Name: 3-dimensional resin casting and imaging of mouse portal vein or intrahepatic bile duct system
Uploaded: 2012-10-25T13:00:00
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Este trabalho foi financiado por subvenções dos Institutos Nacionais de Saúde (NIH) para SSH (R01-DK078640), do Howard Hughes Medical Institute (HHMI), através do Programa de Certificação HHMI / Vanderbilt University em Medicina Molecular para TJW (GRDOT56006779), o Vanderbilt Diabetes Research e Centro de Treinamento (P30-DK020593) eo Digestivo Vanderbilt Disease Research Center (P30-DK058404) fornecendo serviços principais.

1. Prepare Cânula <ol><li> Aqueça uma seção de uma polegada de comprimento da tubulação PE10 com os dedos e estique-lo para que o tubo se torna fina. Nota: o tamanho do vaso ou conduta a ser canulada irá determinar o grau de estiramento necessário. A cânula deve ser bem esticado para ducto biliar lança, mas só podem ser obrigados a ser moderadamente esticada para caber dentro da veia maior portal. </li><li> Cortar o tubo estirado numa diagonal para gerar uma ponta biselada. </li><li> Cortar ...

<ol>
	<li>Sparks, E. E., Perrien, D. S., Huppert, K. A., Peterson, T. E., Huppert, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defects+in+hepatic+Notch+signaling+result+in+disruption+of+the+communicating+intrahepatic+bile+duct+network+in+mice.">Defects in hepatic Notch signaling result in disruption of the communicating intrahepatic bile duct network in mice.</a> Dis. Model Mech. 4, 359-367 (2011).</li><li>Vanderpool, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+interactions+between+hepatocyte+nuclear+factor-6+and+notch+signaling+regulate+mouse+intrahepatic+bile+duct+development+in+vivo.">Genetic interactions between hepatocyte nuclear factor-6 and notch signaling regulate mouse intrahepatic bile duct development in vivo.</a> Hepatology. 55, 233-243 (2012).</li><li>Meyer, E. P., Ulmann-Schuler, A., Staufenbiel, M., Krucker, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Altered+morphology+and+3D+architecture+of+brain+vasculature+in+a+mouse+model+for+Alzheimer's+disease.">Altered morphology and 3D architecture of brain vasculature in a mouse model for Alzheimer's disease.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 105, 3587-3592 (2008).</li><li>Van Steenkiste, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+corrosion+casting:+analyzing+wall+shear+stress+in+the+portal+vein+and+vascular+abnormalities+in+portal+hypertensive+and+cirrhotic+rodents.">Vascular corrosion casting: analyzing wall shear stress in the portal vein and vascular abnormalities in portal hypertensive and cirrhotic rodents.</a> Lab Invest. 90, 1558-1572 (2010).</li><li>Dickie, R., Cormack, M., Semmler-Behnke, M., Kreyling, W. 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S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notch+signaling+regulates+formation+of+the+three-dimensional+architecture+of+intrahepatic+bile+ducts+in+mice.">Notch signaling regulates formation of the three-dimensional architecture of intrahepatic bile ducts in mice.</a> Hepatology. 51, 1391-1400 (2010).</li><li>Carlson, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+expression+of+constitutively+active+Notch4+elicits+reversible+arteriovenous+malformations+in+adult+mice.">Endothelial expression of constitutively active Notch4 elicits reversible arteriovenous malformations in adult mice.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 102, 9884-9889 (2005).</li><li>Hemmeryckx, B., Emmerechts, J., Bovill, E. G., Hoylaerts, M. F., Lijnen, H. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+ageing+on+the+murine+venous+circulation.">Effect of ageing on the murine venous circulation.</a> Histochem. Cell Biol. , (2012).</li><li>Hossler, F. E., Olson, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvasculature+of+the+nasal+salt+gland+of+the+duckling,+Anas+platyrhynchos:+quantitative+responses+to+osmotic+adaptation+and+deadaptation+studied+with+vascular+corrosion+casting.">Microvasculature of the nasal salt gland of the duckling, Anas platyrhynchos: quantitative responses to osmotic adaptation and deadaptation studied with vascular corrosion casting.