄기 세포에서 신경 조직 공학을위한 폴리의 전기 방사 섬유 발판 (글리세롤 dodecanedioate)

For tissue engineering applications, the preparation of biodegradable and biocompatible scaffolds is the most desirable but challenging task. &#160;Among ...

Measurement of Maximum Isometric Force Generated by Permeabilized Skeletal Muscle Fibers

투과성이 골격 근육 섬유에 의해 생성 된 최대 아이소 포스의 측정

Analysis of the contractile properties of chemically skinned, or permeabilized, skeletal muscle fibers offers a powerful means by which to assess muscle ...

Cardiac Muscle-cell Based Actuator and Self-stabilizing Biorobot - PART 1

심장 근육 세포 기반 액츄에이터 및 자체 안정화 비 오로봇 - 1 부

Biological machines often referred to as biorobots, are living cell- or tissue-based devices that are powered solely by the contractile activity of living ...

Cardiac Muscle Cell-based Actuator and Self-stabilizing Biorobot - Part 2

심장 근육 세포 기반 액츄에이터 및 자체 안정화 바이오 오봇 - 제 2 부

In recent years, hybrid devices that consist of a living cell or tissue component integrated with a synthetic mechanical backbone have been developed. ...

Microfluidic Bioprinting for Engineering Vascularized Tissues and Organoids

공학에 대 한 미세 Bioprinting 나가도록 조직 및 Organoids

Engineering vascularized tissue constructs and organoids has been historically challenging. Here we describe a novel method based on microfluidic ...

Two Methods for Decellularization of Plant Tissues for Tissue Engineering Applications

Decellularization 식물 조직의 조직 공학 응용 프로그램에 대 한 두 가지 방법

The autologous, synthetic, and animal-derived grafts currently used as scaffolds for tissue replacement have limitations due to low availability, poor ...

Simultaneous Electrical and Mechanical Stimulation to Enhance Cells' Cardiomyogenic Potential

Cardiovascular diseases are the leading cause of death in developed countries. Consequently, the demand for effective cardiac cell therapies has motivated ...

Construction and Use of an Electrical Stimulation Chamber for Enhancing Osteogenic Differentiation in Mesenchymal Stem/Stromal Cells In Vitro

건설 및 생체 외에서 중간 엽 줄기/Stromal 세포 Osteogenic 차별화를 강화 하기 위한 전기 자극 챔버의 사용

Mesenchymal stem/stromal cells (MSCs) have been used extensively to promote bone healing in tissue engineering approaches. Electrical stimulation (EStim) ...