</a> J. Exp. Zool. 254, 237-247 (1990).</li><li>Hossler, F. E., West, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Venous+valve+anatomy+and+morphometry:+studies+on+the+duckling+using+vascular+corrosion+casting.">Venous valve anatomy and morphometry: studies on the duckling using vascular corrosion casting.</a> Am. J. Anat. 181, 425-432 (1988).</li><li>Hossler, F. E., Monson, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+and+blood+supply+of+intrinsic+lymph+nodes+in+the+wall+of+the+rabbit+urinary+bladder--studies+with+light+microscopy,+electron+microscopy,+and+vascular+corrosion+casting.">Structure and blood supply of intrinsic lymph nodes in the wall of the rabbit urinary bladder--studies with light microscopy, electron microscopy, and vascular corrosion casting.</a> Anat. Rec. 252, 477-484 (1998).</li><li>Hossler, F. E., Monson, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+a+unique+elastic+sheath+surrounding+the+vesicular+arteries+of+the+rabbit+urinary+bladder--studies+of+the+microvasculature+with+microscopy+and+vascular+corrosion+casting.">Evidence for a unique elastic sheath surrounding the vesicular arteries of the rabbit urinary bladder--studies of the microvasculature with microscopy and vascular corrosion casting.</a> Anat. Rec. 252, 472-476 (1998).</li><li>Hossler, F. E., Kao, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvasculature+of+the+urinary+bladder+of+the+dog:+a+study+using+vascular+corrosion+casting.">Microvasculature of the urinary bladder of the dog: a study using vascular corrosion casting.</a> Microsc. Microanal. 13, 220-227 (2007).</li><li>Wischgoll, T., Choy, J. S., Kassab, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+of+morphometry+and+branching+angles+of+porcine+coronary+arterial+tree+from+CT+images.">Extraction of morphometry and branching angles of porcine coronary arterial tree from CT images.</a> Am J Physiol. Heart. Circ. Physiol. 297, H1949-H1955 (2009).</li><li>Hossler, F. E., Douglas, J. E., Douglas, L. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+morphometry+of+myocardial+capillaries+studied+with+vascular+corrosion+casting+and+scanning+electron+microscopy:+a+method+for+rat+heart.">Anatomy and morphometry of myocardial capillaries studied with vascular corrosion casting and scanning electron microscopy: a method for rat heart.</a> Scan Electron Microsc. , 1469-1475 (1986).</li><li>Hossler, F. E., Douglas, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+Corrosion+Casting:+Review+of+Advantages+and+Limitations+in+the+Application+of+Some+Simple+Quantitative+Methods.">Vascular Corrosion Casting: Review of Advantages and Limitations in the Application of Some Simple Quantitative Methods.</a> Microsc. Microanal. 7, 253-264 (2001).</li><li>Mondy, W. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-CT+of+corrosion+casts+for+use+in+the+computer-aided+design+of+microvasculature.">Micro-CT of corrosion casts for use in the computer-aided design of microvasculature.</a> Tissue Eng. Part C Methods. 15, 729-738 (2009).</li><li>Masyuk, T. V., Ritman, E. L., LaRusso, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+Assessment+of+the+Rat+Intrahepatic+Biliary+System+by+Three-Dimensional+Reconstruction.">Quantitative Assessment of the Rat Intrahepatic Biliary System by Three-Dimensional Reconstruction.</a> The American Journal of Pathology. 158, 2079-2088 (2001).</li><li>Masyuk, T. V., Ritman, E. L., LaRusso, N. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hepatic+Artery+and+Portal+Vein+Remodeling+in+Rat+Liver:+Vascular+Response+to+Selective+Cholangiocyte+Proliferation.">Hepatic Artery and Portal Vein Remodeling in Rat Liver: Vascular Response to Selective Cholangiocyte Proliferation.</a> The American Journal of Pathology. 162, 1175-1182 (2003).</li></ol>

Nós descrevemos exemplos específicos de como a veia portal e sistemas de vias biliares intra-hepáticos do fígado pode ser fundido, mas esta técnica pode ser aplicado a virtualmente qualquer outro sistema ductal ou vascular com pequenas adaptações. Os trabalhos anteriores demonstraram a viabilidade desta técnica, em várias espécies, incluindo o mouse 1,2,7-9, patinho 10,11, coelho 12,13, cão 14, e suíno de 15, e em muitos órgãos, inclusive da glândula ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome do reagente </td><td> Companhia </td><td> Número de catálogo </td><td> Comentários </td></tr><tr><td> Tubagem de polietileno PE10 </td><td> Fisher Scientific </td><td> 1417012P </td><td></td></tr><tr><td> 5-0 seda preta cirúrgica trançada </td><td> Roboz Surgical </td><td> SUT-15-1 </td><td></td></tr><tr><td> Steriject 32 G x 13 mm agulha </td><td> Ar-tite </td><td> TSK3213 </td><td></td></tr><tr><td> Tesoura Primavera </td><td> Belas Science Tools </td><td> 15000-08 </td><td></td></tr><tr><td> Número 5 fórceps </td><td> Belas Science Tools </td><td> 91150-20 </td><td></td></tr><tr><td> Mercox II kit </td><td> Ladd Research </td><td> 21247 </td><td></td></tr><tr><td> O álcool benzílico </td><td> Fisher Scientific </td><td> 1816-1804 </td><td> Only necessário para BABB-clearing </td></tr><tr><td> Benzoato de benzilo </td><td> MP Biomedicals, LLC </td><td> 154839 </td><td> Só é necessário para BABB-compensação </td></tr><tr><td> Salina tamponada com fosfato (PBS) </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Massa de modelar </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Escala </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Laboratório de tesoura </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 15 ml de polipropileno tubos com tampas de </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Paraformaldahyde 4% </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> De hidróxido de potássio 15% (KOH) </td><td></td><td></td><td> Só é necessário para maceração </td></tr><tr><td> Gilete </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> Metanol a 100% </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 3 ml de seringa luer lock </td><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

3-dimensional resin casting and imaging of mouse portal vein or intrahepatic bile duct system

De órgãos, a arquitetura correta de estruturas vasculares e ductal é indispensável para a função fisiológica adequada, e a formação e manutenção de tais estruturas é um processo altamente regulado. A análise destes complexos, três estruturas tridimensionais grandemente dependia tanto exame 2-dimensional da secção ou em estudos de injecção de corante. Estas técnicas, no entanto, não são capazes de fornecer uma representação completa e quantificáveis ​​das estruturas ductais ou vascular que se destinam a elucidar. Em alternativa, a natureza do 3-dimensional moldes de resina plástica permanente gera um instantâneo do sistema e é um novo e técnica amplamente útil para visualizar e quantificar as três estruturas tridimensionais e redes. Uma vantagem decisiva do sistema de fundição de resina é a capacidade de determinar o intacto e ligado, ou comunicar a estrutura, de um vaso sanguíneo ou adesiva. A estrutura do vascular e ducredes mentais são cruciais para o funcionamento do órgão, e esta técnica tem o potencial para ajudar estudo das redes vasculares, e ductal de várias maneiras. Moldagem de resina pode ser usada para analisar a morfologia normal e arquitectura funcional de uma estrutura de luminal, identificar mudanças morfogenéticas do desenvolvimento, e descobrir diferenças morfológicas na arquitectura de tecido entre os estados normais e de doença. Os trabalhos anteriores resina de moldagem utilizado para estudar, por exemplo, defeitos de arquitectura e funcionais do sistema biliar intra-hepático do rato duto que não foram reflectidas em 2-dimensional análise da estrutura 1,2, alterações na vasculatura cerebral de rato um modelo de doença de Alzheimer 3 , portal anormalidades veia no Portal ratos hipertensos e cirróticos 4, etapas de desenvolvimento em maturação linfática rato entre pulmões imaturos e adultos, 5 imediatas alterações microvasculares no fígado de rato, pâncreas e rim em resposta a ferimentos em química6. Aqui apresentamos um método de gerar um elenco resina 3-dimensional de uma rede vascular do mouse ou ductal, com foco específico na veia porta e ducto biliar intra-hepática. Estes moldes podem ser visualizadas através de compensação ou maceração do tecido e pode então ser analisada. Esta técnica pode ser aplicado a praticamente qualquer sistema vascular ou ductal e seriam directamente aplicáveis ​​a qualquer estudo investigar o desenvolvimento, a função, a manutenção, ou lesão de uma estrutura 3-dimensional ductal ou vascular.

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3-Dimensional Resin Casting and Imaging of Mouse Portal Vein or Intrahepatic Bile Duct System

Um método de visualização e quantificação da estrutura 3-dimensional do rato da veia porta hepática ou ducto biliar intra-hepático é descrito. Esta técnica de fundição em resina pode também ser aplicada a outros sistemas do tipo ductal ou vascular e permite<em&gt; In situ</em&gt; Visualização ou quantificação de arquitectura intacto um sistema de comunicação.

3-Dimensional Fundição de resina e Imagem da Veia Rato Portal ou Sistema intra-hepática Duto Biliar

In  organs, the correct architecture of vascular and ductal structures is  indispensable for proper physiological function, and the formation and  ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct

Canulação da glândula submandibular do rato através do duto salivar de Wharton

Severe salivary gland hypofunction is frequently found in patients with Sj&ouml;gren's syndrome and those who receiving therapeutic 
irradiation in their ...

Medicina

Modeling and Imaging 3-Dimensional Collective Cell Invasion

Modelagem e imagem 3-Dimensional Invasion cela coletiva

A defining characteristic of cancer malignancy is invasion and metastasis 1. In some cancers (e.g. glioma 2), local invasion into surrounding healthy ...

Generation and 3-Dimensional Quantitation of Arterial Lesions in Mice Using Optical Projection Tomography

Geração e quantificação 3-Dimensional de Arterial lesões em ratos por meio de tomografia óptica de Projeção

The generation and analysis of vascular lesions in appropriate animal models is a cornerstone of research into cardiovascular disease, generating ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

Heterotópico Rat auxiliar Liver Transplantation com fluxo regulado Portal Vein Arterialização na Insuficiência Hepática Aguda

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Bile Duct Ligation in Mice: Induction of Inflammatory Liver Injury and Fibrosis by Obstructive Cholestasis

Ligadura do ducto biliar em ratos: Indução de Inflammatory Lesão hepática e fibrose por colestase obstrutiva

In most vertebrates, the liver produces bile that is necessary to emulsify absorbed fats and enable the digestion of lipids in the small intestine as well ...

Using Multi-fluorinated Bile Acids and In Vivo Magnetic Resonance Imaging to Measure Bile Acid Transport

Using Multi-fluorinated Bile Acids and In Vivo Magnetic Resonance Imaging to Measure Bile Acid Transport

Utilizando os ácidos biliares e multi-fluorados<em&gt; In Vivo</em&gt; Magnetic Resonance Imaging medir Bile transporte do ácido

Along with their traditional role as detergents that facilitate fat absorption, emerging literature indicates that bile acids are potent signaling ...

Ileectomy-induced Bile Overaccumulation in Mouse Intestine

Overaccumulation induzida por Ileectomy biliares no intestino de rato

Intestinal resection is a common therapeutic approach for human diseases such as obesity, inflammatory bowel disease, Crohn's disease, and colon cancer ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Modelo do rato da partição fígado associando e ligadura da veia porta para procedimento encenado Hepatectomy (ALPPS)

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Ablation of Ischemic Ventricular Tachycardia Using a Multipolar Catheter and 3-dimensional Mapping System for High-density Electro-anatomical Reconstruction

Ablação de taquicardia Ventricular isquêmica, usando um cateter Multipolar e sistema de mapeamento 3-dimensional para reconstrução de Electro-anatômica de alta densidade

Ventricular tachycardia (VT) in patients with ischemic cardiomyopathy mainly results from endocardial scars after myocardial infarction; those scars ...

Laser Doppler Perfusion Imaging in the Mouse Hindlimb

Imagem de perfusão doppler laser no hindlimb mouse

Blood flow recovery is a critical outcome measure after experimental hindlimb ischemia or ischemia-reperfusion. Laser Doppler perfusion imaging (LDPI) is ...